Shidham ए.वी. मार्कर के साथ व्यक्तिगत रूप से बिखरे हुए कोशिकाओं और छोटे सेल समूहों युक्त कोशिका विज्ञान के नमूनों से सेल ब्लॉकों की तैयारी के लिए विधि.
यह वीडियो Shidham तरल आधारित cervicovaginal कोशिका विज्ञान व्यक्तिगत रूप से बिखरे हुए कोशिकाओं और छोटे सेल समूहों युक्त नमूनों से सेल ब्लॉक की तैयारी के लिए विधि को दर्शाता है. यह तकनीक पारंपरिक प्रयोगशाला उपकरणों के साथ HistoGel (थर्मो वैज्ञानिक) का उपयोग करता है.
सेल ब्लॉक वर्गों के प्रयोग के गैर gynecologic कोशिका विज्ञान के मूल्यांकन के लिए एक मूल्यवान सहायक उपकरण है. वे अतिरिक्त शब्द के भागों नमूना विस्तार से घाव की वास्तुकला सहित अध्ययन cytopathologist सक्षम. सबसे महत्वपूर्ण बात, वे immunocytochemistry के रूप में सहायक के अध्ययन के मूल्यांकन के लिए अनुमति देते हैं, में स्वस्थानी संकरण (मछली CISH /) परीक्षण और यथास्थान पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर). पारंपरिक सेल ब्लॉक तैयारी तकनीकों ज्यादातर गैर gynecologic कोशिका विज्ञान नमूनों को लागू किया गया है, आम तौर पर शरीर के तरल पदार्थ के बहाव और ठीक सुई आकांक्षा बायोप्सी के लिए.
तरल आधारित cervicovaginal नमूनों अपेक्षाकृत कम कई अलग अलग बिखरे हुए कोशिकाओं के साथ अपने गैर gynecologic समकक्षों की तुलना में सेलुलर रहे हैं. इस वजह से, सेल ब्लॉक वर्गों के भीतर पर्याप्त cellularity को प्राप्त करने के लिए मुश्किल है. इसके अलावा, सेक्शनिंग histotechnologist ब्लॉक स्तर पर जो कोशिकाओं के सर्वोच्च एकाग्रता में हैं कल्पना नहीं कर सकते हैं. इसलिए, यह उचित स्तर पर जो वर्गों को परीक्षण के लिए गिलास स्लाइड के लिए हस्तांतरित किया जा चयनित किया जा सकता है है की निगरानी करने के लिए मुश्किल है. एक परिणाम के रूप में, ब्याज की कोशिकाओं के साथ सेल ब्लॉक के क्षेत्र में पिछले काटने या काटने गहरी पर्याप्त नहीं द्वारा या तो, याद हो सकता है. Shidham विधि के लिए वर्तमान प्रोटोकॉल इन मुद्दों के पते. हालांकि इस प्रोटोकॉल मानकीकृत और gynecologic तरल आधारित कोशिका विज्ञान के नमूनों के लिए सूचना दी है, यह भी बहाव तरल पदार्थ, FNA, brushings सेल ब्लॉक वर्गों में नैदानिक सामग्री की गुणवत्ता में सुधार के लिए, पुटी सामग्री आदि जैसे गैर gynecologic नमूनों को लागू किया जा सकता है.
सेल ब्लॉक विभिन्न कोशिका विज्ञान नमूनों (1) के मूल्यांकन के लिए एक महत्वपूर्ण उपकरण हैं. सबसे महत्वपूर्ण बात, नमूना के वास्तु विवरण अलावा, सेल ब्लॉक immunocytochemistry के रूप में सहायक अध्ययन, फ्लोरोसेंट / chromogenic में स्वस्थानी संकरण (मछली CISH /) परीक्षण और पीसीआर में सीटू के मूल्यांकन के लिए अनुमति देते हैं. सेल ब्लॉक की तैयारी के लिए तरीकों की एक किस्म में वर्णित हैं. हालांकि, इनमें से ज्यादातर गैर gynecologic कोशिका विज्ञान नमूनों जो अपेक्षाकृत कई कोशिकाओं होते हैं और जैसे FNA रेस्पायरेट्रस में ऊतक microfragments और बहाव (1,3,4,5) के रूप में कुछ तरल तरल पदार्थ के साथ के लिए उपयुक्त हैं.
क्योंकि सेल ब्लॉक मुख्य रूप से immunocytochemical मूल्यांकन के लिए अवसर प्रदान करते हैं, उनके प्रसंस्करण अधिमानतः formalin निर्धारित पैराफिन एम्बेडेड (FFPE) ऊतकों के समान होना चाहिए. अंततः सेल ब्लॉक वर्गों के immunocytochemical मूल्यांकन के बाद प्राप्त परिणामों को प्रकाशित साहित्य FFPE ऊतक वर्गों पर मुख्य रूप से प्रदर्शन के साथ उन लोगों के लिए तुलना कर रहे हैं. प्रोटोकॉल में कोई परिवर्तन संभावित समझौता और विभिन्न fixatives और अभिकर्मक दिनचर्या FFPE के लिए इस्तेमाल किया है कि तुलना में अन्य दृश्यों के माध्यम से संसाधित सेल ब्लॉक पर प्राप्त परिणामों की वैधता को उठा देना. कुछ व्यावसायिक तकनीकों अन्य जोखिम लगानेवाला – अभिकर्मक के लिए जोखिम के एक प्रोटोकॉल के माध्यम से प्रसंस्करण का दोष हो सकता है.
सेल ब्लॉक की तैयारी के विभिन्न तरीकों तलछट और ऊतक के टुकड़े के एक महत्वपूर्ण मात्रा के साथ नमूनों के लिए उपलब्ध हैं. मुख्यतः, केंद्रित अवसादों कुछ जेल या जमावट सिद्धांत के द्वारा समर्थित हैं. maneuverable बटन तब शल्य चिकित्सा विकृति नमूनों / बायोप्सी की तरह प्रसंस्करण के बाद आयल में एम्बेडेड है.
इस्तेमाल किया जैल जिलेटिन, अगर, फाइब्रिनोजेन / प्लाज्मा थ्रोम्बिन, और पारा जैसे अन्य वाणिज्यिक जैल शामिल हैं. एकाग्रता के तरीकों centrifugation द्वारा तलछट के सरल pelleting से झिल्ली के विभिन्न प्रकार के साथ कोशिकाओं की एकाग्रता के लिए बदलती हैं. उदाहरणों में शामिल हैं: Milipore, collodin (Celloidin) बैग या गिलास स्लाइड (1) कोशिका विज्ञान स्मीयरों कोशिकाओं से scraping. हम भी अगर और जिलेटिन के विभिन्न संयोजनों की कोशिश कर रहा द्वारा जैल की एक किस्म का मूल्यांकन किया है. संयोजनों की कोई भी एक फर्म पर्याप्त स्थिरता हासिल नमूना से एक टुकड़ा में एम्बेडेड कोशिकाओं के साथ जम जेल के एक आसानी से maneuverable डिस्क प्राप्त करने के लिए. पारा उपयुक्त निरंतरता दिखाया और हमारे अनुभव में पारा सेल ब्लॉक वर्गों पर immunostaining परिणाम उत्कृष्ट रहा है.
Cervicovaginal कोशिका विज्ञान के लिए तरल आधारित कोशिका विज्ञान (LBC) नमूनों आम तौर पर कर रहे हैं गैर – gynecologic नमूनों की तुलना में कम सेलुलर उपरोक्त के रूप में. इसके अलावा, gynecologic LBC नमूनों को मुख्य रूप से अलग – अलग बिखरे हुए cervicovaginal mucosa से exfoliated सतही कोशिकाओं होते हैं. इस के कारण, सेल ब्लॉक वर्गों के भीतर उचित cellularity एक विशेष दृष्टिकोण के बिना हासिल नहीं हो सकता है. के रूप में इन अकेले ब्लॉक में सेलुलर घटकों बिखरे हुए अनुभाग काटने के दौरान histotechnologist द्वारा नहीं देखा जा सकता है, किस स्तर पर कोशिकाओं को वर्गों में प्रदर्शित होने शुरू नहीं किया जा सराहना याद किया जा सकता है सबसे कोशिकाओं के साथ स्तर पिछले काटने के द्वारा या नहीं कर सकते हैं, स्तर में काफी गहरी नमूना कोशिकाओं के सर्वोच्च एकाग्रता (चित्रा 4) के साथ काट. Shidham प्रोटोकॉल इन मध्यम और पारंपरिक प्रयोगशाला (2) उपकरणों (चित्रा 2) एम्बेडिंग के रूप में पारा उपयोग मुद्दों के दोनों पते.
इस प्रोटोकॉल दो प्रमुख विशेषताएं (चित्रा 1) के बाद शामिल हैं:
हालांकि कहांआर प्रोटोकॉल मानकीकृत और तरल आधारित ग्रीवा कोशिका विज्ञान के नमूनों के लिए सूचना दी है, यह भी इसके अलावा कई बहाव तरल पदार्थ, FNA, brushings, पुटी सामग्री आदि जैसे अन्य गैर gynecologic नमूनों का निदान उपज बढ़ाने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है ए.वी. मार्कर सुधार सुविधा होगी इन नमूनों की सेल ब्लॉक वर्गों के immunohistochemical मूल्यांकन के दौरान SCIP दृष्टिकोण के आवेदन. एम्बेडिंग मध्यम प्रासंगिक कदम पर उचित संशोधनों के साथ अन्य अभिकर्मकों द्वारा प्रतिस्थापित किया जा सकता है. पारा (फाइब्रिनोजेन) प्लाज्मा थ्रोम्बिन द्वारा कमरे के तापमान (1) gelled द्वारा प्रतिस्थापित किया जा सकता है.
लेखकों ए.वी. मार्कर के साथ सेल ब्लॉक के काटने अनुभाग का प्रदर्शन करने के लिए धन्यवाद क्रिस चर्त्रंद, हिंदुस्तान टाइम्स (ASCP).