Shidham metod för beredning av cell block med AV-markör från cytologi prover innehållande individuellt utspridda celler och små grupper cell.
Denna video visar Shidham metod för beredning av cell block från flytande baserat livmoderhals och cytologi prover innehållande individuellt utspridda celler och små grupper cell. Denna teknik använder HistoGel (Thermo Scientific) med konventionell laboratorieutrustning.
Användningen av avsnitten Cell Block är ett värdefullt kompletterande verktyg för utvärdering av icke-gynekologisk cytologi. De gör det möjligt cytopathologist att studera ytterligare morfologiska exemplar detalj inklusive arkitektur lesionen. Viktigast av allt, gör de för utvärdering av kompletterande studier som immuncytokemi, in situ hybridisering tester (FISH / CISH) och in situ polymeraskedjereaktion (PCR). Traditionella Cell Block förberedelse tekniker har främst använts till icke-gynekologisk cytologi prover, typiskt för utgjutningar kroppsvätska och fin nål biopsier aspiration.
Flytande baserade livmoderhals och prover är relativt sett mindre cellulär än deras icke-gynekologisk motparter med många individuella utspridda celler. På grund av detta är adekvat cellularitet i cellen blocket avsnitten svårt att uppnå. Dessutom kan histotechnologist sektionering blocket visualisera inte på vilken nivå cellerna med den högsta koncentrationen. Därför är det svårt att övervaka en lämplig nivå där sektioner kan väljas att överföras till glaset bilderna för testning. Som ett resultat kan den del av cellen block med celler av intresse missas, antingen genom att skära tidigare eller inte skära tillräckligt djupt. Aktuella protokoll för Shidham metod behandlar dessa frågor. Även om detta protokoll är standardiserat och rapporteras för gynekologisk flytande cytologi exemplar, den kan också tillämpas på icke-gynekologiska prover som utgjutning vätskor, FNA, borstningar, innehåll cysta etc för förbättrad kvalitet i diagnostiskt material i avsnitt cell block.
Cell block är ett värdefullt verktyg för utvärdering av olika cytologi prover (1). Viktigast av allt, förutom den arkitektoniska detaljer i provet, cell block möjliggöra utvärdering av kompletterande studier som immuncytokemi, lysrör / kromogen in situ hybridisering tester (FISH / CISH) och in situ PCR. En rad olika metoder för beredning av Cell Block beskrivs. De flesta av dessa är lämplig för icke-gynekologisk cytologi prover som innehåller relativt många celler och vävnader microfragments såsom i FNA aspirat och några serös vätska som vätska (1,3,4,5).
Eftersom cell block i första hand att ge möjlighet till immuncytokemiska utvärdering bör deras behandling ska helst vara liknande den i formalinfixerade paraffininbäddade (FFPE) vävnader. Ytterst resultat som uppnåtts efter immuncytokemiska utvärdering av avsnitten Cell Block är jämfört med de med publicerad litteratur som utförs främst på FFPE vävnadssnitt. Eventuella ändringar i protokollet kompromiss potentiellt och upphäver giltigheten av de resultat som erhållits på cell block bearbetas genom olika fixativ och sekvenser reagens än den som används för rutinmässig FFPE. Vissa kommersiella tekniker kan ha nackdelen att behandlingen genom ett protokoll av exponering för andra fixativ-reagens exponering.
Olika metoder för Cell Block förberedelser finns för prover med en betydande mängd av sediment och fragment vävnad. Huvudsakligen är de koncentrerade sedimentet med stöd av några gel eller koagulation princip. Den lättmanövrerade knappen är då inbäddad i paraffin efter bearbetning som kirurgisk patologi ark / biopsier.
Den använda geler innehåller gelatin, agar, fibrinogen / plasma-trombin, och andra kommersiella geler som HG. Metoderna koncentration varierar från enkla pelletering av sediment genom centrifugering till en koncentration av celler längs olika typer av membran. Exempel: Milipore, collodin (Celloidin) påsar eller skrapa celler från cytologi utstryk på objektglas (1). Vi utvärderade också en mängd gel genom att testa olika kombinationer av agar och gelatin. Ingen av de kombinationer som uppnått en tillräckligt fast konsistens att få en lätt lättmanövrerad skiva av stelnad gel med inbyggda celler från provet i ett stycke. HG visade lämplig konsistens och i vår uppleva immunfärgning resultaten på HG sektioner Cell Block har varit utmärkta.
Flytande cytologi (LBC) prover för livmoderhals och cytologi är i allmänhet mindre cellulär än icke-gynekologiska prover som nämnts ovan. Dessutom gynekologisk LBC proverna innehåller främst individuella utspridda exfolierad ytliga celler från livmoderhals och slemhinnor. På grund av detta kan lämpliga cellularitet inom sektionerna Cell Block inte uppnås utan en speciell strategi. Eftersom dessa enstaka spridda cellulära komponenter i blocket inte kan ses av histotechnologist under avsnittet kapning, kan den nivå där de celler börja visas i de avsnitt som inte uppskattas och kan missas, antingen genom att skära förbi nivå med de flesta celler eller inte skära tillräckligt djupt in i nivå med högsta koncentration av prov celler (Figur 4). Shidham s protokoll behandlar båda dessa frågor med hjälp av Hg som bädda medium och konventionell laboratorieutrustning (2) (Figur 2).
Detta protokoll omfattar följande två viktiga funktioner (Figur 1):
Även ouR-protokollet är standardiserat och rapporteras för flytande cervixcytologi exemplar, den kan också användas för att förbättra diagnostiska utbytet av många andra icke-gynekologiska prover som utgjutning vätskor, FNA, borstningar, innehåll cysta etc. Dessutom AV markör skulle underlätta bättre Tillämpningen av SCIP strategi under immunhistokemisk utvärdering av Cell Block delar av dessa specimen. Den bädda mediet kan ersättas av andra reagenser med lämpliga ändringar i relevant steg. HG kan ersättas med plasma (fibrinogen) att geléartad av trombin i rumstemperatur (1).
Författarna tackar Chris Chartrand, HT (ASCP) för att visa avsnittet skära i cellen block med AV-markör.