Паркинсона болезнь вызвана потерей дофаминергических иннервации стриатума, которые могут быть экспериментально индуцированных 6-ОН-допамина. Мы опишем, как выполнять стереотаксической поражения и следить апоморфина вызванных вращательное поведение у мышей. Эта модель является полезным и надежным для тестирования новых методов лечения болезни Паркинсона.
Болезнь Паркинсона (БП) влияет не менее 6,5 миллиона человек по всему миру, независимо от пола, социальных, этнических, экономических или географических границ. Основные симптомы, такие как тремор, ригидность и bradikinesia, развиваться, когда около 3 / 4 дофаминергических клетки теряются в черной субстанции, а не обеспечить гладкий, скоординированного регулирования полосатой схем двигателя. Депрессия и галлюцинации являются общими, и слабоумие в конечном итоге происходит у 20% пациентов. В настоящее время нет лечения, чтобы задержать или остановить прогрессирование БП. Скорее всего, препараты в настоящее время цель в большей степени на смягчение этих симптомов. Новые хирургические методы могут обратимо включить функционально поврежденных цепей посредством электрической стимуляции глубоких структур головного мозга, но, хотя глубокая стимуляция мозга является важным шагом вперед, он не подходит для всех пациентов. Остается поэтому необходимо апробировать новые подходы клеточной терапии в доклинических моделях.
Селективный нейротоксическое нарушение дофаминергических путей могут быть воспроизведены с помощью инъекций 6-hydroxydopamine (6-OHDA) или МФТП (1-метил-4-фенил-1 ,2,3,6-tertahydropyridine), тогда как разрушающие лекарства и окислительно-вредных веществ может также воспроизводить особенности PD у грызунов. В отличие от МФТП, 6-OHDA поражения вызывают массовые необратимой потерей нейронов, и может быть одно-или двусторонним. 6-OHDA поражения модель является надежным, приводит к дефициту надежный двигатель, и является наиболее широко используемым после 40 лет исследований в rats1. Как взаимодействий между трансплантированных клеток и принимающих теперь могут быть изучены более тщательно на мышах, а не на крысах, модель была перенесена на мышах 2,3, где он был недавно характеризуется 4.
В этом видео, мы показали, как поражение левой Нигро-полосатой путь анестезии мышей медленно доставки 2,0 мкл 6-OHDA через stereotaxically вставляется микро-иглы шприца. Потеря дофаминергических ввод происходит в течение нескольких дней, и функциональных нарушений можно наблюдать за послеоперационной недели и месяцы, по рейтингу животных вращения индуцированной агентами дофаминергических 5. Здесь мы покажем, всего тела контралатеральной повороты происходят через 10 минут после однократного введения подкожного апоморфина, измеренное через месяц после поражения. Результаты и недостатки будут рассмотрены ниже.
Обширные одностороннем поражении Нигро-полосатой пути может быть достигнуто надежно у мышей одной стереотаксической инъекции 6-OHDA в полосатом теле. Степень поражения может быть проверена посмертного по иммуногистохимии для тирозингидроксилазы (которая катализирует скорость лимити?…
The authors have nothing to disclose.
Поддержка Fundação де Ампаро Pesquisa сделать Estado-ду-Риу-де-Жанейро (FAPERJ) и Conselho Насьональ де Desenvolvimento Científico электронной Tecnológico (CNPq). Мы благодарны анонимным рецензентам, чьи комментарии помогли нам улучшить как рукопись и видео.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Ketamine hydrochloride | König | 90-120 mg/Kg | ||
Xylazine hydrochloride | König | 10 mg/Kg | ||
Atropine Sulfate | Isofarma | Isofarma | ||
6 – Hydroxydopamine Hydrochloride | Sigma-Aldrich | 5 μg/μL | ||
L – Ascorbic Acid | USB Corporation | 0.2% | ||
Xylocaine (Lidocaine Chloridrate) |
ASTRA Chemistry | 5% 50 mg |
||
Nebacetin (Neomycin Sulfate + Bacitracin) | Altana Pharma | 5 mg/g + 250 Ul/g | ||
R-(-)-Apomorphine hydrochloride | Sigma-Aldrich | 0.5 mg/Kg | ||
GenTeal lOphthalmic ointment Hypromellose |
NOVARTIS | 0.33% |
||
Ibuprofen | Abbott | 4 mg/ 100 ml drinking water | ||
Povidine | JohnsonDiversey | |||
R-(-)-Apomorphine hydrochloride | Sigma-Aldrich | 0.5 mg/Kg |