Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Encyclopedia of Experiments

إثراء للذكور: الحفاظ على مخزون من الذكور C. elegans

Overview

يمكن نشر النيماتود بسهولة في المختبر -- ويرجع ذلك جزئيا إلى أن hermaphrodites يمكن أن تتكاثر عن طريق الإخصاب الذاتي.  ومع ذلك، قد تتطلب الصلبان الوراثية وغيرها من التجارب عددا كبيرا من الذكور.  يصف هذا الفيديو طريقة لإثراء الذكور C. elegans.

Protocol

هذا البروتوكول هو مقتطف من Singaravelu وآخرون، العزلة والتنشيط في المختبر من Caenorhabditis elegans الحيوانات المنوية، J. Vis. Exp. (2011).

1. إثراء السكان الذكور

  1. اعتمادا على الحاجة التجريبية، يمكن الحصول على أعداد كبيرة من الذكور باستخدام إحدى الاستراتيجيات التالية:
    1. ويمكن الحصول على عدد كبير من الذكور نوع البرية عن طريق عبور 5 الذكور نوع البرية و 1 hermaphrodite على حديقة صغيرة من OP50 المبذر في وسط لوحة NGM. ما يقرب من 50٪ من الجيل اللاحق سيكون من الذكور من النوع البري.
    2. له-5(e1490) أو له-8(e1489) hermaphrodites رمي عدد كبير من الذكور. له-5 وهو-8 الذكور هي خصبة وليس هناك عيب واضح في مورفولوجيا الحيوانات المنوية وظيفة. لذلك، يمكن استخدام له-5 أو له-8 الذكور بدلا من الذكور نوع البرية لكثير من التجارب.

2. تحديد وعزل الذكور

  1. فحص مورفولوجيا الذيل من الديدان؛ ذيل الدودة الذكر مدور
  2. اختيار الذكور المرحلة L4 ونقلها إلى لوحة NGM المصنف مع E. القولونية OP50 والسماح لهم بالنمو لمدة يوم أو يومين. زيادة الذكور العازبة في غياب hermaphrodites منع فقدان الحيوانات المنوية، وبالتالي فإن عددا كبيرا من spermatids تكون متاحة خلال الإجراء التجريبي.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Tags

قيمة فارغة، مشكلة ،
إثراء للذكور: الحفاظ على مخزون من الذكور <em>C. elegans</em>
Play Video

المصدر: Singaravelu, G., وآخرون. العزلة والتنشيط في المختبر من Caenorhabditis elegans الحيوانات المنوية . ج. فيس إكسب. (2011).

View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter