男性のためのエンリッチメント:男性C.エレガンスの在庫を維持する

Overview

線虫は、雌雄同体が自己受精によって繁殖することができるので、実験室で容易に伝播することができる。 しかし、遺伝的十字架および他の実験は、多数の男性を必要とするかもしれない。 このビデオでは、男性のC.エレガンスを豊かにする方法について説明します。

Protocol

このプロトコルは、シンガラヴェルら、カエノルハブディティス・エレガンス精子の単離およびインビトロ活性化、J.Vis. Expからの抜粋である。(2011).

1. 男性集団の豊かさ

1. 実験の必要性に応じて、多数の男性は、次の戦略のいずれかを採用することによって得ることができます。
   1. 野生型雄の大きな集団は、NGMプレートの中心に播種されたOP50の小さな芝生の上に5野生型の雄と1つの雌雄体を交えて得ることができる。その後の世代のおよそ50%が野生型の雄です。
   2. 彼-5(e1490)またはhim-8(e1489)雌雄同体は多数の男性を投げる。 彼-5と彼-8の男性は肥沃であり、精子の形態と機能に明らかな欠陥はありません。だから、彼-5または彼-8の男性は、多くの実験のために野生型の男性の代わりに使用することができます。

2. 男性の識別と分離

1. ワームの尾の形態を調べる;オスの虫の尾は丸みを帯びている。
2. L4ステージの男性を選び、 大腸菌 OP50で播種されたNGMプレートに移し、1日か2日成長させます。雌雄同体がない状態で独身男性を成長させることは、精子の喪失を防ぎ、したがって多数の精子が実験的処置の間に利用可能であろう。