남성을 위한 농축: 남성 C. 엘레건의 재고 유지

Overview

선충은 실험실에서 쉽게 전파될 수 있는데, 이는 헤르마프로디테족이 자체 수정에 의해 재현될 수 있기 때문입니다.  그러나, 유전 십자가 및 그밖 실험은 남성의 다수를 요구할 수 있습니다.  이 비디오는 남성 C. elegans를 위해 풍요롭게하는 방법을 설명합니다.

Protocol

이 프로토콜은 Singaravelu 외에서발췌, 격리 및 Caenorhabditis elegans elegans 정자의 체외 활성화, J. Vis. Exp. (2011).

1. 남성 인구의 농축

1. 실험적 필요에 따라 다음과 같은 전략 중 하나를 사용하여 많은 수의 남성을 얻을 수 있습니다.
   1. 야생형 남성의 큰 인구는 NGM 플레이트의 중심에 시드된 OP50의 작은 잔디밭에서 5마리의 야생형 남성과 1헤르마프로디테를 교차시킴으로써 얻을 수 있다. 약 50%의 후징 세대가 야생형 남성이 될 것입니다.
   2. 그-5(e1490)또는 그-8(e1489)hermaphrodites 남성의 많은 수를 던져. 그-5 와 그-8 남성은 비옥 하 고 정자 형태와 기능에 명백한 결함이 있다. 그래서, 그-5 또는 그-8 남성 많은 실험에 대 한 야생 형 남성 대신에 사용할 수 있습니다.

2. 남성의 식별 및 격리

1. 벌레의 꼬리 형태를 검사; 수컷 벌레의 꼬리가 둥글게 됩니다.
2. L4 단계 남성을 선택하고 대장균 OP50으로 시드 NGM 플레이트로 전송하고 하루 이틀 동안 성장하게하십시오. hermaphrodites의 부재에 있는 독신 남성증가는 정액의 손실을 방지하고 이렇게 많은 수의 정자는 실험 적인 절차 도중 유효할 것입니다.