Dissection der Dünndarm-und Speicheldrüsen von Ae. aegypti Moskitos

Summary

Der Moskito Mitteldarm und Speicheldrüsen sind wichtige Ein-und Ausspeisepunkten für Vektor-Erreger wie Plasmodium falciparum und das Dengue-Virus. Dieses Video zeigt die Zerlegung Techniken zur Entfernung der Mitteldarm und Speicheldrüsen von Aedes aegypti Moskitos.

Abstract

Der Moskito Mitteldarm und Speicheldrüsen sind wichtige Ein-und Ausspeisepunkten für Krankheitserreger wie Parasiten Plasmodium und Dengue-Viren. Dieses Video zeigt Protokoll Dissektion Techniken zur Entfernung der Mitteldarm und Speicheldrüsen von Aedes aegypti Moskitos.

Protocol

Dissection der Mitteldarm und Speicheldrüse Gewebe von Mücken, bedarf der vorherigen Vorbereitung 1X Phosphate Buffered Saline (1X PBS)-Lösung und Betäubung von Mücken, indem auf eine Temperatur von 4 ° C, bis immobilisiert. Die Mücken bleiben, indem sie in einer Petrischale, die kalt gehalten wird auf Eis betäubt. Andere Materialien erforderlich sind: Licht-Mikroskop mit 10-fach Objektiv, Pipette, spitzen Pinzette, Objektträger aus Glas-, Nadel-Spitze Sonden ausgestattet. Dünndarm-Dissektion Geben Sie einen Tropfen 1X PBS auf einen Objektträger unter dem Lichtmikroskop montiert. Übertragen einer Mücke auf den vorbereiteten Schlitten durch stechende die Mücke Thorax mit einer Nadelspitze Sonde. Halten Sie die Mücke mit der Sonde, die Zange auf den zweiten bis zum letzten Abdominalsegment fassen und vorsichtig abziehen Mücke Bauch in einer einzigen Bewegung. Der Mitteldarm bleiben sollte an der immobilisierten Thorax. Entsorgen Sie den Bauch. Verwenden Sie die Zange, um den Mitteldarm aus dem Thorax zu lösen. Speicheldrüse Dissektion Geben Sie einen Tropfen 1X PBS auf einen Objektträger unter einem Lichtmikroskop montiert. Pick-up eine Mücke durch stabbling den Brustkorb mit einer Nadelspitze Sonde. Ziehen Sie Moskito-Beinen mit den Fingern. Übertragen Sie die Moskitos auf die Folie. Entfernen Sie den Kopf der Mücke mit einer Pinzette. Halten Sie die Moskito-Thorax mit der Sonde, verwenden Sie eine andere Sonde vorsichtig nach unten auf den Brustkorb. Die Speicheldrüsen sind am vorderen Teil des Thorax und kann durch Verwendung einer Nadelspitze Sonde und Abtrennen der Anhänge, die die Drüse eine Verbindung mit dem Thorax isoliert werden. Zwei seitlichen Lappen und einem medialen Lappen: Intakte Speicheldrüsen sind von drei Lappen besteht.