Collagenase הכנה תשקלי את collagenase לתוך חיץ 50 מ"ל בידוד חרוטי ולהוסיף להפוך את הריכוז הסופי, כמפורט בטבלה שלהלן. ממיסים את collagenase ידי vortexing. (12 + 2 עכברים עכברים עכברים תוספת = 14 x 5 מ"ל / עכבר = 70 מ"…
Materials
Material Name
Type
Company
Catalogue Number
Comment
Dithizone
reagent
Dissolve 5mg Dithizone in 5 ml of DMSO in a 50 ml conical tube. Add 45 ml of normal saline and mix gently. Filter with a 60 cc syringe and a 0.22 “m syringe filter into a new 50 ml tube. Store at 4 OC, until use. Add 1 ml to each 35 mm counting Grid-plate, when needed.
PBS
Buffer
HBSS
Buffer
Isolation soln.
Buffer
HBSS containing 10 mM of HEPES, 1 mM of MgCl2, 5 mM of Glucose, pH 7.4
Wash soln.
Buffer
Isolation buffer containing 1mM CaCl2
Collagenase P
Boehringer Mannheim-Roche
1213873
Dissection tools
Hemostat clamp (n=2), Forceps (n=2), Scissors (for skin incision an for taking out pancreas from adjacent tissue)