Summary
Micro-dissectie van hersenen van de rat in verschillende regio's is van groot belang voor de studie van verschillende neurodegeneratieve ziekten. Deze video toont micro-dissectie van de vier grote gebieden van de hersenen zijn reukorgaan, frontale cortex, striatum en de hippocampus in de hersenen van de rat verse weefsel. Nuttige tips voor snelle verwijdering van de desbetreffende regio's om RNA en eiwit afbraak van het weefsel te voorkomen worden gegeven.
Abstract
Micro-dissectie van hersenen van de rat in verschillende regio's is van groot belang voor de studie van verschillende neurodegeneratieve ziekten. Deze video toont micro-dissectie van de vier grote gebieden van de hersenen zijn reukorgaan, frontale cortex, striatum en de hippocampus in de hersenen van de rat verse weefsel. Nuttige tips voor snelle verwijdering van de desbetreffende regio's om RNA en eiwit afbraak van het weefsel te voorkomen worden gegeven.
Protocol
Stap 1
Offer van de rat volgens de vastgestelde protocollen. Haal de hersenen uit de schedel en het in ijs spoel koud DEPC behandeld Milli Q water op elk oppervlak bloed te verwijderen.
Stap 2
Plaats op koude metalen plaat. Snijd de hersenen bi-half in de rechter-en linker hersenhelft. 
Figuur 1. Het snijden posities van de mediale zicht van de rat halfrond
Stap 3
Verzamel de bulbus olfactorius direct na de eerste snede. Flash bevriezen het model in vloeibare stikstof en bewaar bij -80 ° C. 
Figuur 2. Bulbus olfactorius dissectie
Stap 4
Verzamelen van de frontale cortex direct na de tweede snede, met behulp van een mes en een tang Dumont nr. 5. Flash bevriezen het model in vloeibare stikstof en bewaar bij -80 ° C. 
Figuur 3. Frontale cortex dissectie
Stap 5
Verzamel de striatum (nucleus caudatus) rechts na de derde gesneden met behulp van twee Dumont No.5 tang. Flash bevriezen het model in vloeibare stikstof en bewaar bij -80 ° C. 
Figuur 4. Striatum (nucleus caudatus) dissectie
Stap 6
Voor het verzamelen van de hippocampus, opgemaakt de ventrale zijde van de hersenen en verwijder vervolgens middenhersenen naar de hippocampus bloot te leggen. Ontleden van de hippocampus van de cortex met behulp van twee Dumont No.5 tang. Flash bevriezen het model in vloeibare stikstof en bewaar bij -80 ° C. 
Figuur 5. Hippocampus dissectie
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Verschillende gebieden van de hersenen associëren met verschillende neurodegeneratieve ziekten. Bijvoorbeeld, frontale cortex en het striatum verband met de ziekte van Parkinson s, terwijl hippocampus betrekking heeft met de ziekte van Alzheimer. Precieze micro-dissectie van de hersenen laat ons toe om het mRNA en eiwit veranderingen in de aangetaste regio te detecteren nauwkeuriger.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
De dieren werden behandeld volgens het protocol voor het gebruik van dierlijke in het onderzoek goedgekeurd door het Comite over het gebruik van levende dieren in Onderwijs en Onderzoek (CULATR) in de Universiteit van Hong Kong en volgens de National Institutes of Health richtlijnen voor het gebruik van dieren.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Microscope | Olympus Corporation | ||
| Dissection tools | Metal plate, forceps, blade, etc. Individually wrapped with aluminum foil and heated at 180oC for eight hours to eliminate RNase. Made ice cold before use. |
References
- Palkovits, M. Maps and guide to micro-dissection of the rat brain. , Elsevier. New York. (c.1988).
- Swanson, L. W. Brain maps: structure of the rat brain. 3rd revised edition. , Elsevier Academic Press. (2004).
