Summary
Mikro-disseksiyon içine sıçan beynin çeşitli bölgelerinde, farklı nörodejeneratif hastalıklar çalışma için son derece önemlidir. Bu video dört büyük beyin bölgelerinde mikro diseksiyon koku alma ampul, frontal korteks, striatum ve taze sıçan beyin dokusu hipokampüsteki göstermektedir. RNA ve protein doku bozulması önlemek için ilgili bölgelerde hızlı kaldırılması için yararlı ipuçları verilmiştir.
Abstract
Mikro-disseksiyon içine sıçan beynin çeşitli bölgelerinde, farklı nörodejeneratif hastalıklar çalışma için son derece önemlidir. Bu video dört büyük beyin bölgelerinde mikro diseksiyon koku alma ampul, frontal korteks, striatum ve taze sıçan beyin dokusu hipokampüsteki göstermektedir. RNA ve protein doku bozulması önlemek için ilgili bölgelerde hızlı kaldırılması için yararlı ipuçları verilmiştir.
Protocol
Adım 1
Kurulmuş protokollere göre sıçan Kurban. Kafatası beyin çıkarın ve buz durulayın soğuk DEPC herhangi bir yüzeye kan kaldırmak için Milli Q suyu tedavi.
Adım 2
Soğuk metal plaka üzerine yerleştirin. , Sağ ve sol hemisfer beynin iki yarısı kesin. 
Şekil 1. Sıçan yarımkürenin medial kesme pozisyonları
Adım 3
Ilk kesim hemen sonra koku ampul toplayın. Flaş -80 sıvı azot ve mağaza örnek dondurma ° C 
Şekil 2. Olfaktör ampul diseksiyonu
Adım 4
Bir bıçak ve bir Dumont No 5 forseps kullanarak, ikinci kesim sonra sağ frontal korteksin toplayın. Flaş -80 sıvı azot ve mağaza örnek dondurma ° C 
Şekil 3. Frontal korteks diseksiyonu
Adım 5
Iki Dumont No.5 forseps yardımı ile üçüncü kesintisinden sonra sağ striatum (kaudat nükleus) toplayın. Flaş -80 sıvı azot ve mağaza örnek dondurma ° C 
Şekil 4. Striatum (kaudat nükleus) diseksiyonu
Adım 6
Hipokampus toplamak için, beynin ventral tarafında koymak ve sonra hipokampus maruz Ortabeyin kaldırmak. Iki Dumont No.5 forseps kullanarak korteks, hipokampus parçalara ayır. Flaş -80 sıvı azot ve mağaza örnek dondurma ° C 
Şekil 5. Hippocampus diseksiyonu
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Beynin farklı bölgelerinde farklı nörodejeneratif hastalıklar ile ilişkilendirir. Hipokampus Alzheimer hastalığı ile ilgilidir Örneğin, frontal korteks ve striatum Parkinson hastalığı ile ilgili. Beynin hassas mikro diseksiyon hastalıklı bölgede mRNA ve protein değişiklikleri daha doğru algılamasına olanak sağlar.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Hayvanların Hong Kong Üniversitesi Eğitim ve Araştırma Canlı Hayvan Kullanımı (CULATR) Komitesi tarafından onaylanmış ve hayvan kullanımı için sağlık kuralları National Institutes göre araştırma hayvan kullanımı için protokole göre ele alınmıştır.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Microscope | Olympus Corporation | ||
| Dissection tools | Metal plate, forceps, blade, etc. Individually wrapped with aluminum foil and heated at 180oC for eight hours to eliminate RNase. Made ice cold before use. |
References
- Palkovits, M. Maps and guide to micro-dissection of the rat brain. , Elsevier. New York. (c.1988).
- Swanson, L. W. Brain maps: structure of the rat brain. 3rd revised edition. , Elsevier Academic Press. (2004).
