चूहा मस्तिष्क के विशिष्ट मस्तिष्क क्षेत्र से शाही सेना या प्रोटीन निष्कर्षण के लिए माइक्रो - विच्छेदन

Summary

चूहा मस्तिष्क के विभिन्न क्षेत्रों में लघु विच्छेदन अलग neurodegenerative रोगों के अध्ययन के लिए अत्यंत महत्वपूर्ण है. इस वीडियो को दर्शाता है चार प्रमुख मस्तिष्क क्षेत्रों के विच्छेदन सूक्ष्म घ्राण बल्ब, ललाट प्रांतस्था, striatum और ताजा चूहा मस्तिष्क के ऊतकों में हिप्पोकैम्पस शामिल हैं. संबंधित क्षेत्रों के त्वरित हटाने के लिए उपयोगी सुझावों के लिए शाही सेना और ऊतकों के प्रोटीन गिरावट से बचने के दिया जाता है.

Abstract

चूहा मस्तिष्क के विभिन्न क्षेत्रों में लघु विच्छेदन अलग neurodegenerative रोगों के अध्ययन के लिए अत्यंत महत्वपूर्ण है. इस वीडियो को दर्शाता है चार प्रमुख मस्तिष्क क्षेत्रों के विच्छेदन सूक्ष्म घ्राण बल्ब, ललाट प्रांतस्था, striatum और ताजा चूहा मस्तिष्क के ऊतकों में हिप्पोकैम्पस शामिल हैं. संबंधित क्षेत्रों के त्वरित हटाने के लिए उपयोगी सुझावों के लिए शाही सेना और ऊतकों के प्रोटीन गिरावट से बचने के दिया जाता है.

Protocol

चरण 1

स्थापित प्रोटोकॉल के अनुसार चूहे बलिदान. खोपड़ी से मस्तिष्क निकालें और यह बर्फ में कुल्ला ठंड DEPC मिल्ली क्यू पानी इलाज के लिए किसी भी सतह रक्त निकालने.

चरण 2

ठंड धातु प्लेट पर रखें. सही और बाएँ गोलार्द्ध में मस्तिष्क द्वि आधा काटें.

चित्रा 1. चूहा गोलार्द्ध के औसत दर्जे का दृश्य से काटने पदों

चरण 3

पहली कट के बाद सही घ्राण बल्ब लीजिए. फ्लैश -80 में तरल नाइट्रोजन और दुकान में नमूना फ्रीज डिग्री सेल्सियस

चित्रा 2. घ्राण बल्ब विच्छेदन

चरण 4

दूसरी कटौती के बाद ललाट प्रांतस्था सही लीजिए, एक ब्लेड और Dumont सं 5 संदंश का उपयोग. फ्लैश -80 में तरल नाइट्रोजन और दुकान में नमूना फ्रीज डिग्री सेल्सियस

चित्रा 3. ललाट प्रांतस्था विच्छेदन

चरण 5

दो Dumont No.5 संदंश की मदद के साथ तीसरे कटौती के बाद सही striatum (पूंछवाला नाभिक) ले लीजिए. फ्लैश -80 में तरल नाइट्रोजन और दुकान में नमूना फ्रीज डिग्री सेल्सियस

चित्रा 4. Striatum विच्छेदन (पूंछवाला नाभिक)

चरण 6

हिप्पोकैम्पस को इकट्ठा करने के लिए, मस्तिष्क के ventral पक्ष रख दिया और तब हटाने के लिए midbrain हिप्पोकैम्पस बेनकाब. दो Dumont No.5 संदंश का उपयोग प्रांतस्था से हिप्पोकैम्पस काटना. फ्लैश -80 में तरल नाइट्रोजन और दुकान में नमूना फ्रीज डिग्री सेल्सियस

चित्रा 5. हिप्पोकैंपस विच्छेदन

Discussion

अलग मस्तिष्क क्षेत्रों अलग neurodegenerative रोगों के साथ सहयोगी. उदाहरण के लिए, ललाट प्रांतस्था और striatum पार्किंसंस रोग के साथ संबंधित हैं जबकि हिप्पोकैम्पस अल्जाइमर रोग के साथ संबंधित है. मस्तिष्क की सटीक सूक्ष्म विच्छेदन हमें रोगग्रस्त क्षेत्र में mRNA और प्रोटीन में परिवर्तन का पता लगाने के लिए और अधिक सही करने के लिए अनुमति देता है.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Microscope	Olympus Corporation
Dissection tools			Metal plate, forceps, blade, etc. Individually wrapped with aluminum foil and heated at 180oC for eight hours to eliminate RNase. Made ice cold before use.