Summary
到各地区的大鼠脑微解剖不同的神经退行性疾病的研究是极为重要的。本视频演示了微解剖四个主要的大脑区域包括嗅球,额叶皮质,纹状体和新鲜的大鼠脑组织海马。快速清除各自区域的有用的提示,以避免RNA和蛋白质组织的退化。
Abstract
到各地区的大鼠脑微解剖不同的神经退行性疾病的研究是极为重要的。本视频演示了微解剖四个主要的大脑区域包括嗅球,额叶皮质,纹状体和新鲜的大鼠脑组织海马。快速清除各自区域的有用的提示,以避免RNA和蛋白质组织的退化。
Protocol
第1步
牺牲根据既定协议的大鼠。从头骨取出大脑和冲洗它在冰冷DEPC处理毫Q水,以消除任何表面的血液。
第2步
放置在冰冷的金属板。剪下的大脑分为左,右半球双向一半。
图1。从大鼠大脑半球的内侧,切割位置
第3步
嗅球收集后的首次下调。闪存冻结在液态氮和存储的试样在-80 ° C。
图2。嗅球夹层
第4步
收集后的第二次削减额叶皮层权,使用刀片和一个杜蒙号5钳。闪存冻结在液态氮和存储的试样在-80 ° C。
图3。额叶皮质夹层
第5步
后第三削减两个杜蒙第五钳的帮助下收集的纹状体(尾状核)。闪存冻结在液态氮和存储的试样在-80 ° C。
图4。纹状体(尾状核)夹层
第6步
为了收集海马,大脑的腹侧高达,然后取出脑暴露海马。剖析从两个杜蒙第五钳使用皮质海马。闪存冻结在液态氮和存储的试样在-80 ° C。
图5。海马夹层
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Discussion
不同的大脑区域不同的神经退行性疾病相关联。例如,额叶皮层和纹状体涉及与帕金森氏症与阿尔茨海默氏症有关,而海马。精确的大脑的微观解剖,使我们能够更准确地检测到病变部位的mRNA和蛋白的变化。
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Disclosures
动物根据委员会批准由活的动物(CULATR)在香港大学在教学和科研使用,并根据国家使用动物的健康指引研究所的动物研究使用的协议处理。
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Microscope | Olympus Corporation | ||
Dissection tools | Metal plate, forceps, blade, etc. Individually wrapped with aluminum foil and heated at 180oC for eight hours to eliminate RNase. Made ice cold before use. |
References
- Palkovits, M. Maps and guide to micro-dissection of the rat brain. , Elsevier. New York. (c.1988).
- Swanson, L. W. Brain maps: structure of the rat brain. 3rd revised edition. , Elsevier Academic Press. (2004).