Summary
Micro-dissezione del cervello di ratto in varie regioni è estremamente importante per lo studio di diverse malattie neurodegenerative. Questo video dimostra micro-dissezione di quattro regioni del cervello importanti includono bulbo olfattivo, la corteccia frontale, ippocampo e striato in tessuto fresco cervello di ratto. Consigli utili per la rimozione rapida delle rispettive regioni al fine di evitare l'RNA e la degradazione delle proteine del tessuto sono dati.
Abstract
Micro-dissezione del cervello di ratto in varie regioni è estremamente importante per lo studio di diverse malattie neurodegenerative. Questo video dimostra micro-dissezione di quattro regioni del cervello importanti includono bulbo olfattivo, la corteccia frontale, ippocampo e striato in tessuto fresco cervello di ratto. Consigli utili per la rimozione rapida delle rispettive regioni al fine di evitare l'RNA e la degradazione delle proteine del tessuto sono dati.
Protocol
Fase 1
Il sacrificio del ratto secondo i protocolli stabiliti. Togliere il cervello dal cranio e sciacquarlo in ghiaccio freddo DEPC trattate acqua Milli Q per rimuovere il sangue di superficie.
Fase 2
Mettere sul piatto freddo dei metalli. Tagliare il cervello bi-metà in emisfero destro e sinistro. 
Figura 1. Le posizioni di taglio dal punto di vista mediale dell'emisfero ratto
Fase 3
Raccogliere il bulbo olfattivo subito dopo il primo taglio. Flash congelare il campione in azoto liquido e conservare a -80 ° C. 
Figura 2. Dissezione bulbo olfattivo
Fase 4
Raccogliere il diritto corteccia frontale dopo il secondo taglio, usando una lama e un Dumont n. 5 pinze. Flash congelare il campione in azoto liquido e conservare a -80 ° C. 
Figura 3. Corteccia frontale dissezione
Fase 5
Raccogliere lo striato (nucleo caudato) subito dopo il terzo taglio con l'aiuto di due pinzette Dumont n.5. Flash congelare il campione in azoto liquido e conservare a -80 ° C. 
Figura 4. Striato (nucleo caudato) dissezione
Fase 6
Per raccogliere l'ippocampo, inserire il lato ventrale del cervello e quindi rimuovere mesencefalo per esporre l'ippocampo. Sezionare l'ippocampo dalla corteccia con due pinze No.5 Dumont. Flash congelare il campione in azoto liquido e conservare a -80 ° C. 
Figura 5. Hippocampus dissezione
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Discussion
Differenti regioni del cervello associate con diverse malattie neurodegenerative. Per esempio, corteccia frontale e nello striato rapportarsi con la malattia di Parkinson s mentre l'ippocampo si riferisce alla malattia di Alzheimer. Preciso micro-dissezione del cervello ci permette di rilevare i cambiamenti mRNA e proteine nella regione malato con maggiore precisione.
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Disclosures
Gli animali sono stati trattati secondo il protocollo per l'uso di animali nella ricerca approvato dalla Commissione per l'uso di animali vivi in didattica e la ricerca (CULATR) presso l'Università di Hong Kong e secondo il National Institutes of linee guida per l'uso sanità animale.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Microscope | Olympus Corporation | ||
| Dissection tools | Metal plate, forceps, blade, etc. Individually wrapped with aluminum foil and heated at 180oC for eight hours to eliminate RNase. Made ice cold before use. |
References
- Palkovits, M. Maps and guide to micro-dissection of the rat brain. , Elsevier. New York. (c.1988).
- Swanson, L. W. Brain maps: structure of the rat brain. 3rd revised edition. , Elsevier Academic Press. (2004).
