マウスモデルにおける乳腺の発達と機能の評価
Summary
このメソッドは、マウスから乳腺の発達と機能を細かく分析し、評価する方法について説明します。射乳がオキシトシンベースの筋上皮細胞の収縮アッセイを用いて評価される間に切除された乳腺を全部マウントを使用して開発の度合いを評価されています。
Abstract
人間の乳腺には、15〜20葉で構成されて乳首における分岐ダクトシステムの開口部に分泌するミルクその。これらのローブは分泌肺胞と収束ダクト1から作られたターミナルダクト小葉単位の数で構成そのものです。マウスでは、同様のアーキテクチャは、ダクトと肺胞が結合組織の間質内に散在されている妊娠で観察される。マウス乳腺上皮は細胞の2つの層、基底膜2の範囲で示される筋上皮細胞の外側の層に囲まれた管腔細胞の内側の層から構成されるダクトのシステムのようなツリーです。出生時に、唯一のrudimental膵管ツリーには、主ダクト15〜20支店で構成される、存在しています。ホルモン3,4,5の影響を受けて、約4週齢の思春期の開始時に枝の伸長と増幅の開始、、。 10週間で、間質のほとんどは、妊娠2日まで各性周期に分岐し、回帰のサイクルを受けることになるダクトの複雑なシステムに侵略されている。妊娠の開始時に、開発の第2段階は、肺胞6,7と呼ばれるブドウの形をしたミルクの分泌構造を形成する上皮の増殖と分化と、始まります。分娩に続いて、泌乳期間全体を通して、牛乳は内腔の分泌細胞で産生され、肺胞の内腔内に格納されています。仔の授乳によって誘発される神経反射によって刺激されたオキシトシン放出は、、牛乳はそれが子犬8〜使用可能になった乳首にダクトを介して輸送されるので、肺胞の周りやダクトに沿って筋上皮細胞の同期した収縮を誘発する。乳腺の発達、分化および機能はしっかりと画策し、必要とする、間質および上皮間だけでなく、上皮9,10,11内筋上皮および管腔細胞間の相互作用だけでなく、されています。これにより、これらの相互作用に関与する多くの遺伝子の変異は、妊娠初期、妊娠後期に分化し、授乳12,13につながる分泌活性化の間に思春期や肺胞形成時にどちら管伸長が損なわれる可能性があります。この記事では、我々はマウス乳腺を細かく分析し、全体のマウントを使用して開発を評価する方法について説明します。我々はまた、生体外オキシトシンベースの機能アッセイを用いて筋上皮の収縮と射乳を評価する方法を示します。乳腺の発達と機能に関する遺伝子変異の効果は、このように変異体と野生型コントロールマウスではこれら2つの手法を実行することにより、 その場で決定することができる。
Protocol
Discussion
乳腺の発達と機能は密接にオーケストレーションされています。変異マウスは、腺のアーキテクチャ13,12を評価する必要性を強調する乳腺の発達と機能を損なうことができる遺伝子の変異を抱くことができる。乳腺の発達のすべての段階でこの資料に記載したように全体を取付けを行うことができます。典型的には、上皮の開発は思春期（〜6週齢）の途中でと2,10思春期（〜10…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
これらの研究は、DWLにCIHRとCBCRA補助金によって賄われた。 IPは、CIHR – STP、FRSQとCIHRから奨学金によって賄われていた。 MKGSはOGSとCIHR – STPの奨学金によって賄われていた。著者らは、マウスの繁殖との彼の援助のためにケビンバーに感謝。
Materials
| Reagent | Company | Catalogue number |
|---|---|---|
| Carmine | Sigma-Aldrich | C1022 |
| Aluminum potassium sulfate | Sigma-Aldrich | A6435 |
| Thymol | Sigma-Aldrich | T0501 |
| Methyl salicylate | Sigma-Aldrich | M6752 |
| Oxytocin | Sigma-Aldrich | O3251 |
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