De intraluminale midden cerebrale slagader occlusie (MCAO) model is de meest frequente gebruikte model onder experimentele ischemische beroerte modellen. Hier zullen we demonstreren het gehele model in detail met de gids van Laser Doppler flowmetry, en zijn vertegenwoordiger resultaten.
Beroerte is de derde doodsoorzaak en de belangrijkste oorzaak van invaliditeit in de wereld, met een geschatte kost van bijna 70 miljard dollar in de Verenigde Staten in 2009 1,2. De intraluminale midden cerebrale slagader occlusie (MCAO) model is ontwikkeld door vier Koizumi in 1986 aan deze indrukwekkende menselijke pathologie te simuleren in de rat. Een wijziging van de MCAO methode werd later door Longa 3. Beide technieken zijn op grote schaal gebruikt om de moleculaire mechanismen van hersenletsel als gevolg van ischemische beroerte en potentiële therapeutische modaliteiten 5 te identificeren. Deze relatief niet-invasieve methode bij ratten is uitgebreid om te gebruiken in muizen om te profiteren van transgene en knock-out stammen 6,7. Voor het modelleren van focale cerebrale ischemie, is een intraluminale hechtdraad geavanceerde via de interne halsslagader aan de basis van de MCA af te sluiten. Het terugtrekken van de hechting na een bepaalde periode nabootst spontane reperfusie, maar de hechting kan ook permanent worden bewaard. Deze video demonstreert de twee grote benaderingen voor het uitvoeren van intraluminale MCAO procedure bij muizen op een stapsgewijze manier, alsmede het verschaffen van inzichten voor potentiële nadelen en valkuilen. De ischemische hersenweefsel wordt vervolgens gekleurd door 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) om de mate van herseninfarct acht te evalueren.
Het MCAO model is een model dat vastgesteld cerebrale ischemie repliceert in muriene soorten. Dit model werd voor het eerst gebruikt in ratten en daarna aangepast aan de muizen. Het vermijden van craniectomy om de invloed van chirurgische manipulatie op de bloed-hersen barrière permeabiliteit en intracraniale druk te elimineren is een voordeel van deze techniek. Echter, veel variabelen, zoals de stam-gerelateerde verschillen 10, de grootte van hechtdraad tip 11, duur van de occlusie 6, …
The authors have nothing to disclose.
Name of the reagent | Type | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
---|---|---|---|---|
Male C57BL/6 mice | Animal | Harlan Laboratories, Indianapolis, IN, USA | 20-26 grs | |
Dissection microscope | Microscope | Leica stereo Microscope MZ6 | 6.3:1 zoom | |
Fiber optic illuminator | Illuminator | TechniQuip Corp., Livermore, CA, USA | FO1–150 | |
Isoflurane | Anesthesia | Baxter Pharmaceutics, Deerfield, IL | 1001936060 | |
SuperCut Iris scissor, straight | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 14218 | |
Vannas micro-scissor, straight | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 14003 | |
Dumont fine tip forceps | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 503290 | |
Vessel clip | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 14120 | |
High Frequency Desiccator 900 | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 500397 | |
7-0 surgical Nylon monofilament suture | Suture | Ethicon, Inc., Somerville, NJ, USA | 1647G | Suture for occlusion |
7-0 surgical Silk suture | Suture | Ethicon, Inc., Somerville, NJ, USA | 7733G | Suture for ligation |
Silicone RTV adhesive | Silicone rubber | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 1571 | |
Vetbond | Tissue adhesive | 3M Company, St Paul, MN, USA | 70200746587 | |
Puralube Vet Ointment | Eye ointment | Pharmaderm, Melville, NY, USA | ||
Buprenorphine hydrochlorode | Analgesics | Hospira Inc., Lake Forest, IL, USA | NDC 0409-2012-32 | |
Thermal Cautery Unit | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 501292 | ||
PeriFlux System 5000 | TCD flowmetry | Perimed, Stockholm, Sweeden | ||
BAT-12 | Rectal thermometer | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | BAT-12R | |
T/PUMP, TP600 | Thermal blanket | Gaymar, NY, USA | ||
2,3,5-triphenyltetrazolium chloride | Reagent | Sigma-Aldrich Co., St Louis, MO, USA | T8877 | |
Mice brain matrix slicer | Brain slicer | Zivic-Miller Lab., Inc., Allison Park, PA, USA | BSMAS001-1 |