Метод культуре эндотелиальных монослоя клетки по всему внутреннему 3D поверхность микрофлюидных устройство с микрососудистой размеров каналов (<30 мкм) описывается. Это<em> В пробирке</em> Микрососудов модель позволяет изучать биофизические взаимодействия между клетками крови, эндотелиальных клеток и растворимых факторов, в гематологических заболеваний.
Достижения в области микротехнологий методы позволили производство недорогой и воспроизводимый микрожидкостных систем для проведения биологических и биохимических экспериментов на микро-и наномасштабах 1,2. Кроме того, микрофлюидики также были специально использованы для количественного анализа гематологических и микрососудистых процессов, из-за их способности легко управлять динамическим жидкостный окружающей среды и биологических условий 3-6. Таким образом, исследователи в последнее время использовали микрожидкостных систем для изучения клеток крови деформируемость, агрегация клеток крови, микрососудистых кровообращения, крови и клеточных взаимодействий эндотелиальных клеток 6-13. Тем не менее, эти микрожидкостных систем либо не включать в эндотелиальные клетки или были большими чем sizescale отношение к микрососудистых патологических процессов. Микрофлюидных платформы в эндотелиальные клетки, который точно повторяет сотовый, физические и hemodynАМИК среды микроциркуляции необходимо для более глубокого понимания основных биофизических патофизиологии гематологических заболеваний, которые связаны с микрососудов.
Здесь мы сообщаем о методе создания "endothelialized" в пробирке модель микрососудов, с помощью простого, единого процесса микротехнологий маски в сочетании со стандартными эндотелиальных клеток культуры методов для изучения патологических биофизического взаимодействия микрососудистых, которые происходят в гематологических заболеваний. Это "микрососудов-на-чипе» предоставляет исследователю надежный тест, который жестко контролирует биологические, а также биофизических условий и управляется с помощью стандартного насоса шприца и светлого / флуоресцентной микроскопии. Такие параметры, как микроциркуляторного условиях гемодинамики, эндотелиальной типа клеток, клеток крови, тип (ы) и концентрации (ы), наркотиков / ингибирующая концентрация и т.д., могут быть легко контролируется. Таким образом, наша микросистема обеспечиваетМетод количественно исследовать болезнь процессов, в которых микрососудистых потока нарушается в связи с изменениями в клеточной адгезии, агрегации и деформируемости, возможность недоступна с существующими методами.
Наша система endothelialized микроустройство лучше всего подходит при использовании в сочетании с экспериментами в естественных условиях, и его редукционистской подход может помочь выяснить биофизических механизмов гематологические процессы, которые наблюдаются у людей и животных. К?…
The authors have nothing to disclose.
Мы благодарим Т. Хант, М. Розенблат, и лаборатория Лам за их советы и полезные обсуждения. Мы отмечаем поддержку Г. Spinner и Института электроники и нанотехнологий в Технологическом институте Джорджии. Финансовую поддержку для этой работы был предоставлен грант NIH K08-HL093360, UCSF REAC награду, развития наномедицины Центра NIH премии PN2EY018244, и финансирование из центра эндотелиальной клеточной биологии здравоохранения Детский Атланте.
Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
blunt point needle | OK International | 920050-TE | Precision TE needle 20 Gauge x 1/2″, pink |
dextran | Sigma-Aldrich | 31392 | |
Fibronectin | Sigma-Aldrich | F0895 | |
Hole puncher (pin vise) | Technical Innovations | ||
Human umbilical cord endothelial cells (HUVECs) | Lonza | CC-2519 | |
Plasma cleaner | Plasma | PDC-326 | |
Polydimethylsiloxane (PDMS) | Fisher Scientific | NC9285739 | Sylgard 184 Silicone Elastomer KIT |
Sigmacote | Sigma-Aldrich | SL2 | |
SU-8 2025 | Microchem | Y111069 | |
SU-8 Developer | Microchem | Y020100 | |
Syringe pump | Harvard Apparatus | 70-3008 | PHD-ULTRA |
tubing(larger) | Cole-Parmer Instrument Company | 06418-02 | Tygonreg microbore tubing, 0.020″ ID x 0.060″ OD |
tubing(smaller) | Cole-Parmer Instrument Company | 06417-11 | PTFE microbore tubing, 0.012″ ID x 0.030″ OD |