के आणविक तंत्र की विशेषता<em> Vivo में</em> UVR प्रेरित मोतियाबिंद
Summary
मोतियाबिंद दुनिया में अंधापन का प्रमुख कारण है. सौर पराबैंगनी विकिरण (UVR) मोतियाबिंद के विकास के लिए मुख्य जोखिम कारक है. दूर UVR बी प्रेरित मोतियाबिंद के एक पशु मॉडल विकसित किया गया था. UVR, मात्रात्मक RT-पीसीआर और immunohistochemistry जोखिम: इस लेख में हम मोतियाबिंद गठन की जांच के लिए विधियों का वर्णन.
Abstract
मोतियाबिंद 1 दुनिया में अंधापन का प्रमुख कारण है. विश्व स्वास्थ्य संगठन आंख है जो प्रकाश के हस्तांतरण में बाधा उत्पन्न की लेंस के एक झाई युक्त के रूप में मोतियाबिंद को परिभाषित करता है. मोतियाबिंद एक बहु भाज्य रोग मधुमेह, धूम्रपान, पराबैंगनी विकिरण (UVR), शराब, विकिरण, स्टेरॉयड और उच्च रक्तचाप के साथ जुड़े है. मजबूत 2-4 प्रयोगात्मक और महामारी विज्ञान 5,6 सबूत है कि UVR मोतियाबिंद का कारण बनता है. हम दोनों anesthetized 7 और गैर anesthetized जानवरों में 8 UVR बी प्रेरित मोतियाबिंद के लिए एक पशु मॉडल विकसित किया है.
मोतियाबिंद के लिए केवल इलाज सर्जरी है, लेकिन इस उपचार सभी के लिए सुलभ नहीं है. यह अनुमान लगाया गया है कि मोतियाबिंद के 10 साल के लिए शुरू होने के एक देरी 50 9% से मोतियाबिंद सर्जरी की आवश्यकता को कम कर सकता है. मोतियाबिंद की घटनाओं में देरी, यह मोतियाबिंद गठन के तंत्र को समझने और प्रभावी रोकथाम strat खोजने की जरूरत हैegies. मोतियाबिंद के विकास के लिए तंत्र के अलावा, apoptosis मनुष्य और 10 जानवरों में मोतियाबिंद की दीक्षा में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है. हमारा ध्यान हाल ही में लेंस में मोतियाबिंद 8,11,12 विकास के लिए तंत्र के रूप में apoptosis किया गया है. यह अनुमान है कि apoptosis मार्ग पर एक UVR के प्रभाव की बेहतर समझ नई दवाइयों की खोज के लिए मोतियाबिंद को रोकने के लिए संभावनाओं प्रदान करेगा.
इस अनुच्छेद में, हम वर्णन कैसे मोतियाबिंद प्रयोगात्मक UVR-B vivo जोखिम में द्वारा प्रेरित किया जा सकता है. आगे RT-पीसीआर और immunohistochemistry के रूप में प्रस्तुत कर रहे हैं उपकरण UVR बी प्रेरित मोतियाबिंद के आणविक तंत्र का अध्ययन करने के लिए है.
Protocol
Representative Results
Discussion
इस कागज तरीकों का वर्णन करता है कि आणविक UVR बी प्रेरित मोतियाबिंद के दौरान होने वाली घटनाओं का अध्ययन सक्षम करते हैं.
को ध्यान में रखते हुए है कि vivo UVR प्रेरित मोतियाबिंद में सबसे अधिक ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Och Drottning Viktorias Frimurarstiftelse: इस काम के कारोलिंस्का Institutet KID धन, स्वीडिश विकिरण संरक्षण प्राधिकरण, कारोलिंस्का Institutet नेत्र रिसर्च फाउंडेशन, गन och Bertil Stohnes Stiftelse, सेंट एरिक नेत्र अस्पताल रिसर्च फाउंडेशन, Ögonfonden, Konung गुस्ताव वी द्वारा समर्थित किया गया.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
| Ketalar | Pfizer | 150086 | 50 mg/ml |
| Rompun | Bayer | 022545 | 20 mg/ml |
| Oculentum Simplex | Apoteket, Sweden | 336164 | 5 g |
| Mydriacyl | Alcon | 00352 | 10 mg/ml |
| Balanced salt solution | Alcon | 0007950055 | |
| 3.5 ul β-mercaptoethanol | |||
| NucleoSpin RNA II total RNA isolation kit | Macherey-Nagel GmbH&Co, Duren, Germany | 740955.50 | |
| p53 DNA specific primers | biomers.net GmbH | Custom made | |
| Taq DNA polymerase, dNTPack | Roche | 04 728 866 001 | |
| Agarose | Sigma | A5093 | |
| Ethidium bromide solution 0.5 mg/ml | Sigma | E1385 | |
| Nano-Drop ND-1000 spectrophotometer | NanoDrop Products | ||
| 1st Strand cDNA synthesis kit for RT-PCR (AMV) | Roche Diagnostics GmbH | 11 483 188 001 | |
| iCycler MyiQ Single Color Real Time PCR detection system | Bio-Rad Laboratories | ||
| 96-well plate | Sarstedt | 72.1979.202 | |
| TaqMan Gene Expression Master Mix | Applied Biosystems | 4369016 | |
| TaqMan Gene Expression Assay for caspase 3 | Applied Biosystems | Rn00563902_m1 | |
| TaqMan Gene Expression Assay for 18s | Applied Biosystems | Hs99999901_s1 | |
| MyiQ software | Bio-Rad Laboratories | ||
| Cleaved caspase-3 (Asp175) | Cell signaling technology | 9661 | |
| Anti rabbit IgG | Abcam | Ab6798 | |
| Sucrose | Sigma Aldrich | 84097 | |
| Vectashield | Vector Laboratories | ||
| Universal Microscope Axioplan 2 Imaging | Carl Zeiss | ||
| Paraformaldehyde | Sigma Aldrich | 441244 | |
| TBE buffer 10x | Promega | V4251 |
References
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