Summary

Imaging non invasivo di acuta Alloinnesto rigetto dopo trapianto renale Rat Utilizzo<sup> 18</sup> F-FDG PET

Published: April 28, 2013
doi:

Summary

Siamo qui presentiamo un modello di trapianto di rene di ratto per valutare in modo non invasivo rigetto acuto utilizzando la tomografia ad emissione di positroni con 18F-fluorodeossiglucosio.

Abstract

Il numero di pazienti con malattia renale allo stadio terminale, e il numero di riceventi trapianto allogenico di rene aumenta continuamente. Gli episodi di rigetto acuto cellulare (AR) sono un fattore prognostico negativo per la sopravvivenza del trapianto a lungo termine, e la sua diagnosi tempestiva è fondamentale per la funzionalità dell'organo trapiantato 1. Allo stato attuale, AR può essere definitivamente diagnosticata solo mediante biopsia core-ago, che, come un metodo invasivo, scopre significativo rischio di lesioni o addirittura la perdita dell'innesto. Inoltre, le biopsie non sono fattibili in pazienti che assumono farmaci anticoagulanti e il sito di campionamento limitato di questa tecnica può portare a risultati falsi negativi se l'AR è focale o irregolare. Di conseguenza, questo ha dato luogo a una continua ricerca di nuovi metodi di rilevazione AR, che spesso deve essere fatto in animali, compreso l'uso di vari modelli di trapianto.

Dall'inizio degli anni '60 il trapianto renale ratto è un metodo sperimentale consolidata per l'esazione e l'analisi di AR 2. Noi qui presenti oltre piccola tomografia a emissione di positroni animali (PET) con 18 F-fluorodeossiglucosio (FDG) per valutare AR in un ratto uninephrectomized renale modello di trapianto allogenico e proporre innesto di imaging FDG-PET come una nuova opzione per un non-invasiva, specifica e la diagnosi precoce di AR anche per la situazione umana 3. Inoltre, questo metodo può essere applicato per il follow-up per migliorare il monitoraggio del rigetto del trapianto 4.

Protocol

1. Donor Recovery Organ Impostare il microscopio stereotassica, record di peso del 8-10 settimane di età ratto (donatore e ricevente di peso corporeo dovrebbe corrispondere). Anestetizzare il topo donatore (Lewis Brown Norway F1, LBN F1) con ossigeno / inalazione isoflurano (isoflurano 4% / 2 L / min di ossigeno). Mantenere l'anestesia abbassando isoflurano al 2-2,5%. Posizionare il topo anestetizzato sul pad chirurgia. Fissare le estremità del ratto con del nastro adesivo sul tampon…

Representative Results

Istologia Durante AR leucociti, cioè soprattutto linfociti T sono reclutati nel trapianto, mentre la gravità del rigetto viene riflessa dal grado di infiammazione. Nel periodico-Acid-Schiff (PAS) colorazione raffigurato qui (figura 1), il trapianto renale mostra significativi segni istologici di AR, ovvero glomerulite, tubulitis, endothelialitis e infiltrazione innesto (figura 1, ATX Pod4) (POD = giorno post-operatorio) mentre segnali di rigetto sono…

Discussion

L'imaging FDG-PET è una nuova opzione per la diagnosi di rigetto acuto. A causa della sua natura non invasiva e specifici, FDG-PET è vantaggi rispetto alla diagnostica classica da Core ago biopsia. In contrasto con la dimensione del campione limitata di una biopsia, analisi FDG-PET tutta innesto. Inoltre, si può applicare a pazienti in terapia anticoagulante, e si può effettuare misure di PET ripetutamente ad esempio per monitorare l'efficienza di trattamento 4. Inoltre, abbiamo già dimo…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Questo lavoro è stato sostenuto dalla Deutsche Forschungsgemeinschaft (SFB 656, Münster, in Germania, i progetti C7 e C6) e il IZKF Münster (Core unità SMAP). Gli autori sono grati a Truc Van Le, Anne Kanzog, Ute Neugebauer, Wiebke Gottschlich e Priebe romana per un'eccellente assistenza tecnica e di Daniel Burkert e Sven Fatum per la produzione di radiofarmaci.

Materials

Equipment
Mathieu Needle Holder – 14 cm Fine Science Tools 12010-14
Castroviejo Micro Needle Holder – 9 cm Fine Science Tools 12061-01
Surgical Scissors – Sharp_Blunt Fine Science Tools 14001-12
Iris Scissors – ToughCut Straight 11.5 cm Fine Science Tools 14058-11
Student Vannas Spring Scissors Fine Science Tools 91500-09
Vannas Spring Scissors – 3 mm Blades Fine Science Tools 15000-00
Student Tissue Forceps – 1×2 Teeth 12 cm Fine Science Tools 91121-12
Dumont SS-45 Forceps – Inox Medical Fine Science Tools 11203-25
Micro-Serrefine Clip Applicator with Lock Fine Science Tools 18056-14
Micro-Serrefine 6 mm x 1 mm Fine Science Tools 18055-03
Micro-Serrefine 4 mm x 0.75 mm Fine Science Tools 18055-04
Reagent
Isoflurane (e.g. Forene 100% v/v) Abott
cutane antiseptic (e.g. Octeniderm) Schülke
Povidone Iodine (e.g. Betaisodona) Mundipharma
ophthalmic ointment (e.g. Bepanthen) Bayer
Buprenorphin (e.g. Temgesic) RB Pharmaceuticals
HTK perfusion solution (e.g. CUSTODIOL HTK) Dr. Franz Köhler Chemie
surgical thread Mersilene 0 Ethicon EH6665E
surgical thread Mersilene 4-0 Ethicon EH6732H
surgical thread Prolene 6-0 Ethicon 8697H
surgical thread Ethilon 9-0 Ethicon 2809G
surgical silk 5-0 Vömel 14739
Canula (e.g. Microlance 3, 27G ¾) BD 302200

References

  1. Wu, O., Levy, A. R., Briggs, A., Lewis, G., Jardine, A. Acute rejection and chronic nephropathy: a systematic review of the literature. Transplantation. 87, 1330-1339 (2009).
  2. Miller, B. F., Gonzales, E., Wilchins, L. J., Nathan, P. Kidney transplantation in the rat. Nature. 194, 309-310 (1962).
  3. Reuter, S., Schnöckel, U., Schröter, R., Schober, O., Pavenstädt, H., Schäfers, M., Gabriëls, G., Schlatter, E. Non-invasive imaging of acute renal allograft rejection in rats using small animal F-FDG-PET. PLoS. One. 4, e5296 (2009).
  4. Reuter, S., Schnöckel, U., Edemir, B., Schröter, R., Kentrup, D., Pavenstädt, H., Schober, O., Schlatter, E., Gabriëls, G., Schäfers, M. Potential of noninvasive serial assessment of acute renal allograft rejection by 18F-FDG PET to monitor treatment efficiency. J. Nucl. Med. 51, 1644-1652 (2010).
  5. Schnöckel, U., Reuter, S., Stegger, L., Schlatter, E., Schäfers, K. P., Hermann, S., Schober, O., Gabriëls, G., Schäfers, M. Dynamic 18F-fluoride small animal PET to noninvasively assess renal function in rats. Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging. 35, 2267-2274 (2008).
  6. Grabner, A., Schnöckel, U., Kentrup, D., Schäfers, M., Reuter, S. Strategies for Non-Invasive Molecular Imaging of Acute Allograft Rejection by Gamma Scintigraphy and Positron Emission Tomography. Curr. Radiopharm. 4, 10-23 (2011).
  7. Racusen, L. C., Solez, K., Colvin, R. B., Bonsib, S. M., Castro, M. C., Cavallo, T., Croker, B. P., Demetris, A. J., Drachenberg, C. B., Fogo, A. B., et al. The Banff 97 working classification of renal allograft pathology. Kidney Int. 55, 713-723 (1999).
  8. Edemir, B., Reuter, S., Borgulya, R., Schröter, R., Neugebauer, U., Gabriëls, G., Schlatter, E. Acute rejection modulates gene expression in the collecting duct. J. Am. Soc. Nephrol. 19, 538-546 (2008).
  9. Velic, A., Gabriëls, G., Hirsch, J. R., Schröter, R., Edemir, B., Paasche, S., Schlatter, E. Acute rejection after rat renal transplantation leads to downregulation of Na+ and water channels in the collecting duct. Am. J. Transplant. 5, 1276-1285 (2005).
  10. Reuter, S., Velic, A., Edemir, B., Schröter, R., Pavenstädt, H., Gabriëls, G., Bleich, M., Schlatter, E. Protective role of NHE-3 inhibition in rat renal transplantation undergoing acute rejection. Pflugers Arch. 456, 1075-1084 (2008).

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Cite This Article
Grabner, A., Kentrup, D., Schnöckel, U., Gabriëls, G., Schröter, R., Pavenstädt, H., Schober, O., Schlatter, E., Schäfers, M., Reuter, S. Non-invasive Imaging of Acute Allograft Rejection after Rat Renal Transplantation Using 18F-FDG PET. J. Vis. Exp. (74), e4240, doi:10.3791/4240 (2013).

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