Murino Cervical Modelo de coração Transplante usando uma técnica Cuff Modificado

Summary

O modelo de transplante de coração de murídeo cervical é bem adequado para imunológico, bem como estudos de lesão de reperfusão de isquemia. Nós modificamos o procedimento usando uma técnica cuff não sutura e realizou mais de 1.000 transplantes de sucesso com essa abordagem.

Aqui, nós fornecemos mais detalhes desta técnica para complementar o vídeo.

Abstract

Modelos de mouse são de especial interesse na pesquisa desde uma grande variedade de anticorpos monoclonais e comercialmente definido pura e linhagens knockout estão disponíveis para executar mecanicista estudos in vivo. Enquanto os modelos de transplante cardíaco usando uma técnica de sutura foram primeiro desenvolvido com sucesso em ratos, a tradução para o equivalente murino usado igualmente difundida nunca foi alcançado devido à complexidade técnica de um procedimento neurocirúrgico. Em contraste, as técnicas não-sutura do manguito, também desenvolvido inicialmente em ratos, foram adaptados com sucesso para uso em camundongos ^1-3. Esta técnica de revascularização envolve duas etapas principais I) evertendo o navio beneficiário durante um manguito de polietileno; II) puxando o navio dador sobre o navio beneficiário anteriormente revirado e segurando-o no lugar com uma ligação periférica. Isso garante a continuidade da camada endotelial, tempo de operação de curto e altas taxas de permeabilidade ^4.

t "> Usando esta técnica para a anastomose vascular que realizou mais de 1.000 transplantes de coração do colo do útero com uma taxa de sucesso global de 95%. Para arterial fluxo da artéria carótida comum e do arco aórtico proximal foram anastomosadas resultando em uma perfusão retrógrada do coração transplantado. Para a drenagem venosa a artéria pulmonar do enxerto anastomose com a veia jugular externa do recipiente ^5.

Aqui, nós fornecemos mais detalhes desta técnica para complementar o vídeo.

Introduction

O transplante cardíaco representa a terapia de escolha para pacientes que sofrem de diferentes doenças cardíacas em estágio terminal. Os avanços nas técnicas cirúrgicas, a profilaxia mais eficaz de infecções, e novos regimes imunossupressores resultou em acentuada melhoria do resultado do transplante de órgãos ^6. No entanto, a sobrevida do enxerto a longo prazo não melhorou rigorosamente ao longo dos últimos anos, ^7. A rejeição crônica, caracterizada pela arteriosclerose transplante continua a ser um grande obstáculo para a sobrevivência do enxerto a longo prazo ^8-11.

O modelo de transplante cardíaco heterotópico em ratos fornece uma ferramenta importante e válida para análise de mecanismo imunológico durante aguda, bem como a rejeição crônica ^12-15.

Até o momento o modelo de transplante mais comum ainda é o transplante cardíaco rato abdominal utilizando a técnica de sutura. A aorta ascendente do coração do doador é anastomosada à umaaorta bdominal ea artéria pulmonar é anastomosada à veia cava inferior do receptor. Muitas das dificuldades microcirúrgico da sutura modelo baseia-se no pequeno tamanho dos vasos, os quais são suturados ^16,17.

Em contraste com o modelo de sutura é colocado no centro da região do pescoço do recipiente, onde a veia jugular externa é anastomosado para a artéria pulmonar e a artéria carótida comum a aorta do doador.

A lógica do desenvolvimento do modelo de transplante de coração cervicais utilizando a técnica do manguito ter um modelo animal, o que permite a obtenção de elevadas taxas de sucesso com técnicas de microcirurgia básicas que permitem uma ampla aplicação deste modelo. As principais vantagens desse método são o significativamente menos anastomose ocorrem complicações como hemorragias e trombose relacionada quando comparado com o modelo de sutura ^18.

Protocol

Os animais são alojados em uma instalação livre de patógenos barreira. Todos os animais recebem cuidados humanos, em conformidade com os "Princípios de Laboratório Animal Care" formuladas pela Sociedade Nacional de Pesquisa Médica "e do" Guia para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório ", elaborado pela Academia Nacional de Ciências e publicados pela National Institutes of Health (NIH Publication 86-23 não., revista, 1985). Todos os experimentos foram aprovados pelo Ministério da E…

Representative Results

A Figura 2 mostra os dados de sobrevivência representativas de aloenxertos cardíacos de doadores BALB / c após o transplante em plena MHC incompatíveis C57BL / 6 destinatários. Corações são rejeitados no dia 7 ± 1 após o transplante. Dedo palpação do enxerto transplantado é um método sensível para detectar o campo dependente do tempo de rejeição do enxerto. Todos os transplantes de coração sing�icas realizados em nossa série sobreviveu por tempo indeterminado (> 150 dias). </…

Discussion

Rejeição de enxertos vascularizados implica uma infinidade de passos diferentes que só podem ser insuficientemente avaliados utilizando modelos in vitro. Fenómenos como a sensibilização de receptores, processamento de antigénios em órgãos linfóides secundários, mas também a diferenciação e proliferação de células imunocompetentes são melhor caracterizados in vivo. Os modelos animais são, assim, a ferramenta ideal para a investigação translacional ^16. Modelos de mouse ain…

Materials

Yasargil Clip Mini Permanent 7mm	Aesculap	FE720K
Micro vessel clip	S & T	B1 00396 V
Microscissor	FST	14075-11
Vesseldilatator	S & T	D-5a.2 00125
Microforceps	FST	Dumont 11271- 30
Clipapplicator	S & T	CAF-4 00072
Microvessel clip	S & T	B1 00396 V