Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Bioengineering

العلاج القائم على خلية لقصور القلب في الجرذ: انقر نقرا بضع الصدر لاحتشاء عضلة القلب والنخابية زرع الخلايا وبايوماتريكس

Published: September 22, 2014 doi: 10.3791/51390

Summary

غرس biograft لعلاج احتشاء عضلة القلب الناجم عن LAD ربط في نموذج القوارض قد تطلب تقليديا عمليتي قلب مفتوح. من أجل الحد من الوفيات وتوفير الظروف المثلى لتثبيت من biomatrices الجيلاتينية الصلبة والمرتبطة مع الخلايا، وقد وضعت إجراءات الغازية الحد الأدنى.

Abstract

وقد اكتسب العلاج بالخلايا القلب تزداد الفائدة وزرع المواد الحيوية المرتبطة مع الخلايا أصبحت قضية رئيسية لتحسين تسليم خلية عضلة القلب. نموذج القوارض من احتشاء عضلة القلب (MI)، ويتألف من اليسار الأمامي تنازلي وعادة أجريت الشريان (LAD) ربط عبر بضع الصدر. وقد جرت العادة على إجراء جراحة القلب المفتوح الثانية عن طريق القص لتطبيق النخابية من العلاج. منذ وصف LAD نموذج الربط، انخفض معدل وفيات ما بعد الجراحة 35-13٪، ومع ذلك ظلت عملية جراحية ثانية حاسمة. من أجل تحسين الانتعاش بعد الجراحة وتقليل الألم والعدوى، ويتم عرض العمليات الجراحية الغازية الحد الأدنى. أجريت thoracotomies اثنين، واحد الأولي لLAD ربط والثانية للعلاج إدارة النخابية. طبقت Biografts تتكون من الخلايا المرتبطة مع المصفوفات نوع صلبة أو الهلام على ع محتشيةعصام. أدى LAD ربط في فقدان وظيفة القلب وتخطيط صدى القلب أكده أداؤها بعد 2 و 6 أسابيع. Goldner تلوين ثلاثي الألوان التي أجريت على أقسام القلب وأكد تشكيل ندبة بطريق. أسفرت العمليات الجراحية الأولى والثانية في أقل من 10٪ وفيات ما بعد الجراحة.

Introduction

منذ نهاية القرن ال 19، وبقي مرض القلب والأوعية الدموية القاتل المتسلسل رقم واحد في البلدان الصناعية. من بينها، يمثل مرض الشريان التاجي المسببات الرئيسية. ويلي نتائج المرحلة الحادة في احتشاء عضلة القلب (MI) وإعادة عرض مهايئ الذي يتطور تدريجيا نحو المرحلة المزمنة وقصور القلب الشديد. على الرغم من التقدم التكنولوجي والعلاجية الهامة الأخيرة، فإن معدلات الاعتلال والوفيات بسبب تطور قصور القلب ما زال ينمو 1. في هذا السياق، اكتسبت العلاج بالخلايا اهتمام متزايد كخيار علاجي جديد لوقف تطور المرض نحو قصور القلب وتحفيز القدرة التجديدية التي تم تحديدها مؤخرا من عضلة القلب. وقد وفرت التحقيقات التجريبية والسريرية أدلة دامغة على الآثار المفيدة التي تم الحصول عليها بعد زرع القلب من مختلف أنواع الخلايا. وتضمنت النتائج الرئيسية تحسين كارداتميلان وظيفة مقلص، انخفض الأيسر إعادة البطين، وانخفاض حجم احتشاء، وزيادة كثافة الأوعية الدموية في المنطقة محتشية. ومع ذلك، فإن انخفاض عدد الخلايا الاحتفاظ بعد حقن الخلايا بقي هناك عائقا مهما. رابطة الخلايا مع بايوماتريكس لتحسين التسليم خلية 2 وقد عززت مؤخرا الباحث والمصالح السريرية.

ربط لالأمامي الأيسر النازل الشريان التاجي (LAD) هو وسيلة مرجعية لMI في نموذج الحيوان الصغير الذي يؤدي إلى احتشاء بطريق وندبة ناضجة. العلاج بالخلايا تطبيقها في المرحلة المزمنة من MI يتطلب التدخل الجراحي الثاني. عادة ما يتم تنفيذ القص متوسط ​​للسماح حقن داخل عضلة القلب من الخلايا أو زرع النخابية من biografts. تزيد هذه الإجراءات الجراحية الغازية معدل وفيات، بعد الجراحة وقت الانتعاش، والألم، وخطر العدوى. النهج مينيملي المعروضة هنا ليس فقط يمنع مثل هذا التحيز ولكنها توفر أيضا سptimal الوصول للقلب لتطبيق العلاج. يتم تنفيذ MI والنخابية زرع الخلايا المرتبطة مع نوع هلام بايوماتريكس على قلب ينبض عبر thoracotomies ربي نقاط.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

ملاحظة: لويس ذكور وإناث الفئران، تم إيواء 200-220 ز تحت ظروف المختبر القياسية (ضوء 12 ساعة ودورة الظلام، libitum الإعلانية الماء والغذاء، IVC قفص). تم علاج جميع الحيوانات في الامتثال لتوصيات قانون السويسري FELASA وعلى حماية الحيوان.

1. خلية التحضير: الوسيطة عزل الخلايا الجذعية من نخاع العظام

  1. تخدير الفئران مع isoflurane 5٪ و O 2 5 لتر / دقيقة في غرفة تحريض لمدة 5 دقائق. وضع خطم الحيوان في مخروط الأنف متصلة بنظام التخدير. إجراء أخمص القدمين أو قرصة الذيل لتأكيد التخدير.
  2. إزالة الجلد من الساق مع مقص عن طريق قطع الجلد من الكاحل إلى الفخذ. إزالة العضلات وقطع الشريان الفخذي لاستنزاف الحيوانات. كشف مفصل الورك وخلخل رأس عظم الفخذ. من المهم عدم الاضرار رأس عظم الفخذ. وضع العظام في برنامج تلفزيوني العقيمة في أنبوب بلاستيكي 50 مل.
  3. إزالة جميع موscles والأربطة من عظام دون كسرها. ملاحظة: من المهم أن العظام لا تزال سليمة لتجنب الربط بين حل احمرار أو التلوث مع الايثانول. شطف العظام مقشر في الايثانول 70٪ لمدة 5 دقائق.
  4. تحت غطاء محرك السيارة تدفق الصفحي معقمة، وقطع كلا نصائح من العظام مع مقص. مسح نخاع العظام عن طريق حقن برنامج تلفزيوني العقيمة من أقصى العظام. جمع نخاع في أنبوب 15 مل. الطرد المركزي 7 دقائق عند 300 × ز.
  5. إزالة طاف. تعليق بيليه في 3 مل من خلايا الدم الحمراء تحلل العازلة. احتضان تعليق لمدة 1 دقيقة في درجة حرارة الغرفة قبل الغزل مرة أخرى لمدة 7 دقائق في 300 × ز. في ثقافة قارورة 150 مل، إضافة عقيمة خلية ثقافة المتوسط ​​(395 مل IMDM المتوسطة، 5 مل القلم / بكتيريا، 100 مل FBS) والبذور الخلايا.
  6. تغيير المتوسطة في اليوم الثاني لإزالة الخلايا غير ملتصق.
    1. إجراء تغييرات متوسطة كل يوم الثاني لمدة 2-3 أسابيع حتى يتم الحصول على كمية الخلايا المطلوبة.
    2. بدلا من ذلك، وإعداد biograft بواسطة البذورجي الخلايا على المصفوفة الصلبة حسب الحاجة، ووصف أماكن أخرى 3.
  7. يوم زرع القلب، وإعداد الخلايا أو حصاد biograft قبل تطبيق النخابية.
    1. جمع الخلايا باستخدام Accutase حل مفرزة الخلية. عد الخلايا. ملء أنبوب 1.5 مل الطرد المركزي مع حجم تعليق خلية محسوبة للحصول على كمية الخلايا المطلوبة. أجهزة الطرد المركزي لمدة 7 دقائق في 300 XG وإزالة طاف.
    2. بدلا من ذلك، حصاد biograft من خلية ثقافة المتوسط، وشطف في برنامج تلفزيوني العقيمة، ونضع في مستنبت الطازجة دون المصل.

2. الأولى بضع الصدر وربط LAD

  1. وزن الفئران. بدوره على وسادة التدفئة على 37 درجة مئوية. تخدير الفئران مع 5٪ الأيزوفلورين و 5 لتر / دقيقة 100٪ O 2 في غرفة تحريض لمدة 5-7 دقيقة. إجراء أخمص القدمين أو قرصة الذيل لتأكيد التخدير. وضع الفئران على لوحة التدفئة.
  2. تدخله الحيوان مع 14G الرابع القسطرة. توصيل القسطرة التنبيب لجهاز التنفس الصناعي القوارض المبرمجة ل2.5 لتر / دقيقة الأكسجين، و 2.5٪ الأيزوفلورين، حجم المد والجزر من 2 مل، وتردد التنفس من 90 الأنفاس / دقيقة.
  3. يعد حل البوبرينورفين عند 0.1 ملغم / كغم. حقن تحت الجلد ثلث من الحل. حلاقة الجزء الأيسر من القفص الصدري. تطهير مع بيتادين محلول 1٪.
  4. شق الجلد عمودي على القص في الفضاء وربي الرابع. فصل 3 طبقات من العضلات الصدرية (الصدرية الكبرى والصاعدة الصدرية، الصدرية ومنحرف الخارجية). فتح الفضاء الوربي الرابع (بين الأضلاع 4 و 5).
  5. استخدام ضام صغيرة لنشر الضلوع وفضح القلب. فتح التأمور بعناية. تحديد مكان وligate الأمامي الأيسر النازل الشريان التاجي (LAD) مع 7.0 خياطة 4 ملم تحت الأذين.
  6. إغلاق الفضاء وربي مع اثنين من الغرز باستخدام 3.0 الغرز. ضع الغرز اثنين من قريب وبشكل أقصى من القص. أولا، رighten خياطة البعيدة. العادم المشبك أنابيب التنفس الصناعي لمدة 2 ثانية من أجل تضخيم الصدر وتجنب أي استرواح الصدر. تشديد خياطة الثانية. وضع طبقات العضلات مرة أخرى في مكان (هناك حاجة إلى أي الغرز). إغلاق الجلد مع خياطة 5.0.
  7. تطهير خياطة مع 1٪ محلول بيتادين. حقن ما تبقى من الحل البوبرينورفين. إيقاف نظام التخدير. التنبيب إزالة القسطرة.
  8. الحفاظ على الفئران في قفص تحت مصباح دافئ لمدة 1-2 ساعة. الحفاظ على الحرارة في القفص والتحكم في المسافة بين مصباح دافئ والقفص من أجل تجنب الإفراط في التدفئة. العودة الفئران في وحدة IVC. حقن تحت الجلد البوبرينورفين 0،05 حتي 0،1 ملغ / كغ آخر -operatively كل 6-12 ساعة لمدة 48 ساعة.

3. إدارة النخابية العلاج فيا بضع الصدر الثاني

  1. كرر الخطوات من 2،1-2،3.
  2. شق الجلد عمودي على القص في الفضاء الوربية الخامسة. فصل طبقة 3ق من عضلة الصدر (الصدرية الكبرى، والصعود الصدرية الصدرية منحرف الخارجية). فتح الفضاء الوربية الخامسة (بين الاضلاع 5 و 6).
  3. استخدام ضام صغيرة لنشر الضلوع وفضح القلب. إذا كان هناك بعض الالتزام، وإزالة بعناية لهم مع ملقط غرامة.
  4. تحديد موقع منطقة احتشاء التي تظهر كمنطقة شاحبة تحت ربطة. ملاحظة: عندما يكون ذلك ضروريا، واستخدام قطعة 10 سم من الخيط (7.0) إدراجها في قمة لتصور أفضل البطين الأيسر. سحب بلطف إلى خياطة الحفاظ فضفاضة بواسطة المشبك لفضح القلب.
  5. تطبيق واحد من العلاجات التالية:
    1. ضع biograft على سطح القلب. استخدام حقنة مملوءة مسبقا تسرب الليفين prewarmed في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقيقة. تطبيق قطرة (50-100 ميكرولتر) من تسرب الليفين تحت biograft باستخدام إبرة 25 G يور. تحقق من أن biograft ومختومة تماما.
    2. بدلا من ذلك، تطبيق بيليه الخلية التي تم جمعها مع طرف ماصة على سطح سو قلب على منطقة شاحبة تحت ربطة. تطبيق قطرة (50-100 ميكرولتر) من تسرب الليفين على بيليه الخلية.
  6. إزالة قطعة من الخيط من قمة.
  7. كرر الخطوات من 2،6-2،8.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

جميع الحيوانات تعافت في حدود 1 ساعة بعد thoracotomies. كان التئام الجروح السريع. لم يلاحظ أي عدوى أو ذمة.

في بضع الصدر الأيسر مزدوج يسمح الوصول الأمثل إلى القلب (الشكل 1). كان الألم وفيات ما بعد الجراحة منخفضة. تعافى الحيوان بسرعة من الجراحة واكتسبت الوزن (الشكل 2). كانت كابلان مئير بقاء في المئة 96٪ للبضع الصدر الأول. توفي أربعة الفئران على مدى 104 ضمن التطبيق 24 ساعة بعد العلاج عن طريق بضع الصدر الثاني. كابلان مئير بقاء في المئة متنوعة من 100٪ عندما تلقى الحيوان بضع الصدر الثاني ولكن لا يوجد علاج (صورية)، و 96٪ للMSC ومجموعة تسرب الليفين، أو 86٪ عندما تلقى الحيوان MSC حقن مباشرة داخل عضلة القلب (الشكل 3).

تنفيذ M-وضع تقييم تخطيط صدى القلب الوظائف 2 أسابيع أظهر LAD ربط انخفاض في تقصير كسور (FS) من 44 ± 3٪إلى 22 ± 4٪. تمثيل تردد FS سجلت على 104 الحيوانات 2 أسابيع آخر LAD ربط قدمت أدلة من التكرار من أسلوب (الشكل 4). كان معامل الاختلاف (CV) 17٪. وعلاوة على ذلك، إجراء تخطيط صدى القلب في 2 و 6 أسابيع آخر LAD ربط أظهرت تقدم نحو قصور القلب الذي اقترحه تخفيض جزء طرد (EF) وزيادة حجم LV انبساط وانقباض في (الشكلان 4 و 5). وأكد تطوير احتشاء بطريق في الشام التي تديرها مجموعة من Goldner تلطيخ أقسام القلب عبر (الشكل 6).

الشكل 1
تم تنفيذ الشكل 1. (A) استخدام ضام يسمح الوصول إلى قلب التالية بضع الصدر. LAD ربط في وقت سابق 2 أسابيعوخياطة هي مرئية (السهم). تم إجراء تطبيق العلاج النخابية مع الحد الأدنى من الداخل للخارج من القلب. (B) وبيليه الخلايا ثابتة مع تسرب الليفين والحفاظ على سطح منطقة محتشية.

الشكل 2
أظهر الرقم 2. اليومي بعد العملية الجراحية متابعة فقدان الوزن لمدة 2 أيام بعد الجراحة. ورافق الانتعاش مع زيادة الوزن في جميع الحيوانات. كانت الاختلافات الوزن مستقلة من هذا النوع من العلاج.

الرقم 3
الرقم 3. كابلان مئير رسم بياني يمثل في المئة آخر بقاء LAD ربط (A) وبعد العلاج عن طريق أظهر بضع الصدر الثاني (B) أن كلا من العمليات الجراحية أدت إلى انخفاض فقدان الحيوانات. تمثل مجموعة مراقبة الحيوانات التي ليس لديها صحي الجراحة. بعد أسبوعين من بضع الصدر الأول، تلقت الحيوانات إما عملية صورية ولكن لا يوجد علاج (صورية)، تسرب الليفين وحدها، وخلايا ثابتة مع تسرب الليفين، أو حقن الخلايا مباشرة داخل عضلة القلب (حقن MSC).

الرقم 4
الرقم 4. (A) الممثل M-وضع الصور تخطيط صدى القلب قبل المسجل (صحي) و 2 أسابيع آخر ربط الفتى (محتشية). التوزيع (B) تردد من القيم تقصير كسور سجلت أسبوعين آخر ربط الفتى (ن = 104).

390fig5highres.jpg "العرض =" 500 "/>
تم تقييم شخصية وظيفة 5. القلب بواسطة ضربات القلب 2dimentional (طريقة ذات السطحين سمبسون) وسجلت مشاركة 2 و 6 أسابيع كان LAD ربط. الحيوان اثنين thoracotomies لكنها لم تتلق العلاج. يعني ± SD وكذلك يتم تمثيل القيم الفردية للجزء طرد (A) حجم LV في انقباض (B) وانبساط (C). وأجريت التحليلات الإحصائية باستخدام اختبار اللامعلمية يلكوكسن المقترنة.

الرقم 6
الرقم 6. ممثل Goldner تلطيخ تظهر ندبة متليفة (الخضراء) وقابلة للحياة عضلة القلب (الحمراء) في 2 أسابيع (A) و 6 أسابيع (B) آخر LAD ربط.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

وربط دائم LAD يسبب إصابة عضلة القلب لا رجعة فيها. وصفت نموذج حيواني الأول في 1960 4. منذ ذلك الحين، اعتبر كنموذج قياسي ومناسب للMI المزمن. استقراره واستنساخ يسمح التقييم التجريبي من العلاجات لMI 5. ذكرت وتحسين الإجراءات التالية وصف الأولي معدل وفيات المنطوق من 35-13٪ 6.

كما هو متوقع، LAD ربط يسببها ضعف وظيفة القلب لوحظ في غضون 2 أسابيع. تم تسجيل انخفاض آخر في وظيفة القلب تصل إلى 6 أسابيع، ويرتبط مع ندبة متليفة بطريق. بالإضافة إلى ذلك، بما في ذلك إعادة LV LV توسع لوحظ بشكل واضح في مرحلة ما بعد 6 أسابيع ربط.

وقد تم اختيار فاصل زمني من 2 أسابيع بين الجراحة الأولى والثانية. في هذه الحالة، وقد سهلت بضع الصدر الثاني بسبب غياب الانضمام، كما كانت وفيرة جدا بعد 1 أسبوع لادائهاأماه عملية جراحية ثانية في ظروف مثلى. بالإضافة إلى ذلك، تمثل 2 أسابيع إطار زمني الأمثل لتطبيق العلاج وسمحت لتجنب الموافقة المسبقة عن علم المبكر لالتهاب الناجم عن نقص التروية وتطبيق العلاج قبل تشكيل أنسجة متليفة الكثيفة والتقدم للتمدد.

على الرغم من بضع الصدر الجانبي في الوقت الحاضر هو إجراء العمليات الجراحية القياسية لربط LAD على الحيوانات الصغيرة، وعادة ما يتم تنفيذ عملية القص وسيطة لتطبيق العلاج بالخلايا 7. في بضع الصدر وربي الثاني قدم لتطبيق العلاج هو رواية، نهج مينيملي. لأنها تتيح الوصول إلى القلب من خلال الأضلاع بدون تقطيع العظام والعضلات عن طريق تقسيم. يتم تقليل حدوث التقيد بسبب ندبة صغيرة ومحدودة بعد بضع الصدر الأول، وهذه لا تتداخل مع إنجاز تطبيق العلاج. أدى هذا النهج في خطر منخفض جدا النزف، بعد العملية الجراحية سريعةالانتعاش، ومعدل وفيات منخفض، والألم، وخطر العدوى. واستمر هذا الإجراء الثاني الصدمة الحد الأدنى 20 دقيقة لإجراء عملية جراحية، وتصل إلى 20 دقيقة للمصفوفة التثبيت. الإجراء السريع والتعرض المحدود للقلب التقليل القلب تجفيف الأنسجة. نتج التصوير بالموجات فوق الصوتية بعد الجراحة بحسن الحصول على الصور نوعية لتحليل القياسات استنساخه. لم تكن هناك القيلة التي يمكن أن تؤثر التصوير.

إمكانية الوصول إلى قلب سمح الرؤية الأمثل لعضلة القلب محتشية فضلا عن التعرض جيدة للقلب لتطبيق العلاجات النخابية بما الصلبة وهلام نوع biografts 8-10.

قدم استخدام الليفين تسرب العديد من المزايا. (ط) لإصلاح البقع الصلبة، كان استخدام الليفين تسرب أقل صدمة من الغرز. (الثاني) بالمقارنة مع الغراء الأخرى مثل Bioglue (Cryolife)، وكان تسرب الليفين أكثر متوافقة من Bioglue التي شكلت بنية جامدة وضعاف القلبالانقباضات. (ج) كان وقتها البلمرة الأمثل للسقالة كافية أو بيليه خلية لتحديد المواقع. (رابعا) يسمح تسرب الليفين التصاق الأولي ممتازة من التصحيح الصلبة. واستمر التصحيح بإحكام على سطح القلب لمدة 4 أسابيع على الأقل 10. (ت) كان تسرب الليفين السهل أن العملية عندما تستخدم على النحو سقالة للتسليم خلية النخابية وتمت المحافظة على خلايا ثابتة على سطح منطقة محتشية حتى نهاية الإجراء الجراحي. على الرغم من أن الوقت الاحتفاظ الخلايا كان من محور هذه الدراسة وسيطالب مزيد من التحقيقات، وقد اقترح أن تسمح مصفوفة تحسين الاحتفاظ عضلة القلب من الخلايا المزروعة 11-14. تغسل الخلايا خلال تقلص القلب، فضلا عن نقص الأوكسجين والبيئة التهابات، قد يفسر جزئيا التخليص السريع. قد يتم تخفيض هذه العيوب عندما ترتبط الخلايا مع المصفوفة.

التحديات التقنية الرئيسية تتعلق التعامل الجراحي للوbiograft الصلبة. إذا المصفوفة هي جامدة وnonflexible، ينبغي تفضيل تثبيت مع الغرز. ينبغي النظر في الخطوات الحاسمة التالية لإجراء ناجحة. أولا، ينبغي إيلاء اهتمام خاص خلال بضع الصدر لتجنب كسر الأضلاع. ثانيا، فائض الغراء يجب إزالة بعناية لتجنب الالتزام الأنسجة الآخرين. وأخيرا، وضع ربطة موحد مهم لأنه قد يقلل من التباين في حجم احتشاء. ويمكن الحصول على احتشاء بطريق عندما هو ligated LAD 4 ملم تحت الأذين.

في الختام، مثلت بضع الصدر مزدوج إجراء العمليات الجراحية آمن مع معدل وفيات منخفض، والوصول الكافي إلى القلب النابض لطلب العلاج، وبالتالي نرجح الأمثل للتخطيط التجريبي وخفض عدد الخسائر الحيوانية.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Acknowledgments

الكتاب أشكر الأستاذ هندريك Tevaearai وقسم جراحة القلب والأوعية الدموية للدعم المالي للجزء الأولي من الدراسة.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Polysorb 3-0 suture Covidien UL 204
Polysorb 5-0 suture Covidien UL 202
Surgipro II 7-0 Suture Covidien VP904X
Catheter Insyte 14 G BD 381267
Inspira Advanced Volume Controlled Ventilator Harvard Apparatus 557058
Dumont #7 Forceps FST Germany 11274-20
Fibrin Sealant Baxter 1501441 TISSEEL Glue, Frozen -20 °C
Castroviejo Eye Specula Harvard Apparatus 72-8925 use as retractor for the ribs
IMDM GlutaMAX Gibco 31980
Pen/Strep Gibco 15140
FBS PAA Clone       A15-101
Bone Scissors Fine Science Tools 16044-10
Red Blood Cell Lysis Solution Gentra Systems D-50k1
Accutase Cell Detachment Solution Stem Cell Technology 7920

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Gjesdal, O., Bluemke, D. A., Lima, J. A. Cardiac remodeling at the population level--risk factors, screening, and outcomes. Nat. Rev. Cardiol. 8, 673-685 (2011).
  2. Alcon, A., Cagavi Bozkulak, E., Qyang, Y. Regenerating functional heart tissue for myocardial repair. Cell Mol. Life Sci. 69, 2635-2656 (2012).
  3. Guex, A. G., Fortunato, G., Hegemann, D., Tevaearai, H. T., Giraud, M. N. General Protocol for the Culture of Cells on Plasma-Coated Electrospun Scaffolds. Methods Mol. Biol. 1058, 119-131 (2013).
  4. Selye, H., Bajusz, E., Grasso, S., Mendell, P. Simple techniques for the surgical occlusion of coronary vessels in the rat. Angiology. 11, 398-407 (1960).
  5. Gomes, A. C., Falcao-Pires, I., Pires, A. L., Bras-Silva, C., Leite-Moreira, A. F. Rodent models of heart failure: an updated review. Heart Fail. Rev. 18, 219-249 (2013).
  6. Horstick, G., et al. Surgical procedure affects physiological parameters in rat myocardial ischemia: need for mechanical ventilation. Am. J. Physiol. 276, 472-479 (1999).
  7. Duchatelle, J. P., Vivet, P., Cortes, M., Groussard, O., Pocidalo, J. J. Respiratory and Hemodynamic-Effects of Lateral Thoracotomy or Sternotomy in Mechanically Ventilated Rats. Eur. Surg. Res. 17, 10-16 (1985).
  8. Giraud, M. N., et al. Hydrogel-based engineered skeletal muscle grafts normalize heart function early after myocardial infarction. Artif. Organs. 32, 692-700 (2008).
  9. Siepe, M., et al. Myoblast-seeded biodegradable scaffolds to prevent post-myocardial infarction evolution toward heart failure. J. Thorac. Cardiov. Sur. 132, 124-131 (2006).
  10. Guex, A. G., et al. Plasma-functionalized electrospun matrix for biograft development and cardiac function stabilization. Acta Biomater. 10, (2014).
  11. Terrovitis, J., et al. Noninvasive Quantification and Optimization of Acute Cell Retention by In Vivo Positron Emission Tomography After Intramyocardial Cardiac-Derived Stem Cell Delivery. J. Am. Coll. Cardiol. 54, 1619-1626 (2009).
  12. Guo, H. D., Wang, H. J., Tan, Y. Z., Wu, J. H. Transplantation of marrow-derived cardiac stem cells carried in fibrin improves cardiac function after myocardial infarction. Tissue Eng. Part A. 17, 45-58 (2011).
  13. Qiao, H., et al. Death and Proliferation Time Course of Stem Cells Transplanted in the Myocardium. Mol. Imaging Biol. 11, 408-414 (2009).
  14. Conradi, L., Pahrmann, C., Schmidt, S., Deuse, T., Hansen, A., Eder, A., et al. Bioluminescence Imaging for Assessment of Immune Responses Following Implantation of Engineered Heart Tissue (EHT). J. Vis. Exp. 52 (e2605), (2011).

Tags

الهندسة الحيوية، العدد 91، واحتشاء عضلة القلب (MI)، تسرب الليفين، بضع الصدر، يسار الشريان الأمامي تنازلي (LAD) ربط، العلاج بالخلايا القلب، وجراحة القلب
العلاج القائم على خلية لقصور القلب في الجرذ: انقر نقرا بضع الصدر لاحتشاء عضلة القلب والنخابية زرع الخلايا وبايوماتريكس
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Frobert, A., Valentin, J., Cook, S., More

Frobert, A., Valentin, J., Cook, S., Lopes-Vicente, J., Giraud, M. N. Cell-based Therapy for Heart Failure in Rat: Double Thoracotomy for Myocardial Infarction and Epicardial Implantation of Cells and Biomatrix. J. Vis. Exp. (91), e51390, doi:10.3791/51390 (2014).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter