Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Bioengineering

Rat Kalp Yetmezliği Hücre Terapisi: Miyokard İnfarktüsü için çift Torakotomi ve Hücreleri ile BioMatrix arasında Epikardiyal implantasyonu

Published: September 22, 2014 doi: 10.3791/51390

Summary

Bir kemirgen modelinde, LAD ligasyonu ile uyarılmış miyokardiyal enfarktüsü tedavi etmeye yönelik bir biograft implantasyonu, geleneksel olarak iki açık kalp ameliyatı gerektirmiştir. Ölümlerini azaltmak ve hücreleri ile ilişkili solid ve jelatinli biyolojik matrisler tespiti için en uygun koşulları sağlamak amacıyla, minimal invaziv prosedürler geliştirilmiştir.

Abstract

Kardiyak hücre tedavisi hücreleri ile ilişkili biyomateryallerin ilgi ve implantasyonu artan kazanmış miyokart hücre teslim optimize etmek için önemli bir sorun haline gelmiştir. Miyokard infarktüsü kemirgen modeli (MI) arter (LAD) ligasyonu yaygın bir torakotomi yapılmıştır sol ön inen oluşan; bir sternotomi ile bir ikinci açık kalp cerrahisi, geleneksel olarak tedavi epikardiyal uygulanması için gerçekleştirilmiştir. LAD ligasyon modeli açıklaması yana, ameliyat sonrası ölüm oranı ancak ikinci ameliyat kritik kalmıştır, 35-13% düşmüştür. Ağrı ve ameliyat sonrası enfeksiyon kazanımını arttırmak ve azaltmak için, minimal invaziv cerrahi işlemler sunulmaktadır. İki torakotomi, LAD ligasyon için ilk biri ve tedavi epikardiyal yönetimi için ikinci bir yapıldı. Bir katı ya da jel matrisler özellikleri ile bağlantılı hücrelerden oluşan Biografts enfarktüslü ar üzerine uygulanmıştırad. 2 ve 6 hafta sonra gerçekleştirilmiştir ekokardiyografi ile teyit edildiği gibi, LAD ligasyon kalp fonksiyonlarının kaybı ile sonuçlandı. Goldner kalp bölümlerinde gerçekleştirilen trikrom boyama Transmural skar oluşumunu doğruladı. Birinci ve ikinci ameliyatlar daha az olduğunu,% 10 post-operatif mortalite sonuçlandı.

Introduction

19. yüzyılın sonundan bu yana, kardiyovasküler hastalık sanayileşmiş ülkelerde bir numaralı seri katili kalmıştır. Bunlar arasında, koroner arter hastalığı, ana etiyolojisi temsil eder. Miyokard infarktüsü (Mİ) ve akut faz sonuçları giderek kronik fazda ve ciddi kalp yetmezliği doğru gelişir uyumsuz biçimlenme tarafından takip edilmektedir. Önemli en son teknolojik ve terapötik ilerlemelere rağmen, bağlı kalp yetmezliğinin ilerlemesine morbidite ve mortalitesi hala 1 büyüyor. Bu bağlamda, hücre tedavisi kalp yetmezliği doğru hastalığın ilerlemesini durdurmak ve miyokardın son zamanlarda belirlenen rejeneratif kapasitesini harekete geçirmek için yeni bir tedavi seçeneği olarak artan bir ilgi kazanmıştır. Deneysel ve klinik araştırmalar çeşitli hücre tiplerinin kalp naklinden sonra elde yararlı etkileri ikna edici bir kanıt sağladı. Önemli sonuçlar geliştirilmiş cardi dahilac kasılma fonksiyonu, sol ventrikül remodeling azaldı infarkt azalır ve infarkt alanında damar yoğunluğu artmıştır. Fakat, hücre enjeksiyonundan sonra düşük hücre sayısı tutma önemli bir dezavantajı kalmıştır. Hücre teslim 2 iyileştirmek için bir alçı ile hücrelerin Derneği son zamanlarda araştırmacı ve klinik çıkarlarını teşvik etmişlerdir.

Koroner arter (LAD) sol ön inen ligasyonu transmural infarktüsü ve olgun bir yara sonuçlanan küçük bir hayvan modeli MI için bir referans yöntemidir. MI, kronik fazda uygulanan hücre tedavisi ikinci bir cerrahi müdahale gerektirir. Bir medyan sternotomi genellikle hücrelerin veya biografts bir epikardiyal implantasyon intramiyokardiyal enjeksiyonu sağlamak için gerçekleştirilir. Bu tür invaziv cerrahi işlemler ölüm oranı, ameliyat sonrası iyileşme süresi, ağrı ve enfeksiyon riskini arttırır. Burada sunulan minimal invaziv yaklaşım değil sadece bu önyargı engeller ama aynı zamanda o sağlarTedavi uygulaması için kalbin ptimal erişilebilirlik. MI ve jel tipi biyolojik matris ile ilişkili hücrelerin epikardiyal implantasyon sol interkostal torakotomilerde üzeri kalpte yapılır.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

NOT: Lewis Kadın ve Erkek sıçanlar, 200-220 gr standart laboratuar koşullarında (12 saat aydınlık ve karanlık döngüsü, istenildiği kadar su ve gıda, IVC kafes) altında tutuldular. Tüm hayvanlar hayvan koruma FELASA ve İsviçre Kanun tavsiyelerine uygun olarak tedavi edildi.

1. Hücre Hazırlanışı: Kemik İliği dan Mezenkimal Kök Hücre İzolasyonu

  1. 5 dakika boyunca bir indüksiyon odasında izofluran% 5 ve O 2 5 L / dak, sıçanları anestezisi. Anestezi sistemine bağlı bir burun konisi içine hayvanın burun yerleştirin. Sedasyon onaylamak için bir ayak veya kuyruk tutam gerçekleştirin.
  2. Kalça ayak bileği arasında cildi keserek makasla bacaktan deri kaldırmak. Kasları çıkarın ve hayvan eksanguinasyonla için femoral arter kesti. Kalça eklemi Açığa ve femur başını yerinden. Bu femur başını zarar vermemek önemlidir. 50 ml'lik plastik bir tüp içinde, steril PBS içinde kemikleri yerleştirin.
  3. Tüm mu kaldıronları kırmadan kemiklerden scles ve ligament. Not: Bu, kemik, etanol ile yıkama çözeltisi ya da kirlenme bağlantı bilmek bozulmadan kalması çok önemlidir. 5 dakika boyunca% 70 etanol içinde soyulmuş kemikleri durulayın.
  4. Steril bir laminer akış kaputu altında, makas ile kemiklerin hem ipuçları kesti. Kemik ekstremite steril PBS enjekte edilerek kemik iliği yıkayın. 15 ml tüp içine kemik iliği toplayın. 300 x g ile santrifüj 7 Min.
  5. Süpernatantı. Kırmızı kan Celi Lysis tamponunda 3 ml pelet askıya alınması. 300 x g, 7 dakika boyunca tekrar iplik önce, oda sıcaklığında 1 dakika boyunca süspansiyonu inkübe edin. 150 ml kültür, bir şişe içinde, steril, hücre kültür ortamı (395 ml IMDM ortamı, 5 ml pen / strep, 100 ml FBS) ekleyin ve tohum hücreleri.
  6. Nonadherent hücreleri çıkarmak için ikinci gün orta değiştirin.
    1. Istenilen hücre miktarı elde edilinceye kadar 2-3 hafta boyunca her ikinci gün orta değişiklikleri gerçekleştirin.
    2. Alternatif olarak, tohum tarafından biograft hazırlamakgerekli ve 3 başka bir yerde tarif edildiği gibi bir katı matris üzerine hücreleri ing.
  7. Kalp implantasyonu günü, hücreleri hazırlamak ya da sadece epikardiyal uygulamadan önce biograft hasat.
    1. Accutase hücre dekolmanı çözüm kullanarak hücreleri toplamak. Hücreleri saymak. Istenilen hücre miktarı elde etmek için hesaplanır hücre süspansiyonu hacmi, 1.5 ml santrifüj tüpü doldurun. 300 xg'de 7 dakika santrifüj ve süpernatant kaldırmak.
    2. Seçenek olarak ise, steril PBS içerisinde çalkala ve hücre kültür ortamından hasat biograft ve serumsuz taze kültür ortamı içinde tutar.

2. İlk Torakotomi ve LAD ligasyon

  1. Sıçan tartılır. 37 ° C'de ısıtma yastığı açın. 5-7 dakika indüksiyon odasında% 5 izofluran ve 5 L / dk% 100 O 2 ile sıçan anestezisi. Sedasyon onaylamak için bir ayak veya kuyruk tutam gerçekleştirin. Isıtma yastığı sıçan yerleştirin.
  2. 14 ile hayvan entübeG iv kateter. 2.5 L / dk oksijen,% 2.5 izofluran, 2 ml tidal hacim ve / dak 90 nefeslerin bir nefes frekans için programlanmış bir kemirgen ventilatöre entübasyon kateteri bağlayın.
  3. 0.1 mg / kg bir buprenorfin çözelti hazırlayın. Deri altına çözeltinin üçte biri enjekte edilir. Toraks sol kısmını tıraş. % 1 Betadine solüsyonu ile dezenfekte.
  4. Dördüncü interkostal boşlukta sternum dik cilt İnsizyon. 3 göğüs kasının katmanları (pektoralis majör, artan pektoralis ve dış eğik pektoralis) ayırın. (Kaburga arasında 4 ve 5), dördüncü interkostal boşluk açın.
  5. Kaburga yaymak ve kalp maruz küçük bir ekartörünü kullanın. Dikkatli perikard açın. Bulun ve atrium altında 7.0 dikiş 4 mm ile koroner arter (LAD) sol ön inen Arter.
  6. 3,0 suturlerle iki dikiş ile interkostal alanı kapatın. Sternum proksimal ve distalde iki sütür yerleştirin. İlk olarak, tDistal dikiş ighten. Göğüs şişirmek ve herhangi bir pnömotoraks önlemek için 2 saniye boyunca ventilatör egzoz boru kelepçe. İkinci dikiş sıkın. (Hayır dikişler ihtiyaç vardır) geri yerine kasları katmanları yerleştirin. 5,0 dikiş ile cilt kapatın.
  7. % 1 Betadine solüsyonu ile dezenfekte dikiş. Buprenorfin, solüsyonun geri kalanı enjekte edilir. Anestezi sistemi kapatın. Entübasyon kateteri çıkarın.
  8. 1-2 saat ılık bir Lamp altında kafeste sıçan tutun. Kafes içinde bir termometre tutun ve aşırı ısınmaya önlemek için sıcak lamba ve kafesin arasındaki mesafeyi kontrol eder. VKİ ünitesinde sıçan dön. Deri altından Buprenorfin 0.05-0.1 mg / kg enjekte Gönder -operatively 48 saat boyunca 6-12 saat.

İkinci Torakotomi Tedavi Via 3. Epikardiyal İdaresi

  1. Tekrarlayın 2,1-2,3 adımları.
  2. Beşinci interkostal boşlukta sternum dik cilt İnsizyon. 3 tabakanın ayrılmasıTorasik kas s (pektoralis majör, artan pektoralis ve dış eğik pektoralis). (Kaburgalar 5 ve 6 arasındaki) beşinci interkostal aralık açın.
  3. Kaburga yaymak ve kalp maruz küçük bir ekartörünü kullanın. Bazı bağlılık varsa, dikkatle ince forseps ile bunları kaldırmak.
  4. Dikilen altında bir soluk alanı olarak görünen enfarktüs alanı bulun. Not: Gerektiğinde daha sol karıncığa görselleştirmek için tepe eklenir ameliyat dikiş ipliğinin bir 10 cm'lik bir parça (7,0) kullanır. Kalp maruz bir kelepçe ile gevşek tutulan sütür hafifçe çekin.
  5. Aşağıdaki tedavilerden birini uygulayın:
    1. Kalp yüzeyinde biograft yerleştirin. 10 dakika boyunca, oda sıcaklığında önceden ısıtılmış doldurulmuş fibrin yapıştırıcı şırınga kullanın. 25 G Luer iğne kullanılarak biograft altında fibrin yapıştırıcı bir damla (50-100 ul) uygulayın. Biograft tamamen sızdırmaz olduğundan emin olun.
    2. Seçenek olarak ise, yüzey o bir pipet ile toplanmış hücre pelletini geçerlidirdikilen altında soluk alan üzerine kalp f. Hücre pelet üzerine fibrin yapıştırıcı bir damla (50-100 ul) uygulayın.
  6. Apeksinden sütür parça çıkarın.
  7. Tekrarlayın 2,6-2,8 adımları.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Tüm hayvanlar torakotomilerde sonra 1 saat içinde iyileşti. Yara iyileşmesi hızlı oldu. Enfeksiyon veya ödemi gözlendi.

Çift sol torakotomi kalbe iyi erişim (Şekil 1) izin verdi. Ağrı ve ameliyat sonrası mortalite düşüktür. Hayvan cerrahi hızla iyileşti ve (Şekil 2) ağırlık kazandı. Kaplan Meir sağkalım yüzde ilk torakotomi için% 96 oldu. 104 üzerinde dört sıçan ikinci torakotomi ile 24 saat aşağıdaki tedavi uygulaması içinde öldü. İkinci bir hayvan torakotomi ama hiçbir tedavi (plasebo) alınan% 100, MSC 96 ve% fibrin yapıştırıcı grubu ya da hayvan MSC alınan% 86 arasında değiştiği Kaplan-Meir yaşama yüzdesi, doğrudan kadardır (Şekil 3) içinde enjekte edilmiştir.

M-mod ekokardiyografik değerlendirme 2 hafta LAD ligasyonu 44 ±% 3 fraksiyonel kısalma (FS) bir azalma gösterdi sonrası yapılan22 ±% 4. Yöntemi (Şekil 4) tekrarlanabilirlik kanıt sağladı 104 hayvanlar 2 hafta sonrası LAD ligasyon kaydedilen FS sıklığı gösterimi. Varyasyon katsayısı (CV)% 17 idi. Ayrıca, ekokardiyografi ejeksiyon fraksiyonu (EF) bir azalma ve diyastol ve sistol LV ciltlik bir artış önerdi kalp yetmezliği doğru bir ilerleme 2 ve 6 hafta sonrası LAD ligasyon de gösterdi gerçekleştirilen (Şekil 4 ve 5). Sahte ameliyat grubunda Transmural enfarktüs gelişimi kalp kesitlerin Goldner boyama (Şekil 6) ile teyit edilmiştir.

Şekil 1
Şekil 1. (A) torakotomi. LAD bağlanmasından sonra kalbe geri çekme izin erişim kullanımı 2 hafta önce gerçekleştirildive dikiş görünür (ok). Epikardiyal tedavi uygulaması, kalbin en az eksteriorizasyon gerçekleştirildi. (B) Hücreler Fibrin yapıştırıcı ile sabit topak enfarktüslü alanın yüzeyinde muhafaza edilmiştir.

Şekil 2
Şekil 2. Günlük ameliyat sonrası izlem 2 gün boyunca ameliyat sonrası kilo kaybı gösterdi. Kurtarma tüm hayvanlarda ağırlık kazancı ile eşlik etti. Ağırlık varyasyonlar tedavi tipine bağımsız olmuştur.

Şekil 3,
Şekil 3. Kaplan-Meir grafiği temsil eden yüzde sağkalım sonrası LAD ligasyonu (A) ve üzeri tedavi sonrası ikinci torakotomi (B) iki ameliyatları hayvanların kaybının azalmasıyla sonuçlandığını göstermiştir. Kontrol grubuna hiçbir ameliyat oldu sağlıklı hayvan temsil eder. İki hafta ilk torakotomi sonrası, hayvanlar (MSC enjekte) fibrin yapıştırıcı veya hücreler ile sabit hücreler doğrudan miyokard içinde enjekte yalnız mastik fibrin, sham operasyonu ama hiçbir tedavi (plasebo) içtiler.

Şekil 4
Şekil 4. (A) Temsilcisi M-mod ekokardiyografi görüntüleri kayıtlı öncesi (sağlıklı) ve 2 hafta sonrası LAD ligasyonu (Enfarktüslü). Fraksiyonel kısalma değerleri (B) Frekans dağılımı kaydedildi iki hafta sonrası LAD ligasyon (n = 104).

390fig5highres.jpg "width =" 500 "/>
Şekil 5. Kalp fonksiyonu 2dimentional ekokardiyografi (biplan Simpson yöntemi) tarafından değerlendirilir ve 2 ve 6 hafta LAD ligasyonu. Hayvan iki torakotomileri vardı ama hiçbir tedavi sonrası kaydedildi. Ortalama ± SD yanı bireysel değerler ejeksiyon fraksiyonu (A) sistol (B) LV hacim ve diyastol (C) olarak temsil edilir. İstatistiksel analizler eşleştirilmiş nonparametrik Wilcoxon testi kullanılarak yapıldı.

Şekil 6,
2 hafta (A) ve 6 hafta sonra (B) sonrası LAD ligasyonu fibrotik skar (yeşil) ve miyokard canlılığının (kırmızı) gösteren boyanarak Şekil 6. Temsilcisi Goldner.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

LAD kalıcı ligasyonu geri dönüşümsüz miyokard yaralanmasına neden olmaktadır. İlk hayvan modeli, o günden beri kronik MI için standart ve uygun model olarak kabul edilmiştir. 1960 4 tarif edilmiştir. Onun kararlılığı ve uyarlık MI 5 için tedavilerinin deneysel değerlendirilmesini sağladı. İlk açıklama aşağıdaki Geliştirilmiş prosedürler 35-13% 6 bir operatif mortalite oranı bildirdi.

Beklendiği gibi, LAD ligasyon 2 hafta içinde gözlenen bozulmuş kalp fonksiyonu kaynaklı. Kalp fonksiyonundaki bir başka düşüş 6 hafta kadar kaydedilen ve transmu- fibrotik skar ile ilişkili bulunmuştur. Ayrıca, LV dilatasyonu dahil LV yeniden şekillenme net 6 hafta ligasyondan gözlendi.

Birinci ve ikinci cerrahi arasında 2 haftalık bir ara seçildi. Bunlar 1 hafta performan- sonrası çok bol olduğu gibi, bu durumda, ikinci torakotomi, yapışık- yokluğu ile kolaylaştırılmıştıroptimal koşullar ma ikinci ameliyat. Buna ek olarak, 2 haftalık bir tedaviden sonra bir uygulama için optimum zaman çerçevesi temsil edilir ve iskeminin neden olduğu enflamasyon erken pic önlemek ve genişlemesi yoğun bir fibrotik doku ve progresyon oluşturulmasından önce tedavi uygulamak için bırakıldı.

Torakotomi günümüzde küçük hayvanlar üzerinde LAD ligasyon için standart cerrahi yöntem olmasına rağmen, genellikle medyan sternotomi hücre tedavisi uygulaması 7 için gerçekleştirilir. Tedavi uygulaması için sunulan ikinci interkostal torakotomi bir roman, minimal invaziv yaklaşım; kemikleri kesmeden ve kas bölerek kaburgaları kalbe erişim sağlar. Yapışmanın cereyan ilk torakotomi ile bağlı küçük ve sınırlı bir yara düşürülür ve bu tedavi uygulaması başarı ile karışmaz. Yaklaşım kanama, hızlı postoperatif riski çok düşük sonuçlandıkurtarma, düşük mortalite, ağrı ve enfeksiyon riski. Bu ikinci minimal travmatik prosedürü cerrahi için ve matriks sabitleme için 20 dakika kadar 20 dakika sürdü. Hızlı bir prosedür ve kalp minimize kalp dokusu kurutma sınırlı maruz kalma. Post-operatif ultrason görüntüleme tekrarlanabilir ölçümleri analiz için kaliteli görüntü alımı sonuçlandı. Görüntüleme bozabilecek hiçbir hematom vardı.

Kalbin erişilebilirlik enfarkte miyokardın optimum görünürlük yanı sıra katı ve jel tipi biografts 8-10 dahil epikardiyal tedavilerin uygulanması için kalbin iyi bir pozlama izin verdi.

Fibrin yapıştırıcının kullanılması birçok avantaj sundu. (I) katı yamaları düzeltmek için, fibrin yapıştırıcı kullanımı dikişlerle daha az travmatik oldu. (Ii) Ne zaman böyle BioGlue (Cryolife) gibi diğer yapıştırıcı ile karşılaştırıldığında, fibrin yapıştırıcı rijit yapısı ve engelli kalbini oluşturduğu BioGlue daha uyumlu oldukasılmaları. (Iii) polimerizasyon süresi yeterli yapı iskeleti ya da hücre topağı konumlandırma için uygun olmuştur. (Iv) Fibrin yapıştırıcı katı yama mükemmel bir başlangıç ​​yapışma izin verdi. Yama sıkıca en az 4 hafta için 10 kalbin yüzeyi üzerinde muhafaza edilmiştir. Epikardiyal hücre teslim için bir iskele olarak ve sabit hücreler cerrahi prosedürün sonuna kadar enfarktüslü alanın yüzeyinde muhafaza edilmiştir (V) Fibrin yapıştırıcı işlemine kolaydı. Hücrelerin retansiyon süresi, bu çalışmanın odak dışı ve daha fazla araştırma talep olsa da, bu matriks nakledilen hücrelerin 11-14, miyokardiyal tutulmasına olanak sağlamakta olduğu önerilmiştir. Kısmen hızlı bir yarılma gösterdi açıklayabilir, kalp kasılması, hem de hipoksik ve enflamatuvar çevre boyunca hücrelerin yıkayın. Hücreler bir matris ile ilişkili olduğunda bu dezavantajları azaltılabilir.

Ana teknik zorluklar cerrahi işleme ilgilikatı biograft. Matris sert ve nonflexible ise, dikiş ile tespit tercih edilmelidir. Aşağıdaki kritik adımlar başarılı prosedür için düşünülmelidir. Birincisi, belli bir dikkat kaburga kırılması önlemek için torakotomi sırasında verilmelidir. İkinci olarak, tutkal fazla dikkatle diğer dokuların yapışmasını önlemek için kaldırılmalıdır. O infarkt boyutu değişkenliği azaltabilir Son olarak, standart bir bağ konumlandırma önemlidir. LAD atrium altında 4 mm lige transmurol olduğunda bir enfarktüs elde edilebilir.

Sonuç olarak, çift torakotomi deneysel planlama optimizasyonu ve hayvan kaybı sayısı azaltılmış lehine olacaktır, bu nedenle düşük mortalite, tedavi uygulaması için kalpte yeterli erişim ile güvenli bir cerrahi prosedür temsil ve.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Acknowledgments

Yazarlar Prof Hendrik Tevaearai ve çalışmanın ilk kısmı için mali destek için Kalp Damar Cerrahisi Bölümü teşekkür ederim.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Polysorb 3-0 suture Covidien UL 204
Polysorb 5-0 suture Covidien UL 202
Surgipro II 7-0 Suture Covidien VP904X
Catheter Insyte 14 G BD 381267
Inspira Advanced Volume Controlled Ventilator Harvard Apparatus 557058
Dumont #7 Forceps FST Germany 11274-20
Fibrin Sealant Baxter 1501441 TISSEEL Glue, Frozen -20 °C
Castroviejo Eye Specula Harvard Apparatus 72-8925 use as retractor for the ribs
IMDM GlutaMAX Gibco 31980
Pen/Strep Gibco 15140
FBS PAA Clone       A15-101
Bone Scissors Fine Science Tools 16044-10
Red Blood Cell Lysis Solution Gentra Systems D-50k1
Accutase Cell Detachment Solution Stem Cell Technology 7920

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Gjesdal, O., Bluemke, D. A., Lima, J. A. Cardiac remodeling at the population level--risk factors, screening, and outcomes. Nat. Rev. Cardiol. 8, 673-685 (2011).
  2. Alcon, A., Cagavi Bozkulak, E., Qyang, Y. Regenerating functional heart tissue for myocardial repair. Cell Mol. Life Sci. 69, 2635-2656 (2012).
  3. Guex, A. G., Fortunato, G., Hegemann, D., Tevaearai, H. T., Giraud, M. N. General Protocol for the Culture of Cells on Plasma-Coated Electrospun Scaffolds. Methods Mol. Biol. 1058, 119-131 (2013).
  4. Selye, H., Bajusz, E., Grasso, S., Mendell, P. Simple techniques for the surgical occlusion of coronary vessels in the rat. Angiology. 11, 398-407 (1960).
  5. Gomes, A. C., Falcao-Pires, I., Pires, A. L., Bras-Silva, C., Leite-Moreira, A. F. Rodent models of heart failure: an updated review. Heart Fail. Rev. 18, 219-249 (2013).
  6. Horstick, G., et al. Surgical procedure affects physiological parameters in rat myocardial ischemia: need for mechanical ventilation. Am. J. Physiol. 276, 472-479 (1999).
  7. Duchatelle, J. P., Vivet, P., Cortes, M., Groussard, O., Pocidalo, J. J. Respiratory and Hemodynamic-Effects of Lateral Thoracotomy or Sternotomy in Mechanically Ventilated Rats. Eur. Surg. Res. 17, 10-16 (1985).
  8. Giraud, M. N., et al. Hydrogel-based engineered skeletal muscle grafts normalize heart function early after myocardial infarction. Artif. Organs. 32, 692-700 (2008).
  9. Siepe, M., et al. Myoblast-seeded biodegradable scaffolds to prevent post-myocardial infarction evolution toward heart failure. J. Thorac. Cardiov. Sur. 132, 124-131 (2006).
  10. Guex, A. G., et al. Plasma-functionalized electrospun matrix for biograft development and cardiac function stabilization. Acta Biomater. 10, (2014).
  11. Terrovitis, J., et al. Noninvasive Quantification and Optimization of Acute Cell Retention by In Vivo Positron Emission Tomography After Intramyocardial Cardiac-Derived Stem Cell Delivery. J. Am. Coll. Cardiol. 54, 1619-1626 (2009).
  12. Guo, H. D., Wang, H. J., Tan, Y. Z., Wu, J. H. Transplantation of marrow-derived cardiac stem cells carried in fibrin improves cardiac function after myocardial infarction. Tissue Eng. Part A. 17, 45-58 (2011).
  13. Qiao, H., et al. Death and Proliferation Time Course of Stem Cells Transplanted in the Myocardium. Mol. Imaging Biol. 11, 408-414 (2009).
  14. Conradi, L., Pahrmann, C., Schmidt, S., Deuse, T., Hansen, A., Eder, A., et al. Bioluminescence Imaging for Assessment of Immune Responses Following Implantation of Engineered Heart Tissue (EHT). J. Vis. Exp. 52 (e2605), (2011).

Tags

Biyomühendislik Sayı 91 miyokard infarktüsü (MI) fibrin yapıştırıcı torakotomi sol ön inen arter (LAD) ligasyon kardiyak hücre tedavisi kalp mikrocerrahi
Rat Kalp Yetmezliği Hücre Terapisi: Miyokard İnfarktüsü için çift Torakotomi ve Hücreleri ile BioMatrix arasında Epikardiyal implantasyonu
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Frobert, A., Valentin, J., Cook, S., More

Frobert, A., Valentin, J., Cook, S., Lopes-Vicente, J., Giraud, M. N. Cell-based Therapy for Heart Failure in Rat: Double Thoracotomy for Myocardial Infarction and Epicardial Implantation of Cells and Biomatrix. J. Vis. Exp. (91), e51390, doi:10.3791/51390 (2014).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter