Here, we present a protocol to study the immunology of rejection. The surgical model presented reports a short operating time and a concise technique. Depending on the donor-recipient strain combination, the transplanted kidney may develop acute cellular rejection or chronic allograft damage, defined by interstitial fibrosis and tubular atrophy.
Rejection of the transplanted kidney in humans is still a major cause of morbidity and mortality. The mouse model of renal transplantation closely replicates both the technical and pathological processes that occur in human renal transplantation. Although mouse models of allogeneic rejection in organs other than the kidney exist, and are more technically feasible, there is evidence that different organs elicit disparate rejection modes and dynamics, for instance the time course of rejection in cardiac and renal allograft differs significantly in certain strain combinations. This model is an attractive tool for many reasons despite its technical challenges. As inbred mouse strain haplotypes are well characterized it is possible to choose donor and recipient combinations to model acute allograft rejection by transplanting across MHC class I and II loci. Conversely by transplanting between strains with similar haplotypes a chronic process can be elicited were the allograft kidney develops interstitial fibrosis and tubular atrophy. We have modified the surgical technique to reduce operating time and improve ease of surgery, however a learning curve still needs to be overcome in order to faithfully replicate the model. This study will provide key points in the surgical procedure and aid the process of establishing this technique.
Uzunluk ve yaşam 2 kalitesinde iki gelişme sunan, dünya çapında son dönem böbrek yetmezliği olan hastalar için devrimci bir tedavi haline gelmiştir o zamandan bu yana böbrek yetmezliği tedavisi için başarılı böbrek nakli ilk, tek yumurta ikizleri 1 arasında 1955 yılında tarif edilmiştir. Ancak uzun dönem greft sağkalım kronik allogreft hasar 3 sonuçlanan patolojik süreçlerin bir çok engel olmuştur.
İnsanlarda nakledilen böbreğin reddedilmesi immunosupporessive rejimlerinde önemli gelişmelere rağmen, önemli bir morbidite nedenidir. Böbrek nakli, bir fare modeli geliştirilmesi amacı yakından insan renal transplantasyon 4 bulundu süreci ve patolojiyi çoğaltmak. Skoskiewicz ve ark., 1973 5 böbrek nakli fare modelini tarif. Gelişmiş mikrocerrahi becerileri gerekli olmasına rağmen, değerli bir tçeşitli nedenlerden dolayı ool: fare genomu iyi karakterize ve deneysel yöntemler ve fare çalışmaları için mevcut tekniklerin büyük bir çeşitlilik söz konusudur olmuştur.
Böbrek nakli fare modeli kullanılarak çok grup, ancak deney 4 süresince yerinde bırakılır diğer çalışmalarda ve alıcı farelerin saf böbreklerin bizim tarif edilen metodoloji, bir de, hayatı destekleyen organ olarak böbrek nakli kullandık. Yararı, fare ve böylece fare morbidite ve ikinci bir prosedür ölüm riskini azaltan, tek ve anestezi sergilemesidir. Ayrıca fare kademeli böbrek yetmezliği olumsuz etkilerinden muzdarip değil.
Allojenik ret modelleri, kalp ve deri gibi diğer organlarda mevcut olmasına rağmen, bu her zaman böbrek nakli ile doğrudan ilgili değildir. Bu modeller farklı modları ve dy ortaya kanıtlar vardırreddinin iç- sel, örneğin kalp alograft ve böbrek nakli reddi, zaman süreci, belirli gerilme kombinasyonları 6 önemli ölçüde farklıdır. Bu transjenik olmayan FVB / NJ farelerine, BALB / c donörlerinde akut renal alograft reddi, kalıpları tarif etmişlerdir, bu model T hücreleri ve makrofajlar 7 birikimi ile hücresel kaynaklı yaralanma sergiledi. Bu farenin tek bir MHC sınıf II loci mis ile karakterizedir Alternatif olarak biz de interstisyel fibrozis ve tübüler atrofi sergileyen kronik allogreft hasar modeli tarif var, bu, C57BL / 6 alıcılar içine C57BL / 6 BM12 bağışçıları bir böbrek nakli sonucu -match 8.
Naklinin çok yönlü olarak akut rejeksiyon, hücresel ve hümoral rejeksiyon, iskemi reperfüzyon yaralanması, ve yeni tedavi edici ajanlar da dahil olmak üzere ana hatlarını açıklar böbrek nakli fare modeli kullanarak çalışılmıştır. Biz cerrahi t değiştirdinizechnique çalışma süresini azaltmak ve cerrahi kolaylığını artırmak için. Özellikle simultane donör ve alıcı hazırlık ve sürekli aort yama anastomoz kullanarak basitleştirilmiş bir vasküler anastomoz tekniğini tarif var. Bu video ve el yazması bu tekniğin kurulması yardımcı olmak için kilit noktaları sağlayacaktır.
Arteriyel anastomoz gerçekleştirmek için en iyi tarif şekilde alıcı aorta uç-yan bir şekilde, devamında renal arter ile, donörün uzak aorta kullanmaktır. Daha uygun olması için inanıyoruz insan böbrek nakli yapılan 'Carrell ve yama "ikizleme benzer bir aort yama, kullanımını tarif etmektedir. Donör ve alıcı operasyon süresi literatürde raporlar seyrek olsa biz alıcı aorta için uç-yan donör aort yerine alıcı aort, aort yama kullanan tercih olduğuna inanıyorum. Bir yama kullanara…
The authors have nothing to disclose.
Böbrek Araştırma İngiltere'den finansman, Edinburgh ve Organ Nakli European Society of Surgeons Royal College of bu çalışmayı destekledi.
Surgical Instruments | |||
Blunt Dissecting Scissors | Fine Science Tools | 14072-10 | For skin cutting |
Curved Castoviejo scissors | Fine Science Tools | 15017-10 | For tissue cutting |
Spring Scissors – straight | Fine Science Tools | 15000-08 | For suture cutting |
Toothed forceps 1×2 teeth | Fine Science Tools | 11021-12 | |
2 x Fine Tip forceps (Dumont No.5) | Fine Science Tools | 11251-20 | |
Angled Fine Tip forceps (Dumont No. 5/45) | Fine Science Tools | 11253-25 | For blunt dissecting |
Curved Fine Tip forcep (Dumont No.7) | Fine Science Tools | 11273-22 | Useful to pass around vessels |
Curved Crile Haemostat | Fine Science Tools | 1300-04 | |
Micro clip applicator with lock | Fine Science Tools | 18056-14 | |
2 x Micro serrefines spring width 2mm, jaw length 4mm | Fine Science Tools | 18055-04 | Microvascular clamps |
2 x Colibri 3cm wire retractor | Fine Science Tools | 17000-03 | |
Castroviejo needle holder with lock | Fine Science Tools | 120660-01 | |
Wound clip applicator | Fine Science Tools | 12031-07 | |
7mm wound clips | Fine Science Tools | 12032-07 | Remove 7 to 10 days after surgery |
Equipment | |||
OPMI pico microscope | Carl Zeiss | S100 | |
Thermal cautery unit with fine tip | Geiger | 150A | |
Heat electronic pad | Cozee Cumfort | n/a | |
Euroklav 23-S | Melag | n/a | Autoclave |
Disposable equipment | |||
7/O Silk braided suture | Pearsall | 30514 | |
10/O Dafilon (polyamide) suture | B-Braun | G1118099 | |
6/O Vicryl (plygalectin) | Ethicon | W9537 | |
Regular bevel needle, 1 inch, 21G | Bection, Dickinson and Company | 305175 | For ureteric anastamosis |
Regular bevel needle, 5/8 inch, 25G | Bection, Dickinson and Company | 305122 | |
Regular bevel needle, 1/2 inch, 30G | Bection, Dickinson and Company | 304000 | |
Insulin needle 1ml, 29G | Bection, Dickinson and Company | 324827 | |
Insulin needle 0.3ml, 30G | Bection, Dickinson and Company | 324826 | |
1 ml syringe slip tip | Bection, Dickinson and Company | 300184 | |
5 ml syringe slip tip | Bection, Dickinson and Company | 302187 | |
Wypall paper swabs | Kimberley-Clark | L40 | sterilised by autoclave |
Cotton wool buds | Johnson and Johnson | n/a | sterilised by autoclave |
Plain drapes | Guardian | CB03 | sterilised by autoclave |
Cell culture dish 60mm x 15mm | Corning Incorporated | 430166 | |
Dispensing Pin | B-Braun | DP3500L / 413501 | Used with NaCl 0.9% |
Re-agents and Drugs | |||
(Lacri-Lube) White soft paraffin 57.3%, mineral oil 42.5% and lanolin alcohols 0.2% | Allergan Ltd | 21956GB10X | |
(Videne) Povidone-iodine 10% | Ecolab Ltd | PL 04509/0041 | |
(Vetalar V) Ketamine hydrochloride | Pfizer Animal Health | Vm 42058/4165 | 100mg/ml solution (dose 200mg/kg) |
(Domitor) Medetomidine hydrochloride | Orion Pharma | Vm 06043/4003 | 1mg/ml (dose 0.5mg/kg) |
(Vetergesic) Bupernorphine hydrochloride | Alsto Animal Health | Vm 00063/4002 | 0.3mg/ml (dose 0.05mg/kg) |
(Antisedan) Atipamezole hydrochoride | Orion Pharma | Vm 06043/4004 | 5mg/ml (dose 2mg/kg) |
University of Wisconsin Solution | Belzer Bridge to Life | n/a | dose approximately 500 microlitres/mouse |
NaCl 0.9% | Baxter | FKE1323 | |
Heparin Sulphate | non-proprietary | n/a | 5000units/ml (dose 5units/mouse) |