Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Farelerde Yüz Sinir Aksotomi: Sakatlık Motonöron Yanıtı Eğitim için Bir Model

doi: 10.3791/52382 Published: February 23, 2015

Abstract

Bu cerrahi protokolün amacı Stylomastoid foramende onun çıkışında yüz kasları innerve yüz siniri, ortaya çıkarmak ve ya kesme veya periferik sinir hasarı neden onu ezmek için. Bu ameliyatın avantajları böylece diğer sinir yaralanması modellere kıyasla nispeten hafif cerrahi sonuç sonuçlanan sadeliği, yüksek tekrarlanabilirlik ve sonraki yüz felci hayati fonksiyonları veya hareketlilik üzerindeki etkisinin olmamasıdır. Kranial sinir yaralanması modelini kullanarak önemli bir avantajı motor nöronlar motor nöron hücre gövdeleri çalışma basitleştirilmesi, pons yüz motorlu çekirdeğinde nispeten homojen nüfus ikamet olduğunu. Çünkü yüz sinir innervasyon simetrik yapısı ve yüz motorlu çekirdekleri arasındaki karışma eksikliği, çalışma unaxotomized tarafı eşleştirilmiş iç kontrol olarak hizmet veren tek taraflı yapılabilir. Analiz çeşitli eşek postoperatif yapılabilirBu makalenin kapsamı dışındadır ayrıntıları fizyolojik tepki, s. Örneğin, kas fonksiyonunun geri kazanılması; innervasyonun bir davranış markör olarak görev yapabilir veya motor nöronlar hücre yaşamını ölçmek için sayısal olarak belirlenebilir. Ayrıca, motor nöronlar doğru moleküler analiz için lazer mikrodiseksiyon kullanılarak yakalanabilir. Yüz siniri axotomy minimal invaziv ve iyi tolere edilir, çünkü bu genetik olarak tadil edilmiş farelerin çok çeşitli kullanılabilir. Ayrıca, bu ameliyat modeli periferik sinir yaralanması tedavilerinin etkinliğini analiz etmek için kullanılabilir. Yüz sinir hasarı sadece motor nöronlar araştırılması için bir araç sağlar, ancak merkezi ve çevresel glial mikro-bağışıklık sistemi ve hedef kas da yanıtlar. fasial sinir hasarı modeli sinir hasarı ve yenilenme eğitim için güçlü bir araç olarak hizmet yaygın olarak kabul gören periferik sinir yaralanması modelidir.

Introduction

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Birçok periferik sinir yaralanması modelleri var, ama motor nöronlar çalışma için göze çarpan bir fasiyal sinir aksotomi modelidir. Ayrıca kranial sinir VII olarak bilinen fasial sinir, pons kaynaklanır ve yüz ifadesi 1,2 kasları innerve eder. Bu cerrahi protokolde, fasial sinir Stylomastoid foramende onun çıkışında maruz kalan ve kesilmiş veya ezilmiş ya edilir. Sinir hasarı şiddeti sırayla akson demetleri etrafına sarın bağ dokusu katmanları olan aksonlar, endoneurium, perinörium ve epinörium devamlılığı dayalı yaralanma ayıran Sunderland 3 sınıflandırmaları, aşağıdaki sınıflandırılabilir. Ezilme yaralanması (aksonotmezis) olarak, aksonlar kopmuş, ancak perinevre ve epinöriyuma korunur. Sağlam sinir kılıfı aksonlar 4,5 regrow, içinde bir kanal olarak hizmet vermektedir, çünkü yüz siniri ezmek Komple fonksiyonel iyileşme yaklaşık 11 gün içinde gerçekleşir. ÜzerindeÖte yandan, kesme yaralanması (nöromezis) içinde, aksonlar ve 3 bağ dokusu katmanları kopmuş olup, tüm distal sinir kas innervasyon geri regrow gerekir. Epinörium Cerrahi yeniden bağlanma genellikle sinirin yaralanması yaralanması olan insan hastalarda yapılır, ancak kurtarma sonuçları nadiren uygun bulunmaktadır. Daha fazla çalışma sinir hedefine regrow başarısız ve hangi tedaviler geliştirmek ve rejeneratif sürecini hızlandırmak için istihdam edilebilir anlamak için gereklidir.

Fasial sinir aksotomi modeli kullanılarak sinir yaralanması okuyan birçok avantajı vardır. İlk olarak, fasial sinir aksotomi prosedürü, hızlı, kolay ve son derece tekrarlanabilir; ve yüz kaslarının felci hayati fonksiyonları etkilemez ve iyi hayvan tarafından tolere edilir. Bu motor nöronlar th nispeten homojen nüfus ikamet çünkü basitleştirilmiş motonöron hücre gövdeleri okuyan bir kranial sinir hasarı modeli olduğundan,pons e fasiyal motor çekirdeği. Yedi subnuclei kasların belirli bir grup innerve her özel olarak orada nüfus, yüz motorlu çekirdeğinin içinde subnuclear desen dayalı farklılık yok, bu yüzden axotomy yanıt olarak subnuclear farklılıklar sonuçları 2,6,7 etkileyebilir.

Fasial sinir yaralanması modelinde önemli bir yararı sinir innervasyon son derece simetrik ve yüz motorlu çekirdekleri 8 arasında çapraz olduğundan unaxotomized tarafı eşleştirilmiş iç kontrol olarak hizmet verebilir olmasıdır. Bu cerrahi yöntemi kullanmanın bir diğer avantajı, doğrudan merkezi sinir sistemine travma ya da kan-beyin engeli 9. bozulması eksikliğidir. Aşırı kanama ve enfeksiyon gibi komplikasyonlar bu prosedür ile nadirdir.

Analiz, çeşitli sinir yaralanmasına bağlı fizyolojik tepkisini tayin etmek için gerçekleştirilebilir. göz kırpma refleksinin ve visker etkinlik geri kazanımı davranışsal olarak kullanılabilirFonksiyonel iyileşme 10,11 ölçüsü. Burun kılı aktivite video kayıt şu anda yüz sinir innervasyon 12,13 kurtarma tespit için en güçlü yöntemdir. Ötenazi sonra, beyin sapı histolojik analiz yüz motorlu çekirdeğin içinde motonöron hücre gövdeleri üzerinde yapılabilir. fasiyal motor çekirdeği yaralanmasına 2,6 yanıtları diferansiyel inceleme için izin, yedi subnuclei, belirli yüz kasları her özel bölünmüştür. Yüz motor nöronlar hücre yaşamını ölçmek için sayılabilir ya da immünohistokimya, biyolojik göstergeleri ve özel hücre popülasyonlarının 14 tanımlamak için kullanılabilir. fasiyal motor çekirdeği doğru sinir hasarı 15,16 hücresel yanıtın moleküler analiz için lazer yakalama kullanılarak microdissected edilebilir. Fasial sinir aksotomisi etkileri motor korteks 17,18 analiz edilebilir. Ayrıca, sinir Wallerian dejenerasyon çalışma çıkarılmasına olanak 19 ya daakson rejenerasyonu 20, ve kaslar kas kavşakları 21 çalışma çıkarılabilir. fasial sinir aksotomi da kas 21, ve bağışıklık sistemini yanıtı 23, ilişikteki santral ve periferik glial hücreleri 22 çalışma hedef için kullanılabilir. Çok fasial sinir aksotomi modeli 24 okuyan başarılı olmasına rağmen sinir hasarı hastaları için önemli bir sorundur ve güncel tedaviler iyi sonuçlar üretmek için başarısız çünkü, periferik sinir hasarı daha fazla çalışma gereklidir. Bu model sinir yaralanması fizyolojik yanıtı inceleyerek ve sinir rejenerasyonu tedavilerin etkinliğini analiz etmek için güçlü bir araçtır.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Idam tüm işlemler Tıp Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi Indiana Üniversitesi tarafından onaylanmış ve Sağlık kılavuzların Ulusal Enstitüsü takip edilmektedir.

1. Cerrahi Tekniği

  1. Steril eldiven, aletler ve NIH kurallarına 25 göre steril cerrahi alanını kullanarak bu işlem sırasında aseptik teknik koruyun. Onları otoklav ile ameliyat başlamadan önce araçları sterilize (tam liste için özel Reaktifler / Ekipman Tablo). Operasyon sırasında araçları sterilize etmek için bir cam boncuk sterilizatör kullanın.

2. Anestezi ve Hazırlık

  1. Bir veteriner izofluran buharlaştırıcı sistemi kullanılarak 0.9 L / dk oksijen ve% 2.5 izofluran karışımı ile anestezi kutusuna fare anestezisi. Fare kutusundan çıkarmadan önce vücut pozisyonunda değişikliklere yanıt vermez emin olun.
  2. Mou oftalmik merhem sürünSE gözleri kurumasını onları korumak için.
  3. Burun konisi kutuya gaz akışını geçin. Koni içinde kendi burun ve ağız ile cerrahi ped ve emici tezgah kağıdı ile kaplı bir ısıtılmış pad üzerinde sol tarafta kare fare yerleştirin. Sürekli farenin solunum ritmi ve hızı izlemek ve gerektiğinde izofluran seviyelerini ayarlamak - anestezi yeterli düzeyde tutmak için (2,5 ila% 3 izofluran), toplam sedasyon onaylamak için ayak tutam refleksini kullanın.

3. Cerrahi Yaklaşım

  1. Hizalayın ve cerrahi alan ile stereoskopla odak. Burun konisi ayarlayın ve görme alanının kenarında konumlandırılmış böylece aşağı bantlayın.
  2. Fare sol tarafta yalan, kesi yapılacaktır kulağın arkasındaki alanı açığa burun konisi sağ kulak kenarına bantlayın. Posterior aurikular ven kulağa boyunca yatay hareket emin olun. Not t doğru yerleştirmeO hayvan ve kulak bantlama hızlı yüz siniri bulmak için çok önemlidir.
  3. Ve% 70 etanol ile kulak arkasında kürk ıslatın ve bir jilet veya neşter bıçak kullanarak cerrahi siteyi tıraş. Ön ıslatma kürk, bu anatomik konumda kolay tıraş sağlar.
  4. % 70 etanol ile ve ardından bu Betadinede cerrahi fırçalama (% 7.5 povidon-iyot) gibi bir iyot çözeltisi ile deri temizleyin. Iyice bölgeyi dezenfekte bu temizlik iki kez daha tekrarlayın.
  5. , Kesi yapmak kulak çıkıntı için alan posterior kaudal kulak arka aurikular ven iz yeri belirlemek için. Çıkıntı 3 mm posterior - yaylı makas kullanarak, 4 mm'lik kesi 2 yapmak.
  6. Künt diseksiyon kullanarak deri altı yağ ve fasya ile ayır. Kan damarları veya kas dokusu kolayca zarar görebilir, çünkü makas ile doğrudan kesme kaçının.
  7. Kanama oluşursa, steril bir pamuklu çubukla cerrahi bölgeye baskı uygulamaken az 30 saniye boyunca karıştırılmıştır. Belirgin sıvı kaybı meydana gelmesi durumunda, fazla 25 ya da 27 G iğne kullanılarak steril% 0.9 tuzlu su çözeltisi 0.5 ml ile periton içine fare enjekte edilir.
  8. Yüz siniri bulmak için, birkaç anahtar yerler, spinal aksesuar sinir, kulak kanalına kullanın ve (aşağıda açıklanmıştır) digastrik kas anterior. Fasiyal sinirin dalları görüntülenmiştir kadar bu yerler etrafında ayır. o zaman ortaya sinir önemli bir beyaz katı bir yapı olarak görünür ve fasya tabakası altında yatan yapılara bunu yapışır.
    1. Deri altı yağ ve fasya disseke edilmiş bir kez, trapez kasını innerve kafatası kaudal kısmından geçecek spinal aksesuar sinir, bulun. fasial sinir, spinal aksesuar sinir derin.
    2. Inci beyazı görünüyor ve fasiyal sinirin rostralinde görülebilir kıkırdak kulak kanalı bulun.
    3. Üst ve c yatıyor ön digastrik kas kas karın bulfasiyal sinirin için audal.
  9. Fasial sinirin ana dalları görüntülenmiştir zaman, Stylomastoid foramende kendi kökenini bulmak için dorsal onları iz. , Açık cerrahi siteyi tutun sinirin yolu takip bahar makas ipuçlarını ilerlemek, daha sonra açık yeni gelişmiş alan tutmak için dorsal forseps taşımak için ince uçlu Dumont forseps # 5/45 kullanma.
  10. Bu noktada elmacık, yanak ile fasiyal sinirin gövdesini ve marjinal mandibular dalı gözünüzde canlandırın.
    NOT: Temporal dal foramen yakın bulunacaktır. üst ve alt bölüme marjinal mandibular sinir dalları yakın çene, böylece bu sinir dalları bu düzeyde görünür olmayacaktır.
    1. Bir sinir transeksiyonu performans ise, ince uçlu forseps ile yavaşça sinir stabilize ve yaylı makas ile sinir kesti. Beyin sapından sinir avulsing önlemek için forseps ile sinire çok çekiş uygulamaktan kaçının. İtBirbirlerinden uzakta, ya da kesilmiş ve distal sinir bir kısmını çıkarmadan kütükleri hiçbir yeniden bağlanma oluşabilir sağlamak için.
    2. Bir ezilme yaralanması gerçekleştirmek, sonra, tüm aksonlar sever ilk ezilme sitesine dik ikinci bir açıyla bu ezmek tekrarlamak için sabit basınç kullanarak 30 saniye boyunca sinir sıkıştırmak için Dumont # 5/45 forseps kullanabilir. Aksi takdirde yaralanma hayvanlar arasında tutarsız olacaktır, 30 sn ezmek sırasında basınç değişken miktarlarda uygulamaktan kaçının.

4. Kapanış ve Kurtarma

  1. Altta yatan yapıları üzerinde yağ ve kas yerleştirin.
  2. Kesi kenarlarını yaklaştığı ve 7,5 mm yara klibi kullanarak yara kapatın. Dikişler ya da yapıştırıcı aynı zamanda yara kapatma için kabul edilebilir. Ameliyat sonrası analjezikler, şu anda temin edilebilir.
  3. Farenin kulağına bandı çıkarın. Izofluran akışını kapatın ve fare 1 dakika 30 saniye için saf oksijen solumak için izin verir. Planestezi kurtarmak için hiçbir yatak ile boş bir kafes içinde fare ace.
  4. Fare kurtarıldı zaman, yüz felci doğrulayıcı belirtileri için davranışlarını incelemek. bıyıkları felç ve sırt yanak doğru açılı olacak, burun sapma olacak, ve göz hava puf yanıt yanıp olmaz.
  5. Ev hayvanlar ortaklaşa ameliyattan sonra onlar kadın iseniz. Daha agresif ve zorla enfeksiyona yol açar onların cagemate yara klipleri, kaldırmak eğilimindedir çünkü ortaklaşa erkek fareler konut kaçının. Gerekirse, şu anda cerrahi sonrası analjezik sağlayın.
  6. Hiçbir enfeksiyon ya da diğer bir komplikasyon postoperatif meydana sağlamak için ameliyattan sonra birkaç gün günde bir defa fareler izleyin. Kendi üzerinde düşmüş değil varsa ameliyattan sonra 10 gün - yara klipleri 7 çıkarın.
  7. Göz kırpma refleksi yeniden ya kadar günlük kornea komplikasyonları önlemek için etkilenen göze göz merhemi yağlama Uygulaörtülü veya ötenazi kadar.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Fasial sinir aksotomi gerçekleştirildikten sonra, motor nöron kaybı yaralanma sonucu ortaya çıkar. Yaralanma sonrası motonöron sağkalım gibi hem motonöron sağkalım verileri özetlemek cinsiyet, ameliyat sırasında hayvan yaş ve motonöron sayımları yapılır hangi timepoint ve Moran ve Graeber'in inceleme 24 ve Jinno ve Yamada inceleme 22 gibi birçok değişkene bağlıdır. Tipik olarak, motor nöronlar yaklaşık% 86 sonrası aksotomi 14,15,26 28 gün hayatta. Motonöron kaybı kinetiği Serpe diğerleri açıklanmaktadır. 2000 Şekil 1, birden fazla genetik olarak modifiye edilmiş farelerde motonöron hayatta kalma varyasyonunu gösterir. Hiç bir önemli fark genetik değişiklikler taban sayımı etkisi olmadığını göstermektedir, kontrol tarafının yüz motonöron sayısı görülmektedir. Önemli hücre kaybı, bir fare modelinde gözlenmiştir, (Şekil 1A, D% 84 2.0 ±) vahşi tip farelerde motonöron hayatta kalma ile karşılaştırıldığındaAmyotrofik lateral skleroz (SOD1 G93A;% 68 ± 1; Şekil 1B, D) ve aynı zamanda bağışıklık yetersizliği olan rekombinasyon aktive gen-2 knockout fare 27 (RA-2 - / -, Şekil 1C, K,% 57 2.5 ±) .

Şekil 2 yüz motorlu çekirdeğine uygulanan lazer yakalama mikrodiseksiyon tekniği göstermektedir. Tüm yüz motor çekirdeği (Şekil 2A-C) yakalanabilir veya subnuclei (Şekil 2B-F) ayrı ayrı toplanabilir. Büyük hassasiyet için, motor nöronlar ayrı ayrı ele alınabilir, ve kalan nöropil analizi (Şekil 2G-I) toplanabilir. 3 subnuclear ventromediyal karşılaştırarak örnekler ve ventrolateral subnuclei çıkarılan RNA malzemesi QPCR sonuçlarını göstermektedir Şekil. Dört gen test, β II tubulin, büyüme, protein-43 (Gap-43) ilişkili hemopoietic- ve nörolojik eksprese dizi-1 (Hn1) ve beyin-türevi nörotrofik faktör (BDNF), tüm sinir rejenerasyonu yanıt ile ilişkili ve axotomy 16 sonra iki subnuclei ve gen ekspresyonu profilleri arasında ilginç farklılık göstermektedirler.

Şekil 1,
Şekil 1. Temsilcisi koronal yüz motor çekirdeği bölümleri tionin ile boyanmış ve 28 gün fasial sinir kesisi sonrası ölçülebilir. Yüz motorlu çekirdekleri (A, D) WT, (B, E) SOD1 G93A ve (C, F) şiddetiyle sarmıştı gelen gösterilmiştir 2 - / - fareler (kontrol tarafı, axotomized tarafı). Ölçek çubukları 120 mikron =. Bu rakam, 27 modifiye edilmiştir. th daha büyük bir versiyonunu görmek için buraya tıklayınızrakam.

Şekil 2,
Fasiyal motor çekirdeğinin Şekil 2. Lazer mikrodiseksiyon. (A) kısmi axotomized yüz çekirdeğinin lazer mikrodiseksiyonu ve lazer microdissected doku (C) koleksiyonu ile axotomized yüz nükleus, (B) tionin-lekeli bölümü. Subnuclei bir şablon (D) ventromediyal belirlemek ve lazer mikrodiseksiyon (E, F) için yüz subnuclei ventrolateral için bilgisayar ekranında bindirilmiş edildi. Yüz motonöronlar lazer görünür çekirdek ve çekirdekçik ile morfolojiye göre microdissected edildi, oklar (G) ile gösterilir FMN hücre gövde parçaları, lazer ayrı microdissected ve ortadan kaldırmak için elden iken FMN mRNA (* motor nöron, G, H gösterir) nöropil sörnekleri şunlardır:. Tüm FMN ve hücre gövde parçaları toplandı sonra kalan Yüzdeki sinir hücreleri yığını doku nöropil örnek (I) microdissected lazer oldu. Ölçek çubukları 100 mikron =. Bu rakam, 16 modifiye edilmiştir. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Şekil 3,
Şekil 3. Pro-rejenerasyon ve pro-hayatta kalma mRNA ifadesi ventromediyal olarak (VM) ve ventrolateral (VL) fasiyal sinir aksotomisi aşağıdaki yüz motorlu subnuclear bölgeleri. Için nakledilmiş VM ve VL yüz subnuclei nispetle ± SEM mRNA ifadesinin ortalama yüzde opere kontrol subnuclei (AD). MRNA ekspresyonunun zaman akışı βII tübülin için bir yaralanma (0), 3, 7, 14 ve 28 DPO (A içerir (B), Hn1 (C), ve BDNF (D). # P <0.05 VM kıyasla VL önemli farklılıklar, temsil eder. Bu rakam 16 ile modifiye edilmiştir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Stereo microscope Leica M60
Labeling tape Fisher Scientific 15-952
Vannas-Tübingen spring scissors - straight/sharp/8.5 cm/5 mm cutting edge Fine Science Tools 15003-08 Sterilize before use
Dumont #5/45 forceps - standard tips/angled 45°/Dumoxel/11 cm Fine Science Tools 11251-35 Sterilize before use
Michel suture clips - 7.5 mm x 1.75 mm Fine Science Tools 12040-01 Described as "wound clip" in protocol, sterilize before use
Hagenbarth cross action wound clip applier 5" George Tiemann & Co 160-910 Used to apply wound clip, sterilize before use
Michel suture clip applicator & remover - For 7.5 mm clips Fine Science Tools 12029-12 Used to remove wound clip
0.9% Sodium chloride injection, USP Hospira 0409-4888-10
Betadine, 16 oz, with dispenser Fisher Scientific 19-027132
70% Ethanol
Glass bead sterilizer

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Kaufman, M., Bard, J. The Anatomical Basis of Mouse Development. Elsevier. New York, NY. (1999).
  2. Ashwell, K. The adult mouse facial nerve nucleus: morphology and musculotopic organization. Journal of Anatomy. 135, 531-538 (1982).
  3. Sunderland, S. A classification of peripheral nerve injuries producing loss of function. Brain : A Journal Of Neurology. 74, 491-516 (1951).
  4. Beahrs, T., Tanzer, L., Sanders, V. M., Jones, K. J. Functional recovery and facial motoneuron survival are influenced by immunodeficiency in crush-axotomized mice. Experimental Neurology. 221, 225-230 (2010).
  5. Mesnard, N. A., Haulcomb, M. M., Tanzer, L., Sanders, V., Jones, K. J. Delayed functional recovery in presymptomatic mSOD1G93A mice following facial nerve crush axotomy. Journal of Neurodegeneration & Regeneration. 4, 21-25 (2013).
  6. Komiyama, M., Shibata, H., Suzuki, T. Somatotopic representation of facial muscles within the facial nucleus of the mouse. A study using the retrograde horseradish peroxidase and cell degeneration techniques. Brain Behav Evol. 24, 144-151 (1984).
  7. Canh, M. Y., Serpe, C. J., Sanders, V., Jones, K. J. CD4(+) T cell-mediated facial motoneuron survival after injury: Distribution pattern of cell death and rescue throughout the extent of the facial motor nucleus. Journal of Neuroimmunology. 181, 93-99 (2006).
  8. Isokawa-Akesson, M., Komisaruk, B. Difference in projections to the lateral and medial facial nucleus: anatomically separate pathways for rhythmical vibrissa movement in rats. Exp Brain Res. 65, 385-398 (1987).
  9. Streit, W., Kreutzberg, G. Response of endogenous glial cells to motor neuron degeneration induced by toxic ricin. The Journal of Comparative Neurology. 268, 248-263 (1988).
  10. Serpe, C. J., Tetzlaff, J. E., Coers, S., Sanders, V., Jones, K. J. Functional recovery after facial nerve crush is delayed in severe combined immunodeficient mice. Brain, Behavior, And Immunity. 16, 808-812 (2002).
  11. Lal, D., et al. Electrical stimulation facilitates rat facial nerve recovery from a crush injury. Otolaryngology--Head And Neck Surgery. Official Journal Of American Academy Of Otolaryngology-Head And Neck Surgery. 139, 68-73 (2008).
  12. Tomov, T., et al. An Example of Neural Plasticity Evoked by Putative Behavioral Demand and Early Use of Vibrissal Hairs after Facial Nerve Transection. Experimental Neurology. 178, 207-218 (2002).
  13. Skouras, E., Angelov, D. N. Experimental studies on post-transectional facial nerve regrowth and functional recovery of paralyzed muscles of the face in rats and mice. Anatomy (International Journal of Experimental and Clinical Anatomy). 4, 1-27 (2010).
  14. Xin, J., et al. IL-10 within the CNS is necessary for CD4+ T cells to mediate neuroprotection). Brain, Behavior, And Immunity. 25, 820-829 (2011).
  15. Mesnard, N. A., Sanders, V. M., Jones, K. J. Differential gene expression in the axotomized facial motor nucleus of presymptomatic SOD1 mice. The Journal of Comparative Neurology. 519, 3488-3506 (2011).
  16. Mesnard, N. A., Alexander, T. D., Sanders, V. M., Jones, K. J. Use of laser microdissection in the investigation of facial motoneuron and neuropil molecular phenotypes after peripheral axotomy. Experimental Neurology. 225, 94-103 (2010).
  17. Franchi, G. Changes in motor representation related to facial nerve damage and regeneration in adult rats. Experimental Brain Research. 135, 53-65 (2000).
  18. Munera, A., Cuestas, D. M., Troncoso, J. Peripheral facial nerve lesions induce changes in the firing properties of primary motor cortex layer 5 pyramidal cells. Neuroscience. 223, 140-151 (2012).
  19. Liu, L., et al. Hereditary absence of complement C5 in adult mice influences Wallerian degeneration, but not retrograde responses, following injury to peripheral nerve. Journal of the Peripheral Nervous System. 4, 123-133 (1999).
  20. Ferri, C., Moore, F., Bisby, M. Effects of facial nerve injury on mouse motoneurons lacking the p75 low-affinity neurotrophin receptor. Journal of Neurobiology. 34, 1-9 (1997).
  21. Zhou, R. Y., Xu, J., Chi, F. L., Chen, L. H., Li, S. T. Differences in sensitivity to rocuronium among orbicularis oris muscles innervated by normal or damaged facial nerves and gastrocnemius muscle innervated by somatic nerve in rats: combined morphological and functional analyses. The Laryngoscope. 122, 1831-1837 (2012).
  22. Jinno, S., Yamada, J. Using comparative anatomy in the axotomy model to identify distinct roles for microglia and astrocytes in synaptic stripping. Neuron Glia Biology. 7, 55-66 (2011).
  23. Jones, K. J., Serpe, C. J., Byram, S. C., Deboy, C. A., Sanders, V. M. Role of the immune system in the maintenance of mouse facial motoneuron viability after nerve injury. Brain, Behavior, And Immunity. 19, 12-19 (2005).
  24. Moran, L. B., Graeber, M. B. The facial nerve axotomy model. Brain research. Brain research. 44, 154-178 (2004).
  25. Council, N. R. Guide for the Care and Use of Laboratory Animals: Eighth Edition. The National Academies Press. New York, NY. (2011).
  26. Serpe, C. J., Kohm, A. P., Huppenbauer, C. B., Sanders, V., Jones, K. J. Exacerbation of Facial Motoneuron Loss after facial nerve transection in severe combined immunodeficient (scid) mice. Neuroscience. 19, (1999).
  27. Mesnard-Hoaglin, N. A., et al. SOD1(G93A) transgenic mouse CD4(+) T cells mediate neuroprotection after facial nerve axotomy when removed from a suppressive peripheral microenvironment. Brain, Behavior, And Immunity. 40, 55-60 (2014).
  28. Wang, H., et al. Establishment and assessment of the perinatal mouse facial nerve axotomy model via a subauricular incision approach. Experimental Biology And Medicine. 237, 1249-1255 (2012).
  29. Sharma, N., Moeller, C. W., Marzo, S. J., Jones, K. J., Foecking, E. M. Combinatorial treatments enhance recovery following facial nerve crush. The Laryngoscope. 120, 1523-1530 (2010).
  30. Lieberman, D. M., Jan, T. A., Ahmad, S. O., Most, S. P. Effects of corticosteroids on functional recovery and neuron survival after facial nerve injury in mice. Archives of Facial Plastic Surgery. 13, 117-124 (2011).
  31. Serpe, C. J., Coers, S., Sanders, V. M., Jones, K. J. CD4+ T, but not CD8+ or B, lymphocytes mediate facial motoneuron survival after facial nerve transection. Brain, Behavior, And Immunity. 17, 393-402 (2003).
  32. Haulcomb, M. M., et al. Axotomy-induced target disconnection promotes an additional death mechanism involved in motoneuron degeneration in ALS transgenic mice. The Journal of Comparative Neurology. (2014).
  33. Bauder, A. R., Ferguson, T. A. Reproducible mouse sciatic nerve crush and subsequent assessment of regeneration by whole mount muscle analysis. Journal of Visualized Experiments : JoVE. (60), (2012).
  34. Richner, M., Bjerrum, O. J., Nykjaer, A., Vaegter, C. B. The spared nerve injury (SNI) model of induced mechanical allodynia in mice. Journal of Visualized Experiments : JoVE. (54), (2011).
Farelerde Yüz Sinir Aksotomi: Sakatlık Motonöron Yanıtı Eğitim için Bir Model
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Olmstead, D. N., Mesnard-Hoaglin, N. A., Batka, R. J., Haulcomb, M. M., Miller, W. M., Jones, K. J. Facial Nerve Axotomy in Mice: A Model to Study Motoneuron Response to Injury. J. Vis. Exp. (96), e52382, doi:10.3791/52382 (2015).More

Olmstead, D. N., Mesnard-Hoaglin, N. A., Batka, R. J., Haulcomb, M. M., Miller, W. M., Jones, K. J. Facial Nerve Axotomy in Mice: A Model to Study Motoneuron Response to Injury. J. Vis. Exp. (96), e52382, doi:10.3791/52382 (2015).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter