Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

رواية فأري موديل الفشل شرياني الناسور: العملية الجراحية في التفاصيل

Published: February 3, 2016 doi: 10.3791/53294
Automatic Translation
1,2,3, 2,3, 4, 3, 3, 1,2, 3, 4, 1,2, 2,3, 1,2
1Department of Nephrology, Leiden University Medical Center, 2Einthoven Laboratory for Experimental Vascular Medicine, Leiden University Medical Center, 3Department of Surgery, Leiden University Medical Center, 4Division of Nephrology, University of Cincinnati

Introduction

وظيفية قناة الوصول الأوعية الدموية هي ذات أهمية حيوية لمرضى الفشل الكلوي التي تعتمد على غسيل الكلى المزمن للبقاء على قيد الحياة. بناء على ناسور شرياني (AVF) هو حاليا الخيار المفضل للوصول إلى الأوعية الدموية. ومع ذلك، مضاعفات AVF المتعلقة تشكل السبب الرئيسي لاعتلال المرضى على غسيل الكلى المزمن. وعلى الرغم من جهود علمية واسعة، فإن أيا من رواية نهج للحد من مضاعفات الوصول AVF لم تسفر عن تحسن كبير في AVF المتانة. جزء من هذا التقدم المخيب للآمال يتعلق الفهم الناقص من الفيزيولوجيا المرضية الكامنة وراء فشل وصول غسيل الكلى.

لكشف الفيزيولوجيا المرضية لفشل الوصول AV، النماذج الحيوانية التي تحاكي بشكل وثيق علم الأمراض البشرية هي في غاية الأهمية. في هذا الصدد، وليس فقط الأنواع الحيوانية ولكن أيضا موقع توصيلي، والعلاج المضاد للcoagulatory المطلوبة ومدة المتابعة بعد الزيادةينبغي أن تؤخذ في الاعتبار راي 1. بينما الحيوانات الكبيرة هي الأكثر ملاءمة للدراسات تدخل يهدف إلى وضع استراتيجيات علاجية جديدة، ونماذج الفئران لديها فرص كبيرة لكسب مزيد من التبصر في الآليات الجزيئية الكامنة وراء فشل وصول مركبات بسبب توفر الفئران المعدلة وراثيا. وبالإضافة إلى ذلك، فإن عددا كبيرا من الفئران يمكن أن تستخدم لهذا الغرض في انخفاض التكاليف مقارنة مع استخدام الحيوانات أكبر.

وقد وصفت أول نموذج الفئران من فشل AVF في عام 2004 من قبل Kwei وآخرون. 2 وفي هذا النموذج، تم تشييد AVFs باستخدام الشريان السباتي والوريد الوداجي بطريقة نهاية إلى نهاية باستخدام القسطرة داخل الأوعية الدموية. يمكن أن يكون هذا نموذجا مفيدا لدراسة التكيف وريدي في وقت مبكر في AVFs على الرغم من أن التكوين نهاية إلى نهاية وجود القسطرة داخل الأوعية الدموية تحد من صلاحية هذا النموذج لAVFs الإنسان. وقدم نموذجا AVF محسن من قبل Castier وآخرون. 3 والذي في نهاية لتوصيل الشريان السباتي إلى جانب حبل الوريد. ومع ذلك، AVFs في مرضى غسيل الكلى عادة ما شيدت من قبل التشريح نهاية الوريد إلى جانب الشريان. التكوين الدقيق للAVF هو سمة حاسمة من نموذج وصول AV لأنه يحدد الشخصي الدورة الدموية داخل قناة 4. وهذا الأخير هو مساهما هاما في البطانية الخلل والتطور اللاحق للتضخم باطنة (IH) 5.

وقد تم تطوير نموذج الفئران رواية مؤخرا مع التكوين التشريحي متطابقة كما يستخدم في البشر 6. في هذا النموذج، يتم إنشاء AVF في C57BL / 6 الفئران عن طريق تفاغرية نهاية فرع من الوريد الوداجي الخارجي إلى جانب الشريان السباتي المشترك مع خيوط متقطعة. في هذه الورقة، ونحن نركز على إجراء المجهرية لهذا النموذج من أجل تسهيل الاستخدام واسع النطاق لهذا النموذج الفئران، والتي تهدف إلى كشف الفيزيولوجيا المرضية المعقدةفشل الوصول غسيل الكلى.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

تمت الموافقة على جميع التجارب من قبل اللجنة على الرفق بالحيوان من المركز الطبي لجامعة لايدن.

1. إعداد الحيوانية والتخدير

  1. تخدير الماوس (1-3 أشهر من العمر) في غرفة تحريض التخدير مستمرة مليئة 3-4٪ الأيزوفلورين.
  2. حلق الجانب البطني من الرقبة والجزء الداخلي من الساق الأيمن العلوي باستخدام الحلاقة الكهربائية واستخدام قطعة من شريط لإزالة الشعر.
  3. تطبيق مرهم العين في كلتا العينين.
  4. وضع الحيوان على بطانية التدفئة التي يتم إصلاح قناع الأنف التهوية. يحملق الرأس إلى قناع الأنف باستخدام شريط لاصق.
    1. تقديم الأيزوفلورين بتركيز 1،5-2،0٪ باستخدام الأكسجين المخصب مجموعة الهواء في تدفق التالية: الهواء 0.3 لتر / دقيقة، و 100٪ من الأكسجين 0.2 لتر / دقيقة. قرصة الجلد بين أصابع القدم لتقييم عمق التخدير وضبط تركيز الأيزوفلورين إذا لزم الأمر.
  5. يحملق الحيوان إلىبطانية للتدفئة مع شريط لاصق على كل الأطراف التي تم تعيينها في حوالي 37 درجة مئوية في موقف ضعيف.
  6. حقن البوبرينورفين الذائبة في كلوريد الصوديوم (كلوريد الصوديوم) بنسبة 0.9٪ إلى جرعة من 0.1 ملغ / كغ مع 0.5 مل من العقيمة كلوريد الصوديوم 0.9٪ تحت الجلد في الجهة الحيوان.
  7. تطبيق بالكلورهيكسيدين صبغة 0.5٪ في منطقة المعدة.

شق 2. الجلد

  1. وضع الحيوان تحت المجهر مع رئيسها نحو الجراح.
  2. جعل شق طولي حوالي 1.5 سم في خط الوسط من الرقبة بطني باستخدام مقص الجزئي.
  3. الاستيلاء على الغدد اللعابية مع ملقط وتهجير الغدة اللعابية الصحيحة cranially حتى يتم جزئيا خارج الجرح.

3. تشريح وإعداد الوريد

  1. تحديد وبصراحة تشريح فرع الظهراني الإنسي من الصحيح الوريد الوداجي الخارجي تماما من نسيجه المحيطة بالأوعية عن طريق نشر مجردlongside وفي اتجاه الأوعية الدموية.
  2. ضع حلقة (10.0 خياطة) حول الوريد تشريح وتطبيق عقدة واحدة من دون قفل عليه.

4. إزالة العضلات القصية الترقوية الخشائية

  1. باستخدام ملقط، بصراحة تشريح العضلات القصية الترقوية الخشائية الصحيحة عن محيطها من خلال نشر على طول حدودها. وضع زوج من ملقط مفتوحة تحت العضلات المعزولة وligate أنه قريب وبشكل أقصى مع خياطة 6.0. وفي وقت لاحق، استئصال العضلات باستخدام cauterizer.

5. تشريح وإعداد الشريان السباتي المشترك

  1. تحديد وتشريح الصحيح الشريان السباتي المشترك باستخدام ملقط. وضع موضوع 6.0 خياطة حول الشريان للمساعدة في التلاعب في الشريان.
  2. تطبيق المشابك الأوعية الدموية كما بشكل أقصى وقريب ممكن.
  3. إجراء شق طولي في منتصف الشريان حوالي 1 مم باستخدام مقص الجزئي المتخصصة.
  4. شطفالشريان مع الحل الهيبارين [100 وحدة دولية / مل] حتى السفينة واضحة من الدم.
  5. قياس وضبط طول شق إذا لزم الأمر لتتناسب مع عرض المشبك الأوعية الدموية [1.1 مم].

6. من ربط الوريد

  1. تطبيق المشبك الأوعية الدموية قريب من الوريد استعداد لذلك ووضع خيوط الجروح حول الوريد.
  2. تطبيق الجر الذيلية لطيف إلى الوريد باستخدام haemostat التي يتم وضعها على خيوط الجروح وligate الوريد كما بشكل أقصى قدر ممكن باستخدام خياطة 10.0 الذي تم وضعه في وقت سابق.
  3. قطع الوريد باستخدام مقص فقط قريب للربط.
  4. باستخدام ملقط الأوعية الدموية، وفتح بلطف تجويف الوريد وشطفه بمحلول الهيبارين [100 وحدة دولية / مل].

7. إنشاء التحام الجزء 1

  1. ربط الوريد إلى الشريان مع خياطة متقطعة (10.0) باستخدام 2 عقدة مربع في موقف 0:00 تليها خياطة في س الستالموقف على مدار الساعة. تأكد من توصيل الوريد إلى الشريان دون السماح لها استدارة حول محورها الخاص. وتناوب على الحيوانات من أجل تحسين التعرض الجراحية.
  2. ضع خيط خياطة حول الوريد وتطبيق الجر الجانبي لطيف باستخدام haemostat.
  3. باستخدام نفس الغرز انقطاع، واستكمال مفاغرة عن طريق وضع ما يقرب من 3-4 خيوط إضافية في الجانب البطني المرئي من مفاغرة.

8. إدارة الهيبارين

  1. تدوير التدفئة بطانية 180 درجة وتركيز المجهر على الساق العلوية اليسرى.
  2. تحديد الفخذ حزمة الوريد / الشريان / العصبية التي تبحث عن بنية الأوعية الدموية التي تمتد طوليا في الجزء الأنسي من الساق العلوية ويمكن أن ينظر إليه من خلال الجلد. إجراء شق مع مقص الجزئي من حوالي 1 سم مباشرة فوق الوريد الفخذي بطريقة بالطول.
  3. بعناية تشريح الأنسجة المحيطة بالأوعية من الوريد الفخذي وحقن الهيبارين بجرعة سو 0.2 وحدة دولية / ز وزن الجسم في الوريد الفخذي.

9. إنشاء التحام الجزء 2

  1. العودة إلى منطقة الرقبة وإزالة خيوط الجروح التي وضعت حول الوريد.
  2. وضع خيوط الجروح (6.0) الذي يمر في وقت لاحق تحت الشريان السباتي، خلال الوريد، ومرة ​​أخرى تحت الشريان السباتي. (الشكل 1L)
  3. إزالة المشبك الأوعية الدموية الوريدية.
  4. بعد ذلك، تحريف نصف الانتهاء شرياني الناسور 180 درجة على طول محور الشريان السباتي بطريقة اتجاه عقارب الساعة من قبل التواء في وقت واحد كلا من المشابك الأوعية الدموية وتطبيق الجر وسطي إلى نهايات خيوط الجروح.
  5. استكمال مفاغرة بنفس الطريقة كما هو موضح في الخطوة 7.2.

إزالة 10. الأوعية الدموية المشبك

  1. إزالة خيوط الجروح وتدوير الأوعية الدموية المشابك 180 درجة عكس اتجاه عقارب الساعة.
  2. إزالة المشبك الأوعية الدموية البعيدة تليها المشبك الأوعية الدموية القريبة.
    3. <لى> تقييم المباح من مفاغرة التي تسد بلطف الجهاز تدفق الوريدي مع ملقط الأوعية الدموية. في حالة وجود مفاغرة براءات الاختراع، وقسم الوريدي قبل الاغلاق توسيع بطريقة نابض. نقل الغدة اللعابية الصحيحة للموقف باستخدام ملقط لها التشريحية الأصلية.

11. الجلد اختتام وبعد العملية الجراحية العناية

  1. إغلاق الجلد في الساق العلوي مع خياطة دون انقطاع (6.0).
  2. إغلاق جلد الرقبة مع خياطة دون انقطاع (6.0).
  3. إزالة الحيوان من بطانية التدفئة وحقن 0.5 مل كلوريد الصوديوم 0.9٪ تحت الجلد.
  4. وضع الحيوانات في قفص مظلم التي يتم تسخينها مع مصباح التدفئة والسماح لها يتعافى تماما. عندما لا تسترد حيوان تماما، تأكد من أنه لا يعاني من صدمة الدورة الدموية بسبب نزيف في منطقة العمليات الجراحية. بحث عن علامات مثل الرقبة منتفخة وتسرب الدم.
  5. بعد ما يقرب من 6 ساعات بعد الحقن الأول من buprenorphine، وضخ جرعة واحدة من صياغة الاستمرار في اطلاق سراح تحت الجلد البوبرينورفين في الجرعة التي ينصح من قبل الشركة المصنعة، من أجل توفير تسكين كافية ل72 ساعة إضافية.

12. الأنسجة حصاد

  1. تخدير الحيوانات مع-خليط مخدر تحتوي على ميدازولام (5 ملغ / كلغ)، medetomidine (0.5 ملغ / كلغ) والفنتانيل (0.05 ملغ / كلغ) تدار داخل الصفاق.
  2. يحملق الحيوان في موقف ضعيف عن طريق إدخال إبر من خلال الكفوف والخدين إلى حصيرة السيليكون غير ساخنة.
  3. إجراء شق حوالي 1،5-2،0 سم فوق الجرح في الرقبة مع مقص الجزئي.
  4. تشريح AVF، ووضع المواضيع خياطة (6.0) في جميع أنحاء proximal-، الشريان القاصي وريدي المسالك تدفق لسهولة تحديد.
  5. تقييم المباح من AVF كما هو موضح في القسم 10.3 من البروتوكول.
  6. فتح التجويف البريتوني عن طريق إجراء عملية فتح البطن وسطي شالغناء مقص الجزئي.
    1. قطع طريق القفص الصدري البطني الأيسر والأيمن باستخدام زوج من مقص البدء caudally في خط منتصف الترقوة. باستخدام مقص الجزئي، القطع الحجاب الحاجز التي تعلق على الجزء الأوسط من القفص الصدري البطني وتهجير في وقت لاحق هذا القسم cranially باستخدام ملقط.
    2. تحديد موقع الوريد الأجوف السفلي والقطع مع مقص الجزئي.
  7. اضافة الى وجود إبرة قياس 23 إبرة في البطين الأيسر ويروي مع برنامج تلفزيوني تحت ضغط ما يقرب من 100 ملم زئبقي حتى السائل intravasal واضح تقريبا.
  8. دون إزالة الإبرة، ويروي الآن مع 4٪ من الفورمالين لمدة 10 دقيقة عند ضغط حوالي 100 مم زئبق.
  9. استئصال AVF التي كتبها transecting كل من الشرايين والأوردة مع مقص الجزئي ويغرق في 4٪ محلول الفورمالين O / N.

13. الأنسجة التضمين وباجتزاء

  1. معالجة الأنسجة لالبارافين وفقا لprotoco تصنيع لل. البروتوكول يطبق تتألف مما يلي:
    1. تزج في الإيثانول 70٪ لمدة 1 ساعة على RT. كرر 2X.
    2. تزج في الإيثانول 96٪ لمدة 1 ساعة على RT. كرر 2X.
    3. تزج في الإيثانول 99.5٪ لمدة 1 ساعة على RT. أكرر مرة واحدة.
    4. تزج في الإيثانول 99.5٪ مقابل 1.5 ساعة عند RT.
    5. تزج في زيلين 100٪ لمدة 1 ساعة على RT. أكرر مرة واحدة.
    6. تزج في Parafin لمدة 1 ساعة عند 62 درجة مئوية. كرر 2X.
  2. تضمين AVF في البارافين بحيث يتم الموجه تدفق الجهاز الوريدي عمودي على كاسيت التضمين.
  3. باستخدام مبضع للفحص المجهري، إنشاء 12 مسلسل أقسام يتألف كل منها من 30 أقسام بسمك 5 ميكرون. ثم كل قسم المسلسل، وضع مقطع واحد على تركيب الزجاج واحد بدءا من موقف واحد تصل إلى اثني عشر بشكل منظم بدءا من المنطقة الأقرب إلى مفاغرة.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

بعد إنشاء مفاغرة (الشكل 1)، ينبغي تقييم المباح من قبل الاغلاق وقت قصير من المسالك تدفق الوريدي مع ملقط الأوعية الدموية. عندما مفاغرة هي براءات الاختراع، يجب المسالك القريبة الأوعية الدموية إلى انسداد توسيع بوضوح على نحو نابض. وبالإضافة إلى ذلك، يتم تأكيد المباح باستخدام بالقرب التنظير بالأشعة تحت الحمراء (NIRF) الذي يعمل بشكل فعال باعتبارها الأوعية (الشكل 2). فشل في إجراء العمليات الجراحية يمكن أن يؤدي إلى انسداد مفاغرة كما هو مبين في الشكل (2). يمكن أن يكون سبب هذا الفشل منطقة ضيقة جدا المفاغرة، التواء الأوعية، وعدم كفاية جرعة الهيبارين أو موضع خياطة العرضي الذي يربط الجانب الأمامي من مفاغرة إلى الجانب الخلفي.

على المستوى النسيجي، فإن عملية إعادة الأوعية الدموية في AVF يمكن التحقيق بشكل رائع باستخدام هذا النموذج. إعادة الأوعية الدموية في AVF يحدث نتيجة للزيادة في تدفق الدم والضغط. في الفئران، وتتميز هذه الاستجابة زيادة في محيط (على سبيل المثال، إعادة عرض الخارج) مما يؤدي إلى زيادة في منطقة اللمعية في 2 أسابيع الأولى بعد الجراحة. بعد هذه الأسابيع 2، ومنطقة اللمعية يتناقص تدريجيا بسبب توقف في إعادة الخارج وسماكة الجارية في البطانية الغلالة. تشكيل هذه الآفات تضيقي التقدمية النتائج في انسداد 50٪ من AVF في 4 أسابيع بعد الجراحة. ولذلك، فإن نقطة زمنية المثلى لحصاد AVFs تكون على 2 أسابيع بعد الجراحة، لأنه في هذه المرحلة، والتحليل السليم للاستجابة الأوعية الدموية في براءات الاختراع AVF لا يزال ممكنا. المناعية من الجهاز تدفق الوريدي في 2 أسابيع بعد الجراحة يدل على أن مقصورة الخلوية من البطانية يتكون أساسا من ألفا السلس الأكتين العضلات (α-SMA) خلايا إيجابية (الشكل 3)، كما لوحظ في AVFs البشرية فشلت فضلا 7.

ونظرا لتعقيد الإجراء المجهرية، انها واقعية يحسب لها حساب عطل فني الإجراء في نسبة من الفئران. في أيدينا، كان معدل نجاح العملية 67٪ في البداية. ومع ذلك، مع مزيد من التدريب وزادت هذه النسبة تصل إلى 97٪. وكان السبب الرئيسي لفشل النزف (60٪)، تليها الجلطة الحادة (27٪) وanesthesia- الموت ذات الصلة (13٪). بعد التدريب الكافي، وإجراء العمليات الجراحية يمكن أن يؤديها في حوالي 1 ساعة.

الشكل 1
الشكل 1. مخطط تفصيلي لعملية جراحية (A - T). الخطوات الرئيسية لإنشاء الناجح لAVF. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

إعادة 2 "SRC =" / ملفات / ftp_upload / 53294 / 53294fig2.jpg "/>
الشكل 2. الصور العيانية براءات الاختراع وAVFs مغطاة. (A) وAVF براءات الاختراع مع المشبك الأوعية الدموية على القاصي الشريان السباتي المشترك. (ب) المغطي AVF. (أبيض السهم) يشير إلى اتجاه تدفق الدم. (ج) وAVF براءات الاختراع أظهرت باستخدام الأشعة تحت الحمراء بالقرب من التنظير. (السهم الأحمر) إلى الشريان. (السهم الأزرق) يشير ريدي المسالك التدفق. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل (3)
الشكل 3. stainings النسيجية في الجهاز الوريدي تدفق من AVF في يوم 14 مقابل سفن مراقبة unoperated (A - B). نظرة عامة المورفولوجية باستخدام الهيماتوكسيلين، phloxin والصفرون تظهر زيادة واضحة في محيط السفينة وتضخم باطنة التنمية بعد 14 يوما خلق AVF. (C - D) تلطيخ المناعى يتظاهرون أن غالبية الخلايا الحاضر تضخم باطنة هي ألفا العضلات الملساء الأكتين إيجابية. (L) التجويف. (IH) باطنة تضخم. شريط مقياس: 200 ميكرون الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

يعتبر AVF أن يكون كعب أخيل "في علاج غسيل الكلى. وللأسف، فإن AVF ما زال يعاني من عدد كبير من الفشل 8-10. وعلى الرغم من أبحاث مكثفة حول الآليات الكامنة، يبقى الفيزيولوجيا المرضية المحدد غير معروف. وقد تم بالفعل وصف نماذج الفئران عديدة لفشل AVF في الأدب 2،3،11،12. ومع ذلك، فإن أيا من هذه النماذج تتضمن نهاية الوريدية لتكوين مفاغرة الجانب الشرياني الذي هو الأكثر تستخدم في الوضع السريري. وهذا مهم جدا لأن التعريف الدورة الدموية الناتجة يلعب دورا مهما في إعادة تشكيل الأوعية الدموية. وعلاوة على ذلك، تستخدم بعض النماذج صفعة الاصطناعية للاتصال بين الشريان والوريد 2،11، والتي لا يتم استخدامها في إعداد سريرية.

لتحسين أهمية سريرية، ونحن بالتالي تم وضع نموذج الفئران التي تم إنشاؤها نهاية الوريدية من جانب واحد إلى مفاغرة الجانب الشريانية بين فرع من juguالوريد لار والشريان السباتي المشترك مع خيوط متقطعة 6. في هذا النموذج التغييرات histomorphological حاسمة لوحظت بما في ذلك في الخارج وإعادة عرض التدريجي تضخم باطنة، مما يؤدي في النهاية إلى فشل AVF.

وهناك جانب حاسم من العملية الجراحية هو بروتوكول التخدير. فمن المستحسن استخدام الأيزوفلورين التخدير استنشاق، وهذا هو وسيلة آمنة وسهلة للحصول على فترات طويلة من التخدير. وهذا الأخير له أهمية خاصة لمرحلة التدريب التي الإجراء كله يمكن أن يستغرق فترة تصل الى 3 ساعات.

من أجل إنشاء غرفة اللازمة لالوريد العبور تدفق للناسور شرياني وريدي، لا بد من رفعه عضلة القصية الترقوية الخشائية المماثل.

وفيما يتعلق التعامل مع السفينة أثناء الجراحة، يجب أن يتم تنفيذ تشريح السفن بطريقة حادة باستخدام ملقط. استخدام ملقط الوعائية المتخصصة المستقيمة صecommended للتعامل المباشر والتلاعب في السفن لأنها توفر المزيد من الدقة وإنتاج الأضرار الميكانيكية أقل نظرا لطرف مستدير. استخدام المواضيع خياطة كما الحلقات سفينة جنبا إلى جنب مع مرقئ يمكن أن تساعد في معالجة الأنسجة آمنة وعلاوة على ذلك، في تقديم الأنسجة بطريقة مثلى عندما تستخدم على النحو ناحية ثالثة وهو أمر حاسم لذلك لا يمكن أن يؤديها هذا الإجراء دون أي مساعدة مباشرة.

مما لا شك فيه، فإن الخطوة الأكثر صعوبة في إجراء هي مواضع خياطة بين الشريان والوريد. يجب الحرص على عدم خياطة -side "العودة" للالتحام مع -side "الجبهة"، وهذا سيؤدي إلى تضييق مفاغرة التي يمكن أن تؤدي إلى الفشل المبكر للAVF. لمنع هذا من الحدوث، ضع غيض من ملقط الأوعية الدموية بين جدران السفينة من أجل فصل بينهما. صعوبة التقنية يمكن اعتبار وجود قيود من هذا النموذج. ومع ذلك، فإننا لا أعتقد عشرفي هذا الإجراء هو أكثر صعوبة من النموذج الذي هو حاليا الأكثر استخداما على نطاق واسع 3،6.

من الصعب أن أبدي ملاحظة عامة عن حجم العينة للدراسات المستقبلية، حيث أن حجم العينة المحسوب لا تعتمد فقط على التباين بين الحيوانات ولكن أيضا على 'قوة' للتدخل. ونحن نقدر أن حجم مجموعة من حوالي 10 الفئران (باستثناء الفئران التي تسقط من الدراسة بسبب عطل فني في AVF) ينبغي أن يكون كافيا للدراسات التي تركز على دور جين معين في فشل AVF. في الآونة الأخيرة، كنا قادرين على الحصول على نتائج كبيرة مع متوسط ​​حجم مجموعة من 10 حيوانات في دراسة عن دور الإيلاستين في الفئران AVF إعادة عرض (13).

واحد من جوانب نموذج الفئران لدينا يتطلب مزيدا من المناقشة. ومن المعروف أن الوسط اليوريمي في المرضى الذين يعانون من مرض الكلى المرحلة النهائية يساهم في العديد من الأمراض الأوعية الدموية بما في ذلك hyperplasi باطنة وريديحتى قبل غسيل الكلى جراحة وصول 14-16. هذا النموذج الحالي لا يتضمن الوسط اليوريمي. ولذلك، فإن إدماج نموذجا للفشل الكلوي المزمن 17 سيكون خطوة مضافة القيمة لمواصلة تحسين صحة هذا نموذج الفئران.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

الكتاب ليس لديهم ما يكشف.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Dissecting microsocpe Leica M80
Forceps Medicon 07.61.25
Vascular forceps S&T JFL-3D.2
Vascular forceps S&T D-5a.2
Forceps Roboz SS/45
Micro scissor 5 mm blade Fine science tools 15000-08
Micro scissor 2 mm blade Fine science tools 15000-03
Scissor Medicon 05.12.21
Clip applier 1 S&T CAF-4
Vascular clamp 1 S&T B-1V
Clip applier 2 BBraun FE572K
Vascular clamp 2 BBraun FE740K
Hemostatic forceps BBraun BH110
10.0 sutures BBraun G1117041
6.0 sutures BBraun 768464
Cauterizer Fine science tools 18010-00
Needle holder Medicon 11.82.18
Ocular ointment Pharmachemie 41821101
Chlorhexidine tincture 0,5% Leiden University Medical Center NA
Heparin Leo Pharma 012866-08
Buprenorphin RB Pharmaceuticals  283732
Isoflurane Pharmachemie 45,112,110
Anesthesia mask Maastricht university custom made
Midazolam Actavis AAAC6877
Dexmedetomidine Orion 141-267
Fentanyl Bipharma 15923002
Continuous anaesthetic induction chamber Vet-tech solutions AN010R

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Rotmans, J. I. Animal Models for Studying Pathophysiology of Hemodialysis Access. The Open Urology & Nephrology Journal. 7, 14-21 (2014).
  2. Kwei, S., et al. Early adaptive responses of the vascular wall during venous arterialization in mice. Am.J.Pathol. 164 (1), 81-89 (2004).
  3. Castier, Y., et al. Characterization of neointima lesions associated with arteriovenous fistulas in a mouse model. Kidney Int. 70 (2), 315-320 (2006).
  4. Krishnamoorthy, M. K., et al. Hemodynamic wall shear stress profiles influence the magnitude and pattern of stenosis in a pig AV fistula. Kidney Int. 74 (11), 1410-1419 (2008).
  5. Ene-Iordache, B., Cattaneo, L., Dubini, G., Remuzzi, A. Effect of anastomosis angle on the localization of disturbed flow in 'side-to-end' fistulae for haemodialysis access. Nephrol. Dial. Transplant. 28 (4), 997-1005 (2013).
  6. Wong, C. Y., et al. Vascular remodeling and intimal hyperplasia in a novel murine model of arteriovenous fistula failure. J.Vasc.Surg. 59 (1), 192-201 (2014).
  7. Rekhter, M., Nicholls, S., Ferguson, M., Gordon, D. Cell proliferation in human arteriovenous fistulas used for hemodialysis. Arterioscler. Thromb. 13 (4), 609-617 (1993).
  8. Falk, A. Maintenance and salvage of arteriovenous fistulas. J. Vasc. Interv. Radiol. 17 (5), 807-813 (2006).
  9. Tordoir, J. H., et al. Prospective evaluation of failure modes in autogenous radiocephalic wrist access for haemodialysis. Nephrol. Dial. Transplant. 18 (2), 378-383 (2003).
  10. Dixon, B. S., Novak, L., Fangman, J. Hemodialysis vascular access survival: upper-arm native arteriovenous fistula. Am. J. Kidney Dis. 39 (1), 92-101 (2002).
  11. Yang, B., Shergill, U., Fu, A. A., Knudsen, B., Misra, S. The mouse arteriovenous fistula model. J. Vasc. Interv. Radiol. 20 (7), 946-950 (2009).
  12. Kang, L., et al. Regional and systemic hemodynamic responses following the creation of a murine arteriovenous fistula. Am. J. Physiol Renal Physiol. 301 (4), F845-F851 (2011).
  13. Wong, C. Y., et al. Elastin is a key regulator of outward remodeling in arteriovenous fistulas. Eur. J. Vasc. Endovasc. Surg. 49 (4), 480-486 (2015).
  14. Kennedy, R., et al. Does renal failure cause an atherosclerotic milieu in patients with end-stage renal disease. Am. J. Med. 110 (3), 198-204 (2001).
  15. Cheung, A. K., et al. Atherosclerotic cardiovascular disease risks in chronic hemodialysis patients. Kidney Int. 58 (1), 353-362 (2000).
  16. Lee, T., et al. Severe venous neointimal hyperplasia prior to dialysis access surgery. Nephrol. Dial. Transplant. 26 (7), 2264-2270 (2011).
  17. Kokubo, T., et al. CKD accelerates development of neointimal hyperplasia in arteriovenous fistulas. J. Am. Soc. Nephrol. 20 (6), 1236-1245 (2009).

Tags

الطب، العدد 108، نموذج حيواني، الفأرة، ناسور شرياني وريدي، وعدم النضج، والوصول إلى غسيل الكلى، باطنة تضخم، وإعادة عرض الخارج، والمجهرية
رواية فأري موديل الفشل شرياني الناسور: العملية الجراحية في التفاصيل
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Wong, C. Y., de Vries, M. R., Wang,… More

Wong, C. Y., de Vries, M. R., Wang, Y., van der Vorst, J. R., Vahrmeijer, A. L., van Zonneveld, A. J., Hamming, J. F., Roy-Chaudhury, P., Rabelink, T. J., Quax, P. H. A., Rotmans, J. I. A Novel Murine Model of Arteriovenous Fistula Failure: The Surgical Procedure in Detail. J. Vis. Exp. (108), e53294, doi:10.3791/53294 (2016).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter