Summary
Den amyloid-β (Ap) -injiceret dyremodel muliggør administration af en defineret mængde og art af Ap fragmenter og reducerer individuelle forskelle inden for hver studiegruppe. Denne protokol beskriver intracerebroventrikulær (ICV) injektion af Ap uden stereotaktiske instrumenter, muliggør produktionen af Alzheimer-lignende adfærdsmæssige abnormiteter i normale mus.
Introduction
Da amyloid-β (Ap) er en patologisk kendetegn for Alzheimers sygdom (AD), har udviklingen af AD dyremodeller fokuseret på neurale overekspression af Ap. Fordi mutationer i amyloid precursor protein (APP) eller presenilin (PS) føre til forstyrrelse af Ap ligevægt og i sidste ende til patogenesen af familiær AD 1, har musemodeller involverer APP eller PS genmutationer blevet almindeligt accepteret. Blandt den brede vifte af transgene mus, prototypiske musemodeller omfatter følgende: Tg2576, PDAPP, APP / PS1 og APP23. I hjernen disse mus udviser generelt Ap aggregation og vinder senile plaques; plakdannelse efterfølges af betydelig kognitiv svækkelse, således at de viser dårlige resultater i adfærdsmæssige tests af indlæring og hukommelse. Frembringelsen af at anvende transgene mus, der naturligt efterligne menneskelige AD patologi har dermed bidraget til AD forskning samfund ved at lade os overvåge progression af disease. Men ved hjælp transgene mus er uøkonomisk og tidskrævende, fordi det tager måneder for mus for at udvikle Ap plaques og endnu længere tid at vise Ap-induceret synaptic eller adfærdsmæssige abnormiteter 2,3. Oprindeligt udviklet som et alternativ til at overvinde manglerne i transgene musemodeller, er ikke-transgene modeller også almindeligt anvendt på grund af deres forskellige fordele. Patogen-induceret AD modeller kan fremstilles ved direkte injektion af Ap i hjernen, hvorimod AD-lignende kognitive mangler også kan udløses af andre kemiske og fysiske midler-såsom injektion af neurotoksiske forbindelser, såsom scopolamin, induktionen af læsioner i kognition-relaterede områder som hippocampus, eller ved kortikal skade 4. Men den ikke-patogene induktion af kognitiv svækkelse ikke præcist afspejler grundlæggende patofysiologi af AD; I stedet er det kun efterligner sine symptomatiske resultater. Derimod kan et patogen-induceret AD modellen, A46; -injiceret musemodel, kan ikke kun vise AD-lignende adfærdsmæssige abnormiteter, men kan også udvise Ap patologi, det fælles træk deles af familiær og sporadisk AD.
Trods problemerne med at visualisere Ap plaques i hjernevævet, den største fordel for Ap-injicerede model, der gør det attraktivt for AD undersøgelse er dens styrbarhed. Forskere kan frasortere de individuelle forskelle i musemodeller, der kan føre til fejlagtige data i narkotikarelaterede undersøgelser. Rettidig lægemiddelbehandling er aktiveret afhængigt af mekanismen af kandidat narkotika; at udarbejde, kan en inhibitor af AB sammenlægning anvendes før injektionen af Ap. Derudover kan undersøgere antage, at den patogene transformation, der opstår efter Ap injektion er afledt af Ap eksponering fordi de andre faktorer er tæt kontrolleret, herunder individuelle forskelle.
I denne protokol, en levende beskrivelse af how at fremkalde en AD-lignende fænotype i normale mus via Ap intracerebroventrikulær (ICV) injektion uden stereotaktiske instrumenter præsenteres. Minimering indsættelse-provokeret skader på hjernevævet er afgørende for at forhindre muligheden for strukturelle skader og læsion-induceret inflammation. En manglende evner i muse håndtering medfører uventet neuronal skade. Endvidere teknikker, der muliggør en passende vinkel og dybde, der skal opnås under injektionen er særligt vigtigt at omgå hyppige fejl. Foruden en detaljeret, levende forklaring af ICV injektion pålideligheden af modellen produceret af den følgende protokol også illustreret i de følgende afsnit. Følgende protokol kan være en pålidelig og let forståelig værktøj, der bidrager til AD forskning, hvilket giver en springbræt, der i sidste ende kan føre til en meningsfuld opdagelse for AD samfund.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle eksperimenter dyr blev udført i overensstemmelse med National Institutes of Health Guide til Pleje og anvendelse af forsøgsdyr (NIH Publications nr 8023, revideret 1978) og med Animal Care og brug Udvalg for Institutional Animal Care og brug Udvalg KIST (Seoul, Korea).
1. Dyrepræparation
- Forbered en gruppe af 7 uger gamle ICR-mus (eller C57BL / 6).
- Lad musene gå gennem et akklimatisering proces i 3-7 dage efter transport at genoprette homeostase. Generelt placere en gruppe på 4-5 mus i hvert bur og vedligeholde dem ved 22-23 ° C og 40% fugtighed, med en 12/12 timers lys / mørke-cyklus. Giv vand og mad ad libitum.
Bemærk: akklimatisering proces er afgørende for kunne gendanne fra stress af forsendelse og tilpasning til nye boliger, mad, vand, og lugter samt en ny bur og lys cyklus. I dette eksperiment blev mus anbragt i Individuelt ventilerede bure (IVCs) placeret i Specifikke Patogen Free (SPF) -Grade facilitet - Vejes hver mus og udelukke personer, hvis vægt afviger ± 10% fra gennemsnittet.
- Opdel emnerne i to grupper: et køretøj-injicerede gruppe (Ap (-)) og en Ap-injicerede gruppe (Ap (+)). Hvis forsøget er at teste effektiviteten af et bestemt lægemiddelkandidat, opdele musene i fire grupper: (1) Ap (-) / lægemiddel (-), (2) Ap (-) / lægemiddel (+), (3) Ap (+) / lægemiddel (-), og (4) Ap (+) / lægemiddel (+).
2. Ap Peptid Præparation
- Behandl Ap peptider, der er afledt ved kemisk syntese 5 eller fra kommercielle kilder, med præ-kølet 1,1,1,3,3,3-hexafluor-2-propanol (HFIP) for at opløse eventuelle aggregater og for at gøre peptiderne homogene 6 .
- Sonikeres Ap / HFIP opløsning i et vandbad-sonikator i 5 min (ved stuetemperatur), forsigtigt vortex, og inkuber opløsningen i 30 minutter ved stuetemperatur. Fjern HFIP helt via fordampning med nitrogenog opbevar den homogene Ap ved -80 ° C indtil anvendelse.
- Forbered Ap monomerer: (. 100 uM Ap, 10% DMSO, 90% PBS) til 1 mM Ap dimethylsulfoxid (DMSO) lager og fortynde det 10-fold i phosphatbufret saltvand (PBS)
- Forbered Ap oligomerer.
- Inkubér Ap monomeropløsningen (indeholdende Ap (1-42) eller AB (1-40)) (trin 2.2.) Ved 37 ° C i 3 eller 7 dage.
- Placer Ap opløsning i et forseglet rør i en lynlås pose indeholdende et vådt stykke køkkenrulle for at tilvejebringe en befugtet miljø, der forhindrer vand fordampning i inkubationstiden.
- Bekræft tilberedte Ap oligomerer via natriumdodecylsulfat-polyacrylamidgelelektroforese (SDS-PAGE) med foto-induceret tværbinding af umodificerede proteiner 6.
- Forbered kontrol PBS-opløsning indeholdende 10% DMSO for køretøjet ICV injektion.
3. Sprøjte Forberedelse
Bemærk: Kompression af Parafilm vil føre til dybden af injektionen overstiger 3,6 mm ventralt. For at forhindre at Parafilm i at blive komprimeret under indføring af kanylen, tæt wrap nålen flere gange.
4. Ap-injicerede mus Model Fremstilling
Bemærk: Rengør operationsfeltet med et desinfektionsmiddel til at opretholde sterile forhold og sterilisere alle kirurgiske instrumenter til ICV injektion ved hjælp 70% ethanol og UV eksponering.
- Bedøver musen ved intraperitoneal injektion af en blanding af xylazin (20 mg / kg) og tiletamin · HCI / zolazepam · HCl (80 mg / kg) før ICV injektion. Placer musen på en varm mat til at opretholde sin kropstemperatur mens bedøvet og bekræft tilstrækkelig anæstesi ved at vurdere mund- knivspids respons.
- Anvend sterilt PBS falder til begge øjne til at forhindre hornhindens tørhed under proceduren (figur 1B).
- Forbered to spejle ved at trække flere lodrette linjer på deres overflader i tilfælde af difficuLTY injicere sprøjten vinkelret.
- Placer en spejling (M1) lige ved siden af kroppen af musen, og den anden (M2) foran hovedet. Hold M1 parallelt med imaginære midtlinie mellem de to øjne musen og arrangere M2 vinkelret på M1, således at de to planer danner en vinkel på 90 ° (fig 1C). Placer M1 på venstre side af musen, hvis forskeren er højrehåndet. Placer M1 på højre side af musen, hvis forskeren er venstrehåndet.
- Spray 70% ethanol på midten af panden på musen og gnid det med tørre vatpinde. Fugt ikke for stort et område af panden for at undgå at nedsætte kropstemperaturen på grund af fordampning af alkoholen.
- Tør det samme område på panden med 2% klorhexidin løsning ved hjælp af en ren vatpinde. Gentagne scrubbings med alkohol og chlorhexidin til alt tre gange hver.
Bemærk: Hvis det er nødvendigt, barbere hår på panden af musen for at minimere muligheheden for forurening - Find bregma.
- Brug af tommelfinger og pegefinger, stramt holde huden i panden, lige over de to øjne til den grad, at begge øjne stikker. Træk huden tilbage at gøre panden stram og minimere kraniet bevægelser under huden.
- Form en usynlig trekant ved at tildele tre toppunkter: de to øjne med musen og det punkt, hvor tommelfinger og pegefinger mødes, bregma. (Figurerne 1B, Rød pil: bregma)
- Find indsprøjtningsstedet med målebånd: -1,0 ± 0,06 mm posteriort for bregma, 1,8 ± 0,1 mm lateralt for sagittale sutur, og 2.4 mm i dybden (Figur 1D, blå stjerner: injektion punkter i hver halvkugle). (For B6 mus: -0.9 mm posterior, 1,7 mm lateralt og 2,2 mm i dybden)
- Fyld sprøjten med 10 pi Ap opløsning eller køretøj med overskydende opløsning for at undgå lufttilførsel utilsigtet.
- Placér sprøjten på the injektion punkt (beskrevet i protokol 4.7). Gør sprøjten vinkelret på planet af injektionsstedet. Juster reflekterede billeder af sprøjten i begge spejle med de trukne linjer på spejlene fra et fast perspektiv (fig 1C).
- Begynd nålen indføres indtil parafilm indpakningen når huden.
- Hold hånd, der holder sprøjten stabil og bruge anden side at injicere 5 ul af Ap opløsningen eller køretøj, langsomt over 5 sek uden pauser. Sørg for, at sprøjten forbliver vinkelret hele. Efter endt injektion, vent 3 og 5 sek, før du fjerner sprøjten for diffusion.
- Antages det oprindelige trekant position, udøver moderat tryk for at beskytte kraniet fra unødvendige bevægelser. Tag sprøjten uden at vippe.
- Placer Ap-injicerede mus på varm pad til nyttiggørelse og bevare sin brystleje. Lad ikke musen uden opsyn, indtil det kommer til bevidsthed og ikke returnere mOuse til et bur, der indeholder ikke-kirurgisk mus, indtil den er fuldt tilbagebetalt.
- Vask sprøjten ifølge trin 3.3-3.6.
- Postoperativt overvåge mobilitet musene og tjek for ethvert tegn på infektion eller sygdom i mus i 5-7 dage.
Figur 1. Ap Injektion i ICV region (A) Parafilm-indpakket sprøjtenål sammenlignet med et umodificeret sprøjtenål.; (B) PBS falder på øjnene for at forhindre tørhed; den er dannet på panden af mus med tommelfingeren, pegefingeren trekant, og de to øjne mus samt den imaginære midterlinjen lige langt fra hvert øje; (C) to spejle (M1 og M2) med flere lodrette linjer trukket på overfladerne til at bistå vinkelret injektion af kanylen; (D) trekanten med injektionspunkter, indiskated som blå stjerner (-1,0 ± 0,06 mm fra bregma og 1,8 ± 0,1 mm sagittalt) på hver halvkugle af mus; Grøn pil: parafilm, Rød pil: bregma Klik her for at se en større version af dette tal.
5. Bekræftelse af Ap Injektion af Y-labyrint og Brain Analyser
- Vurdere arbejdshukommelse af Ap-injicerede mus ved Y-labyrint test 3,7,8
- Vente 3 dage efter injektionen for indtræden af hukommelsessvigt.
- Udfør Y-labyrint afprøves med en sort plast labyrint med tre identiske arme mærket A, B, og C, som hver især grene ud i en 120 ° vinkel fra midten af labyrinten (bredde x længde x højde, 10 cm x 40 cm x 12 cm).
- Placer en mus i starten arm (arm A) og lade emnet frit udforske labyrinten i 8 min.
- Mål antallet af poster i hver arm og beregne alternation på hvert emne 3,9.
- Direkte undersøge postmortem hjerner til at kontrollere, om injektionen målrettet ICV regionen korrekt.
- Bedøver musen efter samme procedure som beskrevet i afsnit 4.1. Derefter ofre musen ved cervikal dislokation.
- Halshugge musen og fjerne huden for at blotlægge kraniet ved kirurgiske sakse. Fjern væv og muskler fra kraniet.
- Foretag nedskæringer på den lambdoid sutur (mellem parietale og interparietal knogler) uden at beskadige hjernen. Fjern occipital og interparietal knogler, så parietal og frontal knogler. Fjern kranieknoglen med pincet og isolere hjernen fra kraniet ved at løfte op meninges.
- Vask hjernen i afkølet sterilt saltvand og skære ICV region af hjernen i den koronale retning med en kirurgisk kniv (figur 2).
- Bekræft injektionsregionen baseret på sporet af nåleindføring påhjernevæv (figur 2). Kontroller, om nålen spor har nået et af hjertekamrene. Hvis nålen spor ikke opfylder eller passerer gennem hjertekamrene, udelukke, at motivets data fra analyse af de eksperimentelle resultater.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Dette afsnit viser eksempler på de resultater, der kan opnås ved bekræftelse af Ap-aggregering og Y-labyrint vurdering af hukommelsessvigt. Brug af fuld længde Ap (1-42) peptid af 42 aminosyrer, blanding af Ap-monomerer, oligomerer og fibriller (figur 3) blev produceret. Gennem HFIP-induceret monomerisering trin blev relativt ensartede monomerer (bane B) opnået. Efter de 7 dages inkubation, diverse størrelser af Ap aggregater (bane C) udviklede. Trimerer og tetramerer var den dominerende art blandt de oligomere former af Ap. Rumlig arbejdshukommelse blev vurderet i Ap-injicerede mus via vekslen i Y-labyrint-testen. Sekvensen af armvalg og antallet af samlede arm poster blev registreret, mens hver mus lov til frit udforske labyrinten. Jo mere intakt den kognitive evne bør mere musen har en tendens til at komme ind i mindre nylig besøgte arm, alternating sin arm valg. Ap-injicerede mus udviste signifikant lavere vekslen satser, der angiver udviklingen af kognitive mangler (figur 4).
Figur 2. Eksempler på ICV injektioner (A) Illustration af hjernesnit i coronal retning repræsenterer placeringen af bregma 10 og acceptabel injektion interval (-1.0 ± 0,06 mm fra bregma og 1,8 ± 0,1 mm sagittalt). (B - C) et tilfælde af vellykket ICV injektion (B: ovenfra af hele hjernen, C: coronal snit, der viser laterale ventrikler fyldt med blåt farvestof); (D - E) et tilfælde af mislykket ICV injektion (D: ovenfra af hele hjernen, E: coronal snit, der viser den tredje og fjerde ventricles fyldt med blåt farvestof) Blå cirkel og pil: injiceres site, blå stjerne:. potentiel injektion punkt Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 3. Bekræftelse af udarbejdet en p arter via SDS-PAGE. Ap peptider blev separeret ved SDS-PAGE med foto-induceret tværbinding af umodificerede proteiner. Peptid bånd blev visualiseret ved sølvfarvning; bane (A) protein markør, bane (B) Ap monomer (før inkubation), og bane (C) rugede Ap arter. Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 4. Y-labyrint adfærdsmæssige tests. Procent vekslen af Aβ- eller vehikel-injicerede mus grupper på Y-labyrint-test. White solid graf: køretøj (Ap (-), n = 10). Stribet graf: Ap-injiceret (Ap (+), n = 9). Statistiske analyser blev udført med én-vejs ANOVA efterfulgt af Bonferroni post-hoc sammenligninger (* P <0,05, ** P <0,01, *** P <0,001). Fejlsøjlerne repræsenterer SEMs. Klik her for at se en større version af dette tal.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Det vigtigste skridt i denne protokol er ICV injektion af Ap. Denne protokol er udviklet til at injicere Ap ind ICV-regionen af mus uden stereotaktiske instrumenter 11,12. Før du starter et eksperiment, bør en foreløbig periode med praksis injektioner med et blåt farvestof i stedet for Ap finde sted for at opnå tilstrækkelig fingerfærdighed. Umiddelbart efter injektionen, er det nødvendigt at kontrollere, om pigmentet injektion blev udført korrekt. Forsigtigt tage hjernen og kontrollere, om det relevante område blev farvet blå. Det pigmenterede linje skal nå til, men ikke overskride, dybden af ICV-regionen. , Foreslås Mindst en succesrate på 90%, som opnås typisk efter 50 eller flere ICV injektioner. Under ICV injektion, undgå at beskadige blodkarrene ved at injicere sinus sagittalis (tæt på bregma nulpunktet).
Efter Ap injektion, statistisk signifikant hukommelsessvækkelse var observered mellem Ap-injicerede gruppe og kontrolgruppen ved hjælp Y-labyrint adfærdsmæssige tests. Forskellige typer af adfærdsmæssige eksperimenter kan anvendes til at teste graden af kognitiv forringelse, såsom Morris water maze 13, objekt anerkendelse, og passive undgåelse undersøgelser samt frygt condition. Morris water maze er udnyttet til at undersøge hippocampale rumlige hukommelsessvigt, hvorimod der anvendes frygt conditioning at teste hippocampus-afhængig associativ indlæring og amygdala-hippocampal kommunikation. Objekt anerkendelse af ét særligt formål er egnet til måling af AD-relaterede kognitiv svækkelse, og passiv undgåelse kan anvendes til at teste et dyrs evne til at huske den afskrækningsmiddel stimulus 3. Det er vigtigt at forberede mus af samme vægt og alder, hvis de vil blive udsat for adfærdsmæssige tests anvender elektriske stød, såsom angst konditionering og passive undgåelse tests. Det anbefales, at de nævnte prøver skal udføressenest 10 dage efter indtræden af hukommelsessvigt. Da det er bekræftet, at AB er fundet i hippocampus efter ICV injektion 14, er yderligere undersøgelser berettiget at finde adfærdsmæssige forsøg med andre områder af hjernen med affinitet ICV-injicerede Ap.
Udarbejdelsen af Ap-peptider og timingen af ICV injektion skal omhyggeligt designet afhængig af den eksperimentelle formål, og bør omfatte overvejelser af: (1) de arter af Ap (monomerer, oligomerer, fibriller, eller en blanding); (2) isoformen af Ap (Aβ40, Aβ42, afkortet AP25-35, og andre) 15-18; (3) de tidspunkter af Ap injektion; og (4) latenstiden efter Ap eksponering. Eksempelvis anbefales injektion af Ap-monomerer hvis mus vil blive udsat for indgivelse af lægemidler, som hæmmer de unormale aktiviteter Ap monomerer, såsom aggregering. Injektionen af opløselige Ap oligomerer er suggested hvis undersøgelsen er at vurdere neurotoksicitet eller inflammation induceret af oligomerer. Injektionen af stærkt aggregerede Ap arter anbefales, hvis undersøgelsen har til formål at studere uopløselig Ap og relateret patologi 7,19. Hvis et eksperiment har til formål at teste styrken af Ap aggregation hæmmere, bør forbindelsen generelt påføres før eller sammen med, at Ap, der bør gives Ap-clearing midler eller anti-inflammatoriske forbindelser efter Ap injektion.
Sammenlignet med transgene eller kroniske modeller af AD, Ap-injicerede musemodel giver forskere mulighed for at styre koncentrationen af Ap, indtræden af AD-lignende fænotyper, og den samtidige udvikling af et stort antal demente mus. Disse fordele giver frihed med hensyn til eksperimentelt design og en bred vifte af muligheder for forskere. I betragtning af patogenesen af AD nærmere angår kronisk eksponering snarere end en pludselig stigning i A &# 946; koncentration i hjernen, anbefales yderligere forsøg under anvendelse af transgene modeller til at styrke de konklusioner, der er afledt af anvendelse af Ap-injicerede musemodeller. Derudover, da tau-proteinet er en anden væsentlig årsag til AD, udvikling af tau og Ap injektion musemodeller kan yderligere fremme AD Research Society.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Acknowledgments
Denne forskning blev støttet af en bevilling på Korea Health Technology R & D Project via Korea Health Industry Development Institute (KHIDI), finansieret af Ministeriet for Sundhed & Velfærd, Republikken Korea (tilskud nummer: H14C04660000).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| ICR mouse | Orientbio | male, 6-8 weeks, 27-29 g of body weight | |
| C57BL/6 mouse | Orientbio | male, 6-8 weeks, 21-23 g of body weight | |
| Amyloid-beta1-42 | in house synthesis | stock concentration: 1 mM/DMSO, injected concentration: 100 μM/10% DMSO and 90% PBS | |
| ICV injection syringe (26s gauge) | Hamilton | 80308 | |
| Evans blue dye (EBD) | abcamBIochemicals | ab120869 | 1% EBD in PBS |
| DMSO | Sigma | D2650 | |
| PBS | gibco | 10010-023 | |
| Gradi-GelTM II Gradient PAGE Analysis Kit | ELPiS Biotech | EBS-1056 | 15% Gel |
| Precision Plus ProteinTM Dual Xtra Standards | Bio-Rad | 161-0377 | |
| Silver-Staining Kit | GE-Healthcare | 17-1150-01 | |
| LabDiet | Orientbio | 5053 |
References
- Kam, T. I., Gwon, Y., Jung, Y. K. Amyloid beta receptors responsible for neurotoxicity and cellular defects in Alzheimer's disease. Cell Mol Life Sci. 71, 4803-4813 (2014).
- Elder, G. A., Gama Sosa, M. A., De Gasperi, R. Transgenic mouse models of Alzheimer's disease. Mt Sinai J Med. 77, 69-81 (2010).
- Bryan, K. J., Lee, H., Perry, G., Smith, M. A., Casadesus, G. Methods of Behavior Analysis in Neuroscience Frontiers in Neuroscience. Buccafusco, J. J. , (2009).
- Van Dam, D., De Deyn, P. P. Animal models in the drug discovery pipeline for Alzheimer's disease. Br J Pharmacol. 164, 1285-1300 (2011).
- Choi, J. W., Kim, H. Y., Jeon, M., Kim, D. J., Kim, Y. Efficient access to highly pure beta-amyloid peptide by optimized solid-phase synthesis. Amyloid. 19, 133-137 (2012).
- Rahimi, F., Maiti, P., Bitan, G. Photo-induced cross-linking of unmodified proteins (PICUP) applied to amyloidogenic peptides. J Vis Exp. , (2009).
- Kim, H. V., et al. Amelioration of Alzheimer's disease by neuroprotective effect of sulforaphane in animal model. Amyloid. 20, 7-12 (2013).
- Jackson, L. L. VTE on an elevated T-maze. J Comp Psychol. 36, 9 (1943).
- Kim, H. Y., et al. Taurine in drinking water recovers learning and memory in the adult APP/PS1 mouse model of Alzheimer's disease. Sci Rep. 4, 7467 (2014).
- Paxinos, G., Franklin, B. J. The Mouse Brain in Stereotaxic Coordinates. 2nd edn. , Academic Press. (2001).
- Ledo, J. H., et al. Amyloid-beta oligomers link depressive-like behavior and cognitive deficits in mice. Mol Psychiatry. 18, 1053-1054 (2013).
- Laursen, S. E., Belknap, J. K. Intracerebroventricular injections in mice. Some methodological refinements. J Pharmacol Methods. 16, 355-357 (1986).
- Bromley-Brits, K., Deng, Y., Song, W. Morris water maze test for learning and memory deficits in Alzheimer's disease model mice. J Vis Exp. , (2011).
- Figueiredo, C. P., et al. Memantine rescues transient cognitive impairment caused by high-molecular-weight abeta oligomers but not the persistent impairment induced by low-molecular-weight oligomers. J Neurosci. 33, 9626-9634 (2013).
- Haley, T. J., McCormick, W. G. Pharmacological effects produced by intracerebral injection of drugs in the conscious mouse. Br J Pharmacol Chemother. 12, 12-15 (1957).
- Harkany, T., et al. Neuroprotective approaches in experimental models of beta-amyloid neurotoxicity: relevance to Alzheimer's disease. Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry. 23, 963-1008 (1999).
- Wang, D., et al. The allosteric potentiation of nicotinic acetylcholine receptors by galantamine ameliorates the cognitive dysfunction in beta amyloid25-35 i.c.v.-injected mice: involvement of dopaminergic systems. Neuropsychopharmacology. 32, 1261-1271 (2007).
- Yamada, K., Nabeshima, T. Animal models of Alzheimer's disease and evaluation of anti-dementia drugs. Pharmacol Ther. 88, 93-113 (2000).
- Cho, S. M., et al. Correlations of amyloid-beta concentrations between CSF and plasma in acute Alzheimer mouse model. Sci Rep. 4, 6777 (2014).
