Summary
Cette étude rapporte une méthode efficace de la cellule adipeuse endoscopiques dérivée du tissu stromal (ADSC) feuillet transplantation pour la prévention de la sténose oesophagienne après une dissection étendue endoscopique sous-muqueuse (ESD) dans un modèle porcin.
Abstract
Au cours des dernières années, la cellule-feuille construction a suscité un grand intérêt dans la médecine régénérative, notamment pour les procédures de chirurgie reconstructive. Le développement des technologies diversifiées, combinant des cellules stromales dérivées de tissu adipeux (ADSCs) avec diverses biomatériaux a conduit à la construction de nombreux types de substituts du génie tissulaire, tels que les os, le cartilage et les tissus adipeux de rongeurs, porcine ou ADSCs humaines. dissection prolongée oesophagienne endoscopique sous-muqueuse (ESD) est responsable de la formation de sténose de l'œsophage. la prévention des Rétrécissement reste difficile, sans traitements efficaces disponibles. Des études antérieures ont rapporté l'efficacité de la muqueuse cellulaire feuilles transplantation dans un modèle canin et chez les humains. ADSCs sont attribuées des propriétés anti-inflammatoires, des effets immunitaires locales de modulation, néovascularisation induction, et les capacités de différenciation en mésenchymateuses et lignées non-mésenchymateuses. Cette étude originale décrit la tra endoscopiquensplantation d'une construction de génie tissulaire ADSC pour empêcher sténose de l'œsophage dans un modèle porcin. La construction ADSC est composée de deux feuilles ADSC allogéniques en couches les unes sur les autres sur une membrane de support en papier. Les ADSCs ont été marqués avec le fluorophore PKH67 pour permettre endomicroscopie laser confocale à base de sonde (pCLE) suivi. Le jour de la transplantation, à 5 cm et une ESD hémi-circulaire connu pour induire œsophage a été réalisée. Les animaux ont été immédiatement transplantées par voie endoscopique avec 4 constructions ADSC. L'adhérence complète des constructions ADSC a été obtenu après 10 min d'application douce. Les animaux ont été sacrifiés au jour 28. Tous les animaux ont été transplantés avec succès. Transplantation a été confirmée le jour 3 avec une évaluation de pCLE positive. Par rapport aux animaux transplantés, les animaux témoins ont développé des sténoses sévères, avec grand développement du tissu fibrotique, trouble alimentaire plus fréquent, et le gain de poids réduit. Dans notre modèle, la transplantation de allogenic ADSCs, organisés en feuilles doubles de cellules, après ESD prolongée a réussi et fortement associée à un taux de sténose de l'œsophage inférieur.
Introduction
La gestion des tumeurs œsophagiennes superficielles a changé avec le développement de nouvelles techniques endoscopiques. De nos jours, la résection endoscopique est le traitement de première ligne. En effet, elle est associée à la morbidité et de mortalité inférieurs à ceux d' une chirurgie avec des résultats oncologiques égaux 1, 2, 3. La résection endoscopique de la muqueuse (EMR) et muqueux résection endoscopique (ESD) sont les techniques les plus couramment utilisés. Dans le cas d'une tumeur superficielle étendue, l'EDD est préférable. Par rapport à EMR, ESD permet en bloc résection, indépendamment de la taille de la lésion et de la forme 4, 5, 6. La principale complication tardive de l'EDD est la formation de sténose de l'œsophage, ce qui se produit généralement entre une et deux semaines après la résection. Des études récentes publiées ont montré que la formation de sténose est corrélée à lataille de la résection. La Endoscopic Société japonaise recommande d'éviter l'EDD taille est supérieure à ¾ de la circonférence de l'œsophage, car ils sont associés au développement de sténoses dans plus de 90% des cas et sont responsables de troubles alimentaires graves et la détérioration importante de la qualité de vie.
La prévention de la sténose de l'œsophage reste difficile. Mécanismes impliqués dans la formation de sténoses ne sont que partiellement connus. Rétrécissement formations semble résulter de l'association de deux mécanismes différents: (1) le recrutement cellulaire pro-inflammatoire et (2) le développement excessif de la fibrose 7. Plusieurs traitements préventifs ont été proposés. Cependant, les résultats ne sont pas satisfaisants, avec peu d' avantages et d' effets secondaires graves , 8, 9. Récemment, une équipe japonaise, Ohki et al. , A proposé de transplanter une feuille cellulaire à une seule couche de cellules de la muqueuse orale autologues dans le Esophcicatrice ageal. La transplantation a été effectuée immédiatement après ESD 10, 11. Ils ont démontré l'efficacité de cette approche novatrice, d'abord dans un modèle canin, puis chez les patients.
cellules adipeuses dérivées de tissu stromales (ADSCs) sont prometteurs en médecine régénérative. Leur application dans plusieurs domaines, a donné des résultats intéressants, notamment dans le processus de cicatrisation. Thérapie ADSC offre plusieurs avantages, car les cellules sont facilement isolés et sont associés à des propriétés anti-inflammatoires, des effets immunomodulateurs locaux, néovascularisation induction et capacités de différenciation en lignées mésenchymateuses et non mésenchymateuses 12, 13, 14.
Dans une précédente étude, notre équipe a démontré l'efficacité de la double ADSC-feuille endoscopique transplantation pour prev sténose oesophagienneention après ESD prolongée dans un modèle porcin 15. Dans cet article, les rapports de construction ADSC-feuille et technique de transplantation endoscopiques sont présentés.
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Protocol
Tous les animaux ont été traités selon le Comité d'éthique de la recherche animale (Lignes directrices du ministère français de l'Agriculture). Le protocole a reçu l'approbation du comité d'éthique local autorisé pour les expérimentations animales à l'Université Paris Descartes (numéro enregistré MESR 2035,02; Faculté de médecine Paris Descartes, Paris, France).
1. ADSC Culture et étiquetage
- Obtenir ADSCs confirmés auprès d'une institution privée. Culture ADSCs allogéniques à 37 ° C et 5% de CO 2 avec du milieu essentiel minimum alpha dont 10% de sérum de veau foetal et 1% d' antibiotiques (pénicilline et streptomycine).
- Obtenir environ 24 x 10 6 ADSCs par animal en utilisant des procédés d'expansion cellulaire standard (37 ° C et 5% CO 2). Récolter les ADSCs en utilisant une solution de trypsine standard (10 ml pour un plat de T150). Effectuer le comptage des cellules avec un hémocytomètre.
- Effectuer étiqueter le jour avant la transplantation en utilisant la pr PKH67 de coloration cellulaireocedure décrit ci-dessous.
NOTE: Le but de la procédure de marquage est de permettre le suivi des cellules après la transplantation.- Afin de marquer 2 x 10 6 ADSCs, préparer la solution A (2 x 10 6 cellules avec 100 pi de diluant C) , et la solution B (4 pi de PKH67 avec 1 ml de solvant C).
- Incuber solutions A et B pendant 2 min. Ensuite, ajouter 100 ul de sérum de veau foetal pendant 1 min.
- Rincer la solution avec 300 ul de RPMI citraté (298,5 pi de RPMI et 1,5 pl de citrate) et centrifuger à 1500 g pendant 5 min. Répéter cette opération 2 fois. Maintenir les cellules marquées et de les protéger de la lumière jusqu'à la construction de la feuille.
2. Double ADSC-feuille Construct
- Le jour avant la transplantation, préparer un plat de 12 puits de culture cellulaire sensible à la température avec 4 ml par puits du milieu de culture cellulaire, décrits ci-dessus, avant PKH-étiquetage. Graine le plat avec 1,5 x 10 6 PKH-labelecellules d par puits et incuber pendant 12 h (37 ° C et 5% de CO 2).
- Le jour de la transplantation, détacher la feuille de cellules confluentes par incubation de la cuvette à la température ambiante pendant 30 min.
- Aspirer doucement une feuille de ADSC avec une pipette et la couche sur un papier hydrophobe (1,5 cm de diamètre). Utilisez ce document comme une membrane de support.
- Saisir une autre feuille de ADSC et déposer délicatement sur le dessus de l'autre pour obtenir une construction à double couche.
- Répétez ces procédures pour obtenir autant de constructions ADSC feuilles selon les besoins (4 par animal).
3. oesophagien Endoscopic dissection sous-muqueuse (ESD)
- Le jour de la transplantation, de pré-traiter avec des médicaments les animaux avec 10 mg / kg de kétamine par voie intramusculaire et les amener à 8 mg / kg de propofol par voie intraveineuse. Ensuite, effectuez l'intubation endotrachéale et maintenir l'anesthésie avec de l'isoflurane 2,5% inhalation.
- Une fois que l'animal est sous anesthésie générale, effectuer des décharges électrostatiques avec un gastroscope, un vidéoscope, et une unité d'électrochirurgie.
- Utilisez un couteau endoscopique et la coagulation douce pour obtenir des marques dorsales hémi-circonférentielle allant de 40 cm à 45 cm de l'arcade dentaire.
- Injecter une solution de glycérol contenant de l'indigo carmin de colorant dans la couche sous-muqueuse pour la séparation de la couche muqueuse de la couche musculaire.
- Utilisez un couteau endoscopique avec le mode endocut I pour obtenir des incisions circonférentielles.
- Utilisez un couteau endoscopique avec le mode de coagulation forcée pour effectuer la dissection sous-muqueuse, le déplacement de l'incision proximale à l'incision distale.
- A la fin de la procédure d'ESD, observer la hémi-circonférentielle, 5 cm de long cicatrice oesophagien exposition de la couche musculaire.
4. Endoscopic Transplantation
- Immédiatement après l'ESD, transplanter endoscopically animaux avec 4 doubles constructions ADSC-feuille.
- Attrapez une construction ADSC-feuille avec pince endoscopique etprotéger pendant le transport vers le site de la plaie à l'aide d'un grand bonnet endoscopique, transparent.
- Appliquer toute la surface de l'ADSC-feuille construit sur le lit de l'ulcère.
- Appliquez doucement la ADSC feuilles construction pendant 10 min pour obtenir une greffe complète et stable. Pour l'application, l'utilisation de pinces endoscopiques ou un capuchon endoscopique et appliquer toute la surface de l'ADSC construire sur la couche sous-muqueuse oesophagienne.
- Répétez cette procédure quatre fois pour chaque animal afin d'obtenir quatre doubles constructions cellule de feuille transplantées et adhérentes.
NOTE: L'objectif est de couvrir approximativement la moitié de la zone blessée.
5. postopératoires Évaluation et suivi
- Pour chaque animal, assurer une analgésie-ESD après l'injection intramusculaire de 0,2 mg / kg de morphine trois fois par jour pour le premier jour et avec un traitement anti-acide de 28 jours de l'ésoméprazole (40 mg / jour). Effectuer une prophylaxie antibiotique avec amoxicilldans (1 g / jour) pendant 7 jours. Autorisez liquides le jour 1 et solides sur le jour suivant.
- Suivi avec les animaux pendant 28 jours. Obtenir des évaluations cliniques quotidiennes en utilisant Mellow Pinkas dysphagie scores 16 et des mesures de variation de poids.
- évaluation des sténoses Multimodal: sous anesthésie générale, les jours programmés 3, 14 et 28, procéder à une évaluation multimodale des sténoses événement.
- Effectuer une évaluation endoscopique en utilisant la description de la cicatrice, la mesure du rétrécissement, et le support de papier de détection de la membrane. Mesurer la sténose en utilisant le gastroscope à traverser le rétrécissement (le diamètre du gastroscope est de 8 mm). Observer la cicatrice, en accordant une attention à l'aspect inflammatoire (érythème des muqueuses, œdème de la muqueuse et la muqueuse des saignements spontanés) et l'absence ou la présence de la membrane du support papier au sein de la cicatrice.
- Appliquer pCLE sonde verte à travers le canal opérateur de gastroscope directement dans le lit de cicatrice. Rechercher un spontanéeet organisé signal vert compatible avec PKH67 marqué ADSC feuilles construction greffe.
- Effectuer 2 incidences orthogonales de baryte œsophagographie avec un cerceau radiologique (avant et l'incidence du côté gauche). Gardez le plus serré incidence pour l' évaluation des sténoses (degré de sténose (%) = [1- (longueur de l'axe court sous une sténose / longueur de l'axe normal dans la sténose) x 100)]) 17, 18.
- Les sacrifices d'animaux.
- Au jour 28, à la fin de la période de suivi, effectuer le sacrifice animal. Alors que l'animal est toujours sous anesthésie générale, injecter 100 mg / kg de phénobarbital par voie intraveineuse. Veiller à la mort des animaux en utilisant l'examen clinique de l'absence d'un rythme cardiaque et de la respiration mouvement.
- Après une exposition de sternotomie et orgue, enlever l'oesophage de chaque sacrifié l'animal (avec 10% de la fixation de la formaline tamponnée, inclusion dans la paraffine, et les articles 4 um d'épaisseur). Colorer les lamesavec hématoxyline et Saffron 15. Numériser les diapositives de l' analyse informatisée et de comparer les groupes d'animaux 15.
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Representative Results
La culture de ADSCs et la procédure pour obtenir la feuille de ADSC est représentée sur la figure 1. La figure 2 montre la construction de la greffe, composé de deux feuilles ADSC en couches les unes sur les autres sur leur membrane support papier. ADSCs ont déjà été marqués avec le fluorophore PKH67 pour permettre la surveillance de la greffe in vivo avec pCLE. La figure 3 montre les différentes étapes d'extension de l' oesophage endoscopique dissection sous - muqueuse, ce qui entraîne une cicatrice de l' œsophage 5 cm et semi-circonférentielle. La figure 4 montre la procédure de transplantation endoscopique. La transplantation a réussi pour tous les animaux après 10 min d'application douce. La figure 5 montre l'évaluation de pCLE positif le jour 3, ce qui confirme le succès de la procédure de transplantation.
La période de suivi a permis de analys sténoses multimodales est. Les différentes évaluations sont montrées dans les figures et le tableau suivants. Par rapport aux animaux témoins, le groupe des animaux transplantés a montré des difficultés alimentaires moins fréquentes et plus le gain de poids au jour 28. Un animal dans le groupe transplanté a développé une sténose oesophagienne sévère par rapport à tous les animaux dans le groupe témoin. Par rapport aux animaux transplantés, les animaux témoins ont développé un tissu fibrotique significatif. Le tableau 1 montre les résultats cliniques et endoscopiques au cours de la période de suivi. La figure 6 montre l'endoscopie et les signes radiologiques à la fin de la période de suivi chez des animaux transplantés et non transplantés. La figure 7 montre les différents résultats histologiques entre les animaux transplantés et de contrôle. Ces données confirment l'efficacité de ADSC-feuille transplantation pour la prévention de la sténose oesophagienne.
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Figure 1. ADSC-feuille Construct. A et B. Early-passage ADSCs dans des boîtes de culture standard avec différents grossissements. feuilles de ADSC ont été obtenus par culture ADSCs PKH marqués sur des boîtes de culture sensibles à la température commerciale. C. Lorsque la température d'incubation a été réduite à 20 ° C (température ambiante), toutes les cellules spontanément détachés des surfaces plat comme des feuilles ADSC intactes, sans la nécessité d' un traitement enzymatique. Fiche D. Un ADSC récolté avant la construction de greffe en utilisant une membrane de transfert. S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.
Figure 2. Double ADSC-feuille Construct. A, B et C. La veille transplantation, ADSCs PKH marquées ont été récoltées au nombre précoce de passage (P4 - P5), semé sur une culture cellulaire sensible à la température de 12 puits, et cultivées à 37 ° C et 5% de CO 2 avec du milieu essentiel alpha-minimal , y compris 10% du foetus sérum de veau et 1% d'antibiotiques (pénicilline et streptomycine). Chaque puits a été revêtu d'une membrane de poly-N-isopropylacrylamide (au fond de chaque puits) et on ensemence avec 1,5 x 10 6 cellules. Lorsque la température d'incubation a été réduite à 20 ° C (température ambiante), toutes les cellules spontanément détachés sous forme de feuilles intactes ADSC sans la nécessité d'un traitement enzymatique. D. schéma théorique de la double feuille d' assemblage de cellule composée de deux feuilles ADSC couches les unes sur les autres et appliquées sur une membrane de support en papier. E. Vue macroscopique d'une cellule double-feuille construction terminée. Modifié de référence 15. S'il vous plaît cliquez ici t o voir une version plus grande de cette figure.
Figure 3. Procédure Dissection sous - muqueuse endoscopique. R. marques endoscopiques ont été créés pour délimiter la zone de résection, allant de 40 à 45 cm de l'arc dentaire et en impliquant la moitié de la circonférence. B. L'injection sous - muqueux d'une solution de glycérol contenant de l' indigo carmin. Le but de cette injection est de séparer la couche muqueuse de la couche musculaire afin d'exposer la couche sous-muqueuse. Incisions C. périphériques ont été réalisées à l' extérieur des marques endoscopiques, révélant la couche sous - muqueuse injectée. D. La vue endoscopique à la fin de la dissection sous - muqueuse montrant un 5 cm de long et hémi-circonférentielle cicatrice oesophagien.et = "_ blank"> S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.
Figure 4. Double ADSC-feuille Endoscopic procédure de transplantation. A. Quatre ADSC construit prêts à être transplantés. B. Protection de l'ADSC construire sous un grand chapeau endoscopique avant la transplantation. C. Vue endoscopique de la traversée du pharynx animal, montrant la construction ADSC protégée sous le bouchon endoscopique. D. 10 min d'application était suffisante pour obtenir la feuille d' adhésion. L'application a été réalisée en utilisant le bouchon endoscopique ou endoscopique. S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.
Figure 5. Constatations de PCLE. pCLE le jour 3 montre des signaux spontanés et intenses semblables à ceux obtenus in vitro, compatible avec succès une transplantation de cellules feuille. Aucun signal n'a été trouvé sur les jours 14 et 28. A. Le vitro du signal pCLE dans des ADSCs en suspension. B. Le signal de pCLE in vitro de ADSCs organisés en une feuille cellulaire. C. La vivo pCLE application dans la sonde à la cicatrice de l' œsophage. D. Le signal de pCLE in vivo de ADSCs visualisé le jour 3 après la transplantation. Modifié de référence 15. S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.
Figure 6 : Résultatsde l'analyse morphologique le jour 28. Par rapport au groupe de contrôle, l'endoscopie et les résultats radiologiques sur 28 jours ont montré un rétrécissement court et léger sans dilatation en amont et une muqueuse complètement re-épithélialisées. Modifié de référence 15. S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.
Figure 7. Évaluation histologique des zones sténoses. L'analyse histologique a été réalisée après HES-étiquetage et glisser digitalisation. Chez les animaux transplantés (A), le processus de guérison a été amélioré, avec une augmentation réépithélialisation et une diminution du développement de la fibrose, par rapport à les animaux non greffés (B). le développement du tissu fibrotique Intense étaitobservée en raison de la musculeuse destruction des muqueuses, fibrotique invasion de la couche musculeuse intérieure, et de grands défauts des muqueuses. Modifié de référence 15. S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.
Tableau 1. Les évaluations cliniques durant la période de suivi. Les évaluations cliniques ont été réalisées à l'aide d'une évaluation clinique quotidienne en fonction du score Mellow Pinkas et avec une variation de poids. (*) Mellow Pinkas score de 16. Modifié de référence 15.
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Discussion
Dans ce modèle de porc, la transplantation ADSC-feuille était techniquement réussie, et l'évaluation in vivo de pCLE permis pour la surveillance de la greffe de cellules. Des évaluations cliniques, endoscopiques, radiologiques et histologiques ont démontré l'efficacité de la feuille de ADSC endoscopique à la prévention de la sténose oesophagienne après ESD prolongée.
La transplantation endoscopique d'une solution ADSC de glycérol contenant une feuille carmin de teinture indigo est une approche novatrice en médecine régénérative. Ohki et al. décrit d'abord la procédure de transplantation endoscopique. Dans leurs études, les constructions de cellules feuilles sont composées de feuilles par voie orale muqueuse épithéliale de cellules en couche sur une feuille mince de difluorure de polyvinylidène, utilisé comme membrane de support 10, 11, 19. La membrane de support a été saisi avec des forceps endoscopique et soigneusement placé sur le lit de la plaie. Cell-feuille adhésion a été obtenue après 10 min d'application douce. Cette procédure n'a pas encore été reproduite. Dans cette étude, doubles constructions ADSC-feuilles ont été transplantés pour de multiples raisons. Le choix de ADSC était basée sur plusieurs études qui ont démontré leurs capacités anti-inflammatoires, en particulier dans le processus de guérison de la peau. ADSCs sont connues pour moduler les interactions des kératinocytes et des fibroblastes 7. Le mécanisme du développement de la fibrose est complexe et que partiellement compris. L'effet paracrine semble jouer un rôle majeur dans l' action ADSC, y compris la production de facteur anti-inflammatoire, tels que TGFß et les facteurs pro-angiogéniques 20.
Endoscopic ADSC-feuille transplantation présente plusieurs limites. Tout d'abord, les feuilles de cellules ont été appliqués pendant 10 minutes à la cicatrice de l'oesophage afin d'obtenir une adhérence stable. Cette partie de la procédure était difficile, techniquement difficile, et a dû être effectué par un endoscopiste expérimenté. Néanmoins, tous les animaux ont été transplantées avec succès, ce qui confirme la faisabilité de la procédure endoscopique. Récemment, l'utilisation d'un dispositif 3D-imprimé pour améliorer le succès de la cellule-feuille transplantation a été rapportée 21. D'autre part, cette technique est associée à un taux de survie inconnue. Une cicatrice de l'œsophage est un environnement agressif pour les cellules. Un plat sensible à la température permet la production de la cellule de feuilles à travers la construction d'une matrice extracellulaire, et pour la formation de connexions cellulaires. Ainsi, pour améliorer le taux de survie et les interactions ADSC, un double ADSC-feuille de construction a été choisi 22, 23. Cette étude n'a pas été conçue pour évaluer soit le taux de survie des cellules ou l'effet de dose de la transplantation sur la prévention de sténose de l'œsophage, qui sont les deux questions importantes. Troisièmement, comme dans Ohki et al. , L'utilisation d'une membrane de soutien était nécessaire pour porter le ADSC-feuille construction. à l'arrièreer transplantation, la membrane du support papier ne pouvait pas être enlevé sans destruction de construction. Ce matériau étranger intra-oesophagien est responsable de l'augmentation de l'inflammation. Une technique optimisée permettrait le retrait de la membrane de support en papier.
suivi de la transplantation avec pCLE a également été difficile. Cette nouvelle technique d'imagerie endoscopique permet l'analyse histologique in vivo, y compris la visualisation du motif glandulaire, micro-vascularisation et l' altération cellulaire. pCLE a été évaluée dans de nombreuses pathologies digestives, telles que la maladie inflammatoire de l' intestin, de l' oesophage de Barrett, et les kystes pancréatiques mucine 24, 25. Le PKH67 fluorophore pCLE compatible a été utilisé pour le marquage des cellules. Un signal fluorescent compatible avec la présence de la feuille de ADSC a été observée chez 4 animaux le jour 3. Ce résultat positif reflète le succès de la transplantation ADSC feuilles. Cependant, becautilisation PKH67 a un signal diminué au fil du temps et après la division cellulaire, l' évaluation de pCLE était possible que quelques jours après la transplantation 26. Ohki et al. et Kanai et al. contrôlée feuille de transplantation de cellules par immunocoloration, et ils ont confirmé la présence de cellules jusqu'à ce jour 8 après la transplantation. cellules matures ont été utilisées dans cette étude, qui ont l'avantage d'immunocoloration spécifique.
Sténose œsophagienne est l'un des événements les plus graves indésirables suivants ESD, limitant ainsi le développement de la technique. techniques optimales pour prévenir la formation de sténoses font encore défaut. Dans la pratique clinique, les patients atteints de l' oesophage ESD prolongée sont prescrits différents traitements préventifs, tels que les corticostéroïdes, les dilatations de ballons endoscopiques ou oesophagien stenting 27. L' application locale de biomatériau a été menée, avec des résultats variables 28, 29 30, 31. Une réépithélialisation précoce et l'augmentation a été observée dans la cicatrice de l'œsophage. Pour immunomodulation locale, peu de données sont disponibles dans la littérature sur l' injection ADSC ou de l' application de la membrane amniotique 32, 33. Une formation de sténoses retardée et un taux de striction réduite ont été observées.
Dans ce modèle de porc, la cellule-feuille procédure de transplantation endoscopique a été réalisée avec succès. ADSCs transplantées organisés en feuilles doubles cellulaires ont démontré leur capacité à prévenir la formation de sténose oesophagienne après ESD prolongée. Les mécanismes impliqués dans la guérison ADSCprocessus sont mal compris et doit être étudié plus loin dans les études futures. Ainsi, compte tenu de ces résultats prometteurs, un essai clinique devrait être menée pour évaluer l'efficacité de la construction ADSC-feuille après étendue ESD chez les patients.
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Disclosures
Les auteurs n'ont rien à dévoiler.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Transparent endoscopic cap Q180 compatible | Olympus Optical Co | ||
| GIF-Q180 gastroscope | Olympus Optical Co | ||
| Videoscope System Exera II | Olympus Optical Co | ||
| Injection needle 18 G | Olympus Optical Co | ||
| Electrosurgery unit ERBE ICC 350 | ERBE Technology | ||
| Indigo carmin 1% | Life | ||
| Endoscopic hybrid knife | Life | ||
| Minisonde Z pCLE green probe | Mauna Kea Technology | You must learn how to use the probe. The manipulation could be difficult. | |
| Fetal bovine serum | Sigma Aldrich | 12105C | |
| Trypsin | Sigma Aldrich | T146 | |
| Alpha minimum essential medium | Thermo Fisher | 22561-021 | |
| Phosphate-Buffered Salines | Thermo Fisher | 10010-023 | |
| PKH67 dye kit | Sigma Aldrich | Mini67-KT | |
| 12-well temperature responsive cell culture dish | Upcell Thermo Scientific | 174900 | Feel the weel with 4 mL standard medium culture 30 min before seeding cells |
| Esomeprazole 40 mg | Biogaran | ||
| Moprhine sulfate 50 mg/mL | Lavoisier | ||
| Amoxicilline 1 g | Biogaran | ||
| Ketamine 250 mg/5 mL | Panpharma | ||
| Propofol 10 mg/mL | Fresenius | ||
| Hydrophobic paper | Carrefour |
References
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