Современные способы лечения воспалительных заболеваний кишечника (IBD) направлены на облегчение симптомов болезни, но может вызвать серьезные побочные эффекты. Таким образом, альтернативные стратегии исследуются в животных моделях колита. Здесь мы объясним, как благотворное влияние пищевых добавок на клинические признаки IBD анализируются в такой модели колита.
Воспалительные заболевания кишечника (IBD), включая болезнь Крона и неспецифический язвенный колит, хронические расстройства, рецидивирующий кишечника. Они вызывают серьезные проблемы, такие как спастические боли в животе, кровавый понос и потеря веса, в пострадавших лиц. К сожалению, нет никакого лечения до сих пор, и методы лечения направлены только для облегчения симптомов. Современные методы лечения включают противовоспалительные и иммуносупрессивные препараты, которые могут вызвать серьезные побочные эффекты. Это гарантирует, поиск альтернативных вариантов лечения, таких как пищевые добавки, которые не вызывают побочных эффектов. Перед их применением в клинических исследованиях, такие соединения должны быть тщательно протестированы на предмет эффективности и безопасности в животных моделях. Надежная экспериментальная модель является декстран сульфата натрия (DSS), модель колита у мышей, которая воспроизводит многие клинические признаки язвенного колита у людей. Недавно мы применили эту модель для того чтобы испытать благотворное влияние пищевой добавки, содержащейвитамины С и Е, L-аргинин, и & omega; 3-полиненасыщенные жирные кислоты (ПНЖК). Мы проанализировали различные параметры заболевания и обнаружили, что эта добавка была способна улучшить образование отек, повреждение тканей, лейкоцитарную инфильтрацию, окислительный стресс, а также выработку провоспалительных цитокинов, что приводит к общему улучшению индекса активности заболевания. В этой статье мы подробно объяснить правильное применение пищевых добавок с использованием модели колита DSS в мышей C57BL / 6, а также параметры, как заболевания, такие как гистологии, окислительный стресс и воспаление оцениваются. Анализируя благотворное влияние различных пищевых добавок может затем в конце концов открыть новые возможности для развития альтернативных стратегий лечения, которые облегчают симптомы IBD и / или которые продлевают фазы ремиссии, не вызывая серьезных побочных эффектов.
Колит это воспаление толстой кишки, что может вызвать понос и боли в животе. Колит может быть острым, в ответ на инфекцию или стресс, или он может развиваться как хроническое заболевание, например, при язвенном колите (UC), который принадлежит к группе воспалительных заболеваний кишечника (IBD). Хотя клинические признаки UC были хорошо описаны, патогенез до сих пор плохо изучены 1. Принято считать , что среди экспертов UC является многофакторным заболеванием, с генетическими мутациями и аберрантных иммунных реакций , играющих важную роль 2. Тем не менее, факторы окружающей среды, такие как стиль жизни и питания, а также способствуют развитию заболевания и прогрессирования 3.
К сожалению, IBD не излечим, но есть много вариантов лечения, которые направлены для облегчения клинических симптомов. Современные методы лечения включают в себя противовоспалительные препараты, такие как сульфасалазин и кортикостероиды; иммунодепрессанты, такие как azathioПрайн; моноклональные антитела, которые захватывают провоспалительных цитокинов, таких как фактор некроза опухоли-альфа (TNF-alpha), или блок молекул адгезии, такие как интегрины, в целях уменьшения чрезмерного набора лейкоцитов; и ингибиторы киназ , которые нацелены на которые вызывают провоспалительных пути, такие как Янус – киназы (JAK) 4. Не все пациенты реагируют на все виды лечения, поэтому терапевтические стратегии должны быть индивидуализированы 5. Кроме того, большинство из этих терапевтических препаратов препятствовать метаболизму и иммунных реакций, часто вызывает серьезные побочные эффекты. По этой причине, альтернативные варианты лечения были исследованы.
Альтернативные методы лечения включают пробиотики и пищевые добавки, которые были применены в моделях на животных и клинических испытаний с разной степенью успеха 6,7. Недавно мы обнаружили, что применение различных единичных пищевых добавок, таких как анти-окислительные витамины или ω3-полиненасыщенных жирных кислот (РUFAS), уступает применению комбинации таких добавок в облегчении симптомов колита и сердечно – сосудистых заболеваний 8,9. Эти исследования проводились на мышах, поэтому клинические исследования должны быть выполнены на людях, чтобы определить, будут ли эти данные также быть применимы к людям. Перед тем как клинические исследования инициируются, эффективность и безопасность новых методов лечения должна быть оценена на животных моделях.
Для IBD, модель (DSS) декстран сульфат натрия широко используется для изучения механизмов развития заболевания и благотворное воздействие лекарственных средств и пищевых добавок 6,10. В большинстве исследований, только острое заболевание в течение периода времени в семь дней индуцируется; Тем не менее, клинические признаки , наблюдаемые у этих животных очень похожи на те , наблюдается у пациентов с воспалительной болезнью кишечника (например, кровавый понос, потеря веса, эпителиальная дисфункция, и клеточная инфильтрация иммунитет) 10. ДСС вызывает эрозий в слизистой оболочке,что приводит к барьерной дисфункции и повышенной кишечной проницаемости эпителия 11. Точный механизм остается неизвестным. Тем не менее, исследование показало, что DSS взаимодействует с средней цепью длиной жирных кислот с образованием нано-lipocomplexes , которые способны проникать в эпителиальные клетки и вызывать воспалительные сигнальных путей 12. В этой статье мы подробно описывают, как колиты индуцируется и проанализированы на мышах, как пищевые добавки, применяемые затравки, чтобы обеспечить постоянную дозировку в каждом животном, и как исследуют воздействие таких добавок на различные симптомы колита.
Для того чтобы использовать пищевые добавки , в клинических исследованиях, преимущества и безопасность таких добавок должны быть тщательно оценены в естественных условиях в исследованиях на животных. В случае колита, несколько соответствующих животных моделей, которые напомина?…
The authors have nothing to disclose.
Эта работа была поддержана грантами Мексиканским советом по науке и технике (КОНАСИТ, 207268 и 233395 Михаилу Шнура). KFCO является получателем стипендии КОНАСИТ (396260), чтобы получить степень магистра.
0.3% of gelatin | Bioxon | 158 | |
10% formaldehyde | J.T. Baker | 2106-03 | |
96-well plate with flat bottom | Corning | 3368 | |
Absolute ethanol | J.T. Baker | 9000-03 | |
Absolute xylene | J.T. Baker | 9490-03 | |
ABTS | Sigma Aldrich | H5882 | |
Bovine Serum Albumin | Sigma-Aldrich | 9048-46-8 | |
ColoScreen | Helena Laboratories | 5072 | |
Corabion (Kindly provided by Merck, Naucalpan, Mexico) | Merck | ||
Dextran Sulfate Sodium Salt | Affymetrix | 9011-18-1 | (M.W. 40,000-50,000) |
Dihydroethidium | Life Technology | D11347 | |
Eosin-Y | J.T. Baker | L087-03 | |
Evans blue | Sigma-Aldrich | 314-13-6 | |
Feeding needle | Cadence Science Inc. | 9921 | |
Glass slide rack with handle | Electron Microscopy | 70312-16 | |
Glass Slides | Corning | 2947 | |
Harris hematoxylin | Sigma-Aldrich | H3136 | |
Hexadecyltrimethyammonium (HTAB) | Sigma Aldrich | H6269 | |
Histosette (Embedding cassette) | Simport | M498.2 | |
Hydrochloric acid 1 M | J.T. Baker | 9535-62 | |
Hydrogen peroxide | Sigma Aldrich | H3410 | |
Ketamine | PiSA Agropecuaria | Q-7833-028 | |
Liquid paraffin | Paraplast | 39501-006 | |
Lithium carbonate | Sigma-Aldrich | 2362 | |
N,N-dimethylformamide | J.T. Baker | 68-12-2 | |
N-acetylcysteine | Sigma-Aldrich | A9165 | |
Plastic cubes | Electron Microscopy | 70181 | |
Poly-L-Lysine Solution | Sigma-Aldrich | 25988-63-0 | |
Prism 5 statistical software | GraphPad Software | Prism 5 | |
Saline Solution 0.9% NaCl | CS PiSA | Q-7833-009 | |
Sodium citrate | Sigma-Aldrich | W302600 | |
Synthetic resin | Poly Mont | 7987 | |
Taq DNA polymerase | Invitrogen | 11615-010 | |
Tissue-tek. O.C.T Compound | Sakura Finetek | 4583 | |
Tuberculine Syringe | BD Plastipak | 305945 | |
Tween 20 | Sigma-Aldrich | 9005-64-5 | |
VECTASHIELD Antifade Mounting Medium with DAPI | Vector Laboratories | H-1200 | |
Xylazine | PiSA Agropecuaria | Q-7833-099 |