Summary
Formålet med denne protokol er at beskrive trin for trin teknik af minimalt invasive tværgående aorta konstriktion (TAC) i mus. Af afskaffelsen af intubation og ventilation, som er obligatorisk for den anvendte standardprocedure, minimalt invasive TAC forenkler den operative procedure og reducerer den belastning, sætte på dyret.
Abstract
Tværgående aorta konstriktion (TAC) i mus er en af de mest almindeligt anvendte kirurgiske teknikker for eksperimentel undersøgelse af pres overbelastning-induceret venstre ventrikel hypertrofi (LVH) og dets progression til hjertesvigt. I fleste af de rapporterede undersøgelser, er denne procedure udført med intubation og ventilation af dyret, hvilket gør det krævende og tidskrævende og tilføjer til den kirurgiske byrde for dyret. Formålet med denne protokol er at beskrive en forenklet teknik, minimalt invasive TAC uden intubation og ventilation af mus. Kritiske trin af teknikken, der er understreget for at opnå lav mortalitet og høj effektivitet i inducerende LVH.
Mandlige C57BL/6 mus (10 uger gamle, 25-30 g, n = 60) blev bedøvede med en enkelt intraperitoneal injektion af en blanding af ketamin og xylazin. I et spontant vejrtrækning dyr efter en 3-4 mm øvre delvis sternotomi, et segment af 6/0 silke sutur gevind gennem øjet af en ligatur støtte var gået under aortabuen og bundet over en afrundede 27-gauge kanyle. Humbug-opererede dyr undergik den samme kirurgiske forberedelse, men uden aorta konstriktion. Effekten af proceduren i inducerende LVH er attesteret af en betydelig stigning i hjertet/body vægt-forhold. Dette forhold er opnået på dage 3, 7, 14 og 28 efter operationen (n = 6-10 i hver gruppe og hvert tidspunkt). Brug af vores teknik er LVH observeret i TAC i forhold til sham dyr fra dag 7 gennem dag 28. Udløsende og slutningen (over 28 dage) dødelighed er begge meget lavt på 1,7%.
Afslutningsvis, vores omkostningseffektive teknik af minimalt invasive TAC i mus bærer meget lav operativ og postoperativ mortalitet og er yderst effektiv i inducerende LVH. Det forenkler den operative procedure og reducerer den belastning, sætte på dyret. Det kan udføres nemt ved at følge de kritiske trin, der beskrives i denne protokol.
Introduction
I de seneste år, studiet af hjertesvigt er blevet udført i levedygtige dyre modeller1. Sammenlignet med store dyremodeller for hjertesvigt, har små dyremodeller mange potentielle fordele. Ved siden af lavere udgifter til bolig og vedligeholdelse er små dyremodeller tilgængelige for flere forskere på grund af den mindre komplekse faciliteter nødvendige for2.
Musen hjertesvigt modeller tilbyder mange af de samme fordele som rotte-modeller. Desuden til reduceret boliger koster3, musemodeller drage fordel af adgangen til relevante transgene og knockout (KO) stammer. Muligheden for celle type-specifikke, inducerbar KO eller transgene strategier gør musen et uvurderligt værktøj at studere patogenesen af hjertesvigt og forsøge at identificere nye terapeutiske regimer3.
Blandt musen modeller af hjertesvigt i øjeblikket anvendes4, tværgående aorta konstriktion (TAC), som blev første gang beskrevet af Rockman5 er den foretrukne model til at generere pres overbelastning-induceret venstre ventrikel hypertrofi (LVH)1 , 3. den største fordel ved denne model er muligheden for at tillade stratificering af LVH2, selvom venstre ventrikulær remodellering svar på TAC er variabel blandt forskellige mus stammer. Især udvikle C57BL/6 mus hurtige LV dilatation efter TAC, der ikke kan forekomme med andre stammer4,6,7.
Den pludseligt indsættende af hypertension opnåede med TAC årsager en cirka 50% stigning i LV masse inden for 2 uger, gør det muligt at hurtigt undersøge aktiviteten af farmakologiske eller Molekylær interventioner med henblik på at modulere udviklingen af LVH4. Akut induktion af svær hypertension af TAC ikke nøjagtigt gengive de progressive venstre ventrikel hypertrofi og remodellering observeret i kliniske omgivelser i aorta stenose eller arteriel hypertension. Ikke desto mindre, denne model bruges af mange efterforskere at identificere og ændre roman terapeutiske mål i hjertesvigt4.
Udfører TAC i mus kræver større kirurgisk ekspertise end der kræves til andre teknikker, der anvendes til at fremkalde LVH og efterfølgende hjertesvigt2. De fleste forfattere udføre denne procedure ved intubere og ventilerende den animalske2,8, som gør denne procedure mere krævende og tidskrævende og tilføjer til den kirurgiske byrde for dyret. Kun få efterforskere har brugt minimalt invasiv TAC i deres undersøgelse med korte henvisning til kirurgisk procedure9,10,11.
Formålet med denne protokol er at beskrive trin for trin et forenklet og brugervenlig teknik af minimalt invasive tværgående aorta konstriktion i mus, fremhæver de kritiske faser af proceduren. Ved at følge disse vigtige skridt, kan man nemt udføre denne teknik.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
mandlig C57BL/6J mus (10 uger, 25-30g, n = 60) er brugt i denne protokol. Dyr modtage human behandling i overensstemmelse med de retningslinjer, der er formuleret af det franske ministerium for landbrug og for højere uddannelse og forskning, og alle procedurer er udført i overensstemmelse med direktivet om det Europæiske Fællesskab af 24 November 1986 () 86/609/EØF) og de franske love. Protokollen blev godkendt af den " Regional etisk komité for animalsk eksperimenter CREMEAS " (#2016092816207606).
1. forberedelse til operation
- bevare mus til en uge efter ankomsten i det animalske facilitet på en 12h / 12h lys/mørke cyklus, i standard bure, med mad (for detaljer se tabel materialer) og vand tilgængelig ad libitum.
- På dagen for operationen, placere mus i individuelle bure et par minutter indtil induktion af anæstesi, for at undgå enhver yderligere stress til dyret. Sterilisere alle kirurgiske instrumenter dagen før kirurgi.
- Indsprøjtes intra-peritoneally en enkelt dosis af en blanding af ketamin (51,4 mg/kg) og xylazin (3,3 mg/kg) fortyndet i saltopløsning (0,9% NaCl).
- Kontroller af dybden af anæstesi ved fravær af tå-retreat refleks.
- Barbere hals og bryst af dyret med en kommercielt tilgængelig barberkniv og desinficere området glatbarberet med 70% alkohol.
- Placere dyret liggende på en ren cork arbejder pad og lave poterne med selvklæbende tape.
2. Kirurgi
- steril kirurgiske teknik bruges i hele procedurerne. I et spontant vejrtrækning dyr, udføre en langsgående midterlinje cervikal snit over 10 mm med en 11-bladet kniv fra supra brystbenet notch på midten brystet for at udsætte brystbenet ( figur 1).
- Trække skjoldbruskkirtlen ved at passere et 4/0 monofilamenter polypropylen ophold sutur med Crile-træ nål indehaveren og tape det til arbejdende pad.
- Adskille ligefremt pre trakeal musklerne med micro-kirurgisk pincet til at afdække luftrøret.
- Skub forsigtigt den glatte-tippes buet micro-kirurgisk pincet med lukkede kæberne over luftrøret og bag brystbenet.
- Af forsigtigt åbne og lukke kæberne af glat spids buede microsurgical pincet foretage en stump dissektion under de pre trakeal muskler og bag brystbenet til scenowe brysthinden.
- Gribe lige supra clavicula musklerne med glat spids lige micro-kirurgisk pincet og trække op blidt bryst dyrets.
- Slide ringere kæben af knogle nipper under brystbenet og udføre en 3-4 mm øvre delvis sternotomi ( figur 2). Direkte den nederste del af mini-sternotomi lidt mod venstre.
- Passere et 7/0 monofilamenter polypropylen ophold sutur fra inde til uden for gennem det andet interkostale rum på hver side af mini-sternotomi ved hjælp af en micro-kirurgisk nål holder. Bo tæt på Mareiro-brystbenet vinkel at undgå skade interkostale og interne thorax fartøjer eller brysthinden.
- Sprede brystbenet kanterne med 7/0 monofilamenter polypropylen ophold suturer på hver side og lave dem til arbejde pad med klæbebånd.
- Forsigtigt flytte til side pre trakeal muskler, mediastinale fedt og thymus ved hjælp af glat spids buet microsurgical pincet til at visualisere aortabuen under low-power forstørrelse (2-3 X) ( figur 3). Vær særlig forsigtig ikke at røre eller beskadige parietal brysthinden for at forhindre pneumothorax udvikling.
- Afsløre bløddele under aortabuen ved at binde pincet ( figur 4 A) og spred forsigtigt dens kæber. Forbered en tunnel i det bløde væv under aortabuen med anden koblingssalg pincet ved forsigtigt åbne og lukke kæberne i bløddelene.
- Passere et segment af 6/0 silke ligatur gevind gennem øjet af en ligatur støtte ( fig. 4 B) holdt i venstre hånd under aortabuen og hente den ved at binde pincet holdt i højre hånd mellem oprindelse de rigtige innominate og venstre fælles carotis arterier ( figur 5).
- Skære en 27-gauge kanyle til en længde på 5 mm og sløve begge ender ved at trykke på dem med en Crile nål holder. Placer den afrundede 27-gauge kanyle ved siden af aortabuen ( figur 6) med glat spids lige micro-kirurgisk pincet og binde sutur stramt omkring nålen og aorta mellem den højre innominate og venstre fælles carotis arterierne ved hjælp af de to primære pincet ( figur 7). For at binde stramt sutur, udføre en indledende dobbelt knude efterfulgt af fire ekstra knob. Sørg for at alle knob er flad.
- Efter ligatur, fjerne hurtigt men blidt nål til at opnå en 0,4 mm diameter indsnævring og en reproducerbar tværgående 65-70% aorta konstriktion.
- Tjekke for hæmostase af det bløde væv omkring aortabuen brystbenet kanter og pre trakeal muskler. Sætte resorberbare hæmostatisk gaze, hvor det oser af blod er observeret. Fjern 7/0 monofilamenter polypropylen bo suturer bruges til at sprede brystbenet kanterne.
- Passere en simpel 6/0 monofilamenter polypropylen sutur med en micro-kirurgisk nål holder fra udenfor til indersiden af det venstre andet interkostale rum og derefter fra inde til uden for den lige anden interkostale rum. Bo tæt på Mareiro-brystbenet vinkel at undgå skade interkostale og interne thorax fartøjer eller brysthinden.
- Samle brystbenet kanter ved at binde 6/0 monofilamenter polypropylen sutur med Crile-træ nål indehaveren.
- Lukke huden med en 5/0 monofilamenter polypropylen kører sutur i ét lag med et Crile-træ nål indehaveren.
- Udføre fingeret procedure identiske handlingen konstriktion, men uden at binde en sutur omkring aorta.
3. Postoperativ nyttiggørelse
- meget nøje overvåge dyrene. overføre musen til en individuel buret og placere det i en udsat position.
- Tillad musen til at inddrive under en opvarmning lys indtil fuldt vågen (mindre end 1 time efter inducerende anæstesi).
- For postoperativ analgesi, injicere 0,1 mg/kg af buprenorphin intraperitoneal. Gentag subkutane injektioner af 0,1 mg/kg af buprenorphin hver 8 h for de første tre dage som angivet.
- Placere betjente musene i standard bure (maksimalt 3 mus pr. bur) og minimum 2 mus pr. bur.
4. Hjerte høst
- på dagen for analyse, aflive mus med en opløsning af ketamin 300 mg/kg og xylazin 20 mg/kg i saltvand ved intraperitoneal injektion.
- Første høst blod fra den ringere vena cava og derefter gennem den samme linje indsprøjtes 5 mL af opløsning af 2,6 mM EDTA i saltvand.
- Høst hjertet, fjerne hjertets forkamre og vægt hjerte (højre og venstre ventrikler uden forkamre).
- Separat til venstre fra den rigtige ventrådløst med septum tilbage til venstre hjertekammer del. Vejer begge vævsprøver og fryse dem i flydende nitrogen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Udløsende og sene overlevelse
Den udløsende overlevelse var meget høj, 98.3% (59 ud af 60) for hele serien (TAC og sham-opererede dyr). Kun operativ død skyldtes en blødende komplikation i en mus høvlet for sham operation. Postoperativ overlevelse i observationsperioden på 28 dage var også fremragende, 98.3% (58 ud af 59). Kun slutningen postoperativ døden indtrådte i en TAC mus på dagen (D) 16, muligvis af cardiac oprindelse.
Validering af teknikken
Den præsenterede teknik er meget pålidelig og reproducerbar. Den korrekte anbringelse af suturen mellem lige innominate og venstre fælles carotis arterierne blev bekræftet under væv høst i alle dyr undergår TAC.
Effekten af teknikken til at fremkalde venstre ventrikel hypertrofi blev valideret ved bestemmelse af hjertet vægten/body vægt nøgletal (HW/BW, mg/g) på 3, 7, 14 og 28 dage efter operationen. HW er vægten af de højre og venstre ventrikler uden forkamre. HW/BW-forhold steget betydeligt i den stribede sammenlignet med fingeret grupper fra postoperativ D7 (4.9±0.2 versus 4.1±0.05 mg/g, P < 0,01) på, og forblev væsentligt højere op til D28 (5.8±0.3 versus 4.1±0.1 mg/g, P < 0,0001) efter operationen (figur 8). Den observerede stigning i HW/BW forholdet var udelukkende på grund af en stigning i venstre ventrikel/body vægtforhold (figur 9A) siden den højre ventrikel/body vægtforhold forblev sammenlignelige mellem TAC og sham-opererede dyr under hele observation periode (fig. 9B).
Yderligere, vi målte i venstre ventrikel væv mRNA udtryk af biomarkører af Hjertehypertrofi som tidligere beskrevet12. På D14, mRNA udtryk for hjerne natriuretisk protein (BNP), atrieflimren natriuretisk protein (ANP), angiotensin konverterende enzym (ACE), kollagen 1a1 (Col1a1) og omdanne vækst faktor ß (TGFß) var betydeligt højere i aorta-stribede i forhold til humbug-opererede dyr (figur 10). Derfor, den observerede venstre ventrikel hypertrofi validerer effektiviteten af vores TAC teknik.
Middelværdi og standardafvigelse af middelværdier blev sammenlignet mellem TAC og sham grupper ved hjælp af en-vejs ANOVA efterfulgt af Bonferroni's post-hoc test for sammenligning af parrede data.
Figur 1 : Snit.
Huden er et snit over 10 mm fra supra brystbenet notch til midten brystbenet og skjoldbruskkirtlen er tilbagetrukket med et ophold sutur. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 2 : Knogle nipper.
Dette instrument giver et kort og præcist snit i knoglen for en 3-4 mm øvre delvis superior mini-sternotomi. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 3 : Eksponering.
Efter tilbagetrækning af brystbenet kanterne med 7/0 bo suturer, aortabuen, lige innominate og venstre fælles carotis arterierne sammen med luftrør er udsat. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 4 : A. kombinationsklausuler pincet. Disse pincet er nødvendige for at udføre en blid og stumpe dissektion bag brystbenet og omkring aortabuen. B. ligatur støtte. Dette er det vigtigste instrument for at realisere en delikat og atraumatisk passage under aortabuen både i TAC og sham-drives mus. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 5 : Passage under aorta arch.
Et segment af 6/0 silke ligatur passerede under aortabuen ligatur støtten og placeret mellem højre innominate og venstre fælles carotis arterierne. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 6 : Forberedelse til ligatur.
Et kort segment 2-3 mm af en afrundede 27-gauge kanyle er placeret over aortabuen. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 7 : Tværgående aorta konstriktion.
Den silke sutur er bundet over nålen og aortabuen mellem lige innominate og venstre fælles carotis arterierne ved hjælp af koblingssalg pincet. Silke i stedet for polypropylen sutur foretrækkes for aorta ligatur, fordi knuden bliver bedre hold. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 8 : Validering af tværgående aorta konstriktion.
Induktion af Hjertehypertrofi af vores minimalt invasiv tværgående aorta konstriktion fremgår af betydelig stigning i hjertet vægten/body vægtforhold i stribede (sorte bjælker) i forhold til sham drives (hvid barer) mus. Af Hjertehypertrofi er allerede til stede på D7 efter operationen og øger gradvist over tid op til D28 (n = 6-10 pr. gruppe. ** P < 0,01, *** P < 0,001, *** P < 0,0001). Data præsenteres som betyder ± SEM (fejllinjer). AnbringendeSe Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 9 : Venstre (A) og højre (B) ventrikel / body vægtforhold.
I observationsperioden øger vægtforhold venstre ventrikel og krop mens højre ventrikel/body vægtforhold forbliver lignende i TAC (sorte bjælker) i forhold til sham-drives (hvid barer) dyr. Dette bekræfter venstre ventrikel hypertrofi uden ændring i højre hjertekammer og styrker validering af vores teknik (n = 6-10 pr. gruppe. ** P < 0,01, *** P < 0,001, *** P < 0,0001). Data præsenteres som betyder ± SEM (fejllinjer). Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 10 : BNP-mRNA udtryk.
mRNA udtryk for hjerne natriuretisk protein (BNP), atrieflimren natriuretisk protein (ANP), angiotensin konverterende enzym (ACE), kollagen 1a1 (Col1a1) og omdanne vækst faktor ß (TGFß), positiv kontrol for Hjertehypertrofi i aorta-stribede (sort bar) vs humbug dyr (hvid kolonne) (n = 6 pr. gruppe) på D14. Udtrykket beregnes som 2(-ΔCt) hvor kalibrator er mRNA niveau af Gapdh reference genet. Data præsenteres som betyder ± SEM (fejllinjer). * P < 0,05, ** P < 0,01, *P < 0,001 sammenlignet med fingeret gruppe (t-test). Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Formålet med denne protokol er at præsentere en trinvis illustration af den kirurgiske teknik for minimalt invasiv tværgående aorta konstriktion i mus. Detaljeret teknisk beskrivelse af tværgående aorta konstriktion i mus er blevet indberettet af andre forfattere2,8. Men disse efterforskere udføre kirurgi efter intubation og ventilation af dyr. Brugen af et ekstra trin af intubation-ventilation stiger i kompleksitet og varighed af hele proceduren og den globale stress dyret udsættes. Af disse grunde har begrebet minimalt invasiv tværgående aorta konstriktion modtaget nogle opmærksomhed. De minimalt invasive tværgående aorta konstriktion i mus bruges til at fremkalde venstre ventrikel hypertrofi og dets progression til hjertesvigt9,10,11. Disse undersøgelser fokuserer på de veje, der er involveret i tilblivelsen af venstre ventrikel hypertrofi og hjertesvigt, men ikke på beskrivelsen af kirurgisk teknik9,10,11.
I denne protokol rapport vi i detaljer en forenklet og reproducerbare teknik af minimalt invasive TAC i mus. En dygtig kirurg kan gøre den konstriktion i 20 minutter og sham operation (uden sutur binde) i 15 minutter. Under vores indledende tekniske beviser fandt vi, at indførelsen af et centralt instrument, støtte ligatur tilladt en meget lav operativ MORTALITET på 1,7%. Det sammenligner positivt til operative dødelighed på 4% rapporterede af Rockman et. al. 5, på 3,7% af Liao et al. 13 og på 2,7% af Stansfield et al14. Yderligere, observationsperioden op til 28 dage, også viser en meget lav sent postoperativ dødelighed på 1,7%. Igen, dette sammenligner godt til den sene MORTALITET rapporteret af Rockman et al (10%)5, Liao et al (19%)13 eller Stansfield et al (2,6%)14.
Passage under aortabuen er det mest afgørende trin i hele proceduren. Reproducerbarhed af dette skridt var ikke beskrevet af Hu og kollegaer, der brugte en hjemmelavet ledning med en snare sin enden for at passere under aorta mellem oprindelsen af den lige innominate og venstre fælles carotis arterierne9eller Tarnavski, der placeres i buet pincet fra den mediale side under den opstigende aorta at fange den 7/0 silke sutur på den modsatte side og flytte det nedenunder aorta2. Ligatur støtten bruges i vores teknik giver mulighed for en standardiseret og reproducerbare manøvre med lav risiko for aorta tåre.
En anden afgørende trin i proceduren er spændingen anvendes på slipset over 27-gauge kanyle til at reducere effektivt og homogen måde lumen af aortabuen. Først bruger vi binde pincet, der hjælpe med at anvende en ensartet og reproducerbar spænding på sutur omkring aortabuen. Den pågældende placering af sutur kontrolleres under høsten af hjertet og aortabuen. Andersen og kolleger kontrollerer den pågældende placering af bandet evaluering af Doppler signaler af carotis arterierne både før og efter placering af aorta band11. I deres betænkning, blev passende banding accepteret når Doppler hastighed forholdet fordoblet fra højre til venstre halspulsårer11. I vores teknik, valgte vi at måle effektiviteten af TAC af graden af inducerede venstre ventrikel hypertrofi i stribede sammenlignet med fingeret dyr for at validere proceduren, da det kræver ikke nogen øget varigheden af proceduren eller supplerende bedøvelse af dyr. I vores teknik, graden af venstre ventrikel hypertrofi og passende placering af banding er markeret i slutningen af forsøget. Graden af venstre ventrikel hypertrofi af vores teknik sammenligner positivt med resultaterne rapporteres af andre efterforskere på 3 uger efter TAC i mus15. Derudover attesterer lave variationen af forholdet mellem hjerte til kropsvægt observeret i vores stribede dyr lavt udsving i spændingen anvendes på uafgjort.
Afslutningsvis gennem undgåelse af intubation-ventilation giver som præsenteres i denne protokol, vores teknik af minimalt invasive TAC i mus en pålidelig og reproducerbar model. Denne model reducerer det globale belastning sætte på dyrene og er gang - og omkostningsbesparende sammenlignet med TAC bruger intubation-ventilation af dyr. De udløsende og sene dødelighed af denne procedure er meget lav og gøre denne teknik, en af metoderne til valg af induktion af venstre ventrikel hypertrofi i mus.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har nogen interessekonflikt at videregive.
Acknowledgments
Dette arbejde blev støttet af en bevilling (N ° 32016) af den schweiziske kardiovaskulære Foundation til RT.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Surgical microscope | Olympus | SZX2-TR30 | |
| Razor | Rowenta | Nomad TN3650FO | |
| Sutures: | |||
| Polypropylene 7/0 | Ethicon | BV-1X | |
| Polypropylene 6/0 | BBraun | C0862061 | |
| Silk 6/0 ligature | FST | 18020-60 | |
| Polypropylene 4/0 | Ethicon | 8683 | |
| Polypropylene 5/0 | Ethicon | Z303 | |
| Drugs: | |||
| Ketamin | Merial | Imalgène 1000, LBM154AD | |
| Xylazine | Bayer | Rompun 2%, KP09PPC | |
| Buprenorphine | Ceva | Vetergesic, 072013 | |
| Instruments: | |||
| Bone nippers | Fine Surgical Tools | 16101-10 | |
| Ligation aid | Fine Surgical Tools | 18062-12 | |
| Tying forceps | Fine Surgical Tools | 18026-10 | |
| Needle holder Crile-Wood | Fine Surgical Tools | 12003-15 | |
| Microsurgery forceps | Fine Surgical Tools | 11003-12 | |
| Microsurgery forceps | Fine Surgical Tools | 11002-12 | |
| Tissue forceps | Fine Surgical Tools | 11021-12 | |
| Microsurgery needle holder | Fine Surgical Tools | 12076-12 | |
| Microsurgery scissors | Fine Surgical Tools | 91501-09 | |
| Mayo scissors | Fine Surgical Tools | 14511-15 | |
| 11-blade knife | Fine Surgical Tools | 10011-00 | |
| RNA extraction and qPCR: | |||
| TriReagent | Euromedex | TR-118-200 | |
| Rneasy Mini kit | Qiagen | 74704 | |
| Qubit Fluorimetric RNA assay | Fisher Scientific | 10034622 | |
| RNA 6000 Nano kit | Agilent | 5067-1511 | |
| High Capacity cDNA kit | Fisher Scientific | 10400745 | |
| Taqman Master Mix | Fisher Scientific | 10157154 | |
| Taqman BNP primers | Fisher Scientific | Mm01255770_g1 | |
| Taqman ANP primers | Fisher Scientific | Mm01255747_g1 | |
| Taqman ACE primers | Fisher Scientific | Mm00802048_m1 | |
| Taqman Col1a1 primers | Fisher Scientific | Mm00801666_g1 | |
| Taqman TGFb primers | Fisher Scientific | Mm01178820_m1 | |
| Taqman Gapdh primers | Fisher Scientific | Mm99999915_g1 | |
| ABIPrism Thermocycler | Applied Biosystems | 7000 | |
| Software: | |||
| GraphPad Prism | GraphPad | Prism 7 | |
| Animal food | |||
| Complete diet for adult rats/mice | Safe | UB220610R |
References
- Molinari, F., Malara, N., Mollace, V., Rosano, G., Ferraro, E.
- Tarnavski, O. Mouse surgical models in cardiovascular research. Methods. Mol. Biol. 573, 115-137 (2009).
- Verma, S. K., Krishnamurthy, P., Kishore, R., et al. Transverse aortic constriction: a model to study heart failure in small animals. Manual of Research Techniques in Cardiovascular Medicine. Ardehali, H. , Wiley, J., & Sons. 164-169 (2014).
- Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. Small animal models of heart failure. Development of novel therapies, past and present. Circ. Heart Fail. 2 (2), 138-144 (2009).
- Rockman, H. A., et al. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 88 (18), Erratum in: Proc. Natl. Acad. Sci. USA Page 9907 8277-8281 (1991).
- Barrick, C. J., Rojas, M., Schoonhoven, R., Smyth, S. S., Threadgill, D. W. Cardiac response to pressure overload in 129S1/SvImJ and C57BL/6J mice: temporal- and background-dependent development of concentric left ventricular hypertrophy. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 292 (5), 2119-2130 (2007).
- Deschepper, C. F., Olson, J. L., Otis, M., Gallo-Payet, N. Characterization of blood pressure and morphological traits in cardiovascular-related organs in 13 different inbred mouse strains. J. Appl. Physiol. 97 (1), 369-376 (2004).
- Almeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. T. Transverse aortic constriction in mice. J. Vis. Exp. (38), April 21 (2010).
- Hu, P., Zhang, D., Swenson, L., Chakrabarti, G., Abel, E. D., Litwin, S. E. Minimally invasive aortic banding in mice: effects of altered cardiomyocyte insulin signaling during pressure overload. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 285 (3), 1261-1269 (2003).
- Faerber, G., et al. Induction of heart failure by minimally invasive aortic constriction in mice: Reduced peroxisome proliferator-activated receptor ϒ coactivator levels and mitochondrial dysfunction. J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 141 (2), 492-500 (2011).
- Andersen, N. M., Tang, R., Li, L., Javan, H., Zhang, X. Q., Selzman, C. H. IKK-β inhibition prevents adaptive left ventricular hypertrophy. J. Surg. Res. 178 (1), 105-109 (2012).
- Nemska, S., Monassier, L., Gassmann, M., Frossard, N., Tavakoli, R. Kinetic mRNA profiling in a rat model of left ventricular hypertrophy reveals early expression of chemokines and their receptors. PLoS ONE. 11 (8), 0161273 (2016).
- Liao, Y., et al. Echocardiographic assessment of LV hypertrophy and function in aortic-banded mice: necropsy validation. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 282 (5), 1703-1708 (2002).
- Stansfield, W. E., et al. Characterization of a model to independently study regression of ventricular hypertrophy. J. Surg. Res. 142 (2), 387-393 (2007).
- Beetz, N., et al. Ablation of biglycan attenuates cardiac hypertrophy and fibrosis after left ventricular pressure overload. J. Mol. Cell. Cardiol. 101, December 145-155 (2016).
