मानव भ्रूण स्टेम कोशिकाओं की आत्म नवीनीकृत और शरीर के सभी प्रकार की कोशिकाओं में अंतर करने की क्षमता का पता चलता है कि वे दोनों चिकित्सा अनुप्रयोगों के लिए और विकास और रोग में मौलिक सवालों को संबोधित करने के लिए एक अनुसंधान उपकरण के रूप में महान वादा पकड़. यहाँ, हम एक संक्षिप्त, आंतरिक कोशिका द्रव्यमान के immunosurgical अलगाव द्वारा भ्रूण से मानव भ्रूण स्टेम कोशिकाओं की व्युत्पत्ति के लिए कदम दर कदम प्रोटोकॉल प्रदान करते हैं.
मानव भ्रूण स्टेम कोशिकाओं की आत्म नवीनीकृत और शरीर के सभी प्रकार की कोशिकाओं में अंतर करने की क्षमता का पता चलता है कि वे दोनों चिकित्सा अनुप्रयोगों के लिए और विकास और रोग में मौलिक सवालों को संबोधित करने के लिए एक अनुसंधान उपकरण के रूप में महान वादा पकड़. यहाँ, हम एक संक्षिप्त, आंतरिक कोशिका द्रव्यमान के immunosurgical अलगाव द्वारा भ्रूण से मानव भ्रूण स्टेम कोशिकाओं की व्युत्पत्ति के लिए कदम दर कदम प्रोटोकॉल प्रदान करते हैं.
प्रस्तुत प्रोटोकॉल यहाँ शोधकर्ताओं के साथ प्रदान करता है एक संक्षिप्त, आसानी से कैसे आंतरिक कोशिका द्रव्यमान के immunosurgical अलगाव द्वारा मानव भ्रूण स्टेम सेल लाइनों प्राप्त करने के लिए की रूपरेखा का पालन करें.
The authors have nothing to disclose.
एईसी जेन ताबूत मेडिकल रिसर्च और मर्क अनुसंधान प्रयोगशालाओं के लिए Childs मेमोरियल फंड के एक साथी है. हम प्रयोगात्मक सलाह और चर्चा के लिए डी. Egli और सी. Cowan धन्यवाद.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
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Quinn’s Advantage Thaw Kit | Sage | ART-8016 | ||
Global medium | Life Global | GMGB-050 | ||
Plasmanate | Talecris | 61325 | ||
EmbryoMax Acidic Tyrodes | Chemicon/Millipore | MR-004-D | ||
KO-DMEM | Invitrogen/Gibco | 10829-018 | ||
KO-Serum Replacement | Invitrogen/Gibco | 10828-028 | ||
ES cell-tested fetal bovine serum, Defined | Hyclone | SH30070.03 | ||
Glutamax-I | Invitrogen/Gibco | 35050-079 | ||
Non-essential amino acids | Invitrogen/Gibco | 11140-076 | ||
Penicillin/Streptomycin | Invitrogen/Gibco | 15070-063 | ||
Recombinant human basic fibroblast growth factor | Invitrogen | 13256-029 | ||
Beta-mercaptoethanol | Invitrogen/Gibco | 21985-023 | ||
Rabbit anti-human red blood cell primary antibody | Rockland | 109-4139 | ||
Guinea-pig complement serum | Sigma | S-1639 | ||
Capillary pipettes in 10 microL, 50 microL, 100 microL sizes | VWR | |||
Mouth pipettes with tubing | VWR | supplied with capillary pipettes from VWR | ||
0.2 microm Acrodisc syringe filter | Pall Life Sciences | PN4192 | ||
0.5% Trypsin-EDTA | Invitrogen/Gibco | 25300-120 | ||
Tissue culture dishes | VWR | |||
Tissue culture dishes | NUNC | |||
Nikon SMZ1500 dissection scope equipped with Nikon Tokai Hit ThermoPlate warming stage | ||||
Mouse embryonic fibroblasts (E12.5) |