Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Behavior
Click here for the English version

Behavior

פרוטוקול לא צפוי מתח כרוני מתון להשראת אנהדוניה בעכברים

Published: October 24, 2018 doi: 10.3791/58184
Automatic Translation
1, 1,2
1School of Behavioral Science, The Academic College Tel-Aviv-Yaffo, 2Department of Education and Psychology, Open University

Summary

כאן אנו מציגים את פרוטוקול לא צפוי מתח כרוני מתון בעכברים. פרוטוקול זה המניע הפנוטיפ לטווח ארוך, כמו דיכאון, מאפשר להעריך את היעילות של תרופות נגד דיכאון בשם היפוך של גירעונות כמו דיכאון ובעיות התנהגות neuromolecular.

Abstract

דיכאון הוא מצב נפוץ מאוד, מתישה, התייחס באופן חלקי בלבד על-ידי pharmacotherapies הנוכחית. חוסר התגובה לטיפול על ידי מטופלים רבים יבקש הצורך לפתח חלופות טיפוליות חדשות כדי להבין טוב יותר את האטיולוגיה של ההפרעה. מודלים קליניים עם היתרונות translational מפותחים עבור משימה זו. כאן אנו מציגים פרוטוקול עבור שיטת מתח בלתי צפוי כרוני מתון (UCMS) בעכברים. ב פרוטוקול זה, עכברים בגיל ההתבגרות באופן כרוני חשופים מתחלפות לא צפויים לחצים מתון. דמוי בפתוגנזה של דיכאון אצל בני אדם, מתח חשיפה במהלך תקופת ההתבגרות עכברים רגישים שמסיתה הפנוטיפ דיכאונית כמו בבגרות. UCMS יכול לשמש עבור הקרנות של נוגדי דיכאון על מגוון רחב של התנהגויות כמו דיכאון ובמדד neuromolecular. בין הניסויים בולט יותר להעריך התנהגות דיכאונית בחולדות הוא מבחן העדפה סוכרוז (SPT), אשר משקף אנהדוניה (לסימפטום הליבה של דיכאון). SPT יוצגו גם בפרוטוקול זה. היכולת של UCMS כדי לגרום אנהדוניה, לעורר חסרונות התנהגותיים לטווח ארוך ולאפשר היפוך גירעונות אלה באמצעות טיפול כרוני (אך לא חריפה) עם תרופות נוגדות דיכאון מחזקת את תוקפו של הפרוטוקול לעומת פרוטוקולים בעלי חיים אחרים עבור גרימת התנהגויות כמו דיכאון.

Introduction

הפרעת דיכאון (MDD) הינה מחלה מתישה, זה כבר ציינו כמו ה-11 סיבתth הנטל הכלל-עולמי למחלות1, עם שכיחות שלמים של 11-16%2,3. MDD שויכה מגבלות קשות על המטופלים בתפקוד החברתי, תעסוקתי, מופחתת איכות החיים, רבים הפרעות מנטלית ופיזית סיכון מוגבר לתמותה4,5,6 , 7. ישנם מספר pharmacotherapies אפקטיבי והתערבויות פסיכולוגיות עבור MDD; עם זאת, יותר מאשר השלישי של החולים לא להשיג הפוגה עם קיימות אפשרויות טיפוליות8,9,10,11. לכן, כדאי מיפוי של הפתופיזיולוגיה של MDD ופיתוח תרופות חדישות הן עדיין בעל חשיבות עליונה. על מנת מענה לצרכים מודלים בעלי חיים אלו משימות לאמת מדעית כדי להיות מנוצל.

מתח בלתי צפוי כרוני מתון (UCMS) היא פרדיגמה מכרסמים הנודע בשימוש כדי לגרום דיכאון, חרדה-כמו התנהגויות12,13,14,15. המטרה העיקרית של UCMS היא ליצור גירעונות התנהגותית (כגון אנהדוניה ייאוש התנהגותית12,15) ב עכברים וחולדות, ולקדם הקרנות עבור פוטנציאל סוכנים תרופתי טיפולית. ההליך היה הוצג לראשונה על ידי כץ16 , לאחר מכן פותח על ידי וילנר17,18, מניב תוצאות התנהגותי, הנוירוביולוגי העצום זיכרונות התנסותו עם דיכאון12. זה תוכנן בתחילה על חולדות, אחר כך לאכלס עכברים13,19. בשגרה, מתבגרים בעלי חיים חשופים באופן כרוני שונים לא צפויים לחצים מתון. לאחר מכן, סוכנים תרופתי מנוהלים. מדדים התנהגותיים, ביולוגיות מתקבלים עם סיום הטיפול. אחד המבחנים בולט יותר שנערך בעקבות UCMS הוא המבחן העדפה סוכרוז (SPT). SPT מבוסס על העדפה מולדת של מכרסמים הפתרון ממותק ולא מים, הוא הודה נרחב כמודל translational חיוניים להערכת אנהדוניה12,18,20, 21 (וזה תסמין הליבה הדיכאון האנושי22,23).

בכניסתו העשור הרביעי מאז השקתו, UCMS הוחל על עכברים וחולדות במחקרים רבים. הרוב המכריע של מחקרים אלה מועסקים UCMS כשיטה לזירוז התנהגויות כמו דיכאון12,13,21,24. מחקרים גם המועסקים המודל ליצירת anxiogenic אפקטים25,26,27,28,29. סוכרוז והעדפות סכרין הן הבדיקות העיקריות להערכת אנהדוניה בעקבות UCMS12,18,30,31,32,33. אמצעים אחרים התוצאה ראויה לציון זה משולבים מאוד בספרות UCMS הם: ההשעיה הזנב בדיקה (הבטחה למחיר)28,34,35, לשחות בכוח בדיקה (FST)28,34 , 36 , 37 (שני מדידת הלחץ התמודדות/התנהגותית ייאוש), ניסוי השדה פתוח (OFT; מודדים לניתוח התנהגות, חרדה, כמו התנהגות ופעילות גינקולוגיות)28,25,38, את גבוה בנוסף מבוך (EPM; התנהגות חרדה מדידה)25,39,40 ובדיקות נוספות למדידת התנהגויות כמו דיכאון, חרדה, כמו התנהגויות, התפקוד הקוגניטיבי, התנהגות חברתית12 . ממשל כרונית של נוגדני דכאון (TCAs; imipramine35,41,42,43, desipramine18,44,45 ), תרופות נגד דיכאון tetracyclic (TeCAs;46,maprotiline47, mianserin48), מעכבי ספיגה חוזרת של סרוטונין (תרופות Ssri; פלואוקסטין46,47,49 ,30,אסציטלופרם50, האסירה51,52), מלטונין43,49, agomelatine53, החומר המדכא ההידרולז (FAAH) של חומצת שומן אמיד URB59754 ו מספר תרכובות טבעיות30,37,50,55,56,57,58 כבר הפגינו כדי להפוך את UCMS-induced דיכאון, חרדה-תסמינים דמויי. בסך הכל, השפעות טיפוליות אלו לא הושגו באמצעות טיפולים חריפה12 (למשל, האסירה51,52, imipramine53,54,59 ,60, פלואוקסטין53, agomelatine53, URB59754, brofaromine60).

חשיפה ללחץ בתקופת הילדות וההתבגרות היא גורם סיכון מרכזי להיווצרות הקדמי MDD (בין מספר הפרעות פסיכיאטריות אחרות) ב בגרות-61,-62,-63. הציר ההיפותלמוס-יותרת המוח-יותרת הכליה (HPA) היא מערכת נוירואנדוקריניים הגדולות ויסות התגובה הביו-התנהגותי ללחץ64. מתח לטווח ארוך במהלך תקופות התפתחותיות רגיש הילדות וההתבגרות מחליש את האיזון של הציר HPA. . זה יכול להרגיז למצב של הפעלה משופרת סימפטי, תגובתיות לא מאוזן, hypercortisolemia קיימא באמצעות המדינה המנוחה; לפיכך, עיבוד אנשים פגיעים דיכאון או חרדה הקשורים נפש65,66,67,68. UCMS מתרגמת כראוי זה הפתוגנזה: דגש על יישום במהלך עכברים ' ההתבגרות מעוררת רגישות כמו דיכאון לטווח ארוך. יתר על כן, חסרונות התנהגותיים המושרה על ידי UCMS, הן והיכרות שינויים משמעותיים ב- HPA ציר מתפקדת (למשל, על-ידי גרימת הפחתה במקדם neurotrophic נגזר מוח בהיפוקמפוס [BDNF; חלבון מעורב מאוד האיזון של HPA ציר69,70]30, או על-ידי ופוגע ויסות הפרשת corticosterone ל71,הדם72), בדמיון פתופיזיולוגיה בני12, 50,73.

UCMS יש מספר תכונות bolstering כמודל עבור דיכאון: למשל (i) ההתמחרות של אנהדוניה (אשר נחשב endophenotype של MDD23,74); (ii) UCMS מאפשר להעריך מגוון רחב של התנהגויות כמו דיכאון כמו ייאוש התנהגותית, התנהגות חברתית מופחתת, התדרדרות במצב הפרווה עוד34; וכן (iii) כרונית (2-4 שבועות), אך לא חדות, מנהלה של נוגדי דיכאון עקב חשיפה מתח יכול לייצר השפעה תרפויטית ממושך במקביל האפקט שבידי בחולים אנושיים אותם סוכנים30,75 ,76,77.

תכונות אלה מחזקים את תוקפו של UCMS לעומת דגמים אחרים בעלי חיים של דיכאון. של FST78 את הבטחה למחיר79 שני מודלים המשמשים לזירוז או להעריך התנהגות דיכאונית בקרב אנשי עסקים ותיירים כאחד. כמודלים להשראת התנהגויות כמו דיכאון יש להם ברור הגירעונות בהשוואה ל- UCMS; הם אינם לבקש שינויים התנהגותיים לטווח ארוך ועל אולי רק לשקף את התאמת כהתקפת ולא תשואה של ביטוי, כמו דיכאון עמיד76.

במודל חיה חלופית של דיכאון הוא הדגם תבוסה חברתית. בניגוד FST, הבטחה למחיר את הדגם הזה (כמו UCMS) מחייב היישום של מתח כרוני (מזהה est [קרי], לו את חוזרים ונשנים של החיה החברתית aversive מפגשים עם עמיתיהם דומיננטית)76,77 , 80 , 81 , 82. היתרון העיקרי של המודל תבוסה חברתית היא כי היא מעסיקה גירויים חברתיים כמו לחצים, ובכך המשקף את התפקיד של מתח פסיכו-סוציאלי בפתוגנזה של הדיכאון האנושי. בדומה UCMS, המודל תבוסה חברתי מעורר לטווח ארוך התנהגויות כמו דיכאון, שינויים נוירואנדוקריניים. שוב במקביל UCMS, יש התבוסה-induced חברתית ' יוכל להעצר באמצעות הנהלת כרונית, אך לא חדות, של תרופות נוגדות דיכאון. בסך הכל, אין תמיכה גדולה עבור הניצול של UCMS ותבוסה חברתית כמו מנגנוני קליניים על חקירת הפתופיזיולוגיה של דיכאון76,77,81,82 . הפיגור העיקריים של המודל חברתית מפלה זאת, כי זה יכול רק להיות מיושם על מכרסמים זכר, כמוצג נקבות לא מספיקות התנהגות תוקפנית כלפי השני83. . Contrastingly, UCMS הוכח כדי להפיק אפקטים דמויי דיכאון מספר על שני עכברים זכר ונקבה34.

מתח צפוי כרוני מתון (PCMS) הוא מודל מכרסם אחר זה אוכף משטר של חשיפה חוזרת יומי איפוק מתח28,84,85,86,87. מספר מחקרים הראו כי PCMS מוגבר, כמו חרדה התנהגויות28,87; אמנם, ישנם סותרות דוחות ושהבנק vis PCMS היכולת לגרום התנהגויות כמו דיכאון לטווח ארוך. בניגוד UCMS, PCMS הפיק תוצאות משביעות רצון פחות מתייחס יכולתו לגרום84,28,נו כמו המדינה86. . זה עקבי עם הפנומנולוגיה האנושית, שבה לא צפויים לחצים הם מזיקים יותר מאשר צפוי אלה88.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

כל השיטות המתוארות כאן אושרו על ידי טיפול בעלי חיים מוסדיים ועל שימוש הוועדה של אקדמיים במכללת תל-אביב יפו.

1. בעלי חיים

  1. שימוש המתבגר מראש (קרי, בן 3 שבועות) המכון של סרטן מחקר (ICR) outbred עכברים זכרים.
  2. אקראי עכברים לקבוצת הלחץ באופן שווה בגודל שני (UCMS לעומת נאיבי). השתמש עכברים 15 לכל קבוצה טיפול (למשל: אם יש 3 תרופתי קבוצות הטיפול להשתמש 90 הכוללת עכברים; [UCMS לעומת תמים] 2 × 3 [טיפולי] × 15 [עכברים] = 90)
  3. עכברים בבית לפי קבוצת לחץ; כלומר, הבית עכברים תמים עם עכברים תמים רק ועכברים הבית UCMS קבוצה עם עכברים מקבוצת UCMS בלבד.
  4. בית חיות בכלובים בבית רגיל (30 × × 14 ס מ 15; עכברים 5 לכל בכלוב; כל הכלוב המכיל עכברים של כל קבוצות טיפול [קרי, טיפול תרופתי קבוצות]; לשמור על עכברים באותו כלוב לאורך כל הניסוי, למעט כאשר צוין אחרת) .
  5. למלא את הכלובים הביתה עם נסורת טריים (מוחלפים פעמיים בשבוע), הוסף פיסת צמר גפן העשרה.
  6. חיות הבית בכלוב בבית לתקופה בעזיבה של שבוע אחד. לאפשר גישה ad libitum צ'או מכרסמים ומים (למעט במהלך UCMS הלחץ יישומים).
  7. לשמור על מחזור/כהה עקבי 12 שעות (למעט כאשר צוין אחרת). במהלך הליכי UCMS לשמור על עכברים תמימה בכלוב שלהם הביתה.

2. UCMS

  1. לייעד את חדר נפרד במעבדה, לשימוש הבלעדי של הפרוטוקול UCMS.
  2. עיצוב משטר 4 שבועות הלחץ שבו כל אחד גורמי שבע (קרי, כלוב רטוב, נסורת לחה, כלוב מוטה, כלוב ריק, הלחץ החברתי, עכברים איפוק, שיבוש מחזור/כהה) מנוצל פעם בשבוע, ביום אחר כל שבוע (עבור עיצוב אפשרי לראות את הדו ח המשלים טבלה 1).
  3. בעקבות 1 בשבוע של להתאקלמות (ראה 1.6) ליזום לחצים היישום (להבטיח כי עכברים הם בן כ- 4 שבועות).
  4. כל יום, לפני היישום של הלחץ, העברת הכלובים של קבוצת UCMS מן החדר דיור אל חדר UCMS.
  5. במהלך הלחץ יישומים, לחסום את הגישה האוכל מכרסמים ואת המים עבור קבוצת UCMS (למעט במהלך היפוך/כהה מחזור).
    הערה: זו יכולה להיות מושגת על ידי ההחלפה של המקורית כלוב המכסה (שמכילה מזון ומים), מכסה כלוב ריק.
  6. להחיל את גורמי הבאים לפי משטר תוכננה קודם (ראה 2.2):
    1. כלוב רטוב
      1. הצב עכברים עם עמיתיהם הביתה כלוב בכלוב ריק (קרי, ללא נסורת הכלוב).
      2. למלא את הכלוב ריק עם מים כל הזמן-24 ± 1 ° C עד לעומק של 1 ס מ (לשפוך במשנה זהירות כדי למנוע דליפה מים ישירה על עכברים). לשמור על עכברים בכלוב רטוב במשך 4 שעות.
      3. להעביר את העכבר כל נפרד בודדים הציעה שתושב זמני הייבוש כלוב עם מנורת חימום מעליו, כרית החימום תחת זה ומצעים נייר מגבת. מקום מדחום בכלוב ארעי כדי לוודא בטמפרטורה שלא תעלה על 37 מעלות צלזיוס.
      4. שמור כל עכבר בכלוב ארעי עד יבש, נראה נמרץ (כ 10-15 דקות). עכברים לשוב הביתה כלוב עם עמיתיהם אותו.
    2. נסורת לחה
      1. יוצקים מים שמרו ב 24 ± 1 ° C לכלוב הביתה עד הנסורת הוא בינוני לחה (לשפוך במשנה זהירות כדי למנוע דליפה מים ישירה על עכברים).
        הערה: אין צורך להשתמש נסורת טריים לפני לשפוך את המים.
      2. לאחר 4 שעות, יבש עכברים בכלוב ארעי כמתואר ב- 2.6.1.3. מקום עכברים עם עמיתיהם הביתה כלוב כלוב סטרילי עם נסורת טריים.
    3. כלוב מוטה
      1. להטות כלובים-45° הקיר במשך 4 שעות.
        הערה: במהלך תקופה זו, עכברים הלחץ להישאר בכלוב שלהם הביתה עם עמיתיהם.
    4. כלוב ריק
      1. העברת עכברים, יחד עם עמיתיהם כלוב הביתה ספציפיים, מן הכלוב בבית אל כלוב ריק במשך 4 שעות.
    5. לחץ חברתי
      1. העברת עכברים, יחד עם עמיתיהם כלוב הביתה ספציפיים, מן הכלוב הביתה אל כלוב אשר הוחזק על ידי קבוצה שונה של עכברים לתקופה של פחות 3 d לקראת יישום גורם הלחץ. לשמור על עכברים בכלוב לא מוכר במשך 4 שעות.
        הערה: כדי למנוע חוסר וודאות במקום מדבקה על כל הכלוב כדי לציין מקור עכברים בכלוב.
    6. עכברים איפוק
      1. הנח את העכבר כל בנפרד ב- restrainer העכבר נקי עבור 4 h עכברים החזרה לכלוב הביתה עם עמיתיהם אותו.
    7. שיבוש מחזור/כהה
      1. העברת עכברים בכלוב שלהם הביתה עם עמיתיהם ספציפית, אל חדר UCMS. להשאיר את האור דולק, במשך 24 שעות רצופות.
        הערה: רק במהלך הזה גורם הלחץ עכברים תתאפשר גישה ad libitum צ'או מכרסמים ומים.
  7. בעקבות הלחץ יישום, להחזיר כלובים של קבוצת UCMS מן החדר UCMS אל חדר דיור.
  8. במהלך 4 שבועות של חשיפה ללחץ, לשמור על קבוצת תמימים בכלובים בבית שלהם ממוקם בחדר דיור.
    הערה: עכברים תמים שאינן מועברות אל החדרים UCMS כי חשיפה לעכברים אחרים שעברו הליך מתח שיכולים לזרז אפקט stressogenic, אפילו בלי חשיפה ישירה הלחץ89,90.
  9. פיקוח על בעלי חיים במהלך UCMS
    1. במהלך הלחץ יישומים (למעט במהלך שיבוש/כהה מחזור) לפקח על עכברים כל 30 דקות על-ידי נסיינית מנוסים. אם מצוקה לא טיפוסיות (למשל, רעד, עייפות, חוסר תנועה) הוא ציין (זהירות מיוחדת צריכה להינתן היפותרמיה פוטנציאליים במהלך 'רטוב קייג '' ו 'לחה נסורת') לשחרר את העכבר מן הלחץ באופן מיידי.
    2. לבדוק כל עכבר מדי יום עבור פצעים או מומים פיזיים או התנהגותיים אחרים. אם כך ומפוקחים להתייעץ עם הוטרינר של המעבדה כדי להחליט אם העכבר לא להיות כלולים הניסוי.
    3. שוקלים כל עכבר כל 3 ימים. ירידה חזקה במשקל הגוף (קרי, > הפחתת 10% מן המשקל הבסיסית או > 15% הפחתה מן האחרון נמדד משקל) יש לדווח הוטרינר של המעבדה העכבר כשמשהו מהניסוי.

3. סינון עבור תרופות נגד דיכאון

  1. ביום שלאחר הפסקת בפרוטוקול UCMS, להתחיל מינהל בשם סוכנים תרופתי טיפולית (כלומר, אסציטלופרם [15 מ"ג/ק"ג; i.p.; 3 שבועות; על המינהל ליום]30,50או רומן צמחים טיפול [NHT; 30 מ"ג/ק"ג i.p.; 3 שבועות; ניהול אחת ליום]30,50).
    הערה: לקבלת מינונים של תרופות אחרות לא נכלל בפרוטוקול זה ראה: flouxetine46, 47, 49, 89, 90, האסירה51, imipramine35,41,42,43, desipramine18,44,45, maprotiline46,47, mianserin48, מלטונין43,49, URB59754, טבעיים אחרים תרכובות37,55,56,57,58.
    הערה: NHT היא בנוסחת צמחים שפותחה במעבדתנו. הוא מורכב של 4 המרכיבים:
    עוזרר Pinnatifida, חיטת הלחם, Lilium בראוני , שיזף Fructus Zizyphi. הנוסחה מוגש על ידי המסת מרכיבי (רכשה כמו גרגרי הליחה) ביחד בתוך תמיסת מלח המכיל 1% דימתיל סולפוקסיד לתת ריכוז סופי של 0.47 מ"ג/מ"ל (כל)27,50.
  2. לכלול קבוצת טיפול לשלוט ולפקח תמיסת מלח (i.p.; 3 שבועות זריקה אחת ליום) לקבוצה זו.
  3. לחשב את התרופה במינון לפי עכברים ' משקל, כפי שהתקבל בשקילת הקודמת.
  4. מחלקים תרופות באופן כרוני (בדרך כלל אחד והתרופות האמריקני ביום באמצעות הזרקת בקרום הבטן [i.p.] למשך 3 שבועות).
    הערה: יש צורך עזים ומתנגד העכברים לפני הזריקה i.p..
  5. ממשיכים לשקול עכברים כל 3 d; שקילת האחרון צריך להיות 3 d לפני ההנהלה התרופה האחרונה.

4. הערכה של טון האסתטית SPT

  1. בעקבות שלב הטיפול, להסיר את העכבר כל הכלוב הביתה ומניחים אותו בנפרד בתוך כלוב מלא עם נסורת טריים וחתיכת צמר גפן העשרה.
  2. להכין שני בקבוקים, אחת עם מים מזוקקים ואחרת עם פתרון 2% סוכרוז (חומר אחר שיכול לשמש: למשל, סכרין91, אתנול30).
    הערה: כל בקבוק צריך להכיל באותו אמצעי אחסון של נוזל. לא להתאקלמות מוקדמת ולא habituation שלבים נחוצים לפני כניסתה של נוזלים.
  3. שוקל שני בקבוקים ולהגדיר אותם על המכסה את הכלוב כדי לאפשר את העכברים גישה ad libitum שני פתרונות לתקופה של (באחת מהאפשרויות הבאות): 24/48/72/144 h.
  4. מקם את שני הבקבוקים בשני הקצוות של המכסה את הכלוב. המקום צ'או מכרסמים בין שני בקבוקים כדי לאפשר גישה ad libitum מזון.
  5. החלף בקבוקים כל 24 שעות, באמצעות סטרילי בקבוקים עם נוזלים טריים.
    הערה: כמו עכברים שוכנים בנפרד יש צורך לשנות את הנסורת גם לאחר 144 h92.
  6. להחליף העמדות של חרירי כל 12 שעות (כאשר הבדיקה משך 24 שעות ביממה) או פעם ביום (כאשר משך הבדיקה עולה 24 שעות ביממה) לאזן את האפשרות כי התוצאות נמהלו לפי העדפת מיקום.
  7. שוקלים בקבוקים כל יום כדי להעריך את הצריכה של כל בקבוק.
  8. לחשב סוכרוז העדפה כמו theratio של סוכרוז צריכת מתוך סך צריכת הנוזלים (קרי, סוכרוז/סוכרוז + מים).

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

על מנת לאמת את היעילות של ההליך UCMS להשראת גירעונות, כמו דיכאון, נערכה בדיקת מניפולציה. עכברים ICR outbred זכר חולקו באופן אקראי לתנאים או UCMS או נאיבית (4 שבועות, כפי שמתואר פרוטוקול 2.2). לאחר מכן, SPT (6 ימים, כפי שמתואר פרוטוקול 4) היה מנוהל כדי להעריך אם עכברים לאחר שעברו UCMS הפגינו גירעונות האסתטית. כעבור זמן קצר, עכברים הוקרבו, ההיפוקמפוס היה גזור החוצה לחלוטין עבור BDNF (חלבון מאוד מעורבים הפתופיזיולוגיה של דיכאון70,93) הערכה באמצעות מקושרים-אנזים immunosorbent assay (אליסה). ראה איור 1 עבור תכנון המחקר.

עצמאית דגימות t-הבדיקה התגלה הבדל משמעותי בין הקבוצות בהעדפות שלהם סוכרוז (t(23) = 2.32, p < 0.05). הקבוצה UCMS הפגינו פחתה העדפה סוכרוז לעומת נאיבי קבוצה (ראה איור 2 א). הדבר מצביע על פרוטוקול UCMS היה יעיל וגורם אנהדוניה. עצמאית דגימות t-מבחן BDNF בהיפוקמפוס רמות גילה הבדל משמעותי בין הקבוצות (t(23) = 2.43, p < 0.05). הקבוצה UCMS הפגינו פחתה רמות BDNF בהיפוקמפוס לעומת נאיבי קבוצה (ראה איור 2B). הדבר מצביע על פרוטוקול UCMS הוביל הצטמצמות ברמות BDNF בהיפוקמפוס, כפי שניתן לראות דיכאון האנושי94.

במחקר אחר מהמעבדה שלנו, נבחנו ההשפעות נוגדות דיכאון, כמו פוטנציאלי של שתי התרופות ע פ הפרוטוקול UCMS. ההליך הבא UCMS 30 (כפי שמתואר 2-) גברית, ICR outbred העכברים קיבלו טיפול כרוני (3 שבועות) עם אסציטלופרם SSRI (15 מ"ג/ק"ג; i.p.), NHT (30 מ"ג/ק"ג; i.p.; לקבלת מידע נוסף בנוגע NHT ראה הפניות25 30,50,75) או מלוחים. בעקבות הטיפול שלב, SPT נערך, רמות BDNF בהיפוקמפוס היו העריך. ראה איור 3 תכנון המחקר.

דו-כיווני השונות (ANOVA) על העדפה סוכרוז חשף טיפול משמעותי (F(2,92) = 4.01, p < 0.05) ואינטראקציה UCMS × טיפול (F(2,92) = 4.92, p < 0.01) אפקטים (ראה איור 4A). ניתוח פוסט-הוק Sidak גילה כי הקבוצה UCMS-תמיסת מלח הדגימו ירידה משמעותית העדפה סוכרוז לעומת הקבוצה תמימה-תמיסת מלח (p < 0.001); אין ירידות נצפו UCMS-אסציטלופרם, קבוצות UCMS-NHT לעומת הקבוצות תמימה (לא משמעותית [נ. ס.]). בנוסף, הקבוצה UCMS-תמיסת מלח הפגינו העדפה סוכרוז ירידה בהשוואה UCMS-אסציטלופרם (p < 0.05) והן את קבוצות UCMS-NHT (p < 0.001). אלה מראים כי אסציטלופרם והן NHT מנורמל אנהדוניה הנוצרות על-ידי UCMS.

אנובה דו-כיווני ברמות BDNF בהיפוקמפוס חשף UCMS משמעותית (F(1,22) = 8.92, p < 0.01), טיפול (F(2,22) = 18.36, p < 0.001) ואינטראקציה UCMS × טיפול (F(2,22) = 5.19, p < 0.05) (ראה איור 4B). ניתוח פוסט-הוק Sidak גילה כי הקבוצה UCMS-תמיסת מלח הראו ירידה משמעותית ברמות BDNF בהיפוקמפוס לעומת הקבוצה תמימה-תמיסת מלח (p < 0.001); אין ירידות דומות נצפו UCMS-אסציטלופרם, קבוצות UCMS-NHT לעומת הקבוצות תמימה (נ. ס). בנוסף, הקבוצה UCMS-תמיסת מלח הדגימו ירידה BDNF בהיפוקמפוס רמות בהשוואה UCMS-אסציטלופרם והן את קבוצות UCMS-NHT (p < 0.001 שני ניגודים). אלה מראים כי אסציטלופרם והן NHT מנורמל ההפחתה UCMS-induced ברמות BDNF בהיפוקמפוס.

Figure 1
איור 1: תרשים המתאר עיצוב ניסיוני אפשרי. בעקבות 1 בשבוע של והפיזיולוגי, עכברים חולקו באופן אקראי UCMS או נאיבית תנאים (שמירת 4 שבועות). לאחר מכן, סוכרוז בהעדפה נבדקה, עכברים הוכנו להערכת BDNF. SPT: סוכרוז העדפת מבחן; תקליטור: נקע בצוואר הרחם. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

Figure 2
איור 2: השפעת UCMS על העדפה סוכרוז ורמות BDNF hippocampal. (א) עכברים נתון 4 שבועות של UCMS הראו ירידה משמעותית העדפה סוכרוז לעומת עכברים תמים. (ב) עכברים נתון 4 שבועות של UCMS הראו ירידה משמעותית ברמות BDNF בהיפוקמפוס לעומת עכברים תמים. n = 12-13 עכברים לכל קבוצה. תוצאות מבוטא זאת אומרת ± ב- SEM *p < 0.05 אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

Figure 3
איור 3: דיאגרמה המתארת בעיצוב ניסיוני אפשרי. בעקבות 1 בשבוע של והפיזיולוגי, עכברים חולקו באופן אקראי UCMS או נאיבית תנאים (שמירת 4 שבועות). לאחר מכן, עכברים קיבל טיפול כרוני עם תמיסת מלח, אסציטלופרם (15 מ"ג/ק"ג; i.p.) או NHT (30 מ"ג/ק"ג; i.p.), שנמשך 3 שבועות (אחד מינהלה ליום). בעקבות הטיפול, סוכרוז בהעדפה נבדקה, עכברים הוכנו להערכת BDNF. SPT: סוכרוז העדפת מבחן; תקליטור: נקע בצוואר הרחם. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

Figure 4
איור 4: ההשפעות של טיפול כרוני עם אסציטלופרם NHT-UCMS-induced הפחתות סוכרוז העדפה ורמות BDNF hippocampal. (א) שני אסציטלופרם NHT מנע את ההפחתה UCMS-induced בהעדפות סוכרוז; n = 15 – 17 עכברים לכל קבוצה. (B) בשני אסציטלופרם NHT מנע את ההפחתה UCMS-induced ברמות BDNF בהיפוקמפוס; n = 4-6 עכברים לכל קבוצה. תוצאות מבוטא זאת אומרת ± ב- SEM *p < 0.05 * * *p < 0.001. דמות זו שונתה ממחקר שפורסם בעבר מהמעבדה שלנו, מודפס תחת רישיון גישה פתוחה PLoS ONE ("CC-מאת") אשר מאפשר הדפסה מחדש30. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

משלימה טבלה 1: זמנים של מתח בלתי צפוי כרוני מתון (UCMS). אנא לחץ כאן כדי להוריד את הקובץ.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

ככל MDD היא הפרעה נפוצה מאוד מתישה, התייחס באופן חלקי בלבד על-ידי אפשרויות טיפוליות הנוכחי, בחיפוש אחר טיפולים טובים יותר מדעי הוא עדיין לסוגיה דחופה. יחד עם חידושים טכניקות פסיכולוגיות, pharmacotherapies נוספים נדרשים עבור חלק גדול של חולים שאינם מגיבים לתרופות קיימות. מוקפד מודלים לטיפול בדיכאון הם רכיב המפתח במשימה זו. מודלים כאלה להקל על הקרנות עבור דיכאון חדשני ולהרחיב את ההבנה של האטיולוגיה של ההפרעה. UCMS הוא אחד הדגמים מכרסמים הבולטים של דיכאון. שלה ' קומתו מוצגת על-ידי תובנות הבולטים12,18,82,95,96,97ופרסומים המכריע.

אנהדוניה הוא אחד הסימפטומים הליבה של MDD22,23,74. צליל נו חמורות יותר נמצא קשור עניים הפרוגנוזה MDD חולים74,98. כוחות גדולים UCMS כמודל של דיכאון היא היכולת שלה ליצור אנהדוניה31 כפי שהודגם ב סוכרוז SPT. הוא reinforcer מולדת עבור מגוון מינים מכרסמים51,52,59, 99; זה מסביר את התמיכה הכוללת של SPT כמודל מציאותי של הטון האסתטית מכרסמים14,31,100. עקב דיסטוניה בתפקיד אנהדוניה במודל חיה כלשהי של דיכאון, הוצע כי כאשר בוחנים יישום UCMS למעבדה, הצעד הראשון צריך להיות אישור של הליך את היכולת לגרום למצב של נו12. זה יקל על תקינה יותר של מעבר מעבדות, יכול להיות קרן מחקרים עתידיים ששפך אור נוסף על ההפרעה.

תכונה נוספת התומכת את תוקפו של UCMS כמו מודל של דיכאון היא כי שינויים התנהגותיים ומולקולרית שנגזרות UCMS הפוכים על ידי טיפול כרוני, אבל לא חריפה, עם סוכנים בעבר שאומתו יעיל תרופות נוגדות דיכאון12. האפקט הטיפולי המתמשך דומה ההשפעות של תרופות נוגדות דיכאון אצל בני אדם, אשר בדרך כלל להתחיל מתבטא רק לאחר 2-3 שבועות של טיפול101,102. בהקשר זה, UCMS יש את ערך עליון הפנים לעומת של FST78 ו את הבטחה למחיר103, שבו מתקבלים ההשפעות גם לאחר הטיפול חריפה. שלא כמו הבטחה למחיר של FST, הגירעון זו אינה ניכרת הדגם תבוסה החברתית של דיכאון, אשר (יחד עם UCMS) תבלוט מעולה במודל חיה של דיכאון. עם זאת, לעומת FST ו את הבטחה למחיר, UCMS ומודלים מתח כרוני אחרים הם הרבה יותר ארוך ויקר.

יש כבר מועסקים זני עכברים הבולטים במחקרים UCMS. בין זנים תכופים יותר הן את C57BL/621,BALB/cJ34. אנחנו מסויימת גברית, ICR outbred עכברים כמו מחקרים רבים הראו את היעילות של UCMS של זן זה. יתר על כן, הניצול של ICR outbred עכברים לוח עץ תוקף אקולוגי של הפרוטוקול, עקב הגבוה בין השתנות גנטית חיות זה זן (לעומת העכברים הטרנסגניים זנים)30,75,104 , 105 , 106.

המוצע מינונים של תרופות אחרות לא נכלל בפרוטוקול זה, אך שימשו פרוטוקולים אחרים UCMS ראה: flouxetine46,47,49,104,105, האסירה51 42,41,35,imipramine43,44,desipramine18,45,46,maprotiline47, mianserin48, מלטונין43,49, URB59754 , טבעיים אחרים תרכובות37,55,56,57,58 .

ישנם מספר אמצעים נוספים התוצאה לעתים קרובות יושמו פרוטוקולים UCMS, ביניהם: (i) FST: מדד לייאוש התנהגותית (ראה התייחסות78 עבור פרוטוקול תיחום); (ii) הבטחה למחיר: מדד נוסף לייאוש התנהגותית (ראה התייחסות103 עבור פרוטוקול תיחום); (iii) התז בדיקה והערכה של המעיל המדינה: שני אינדיקטורים של טיפוח התנהגות, בשם למדידת אפתיה (ראה התייחסות107 עבור פרוטוקול תיחום); (iv) גדושה/העדפה לחדשנות חברתית: אמצעי עבור התנהגות חברתית108 (ראה התייחסות109 עבור פרוטוקול תיחום); התנהגות מינית (v): מדד נוסף לצליל האסתטית (ראה התייחסות75 עבור פרוטוקול תיחום). יתר על כן, UCMS משמש כדי להעריך neuromolecular, אנדוקרינית ואמצעים אחרים ביולוגית הקשורה דיכאון50,72,110,111,112, 113 , 114 , 115 , 116 (ליתר דיוק, ראה הפניות117,118 להערכת BDNF באמצעות תיחום פרוטוקול אליסה).

קיימים מספר שלבים קריטיים בתוך פרוטוקול UCMS: (i) היא חיונית, כי עכברים של כל קבוצות הטיפול ישוכנו יחד, לא בכלובים נפרדים. לדוגמה, אם ישנן 3 קבוצות טיפול (למשלאסציטלופרם, NHT, תמיסת מלח) יהיו שני עברים בין 2 הקבוצות ועכבר 1 מקבוצת שנותרה בכלוב כל. הדיור קבוצה היברידית יסכל את האפשרות כי התוצאות היו והיכרות את התנאים דיור וגם לא את הטיפול כשלעצמה. (ii) תמים עכברים חייב להיות בו בנפרד מן העכבר לחוץ, שכן דיור עם העכברים הדגיש הוא מלחיץ90,119,120 , לפיכך, יכול לעכב או להחליש את המניפולציה מתח. פרוטוקולים UCMS הקודם (iii) יש הורה דיור אחת יותר מאשר קבוצת הדיור32,121; לנו הציעו לאחרון כמו דיור אחת עלול לגרום נוספת הרגישות ללחץ של עכברים וחולדות122,123,124,125. (iv) לוח הזמנים UCMS להיות מתוכננים בשקידה כדי להבטיח הוודאות (קרי, חשיפה אקראית הלחץ בכל פעם בשבוע); עם זאת, לוחות זמנים יכול להיות שונה לאורך כל הניסוי כל עוד נשמרת החריפו.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

המחברים אין לחשוף.

Acknowledgments

המחברים רוצה להודות גלי ברויר על הסיוע ב הפקת הסרטון. מחקר זה נתמך על ידי משרד המדע, הטכנולוגיה והחלל (מענק מס 313552), על ידי המכון הלאומי לפסיכוביולוגיה בישראל (NIPI-208-16-17b) ועל ידי קרן האוניברסיטה הפתוחה.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Heating lamp Ikea AA-19025-3
Heating pillow Sachs EF-188B
Mice restrainer
Portable electronic balance (*.** g)
Standard rubber stopper, size 5 Ancare #5.5R To avoid spillage during SPT
Straight open drinking tube (2.5") Ancare OT-100 To avoid spillage during SPT (insert drinking tube into rubber stopper)
2% sucrose solution
50 mL conical centrifuge tube For the SPT
Pre-adolescent (approximately 20-days old) ICR outbred mice Envigo Hsd:ICR (CD-1)

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Murray, C. J., et al. Disability-adjusted life years (DALYs) for 291 diseases and injuries in 21 regions, 1990-2010: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study. Lancet. 380 (9859), 2197-2223 (2010).
  2. Bromet, E., et al. Cross-national epidemiology of DSM-IV major depressive episode. BMC Medicine. 9, (2011).
  3. Kessler, R. C., et al. The Epidemiology of Major Depressive Disorder. JAMA: The Journal of the American Medical Association. 289 (23), 3095 (2003).
  4. Doom, J. R., Haeffel, G. J. Teasing apart the effects of cognition, stress, and depression on health. American Journal of Health Behavior. 37 (5), 610-619 (2013).
  5. Mykletun, A., Bjerkeset, O., Øverland, S., Prince, M., Dewey, M., Stewart, R. Levels of anxiety and depression as predictors of mortality: The HUNT study. British Journal of Psychiatry. 195 (2), 118-125 (2009).
  6. Moussavi, S., Chatterji, S., Verdes, E., Tandon, A., Patel, V., Ustun, B. Depression, chronic diseases, and decrements in health: results from the World Health Surveys. Lancet. 370 (9590), 851-858 (2007).
  7. Otte, C., et al. Major depressive disorder. Nature Reviews Disease Primers. 2, (2016).
  8. Rush, A. J., et al. Acute and longer-term outcomes in depressed outpatients requiring one or several treatment steps: A STAR*D report. Amerian Journal of Psychiatry. 163 (11), 1905-1917 (2006).
  9. Cuijpers, P., Karyotaki, E., Weitz, E., Andersson, G., Hollon, S. D., Van Straten, A. The effects of psychotherapies for major depression in adults on remission, recovery and improvement: A meta-analysis. Journal of Affective Disorder. 159, 118-126 (2014).
  10. Lam, R. W., et al. Canadian Network for Mood and Anxiety Treatments (CANMAT) 2016 Clinical Guidelines for the Management of Adults with Major Depressive Disorder. Canadian Journal of Psychiatry. 61 (9), 510-523 (2016).
  11. Kupfer, D. J., Frank, E., Phillips, M. L. Major depressive disorder: New clinical, neurobiological, and treatment perspectives. Lancet. 379 (9820), 1045-1055 (2012).
  12. Willner, P. Chronic mild stress (CMS) revisited: Consistency and behavioural- neurobiological concordance in the effects of CMS. Neuropsychobiology. 52 (2), 90-110 (2005).
  13. Surget, A., Belzung, C. Unpredictable chronic mild stress in mice. Experimental Animal Model in Neurobehavior Research. , 79-112 (2009).
  14. Hoffman, K. L. 2 -What can animal models tell us about depressive disorders?. Modelling Neuropsychiatric Disorder in Laboratory Animals. , (2016).
  15. Cryan, J. F., Holmes, A. The ascent of mouse: advances in modelling human depression and anxiety. Nature Review Drug Discovery. 4 (9), 775-790 (2005).
  16. Katz, R. J., Roth, K. A., Carroll, B. J. Acute and chronic stress effects on open field activity in the rat: Implications for a model of depression. Neuroscience and Biobehavior Reviews. 5 (2), 247-251 (1981).
  17. Willner, P. The validity of animal models of depression. Psychopharmacology (Berlin). 83 (1), 1-16 (1984).
  18. Willner, P., Towell, A., Sampson, D., Sophokleous, S., Muscat, R. Reduction of sucrose preference by chronic unpredictable mild stress, and its restoration by a tricyclic antidepressant. Psychopharmacology (Berlin). 93 (3), 358-364 (1987).
  19. Ducottet, C., Belzung, C. Behaviour in the elevated plus-maze predicts coping after subchronic mild stress in mice. Physiology and Behavior. 81 (3), 417-426 (2004).
  20. Treadway, M. T., Zald, D. H. Reconsidering anhedonia in depression: Lessons from translational neuroscience. Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 35 (3), 537-555 (2011).
  21. Pothion, S., Bizot, J. C., Trovero, F., Belzung, C. Strain differences in sucrose preference and in the consequences of unpredictable chronic mild stress. Behavioural Brain Research. 155 (1), 135-146 (2004).
  22. American Psychiatric Association. . Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders. 5th Edition (DSM-5). , (2013).
  23. Pizzagalli, D. A. Depression, stress, and anhedonia: toward a synthesis and integrated model. Annual Review Clinical Psychology. 10, 393-423 (2014).
  24. Nollet, M., Le Guisquet, A. -M., Belzung, C. Models of depression: unpredictable chronic mild stress in mice. Current Protocols in Pharmacology. , Chapter 5 (June), Unit 5.65 (2013).
  25. Doron, R., Lotan, D., Rak-Rabl, A., Raskin-Ramot, A., Lavi, K., Rehavi, M. Anxiolytic effects of a novel herbal treatment in mice models of anxiety. Life Science. 90 (25-26), 995-1000 (2012).
  26. Rössler, A. S., Joubert, C., Chapouthier, G. Chronic mild stress alleviates anxious behaviour in female mice in two situations. Behavioural Processes. 49 (3), 163-165 (2000).
  27. Maslova, L. N., Bulygina, V. V., Markel, A. L. Chronic stress during prepubertal development: Immediate and long-lasting effects on arterial blood pressure and anxiety-related behavior. Psychoneuroendocrinology. 27 (5), 549-561 (2002).
  28. Zhu, S., Shi, R., Wang, J., Wang, J. -F., Li, X. -M. Unpredictable chronic mild stress not chronic restraint stress induces depressive behaviours in mice. Neuroreport. 25 (14), 1151-1155 (2014).
  29. Bondi, C. O., Rodriguez, G., Gould, G. G., Frazer, A., Morilak, D. A. Chronic unpredictable stress induces a cognitive deficit and anxiety-like behavior in rats that is prevented by chronic antidepressant drug treatment. Neuropsychopharmacology. 33 (2), 320-331 (2008).
  30. Burstein, O., et al. Escitalopram and NHT normalized stress-induced anhedonia and molecular neuroadaptations in a mouse model of depression. PLoS One. 12 (11), (2017).
  31. Willner, P., Muscat, R., Papp, M. Chronic mild stress-induced anhedonia: A realistic animal model of depression. Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 16 (4), 525-534 (1992).
  32. Papp, M., Willner, P., Muscat, R. An animal model of anhedonia: attenuation of sucrose consumption and place preference conditioning by chronic unpredictable mild stress. Psychopharmacology (Berlin). 104 (2), 255-259 (1991).
  33. Kumar, B., Kuhad, A., Chopra, K. Neuropsychopharmacological effect of sesamol in unpredictable chronic mild stress model of depression: Behavioral and biochemical evidences. Psychopharmacology (Berlin). 214 (4), 819-828 (2011).
  34. Mineur, Y. S., Belzung, C., Crusio, W. E. Effects of unpredictable chronic mild stress on anxiety and depression-like behavior in mice. Behavioral Brain Research. 175 (1), 43-50 (2006).
  35. Ibarguen-Vargas, Y., et al. Deficit in BDNF does not increase vulnerability to stress but dampens antidepressant-like effects in the unpredictable chronic mild stress. Behavioral Brain Research. 202 (2), 245-251 (2009).
  36. Luo, D. D., An, S. C., Zhang, X. Involvement of hippocampal serotonin and neuropeptide Y in depression induced by chronic unpredicted mild stress. Brain Research Bulletin. 77 (1), 8-12 (2008).
  37. Bhutani, M. K., Bishnoi, M., Kulkarni, S. K. Anti-depressant like effect of curcumin and its combination with piperine in unpredictable chronic stress-induced behavioral, biochemical and neurochemical changes. Pharmacolology and Biochemistry Behavior. 92 (1), 39-43 (2009).
  38. Lin, Y. H., Liu, A. H., Xu, Y., Tie, L., Yu, H. M., Li, X. J. Effect of chronic unpredictable mild stress on brain-pancreas relative protein in rat brain and pancreas. Behavior Brain Research. 165 (1), 63-71 (2005).
  39. Cox, B. M., Alsawah, F., McNeill, P. C., Galloway, M. P., Perrine, S. A. Neurochemical, hormonal, and behavioral effects of chronic unpredictable stress in the rat. Behavior Brain Research. 220 (1), 106-111 (2011).
  40. Lagunas, N., Calmarza-Font, I., Diz-Chaves, Y., Garcia-Segura, L. M. Long-term ovariectomy enhances anxiety and depressive-like behaviors in mice submitted to chronic unpredictable stress. Hormones and Behavior. 58 (5), 786-791 (2010).
  41. Papp, M., Klimek, V., Willner, P. Parallel changes in dopamine D2 receptor binding in limbic forebrain associated with chronic mild stress-induced anhedonia and its reversal by imipramine. Psychopharmacology (Berlin). 115 (4), 441-446 (1994).
  42. Harkin, A., Houlihan, D. D., Kelly, J. P. Reduction in preference for saccharin by repeated unpredictable stress in mice and its prevention by imipramine. Journal of Psychopharmacology. 16 (2), 115-123 (2002).
  43. Detanico, B. C., et al. Antidepressant-like effects of melatonin in the mouse chronic mild stress model. European Journal of Pharmacology. 607 (1-3), 121-125 (2009).
  44. Kubera, M., et al. Prolonged desipramine treatment increases the production of interleukin-10, an anti-inflammatory cytokine, in C57BL/6 mice subjected to the chronic mild stress model of depression. Journal of Affective Disorder. 63 (1-3), 171-178 (2001).
  45. Moreau, J. L., Jenck, F., Martin, J. R., Mortas, P., Haefely, W. E. Antidepressant treatment prevents chronic unpredictable mild stress-induced anhedonia as assessed by ventral tegmentum self-stimulation behavior in rats. European Neuropsychopharmacoly. 2 (1), 43-49 (1992).
  46. Muscat, R., Papp, M., Willner, P. Reversal of stress-induced anhedonia by the atypical antidepressants, fluoxetine and maprotiline. Psychopharmacology (Berlin). 109 (4), 433-438 (1992).
  47. Yalcin, I., Belzung, C., Surget, A. Mouse strain differences in the unpredictable chronic mild stress: a four-antidepressant survey. Behavioural Brain Research. 193 (1), 140-143 (2008).
  48. Moreau, J. L., Bourson, A., Jenck, F., Martin, J. R., Mortas, P. Curative effects of the atypical antidepressant mianserin in the chronic mild stress-induced anhedonia model of depression. Journal of Psychiatry Neuroscience. 19 (1), 51-56 (1994).
  49. Kopp, C., Vogel, E., Rettori, M. C., Delagrange, P., Misslin, R. The effects of melatonin on the behavioural disturbances induced by chronic mild stress in C3H/He mice. Behavioural Pharmacology. 10 (1), 73-83 (1999).
  50. Doron, R., et al. Escitalopram or novel herbal mixture treatments during or following exposure to stress reduce anxiety-like behavior through corticosterone and BDNF modifications. PLoS One. 9 (4), (2014).
  51. Elizalde, N., et al. Long-lasting behavioral effects and recognition memory deficit induced by chronic mild stress in mice: Effect of antidepressant treatment. Psychopharmacology (Berlin). 199 (1), 1-14 (2008).
  52. Casarotto, P. C., Andreatini, R. Repeated paroxetine treatment reverses anhedonia induced in rats by chronic mild stress or dexamethasone. European Neuropsychopharmacology. 17 (11), 735-742 (2007).
  53. Papp, M., Gruca, P., Boyer, P. -A., Mocaër, E. Effect of agomelatine in the chronic mild stress model of depression in the rat. Neuropsychopharmacology. 28 (4), 694-703 (2003).
  54. Bortolato, M., et al. Antidepressant-like activity of the fatty acid amide hydrolase inhibitor URB597 in a rat model of chronic mild stress. Biological Psychiatry. 62 (10), (2007).
  55. Liu, Y., et al. Antidepressant-like effects of tea polyphenols on mouse model of chronic unpredictable mild stress. Pharmacology Biochemistry Behavior. 104 (1), 27-32 (2013).
  56. Dai, Y., et al. Metabolomics study on the anti-depression effect of xiaoyaosan on rat model of chronic unpredictable mild stress. Journal of Ethnopharmacology. 128 (2), 482-489 (2010).
  57. Zhang, D., Wen, X. S., Wang, X. Y., Shi, M., Zhao, Y. Antidepressant effect of Shudihuang on mice exposed to unpredictable chronic mild stress. Jouranl of Ethnopharmacology. 123 (1), 55-60 (2009).
  58. Li, Y. C., et al. Antidepressant-like effects of curcumin on serotonergic receptor-coupled AC-cAMP pathway in chronic unpredictable mild stress of rats. Progress in Neuro-Psychopharmacology and Biological Psychiatry. 33 (3), 435-449 (2009).
  59. Monleon, S., Parra, A., Simon, V. M., Brain, P. F., D'Aquila, P., Willner, P. Attenuation of sucrose consumption in mice by chronic mild stress and its restoration by imipramine. Psychopharmacology (Berlin). 117 (4), 453-457 (1995).
  60. Papp, M., Moryl, E., Willner, P. Pharmacological validation of the chronic mild stress model of depression. European Journal of Pharmacology. 296 (2), 129-136 (1996).
  61. Jansen, K., et al. Childhood trauma, family history, and their association with mood disorders in early adulthood. Acta Psychiatrica Scandinavica. (4), (2016).
  62. Kessler, R. C. THE EFFECTS OF STRESSFUL LIFE EVENTS ON DEPRESSION. Annual Review of Psychology. 48 (1), 191-214 (1997).
  63. Brady, K. T., Back, S. E. Childhood trauma, posttraumatic stress disorder, and alcohol dependence. Alcohol Research. 34 (4), 408-413 (2012).
  64. Pariante, C. M., Lightman, S. L. The HPA axis in major depression: classical theories and new developments. Trends in Neurosciences. 31 (9), 464-468 (2008).
  65. De Bellis, M. D., et al. Developmental traumatology part I: biological stress systems. Biological Psychiatry. 45 (10), 1259-1270 (1999).
  66. de Kloet, E. R., Joëls, M., Holsboer, F. Stress and the brain: from adaptation to disease. Nature Reviews Neurosciences. 6 (6), 463-475 (2005).
  67. Heim, C., Newport, D. J., Mletzko, T., Miller, A. H., Nemeroff, C. B. The link between childhood trauma and depression: Insights from HPA axis studies in humans. Psychoneuroendocrinology. 33 (6), 693-710 (2008).
  68. Trickett, P. K., Noll, J. G., Susman, E. J., Shenk, C. E., Putnam, F. W. Attentuation of cortisol across development for victims of sexual abuse. Developmental Psychopathology. 22 (1), 165-175 (2010).
  69. Bremne, J. D., Vermetten, E. Stress and development: behavioral and biological consequences. Developmental Psychopathology. 13 (3), 473-489 (2001).
  70. Nestler, E. J., Barrot, M., DiLeone, R. J., Eisch, A. J., Gold, S. J., Monteggia, L. M. Neurobiology of depression. Neuron. 34 (1), 13-25 (2002).
  71. Liu, D., et al. Resveratrol reverses the effects of chronic unpredictable mild stress on behavior, serum corticosterone levels and BDNF expression in rats. Behavioural and Brain Research. 264, 9-16 (2014).
  72. Silberman, D. M., Wald, M., Genaro, A. M. Effects of chronic mild stress on lymphocyte proliferative response. Participation of serum thyroid hormones and corticosterone. Int Immunopharmacol. 2 (4), 487-497 (2002).
  73. Bielajew, C., Konkle, A. T., Merali, Z. The effects of chronic mild stress on male Sprague-Dawley and Long Evans rats: I. Biochemical and physiological analyses. Behavioural and Brain Research. 136 (2), 583-592 (2002).
  74. Vrieze, E., et al. Dimensions in major depressive disorder and their relevance for treatment outcome. Journal of Affective Disorder. 155 (1), 35-41 (2014).
  75. Doron, R., et al. A novel herbal treatment reduces depressive-like behaviors and increases BDNF levels in the brain of stressed mice. Life Sciences. 94 (2), 151-157 (2014).
  76. Nestler, E. J., Hyman, S. E. Animal models of neuropsychiatric disorders. Nature Neurosciences. 13 (10), 1161-1169 (2010).
  77. Yan, H. -C., Cao, X., Das, M., Zhu, X. -H., Gao, T. -M. Behavioral animal models of depression. Neuroscience Bulletin. 26 (4), 327-337 (2010).
  78. Yankelevitch-Yahav, R., Franko, M., Huly, A., Doron, R. The Forced Swim Test as a Model of Depressive-like Behavior. Journal of Visualized Experiment. (97), (2015).
  79. Cryan, J. F., Mombereau, C., Vassout, A. The tail suspension test as a model for assessing antidepressant activity: Review of pharmacological and genetic studies in mice. Neurosciences and Biobehavioral Reviews. 29 (4-5), 571-625 (2005).
  80. Berton, O., et al. Essential role of BDNF in the mesolimbic dopamine pathway in social defeat stress. Science. 80 (5762), 864-868 (2006).
  81. Krishnan, V., Nestler, E. J. Animal models of depression: Molecular perspectives. Current Topics in Behavioral Neurosciences. 7 (1), 121-147 (2011).
  82. Belzung, C., Lemoine, M. Criteria of validity for animal models of psychiatric disorders: focus on anxiety disorders and depression. Biology of Mood and Anxiety Disorder. 1 (1), 9 (2011).
  83. Björkqvist, K. Social defeat as a stressor in humans. Physiology and Behavior. 73 (3), 435-442 (2001).
  84. Parihar, V. K., Hattiangady, B., Kuruba, R., Shuai, B., Shetty, A. K. Predictable chronic mild stress improves mood, hippocampal neurogenesis and memory. Molecular Psychiatry. 16 (2), 171-183 (2011).
  85. Haile, C. N., GrandPre, T., Kosten, T. A. Chronic unpredictable stress, but not chronic predictable stress, enhances the sensitivity to the behavioral effects of cocaine in rats. Psychopharmacology (Berlin). 154 (2), 213-220 (2001).
  86. Suo, L., et al. Predictable chronic mild stress in adolescence increases resilience in adulthood. Neuropsychopharmacology. 38 (8), 1387-1400 (2013).
  87. Gameiro, G. H., et al. Nociception- and anxiety-like behavior in rats submitted to different periods of restraint stress. Physiology and Behavior. 87 (4), 643-649 (2006).
  88. Anisman, H., Matheson, K. Stress, depression, and anhedonia: Caveats concerning animal models. Neuroscience and Biobehavioural Reviews. 29 (4-5), 525-546 (2005).
  89. Carr, W. J., Martorano, R. D., Krames, L. Responses of mice to odors associated with stress. J Comp Physiol Psychol. 71, 223-228 (1970).
  90. Zalaquett, C., Thiessen, D. The effects of odors from stressed mice on conspecific behavior. Physiology and Behavior. 50 (1), 221-227 (1991).
  91. Burstein, O., Shoshan, N., Doron, R., Akirav, I. Cannabinoids prevent depressive-like symptoms and alterations in BDNF expression in a rat model of PTSD. Progess in Neuro-Psychopharmacology Biological psychiatry. 84 (Part A), 129-139 (2018).
  92. Hedrich, H. J., Nicklas, W. Housing and Maintenance. Lab Mouse. , 521-545 (2012).
  93. Molendijk, M. L., Spinhoven, P., Polak, M., Bus, B. A. A., Penninx, B. W. J. H., Elzinga, B. M. Serum BDNF concentrations as peripheral manifestations of depression: evidence from a systematic review and meta-analyses on 179 associations (N=9484). Molecular Psychiatry. 19 (7), 791-800 (2014).
  94. Chen, B., Dowlatshahi, D., MacQueen, G. M., Wang, J. F., Young, L. T. Increased hippocampal BDNF immunoreactivity in subjects treated with antidepressant medication. Biological Psychiatry. 50 (4), 260-265 (2001).
  95. Tye, K. M., et al. Dopamine neurons modulate neural encoding and expression of depression-related behaviour. Nature. 493 (7433), 537-541 (2013).
  96. Hamani, C., et al. Deep brain stimulation reverses anhedonic-like behavior in a chronic model of depression: Role of serotonin and brain derived neurotrophic factor. Biological Psychiatry. 71 (1), 30-35 (2012).
  97. Hill, M. N., Hellemans, K. G. C., Verma, P., Gorzalka, B. B., Weinberg, J. Neurobiology of chronic mild stress: Parallels to major depression. Neuroscience and Biobehavior Reviews. 36 (9), 2085-2117 (2012).
  98. Kasch, K. L., Rottenberg, J., Ba Arnow,, Gotlib, I. H. Behavioral activation and inhibition systems and the severity and course of depression. Journal of Abnormal Psychology. 111 (4), 589-597 (2002).
  99. Faull, J. R., Halpern, B. P. Reduction of sucrose preference in the hamster by gymnemic acid. Physiology and Behavior. 7 (6), 903-907 (1971).
  100. Moreau, J. -L., Scherschlicht, R., Jenck, F., Martin, J. R. Chronic mild stress-induced anhedonia model of depression; sleep abnormalities and curative effects of electroshock treatment. Behavioural Pharmacology. 6 (7), 682-687 (1995).
  101. Blier, P. Optimal use of antidepressants: when to act? J Psychiatry Neurosci. 34 (1), 80 (2009).
  102. Frazer, A., Benmansour, S. Delayed pharmacological effects of antidepressants. Mol Psychiatry. 7, S23-S28 (2002).
  103. Can, A., Dao, D. T., Terrillion, C. E., Piantadosi, S. C., Bhat, S., Gould, T. D. The Tail Suspension Test. Journal of Visualized Experiments. (58), (2011).
  104. Song, L., Che, W., Min-wei, W., Murakami, Y., Matsumoto, K. Impairment of the spatial learning and memory induced by learned helplessness and chronic mild stress. Pharmacology Biochemistry and Behavior. 83 (2), 186-193 (2006).
  105. Mao, Q. Q., Ip, S. P., Ko, K. M., Tsai, S. H., Che, C. T. Peony glycosides produce antidepressant-like action in mice exposed to chronic unpredictable mild stress: Effects on hypothalamic-pituitary-adrenal function and brain-derived neurotrophic factor. Progress in Neuro-Psychopharmacology and Biological Psychiatry. 33 (7), 1211-1216 (2009).
  106. Lutz, C. M., Linder, C. C., Davisson, M. T. Strains, Stocks and Mutant Mice. Lab Mouse. , 37-56 (2012).
  107. Yalcin, I., Aksu, F., Belzung, C. Effects of desipramine and tramadol in a chronic mild stress model in mice are altered by yohimbine but not by pindolol. European Journal of Pharmacology. 514 (2-3), 165-174 (2005).
  108. Van Boxelaere, M., Clements, J., Callaerts, P., D'Hooge, R., Callaerts-Vegh, Z. Unpredictable chronic mild stress differentially impairs social and contextual discrimination learning in two inbred mouse strains. PLoS One. 12 (11), (2017).
  109. Nadler, J. J., et al. Automated apparatus for quantitation of social approach behaviors in mice. Genes, Brain Behavior. 3 (5), 303-314 (2004).
  110. Girard, I., Garland, T. Plasma corticosterone response to acute and chronic voluntary exercise in female house mice. Journal of Applied Physiology. 92 (4), 1553-1561 (2002).
  111. Gumuslu, E., et al. The antidepressant agomelatine improves memory deterioration and upregulates CREB and BDNF gene expression levels in unpredictable chronic mild stress (UCMS)-exposed mice. Drug Target Insights. 2014 (8), 11-21 (2014).
  112. Willner, P., Golembiowska, K., Klimek, V., Muscat, R. Changes in mesolimbic dopamine may explain stress-induced anhedonia. Psychobiology. 19 (1), 79-84 (1991).
  113. Peng, Y. L., Liu, Y. N., Liu, L., Wang, X., Jiang, C. L., Wang, Y. X. Inducible nitric oxide synthase is involved in the modulation of depressive behaviors induced by unpredictable chronic mild stress. Journal of Neuroinflammation. 9, (2012).
  114. Liu, B., et al. Icariin exerts an antidepressant effect in an unpredictable chronic mild stress model of depression in rats and is associated with the regulation of hippocampal neuroinflammation. Neuroscience. 294, 193-205 (2015).
  115. Yalcin, I., Aksu, F., Bodard, S., Chalon, S., Belzung, C. Antidepressant-like effect of tramadol in the unpredictable chronic mild stress procedure: Possible involvement of the noradrenergic system. Behavioural Pharmacology. 18 (7), 623-631 (2007).
  116. Mineur, Y. S., Belzung, C., Crusio, W. E. Functional implications of decreases in neurogenesis following chronic mild stress in mice. Neuroscience. 150 (2), 251-259 (2007).
  117. Simchon-Tenenbaum, Y., Weizman, A., Rehavi, M. Alterations in brain neurotrophic and glial factors following early age chronic methylphenidate and cocaine administration. Behav Brain Research. 282, 125-132 (2015).
  118. ELISA: Methods and Protocols. Hnasko, R. , (2015).
  119. Watanabe, S. Social factors modulate restraint stress induced hyperthermia in mice. Brain Research. 1624, 134-139 (2015).
  120. Mineur, Y. S., Prasol, D. J., Belzung, C., Crusio, W. E. Agonistic behavior and unpredictable chronic mild stress in mice. Behaviour Genetics. 33 (5), 513-519 (2003).
  121. Frisbee, J. C., Brooks, S. D., Stanley, S. C., d'Audiffret, A. C. An Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Instigating Depressive Symptoms, Behavioral Changes and Negative Health Outcomes in Rodents. Journal of Visualized Experiments. (106), (2015).
  122. Westenbroek, C., Ter Horst, G. J., Roos, M. H., Kuipers, S. D., Trentani, A., Den Boer, J. A. Gender-specific effects of social housing in rats after chronic mild stress exposure. Progress in Neuro-Psychopharmacology and Biological Psychiatry. 27 (1), 21-30 (2003).
  123. Bartolomucci, A., et al. Individual housing induces altered immuno-endocrine responses to psychological stress in male mice. Psychoneuroendocrinology. 28 (4), 540-558 (2003).
  124. Võikar, V., Polus, A., Vasar, E., Rauvala, H. Long-term individual housing in C57BL/6J and DBA/2 mice: Assessment of behavioral consequences. Genes, Brain and Behavior. 4 (4), (2005).
  125. Krohn, T. C., Sørensen, D. B., Ottesen, J. L., Hansen, A. K. The effects of individual housing on mice and rats: a review. Animal Welfare. 15 (4), 343-352 (2006).

Tags

התנהגות בעיה 140 לא צפוי מתח כרוני מתון אנהדוניה העדפה סוכרוז המודל החייתי דיכאון נוגדי דיכאון
פרוטוקול לא צפוי מתח כרוני מתון להשראת אנהדוניה בעכברים
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Burstein, O., Doron, R. The… More

Burstein, O., Doron, R. The Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Inducing Anhedonia in Mice. J. Vis. Exp. (140), e58184, doi:10.3791/58184 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter