Heri, en protokol til at gennemføre Morris vand labyrint tests for at evaluere evnen til læring og hukommelse af Alzheimers sygdom model mus og til at vurdere effekten af manuelle akupunktur til behandling af dem er beskrevet.
En Morris Water Maze (MWM) eksperiment tvinger forsøgsdyr til at svømme og lære at finde en platform skjult i vandet. Det er almindeligt anvendt i videnskabelig forskning til at vurdere indlæring og hukommelse af dyr. På grund af den omfattende brug af MWM-testen er visuelle forsøgsprotokoller afgørende for forskerne. Dette manuskript bruger de seneste undersøgelser til at introducere protokollen for MWM-testen. Alzheimers sygdom (AD) er karakteriseret ved et progressivt tab af hukommelse og kognitiv funktion. En alternativ og supplerende behandling, der anvendes til AD er manuel akupunktur (MA). For at vurdere lærings-og hukommelses evnen i AD model-mus blev MWM-testen udført. Den synlige platform retssag, skjulte platform Trial, sonde Trial, og tilbageførsel retssag af MWM blev brugt til at evaluere rumlig læring og hukommelse evne. I den synlige platform retssag, svømning hastighed og flugt ventetid af mus i forskellige grupper var ikke signifikant anderledes. I den skjulte platform og tilbageførsel forsøg, viste annoncegruppen en lang flugt ventetid. Escape-Latensen faldt markant efter behandling med MA. Det lave platforms-crossover-nummer og andelen af tid i SW-kvadranten i sonde forsøget steg efter MA-behandlingen (p < 0,05 eller p < 0,01). Resultaterne af MWM-testene tyder på, at MA effektivt kan forbedre de rumlige lærings-og hukommelsesevner i annonce model-mus. Strenge eksperimentelle operationer gav sikkerhed for resultaternes pålidelighed.
I øjeblikket, den MWM eksperiment er blevet den mest udbredte og standard adfærdsmæssige eksperiment til at evaluere den rumlige indlæring og hukommelse af dyr1. Det blev oprindeligt designet af den britiske psykolog Richard G. Morris og er konstant blevet forbedret. Mange fordele såsom minimal uddannelse, Cross-Species nytte, ufølsomhed over for forskelle i kropsvægt, og gentagne test evne af MWM gør det den bedste metode til vurdering af kognitiv funktion2. Alzheimers sygdom (AD) er et stort medicinsk problem, primært karakteriseret ved et fald i hukommelsen behandling og kognitiv funktion3. MWM er en uundværlig Eksperimentel metode til at evaluere lærings-og hukommelses evnen for annonce model dyrene og effektiviteten af interventionsmetoderne. MWM eksperimenter er generelt tidskrævende (6 – 11 dage) og involverer mange variable faktorer4. Selv om der er mange artikler om vand labyrint eksperimenter, i praksis, forskere mangler en sammenhængende protokol. Derfor er en intuitiv og stringent protokol proces video særlig vigtig. Ved hjælp af et tidligere eksperiment som eksempel5beskrives alle trinene i MWM. Ved hjælp af MWM, tidligere undersøgelser foreslog, at akupunktur kunne lindre symptomerne på annonce model mus5,6,7.
Heri, den MWM protokol, der anvendes i en nylig undersøgelse5 er beskrevet for at give en enkel og synlig metode for forskere til at vurdere den rumlige læring og hukommelse af annonce model dyr.
Selv om mange vand labyrinter, herunder Biel vand labyrint og Cincinnati vand labyrint, har eksisteret i mindst et århundrede, kun MWM har været meget brugt til effektivt og objektivt evaluere rumlig læring og hukommelse evne, fordi det har mange fordele9. Trods omfattende brug af MWM, er proceduren ikke altid blevet brugt optimalt. MWM-eksperimenter tager generelt lang tid og påvirkes af mange variable faktorer. Der er nogle effektive og pålidelige aspekter, der hjælper med at opdage ændringer i rumlig indlæring og hukommelse evne, der bør tages i betragtning.
Der blev udført fire forskellige MWM-forsøg. Den synlige platform retssag blev brugt på dag 1 af MWM. Hvis dyrene kunne svømme direkte til platformen, det indikerede, at svømning evne og vision af dyrene var normal10. Otnass foreslog, at den synlige platform retssag skal gennemføres først11. Resultaterne af det synlige platforms forsøg i denne undersøgelse betød, at de fire grupper startede på samme lærings niveau. Derfra kunne de successive eksperimenter påbegyndes. Den skjulte platform Trial blev brugt til at vurdere musens evne til at erhverve indlæring og hukommelse evne. Sonde forsøget blev udført på dag 7, 24 timer efter afslutningen af den skjulte platform retssag, for at vurdere arbejdshukommelsen. Endelig blev tilbageførselsforsøget brugt til at vurdere arbejdshukommelsen2. Ændringerne i de fire forskellige forsøg med MWM sammen indikerede, at annonce modellens mus havde lav indlærings-og hukommelses evne, og at MA havde en positiv effekt på AD5.
Der er ingen specifikke standarder for dimensionerne af puljen og platform1. En pulje på 214 cm i diameter anvendes i de fleste MWM-studier. Vorhees og Williams viste, at med identiske protokoller, rotter lære hurtigere i en 122-cm pulje end i en 210-cm pool; den stejle hældning af indlæringskurven indikerer, at den 122-cm diameter pulje er ekstremt let for rotter at navigere12. I den nuværende protokol, i betragtning af den gamle alder og svage statur af AD-mus, en 90-cm diameter pulje og 9,5-cm diameter platform blev brugt. Resultaterne af de indledende eksperimenter indikerede, at mus havde sværere ved at finde platformen i en pulje med større diameter. Derfor repræsenterer tests i større puljer ikke den reelle forskel mellem grupperne. Forsøgsdyr havde sværere ved at finde platformen i en større pulje med en mindre platform4. Derfor, størrelsen af puljen og platformen skal optimeres i indledende eksperimenter i henhold til de eksperimentelle krav og tilstand af forsøgsdyr.
Vand ved temperaturer fra 20 – 24 °C anbefales til udførelse af MWM-testen4. Alderen forsøgsdyr udført dårligt i koldt vand13, hvilket indikerer et klart aldersbetinget tab af termoregulering14. I denne undersøgelse blev en termostat placeret i bunden af puljen for at opretholde temperaturen af vandet ved 20 – 24 °C. Undersøgelsens resultater viste ingen signifikant forskel i svømme hastigheden blandt de fire grupper5.
MWM er en kraftfuld teknik til at vurdere kognitiv funktion og er meget udbredt i undersøgelser i øjeblikket. Men der er ingen defineret, standard, konsekvent udstyr til at udføre MWM test, herunder størrelser af puljen og platform15,16. Forskellige laboratorier har forskellige specifikationer for MWM. Derfor vælger forskerne den rette eksperimentelle anordning i henhold til deres individuelle eksperimentelle krav, hvilket kan skabe forvirring blandt forskerne. Indledende eksperimenter er også nødvendige. Flere undersøgelser skal udføres på grundlæggende eksperimenter som MWM. I øjeblikket, fleksibiliteten i MWM som et eksperimentelt værktøj kun ligger i evnen til at vælge de grundlæggende protokoller i henhold til undersøgelsen foreslået. Derfor kan denne test anvendes til at vurdere kognitiv funktion i større dybde.
The authors have nothing to disclose.
Huiling Tian og ning Ding er co-første forfattere. Zhigang Li og Jing Jiang er co-tilsvarende forfattere. Denne forskning blev støttet af tilskud fra Kinas National Natural Science Foundation (Grant nr. 81804178, 81473774 og 81503654). Protokollen og resultaterne beskrevet heri stammer fra artiklen, “inddragelse af manuel akupunktur regulerer adfærd og cerebral blodgennemstrømning i SAMP8 muse model af Alzheimers sygdom” af Dr. ning Ding et al.
acupuncture needles | Beijing Zhongyan Taihe Medical Instrument Limited Company | 511526 | |
desktop computer | Chengdu Techman Software Limited Liability Company | Lenovo T4700D | |
Donepezil Hydrochloride Tablet | Eisai China | H20050978 | Aricept |
mice | Zhi Shan (Beijing) Academy of Medical Science | SCXK2014-0003 | |
Mirros water maze device | Chengdu Techman Software Limited Liability Company | WMT-100S | |
mouse bags | home-made | ||
Signal acquisition and processing system | Chengdu Techman Software Limited Liability Company | BL-420N |