כאן, אנו מציגים פרוטוקול לבצע הערכה פולשנית הומודינמיקה של החדר הימני והעורק הריאתי בעכברים באמצעות גישה לניתוח פתוח בחזה.
יתר לחץ דם ריאתי (אח י) הוא הפרעת לב כרונית וחמורה. עכברים הם מודל פופולרי בעלי חיים המשמש כדי לחקות את המחלה. עם זאת, הערכה של לחץ חדרית הימני (RVP) ולחץ עורק הריאתי (פאפ) נשאר מאתגרת מבחינה טכנית בעכברים. RVP ו-פאפ קשה יותר למדוד מאשר הלחץ החדרית השמאלי בגלל הבדלים אנטומיים בין מערכות הלב השמאלי והימני. במאמר זה, אנו מתארים הלב הימני יציב היקף שיטת המדידה ואת האימות שלה באמצעות עכברים בריאים ו-אח. שיטה זו מבוססת על ניתוח בחזה פתוח ותמיכה באוורור מכני. זהו תהליך מסובך בהשוואה להליכי החזה הסגורים. בעוד מנתח מיומן היטב נדרש עבור ניתוח זה, היתרון של הליך זה הוא שהוא יכול לייצר גם RVP ו-פאפ פרמטרים באותו זמן, כך הוא הליך מעדיף להערכה של מודלים פה.
יתר לחץ דם ריאתי (אח י) הוא הפרעת לב כרונית וחמורה עם העלאת הלחץ בעורק הריאתי (פאפ) ולחץ המוח הימני (RVP) הנגרמת על ידי התפשטות הסלולר פיברוזיס של עורקים ריאתי קטן 1. קטטרי עורק ריאתי, המכונים גם ברבור-גנץ2, משמשים בדרך כלל בניטור הקליני של rvp ו-פאפ. יתר על כן, מערכת ניטור פאפ אלחוטית שימש קלינית3,4,5. כדי לחקות את המחלה למחקר בעכברים, סביבה ארוי משמש כדי לדמות הביטויים הקליניים האנושיים של אח6. בהערכה של פאפ בבעלי חיים, בעלי חיים גדולים קל יחסית לפקח דרך קטטרים עורק הריאתי באמצעות אותה טכניקה של האנשים האנושיים, אבל בעלי חיים קטנים כגון חולדות ועכברים קשה להעריך בגלל גודל הגוף הקטן שלהם. מדידה הומודינמית של המערכת הימני החדרית בעכברים אפשרי עם מידה קטנה במיוחד 1 הקטטר Fr7. שיטה למדידת rvp ו-פאפ בעכברים דווחו בספרות8,9, אבל המתודולוגיה חסרה תיאור מפורט. RVP ו-פאפ הם מאתגרת יותר למדוד מאשר הלחץ החדרית השמאלי בגלל הבדלים אנטומיים בין מערכות הלב השמאלי והימני.
כדי לקבל גם את הפרמטרים פאפ ו-RVP באותו עכבר, אנו מתארים גישה בחזה פתוח מבוסס ניתוח עבור מדידות הלב הנכון, האימות שלה עם עכברים בריאים ו-אח, וכיצד להימנע מיצירת נתונים מלאכותיים במהלך פתוח החזה מסובך ניתוח. למרות טכניקה זו מבוצעת בצורה הטובה ביותר על ידי מנתח מיומן היטב, יש לו את היתרון של היכולת להעריך פאפ ו RVP באותו עכבר.
צנרור קנה הוא הצעד החשוב הראשון לניתוחי חזה פתוח. השיטה הקלאסית של צנרור קנה לבעלי חיים קטנים, כגון חולדות או עכברים, כרוך ביצוע חתך בצורת T על קנה הנשימה ומוסיף ישירות Y סוג צינורות הקנה אל קנה הנשימה. בפועל, אנו מוצאים כי שיטה זו אינה קלה במהלך הפעולה. צינור Y סוג אל הקנה הוא גדול מדי עבור בעל…
The authors have nothing to disclose.
מחקר זה נתמך על ידי פרויקט החינוך לתארים מתקדמים והוראה של המכללה האקדמית לרפואה של פקינג (10023-2016-002-03), הקרן לנוער של החולים fuwai (2018-F09), ואת קרן המנהל של בייג המעבדה המפתח של מחקר טרום קליני ו הערכה לחומרים לשתל לב וכלי דם (2018-PT2-ZR05).
2,2,2-Tribromoethanol | Sigma-Aldrich | T48402-5G | For anesthesia |
Animal temperature controller | Physitemp Instruments, Inc. | TCAT-2LV | For temperature control |
Dissection forceps | Fine Science Tools, Inc. | 11274-20 | For surgery |
Gemini Cautery System | Gemini | GEM 5917 | For surgery |
Intravenous catheter (22G) | BD angiocath | 381123 | For intubation |
LabChart 7.3 | ADInstruments | For data analysis | |
Light illumination system | Olympus | For surgery | |
Mikro-Tip catheter | Millar Instruments, Houston, TX | SPR-1000 | For pressure measurement |
Millar Pressure-Volume Systems | Millar Instruments, Houston, TX | MVPS-300 | For pressure measurement |
O2 Controller and Hypoxia chamber | Biospherix | ProOx 110 | For chronic hypoxia |
PowerLab Data Acquisition System | ADInstruments | PowerLab 16/30 | For data recording |
Scissors | Fine Science Tools, Inc. | 14084-08 | For surgery |
Small animal ventilator | Harvard Apparatus | Mini-Vent 845 | For surgery |
Stereomicroscope | Olympus | SZ61 | For surgery |
Surgery tape | 3M | For surgery | |
Terg-a-zyme enzyme | Sigma-Aldrich | Z273287-1EA | For catheter cleaning |