Aquí, presentamos un protocolo para realizar una evaluación hemodinámica invasiva del ventrículo derecho y la arteria pulmonar en ratones utilizando un enfoque de cirugía de pecho abierto.
La hipertensión arterial pulmonar (HAP) es un trastorno cardiopulmonar crónico y grave. Los ratones son un modelo animal popular utilizado para imitar esta enfermedad. Sin embargo, la evaluación de la presión ventricular derecha (RVP) y la presión arterial pulmonar (PAP) sigue siendo técnicamente difícil en ratones. RVP y PAP son más difíciles de medir que la presión ventricular izquierda debido a las diferencias anatómicas entre los sistemas del corazón izquierdo y derecho. En este artículo, describimos un método de medición hemodinámica estable del corazón derecho y su validación utilizando ratones sanos y PAH. Este método se basa en la cirugía de pecho abierto y el soporte de ventilación mecánica. Es un procedimiento complicado en comparación con los procedimientos de tórax cerrados. Mientras que se requiere un cirujano bien entrenado para esta cirugía, la ventaja de este procedimiento es que puede generar parámetros RVP y PAP al mismo tiempo, por lo que es un procedimiento preferible para la evaluación de los modelos de HAP.
La hipertensión arterial pulmonar (HAP) es un trastorno cardiopulmonar crónico y grave con elevación de la presión arterial pulmonar (PAP) y la presión ventricular derecha (RVP) que es causada por la proliferación celular y la fibrosis de las pequeñas arterias pulmonares 1. Los catéteres de la arteria pulmonar, también llamados catéteres Swan-Ganz2,se utilizan comúnmente en el monitoreo clínico de RVP y PAP. Además, se ha utilizado clínicamente un sistema de monitorización PAP inalámbrico3,4,5. Para imitar la enfermedad para su estudio en ratones, se utiliza un entorno hipóxico para simular manifestaciones clínicas humanas de HAP6. En la evaluación de PAP en animales, los animales grandes son relativamente fáciles de monitorear a través de catéteres de arteria pulmonar utilizando la misma técnica que para sujetos humanos, pero los animales pequeños como ratas y ratones son difíciles de evaluar debido a su pequeño tamaño corporal. La medición hemodinámica del sistema ventricular derecho en ratones es posible con un catéter de tamaño ultrapequeño 1 Fr7. En la literatura8,9, se ha informado de un método para medir RVP y PAP en ratones, pero la metodología carece de una descripción detallada. RVP y PAP son más difíciles de medir que la presión ventricular izquierda debido a las diferencias anatómicas entre los sistemas del corazón izquierdo y derecho.
Para obtener parámetros PAP y RVP en el mismo ratón, describimos un enfoque basado en cirugía de pecho abierto para mediciones hemodinámicas del corazón derecho, su validación con ratones sanos y PAH, y cómo evitar la generación de datos artificiales durante el complicado pecho abierto Cirugía. Aunque esta técnica es mejor realizada por un cirujano bien entrenado, tiene la ventaja de poder evaluar PAP y RVP en el mismo ratón.
La intubación traqueal es el primer paso importante para las cirugías de pecho abierto. El método clásico de intubación traqueal para animales pequeños, como ratas o ratones, consiste en hacer una incisión en forma de T en la tráquea e insertar directamente tubos traqueales de tipo Y en la tráquea. En la práctica, encontramos que este método no es fácil durante el funcionamiento. El tubo traqueal tipo Y es demasiado grande para animales pequeños y forma un ángulo con la tráquea. Por lo tanto, es difícil f…
The authors have nothing to disclose.
Esta investigación está respaldada por el Proyecto de Educación y Reforma Docente de Peking Union Medical College (10023-2016-002-03), el Fuwai Hospital Youth Fund (2018-F09) y el Director Fund of Beijing Key Laboratory of Pre-clinical Research and Evaluación de Materiales de Implantes Cardiovasculares (2018-PT2-ZR05).
2,2,2-Tribromoethanol | Sigma-Aldrich | T48402-5G | For anesthesia |
Animal temperature controller | Physitemp Instruments, Inc. | TCAT-2LV | For temperature control |
Dissection forceps | Fine Science Tools, Inc. | 11274-20 | For surgery |
Gemini Cautery System | Gemini | GEM 5917 | For surgery |
Intravenous catheter (22G) | BD angiocath | 381123 | For intubation |
LabChart 7.3 | ADInstruments | For data analysis | |
Light illumination system | Olympus | For surgery | |
Mikro-Tip catheter | Millar Instruments, Houston, TX | SPR-1000 | For pressure measurement |
Millar Pressure-Volume Systems | Millar Instruments, Houston, TX | MVPS-300 | For pressure measurement |
O2 Controller and Hypoxia chamber | Biospherix | ProOx 110 | For chronic hypoxia |
PowerLab Data Acquisition System | ADInstruments | PowerLab 16/30 | For data recording |
Scissors | Fine Science Tools, Inc. | 14084-08 | For surgery |
Small animal ventilator | Harvard Apparatus | Mini-Vent 845 | For surgery |
Stereomicroscope | Olympus | SZ61 | For surgery |
Surgery tape | 3M | For surgery | |
Terg-a-zyme enzyme | Sigma-Aldrich | Z273287-1EA | For catheter cleaning |