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Chemistry

ठोस चरण 11सी-मेथिलेशन, शुद्धि और पीईटी ट्रेसर्स के उत्पादन के लिए निर्माण

Published: October 24, 2019 doi: 10.3791/60237
Automatic Translation
*1, *1, 1, 1, 1, 1,2
1McConnell Brain Imaging Centre, Montreal Neurological Institute, McGill University, 2Department of Neurology and Neurosurgery, McGill University
* These authors contributed equally

Summary

हम ठोस चरण निष्कर्षण कारतूस का उपयोग कर Positron उत्सर्जन Tomography (पीईटी) के लिए नैदानिक रूप से प्रासंगिक अनुरेखकों का उत्पादन करने के लिए एक कुशल कार्बन-11 radiolabeling तकनीक की रिपोर्ट. 11 सी-मेथिलिंग एजेंट को एक कार्ट्रिज के माध्यम से पारित किया जाता है जो जलीय इथेनॉल के साथ पूर्ववर्ती और क्रमिक एलुशन के साथ पहले से लोड होता है, उच्च रेडियोकेमिकल पैदावार में रासायनिक और रेडियोकेमिकल शुद्ध पीईटी अनुरेखक प्रदान करता है।

Abstract

पॉजिट्रॉन उत्सर्जन टोमोग्राफी (पीईटी) में इस्तेमाल किए जाने वाले रेडियोट्रासकर का नियमित उत्पादन ज्यादातर गीला रसायन विज्ञान पर निर्भर करता है जहां रेडियोधर्मी सिन्थॉन समाधान में एक गैर-रेडियोएक्टिव अग्रदूत के साथ प्रतिक्रिया करता है। इस दृष्टिकोण उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी (HPLC) मानव प्रशासन के लिए एक bioसंगत विलायक में सुधार के बाद द्वारा अनुरेखक की शुद्धि की आवश्यकता है. हम हाल ही में कार्बन-11लेबल पीईटी radiopharmaceuticals के अत्यधिक कुशल संश्लेषण के लिए एक उपन्यास 11 सी मिथाइल दृष्टिकोण विकसित की है, डिस्पोजेबल के रूप में ठोस चरण कारतूस का लाभ ले "3 में-1" संश्लेषण के लिए इकाइयों, शुद्धि और ट्रेसरों का सुधार। यह दृष्टिकोण तैयारी HPLC के उपयोग obviates और हस्तांतरण लाइनों में अनुरेखक के नुकसान को कम कर देता है और रेडियोधर्मी क्षय के कारण. इसके अलावा, कारतूस आधारित तकनीक संश्लेषण विश्वसनीयता में सुधार, स्वचालन प्रक्रिया को सरल और अच्छा विनिर्माण अभ्यास (जीएमपी) आवश्यकताओं के साथ अनुपालन की सुविधा. यहाँ, हम एक पीईटी अनुरेखक पिट्सबर्ग यौगिक बी के उत्पादन के उदाहरण पर इस तकनीक का प्रदर्शन ($11C$PiB), मानव दिमाग में एमिलॉयड प्लेक के लिए विवो इमेजिंग एजेंट में एक सोने के मानक.

Introduction

Positron उत्सर्जन टोमोग्राफी (पीईटी) एक आणविक इमेजिंग मोडलिटी जो जैव रासायनिक प्रक्रियाओं, संकेतों और परिवर्तनों के इन विवो दृश्य को सक्षम करने के लिए एक जैविक रूप से सक्रिय अणु से जुड़ी आइसोटोप के रेडियोधर्मी क्षय का पता लगाने पर निर्भर करता है . कार्बन-11 (ट1 डिग्री 2 $ 20.3 मिनट) पीईटी में सबसे अधिक इस्तेमाल किया रेडियोआइसोटोप में से एक है क्योंकि कार्बनिक अणुओं और कम आधा जीवन में अपनी बहुतायत है जो एक ही मानव या पशु विषय के लिए एक ही दिन पर कई अनुरेखक प्रशासन के लिए अनुमति देता है और रोगियों पर विकिरण बोझ कम कर देता है। इस आइसोटोप के साथ लेबल कई अनुरेखण नैदानिक अध्ययन में और शास्त्रीय और उभरते जैविक रूप से प्रासंगिक लक्ष्यों के vivo पीईटी इमेजिंग में के लिए बुनियादी स्वास्थ्य अनुसंधान में उपयोग किया जाता है - [11C]raclopride के लिए डी2/ एमिलॉयड प्लेक के लिए पीआईबी, ट्रांसलोकेटर प्रोटीन के लिए11सीजेड पीबीआर28 - बस कुछ ही नाम है।

कार्बन-11 लेबल पीईटी अनुरेखक मुख्य रूप से -OH (शराब, फिनोल और कार्बोक्सीलिक एसिड), -एनएच (एमिन और एमाइड) या -एसएच (thiol) समूहों युक्त गैर-रेडियोएक्टिव अग्रदूतों के 11सी-मेथिलेशन के माध्यम से उत्पादित कर रहे हैं। संक्षेप में, साइक्लोट्रॉन के गैस लक्ष्य में 14छ (च, ख्))11सी नाभिकीय अभिक्रिया के माध्यम से साइक्लोट्रॉन के गैस लक्ष्य में इसोटोप उत्पन्न होता है, जो11C$CO2के रासायनिक रूप में होता है। बाद में परिवर्तित हो जाता है [11C]मेथिल आयोडाइड ([11C]CH3I) या तो गीला रसायन विज्ञान के माध्यम से (11C$CH3OH LiAlH के साथ4 HI के साथ शमन द्वारा पीछा किया)1 या सूखी रसायन विज्ञान(11C$CH4 के लिए उत्प्रेरक कमी आणविक I 2 )2के साथ कट्टरपंथी iodinationके बाद . [11सी] CH3मैं तो आगे अधिक प्रतिक्रियाशील 11सी-मेथिल triflate ([11C]CH3OTf) यह एक चांदी triflate स्तंभ3पर पारित करके परिवर्तित किया जा सकता है. 11सी-मेथिलेशन तो या तो कार्बनिक विलायक में गैर रेडियोएक्टिव अग्रदूत के एक समाधान में रेडियोधर्मी गैस bubbling द्वारा किया जाता है या अधिक सुरुचिपूर्ण बंदी विलायक "लूप" विधि के माध्यम से 4,5. 11सी-ट्रैकर तो HPLC के माध्यम से शुद्ध है, एक bioसंगत विलायक में reformulated, और मानव विषयों के लिए प्रशासित किया जा रहा से पहले एक बाँझ फिल्टर के माध्यम से पारित कर दिया. इन जोड़तोड़ के सभी तेजी से और विश्वसनीय होना चाहिए कार्बन-11 की छोटी आधा जीवन दिया. हालांकि, एक HPLC प्रणाली का उपयोग काफी अनुरेखक और उत्पादन समय के नुकसान बढ़ जाती है, अक्सर विषाक्त सॉल्वैंट्स के उपयोग की जरूरत है, स्वचालन पेचीदा और कभी कभी विफल syntheses की ओर जाता है. इसके अलावा, रिएक्टरों और HPLC स्तंभ की आवश्यक सफाई बाद ट्रेसर बैचों के syntheses के बीच देरी को बढ़ाता है और विकिरण के लिए कर्मियों के जोखिम बढ़ जाती है.

फ्लोरीन-18 के रेडियोकेमिस्ट्री (टी1/2 $ 109.7 मिनट), अन्य व्यापक रूप से इस्तेमाल किया पीईटी आइसोटोप, हाल ही में कैसेट आधारित किट है कि HPLC शुद्धि के लिए की जरूरत obviate के विकास के माध्यम से उन्नत किया गया है. ठोस चरण निष्कर्षण (एसपीई) कारतूस को रोजगार करके, इन पूरी तरह से डिस्पोजेबल किट के विश्वसनीय नियमित उत्पादन के लिए अनुमति देते हैं 18एफ-ट्रेसर, सहित [18F]FDG, [18F]FMISO, [18F]FMC और अन्य, कम संश्लेषण के साथ समय, कम कर्मियों की भागीदारी और उपकरणों के न्यूनतम रखरखाव. कारणों में से एक कार्बन-11 पीईटी इमेजिंग में एक कम लोकप्रिय आइसोटोप बनी हुई है 11सी-ट्रेसर्स के नियमित उत्पादन के लिए इसी तरह की किट की कमी है. उनके विकास में काफी सिंथेटिक विश्वसनीयता में सुधार होगा, रेडियोकेमिकल पैदावार बढ़ाने के लिए और स्वचालन और उत्पादन मॉड्यूल के निवारक रखरखाव को आसान बनाने.

वर्तमान में उपलब्ध उत्पादन किट सस्ती, डिस्पोजेबल, स्पे कारतूस के बजाय unreacted रेडियोधर्मी आइसोटोप, अग्रदूत और अन्य रेडियोधर्मी और गैर रेडियोधर्मी उप-उत्पादों से रेडियोट्रैकर की जुदाई के लिए HPLC कॉलम का लाभ ले लो। आदर्श रूप में, radiolabeling प्रतिक्रिया भी एक ही कारतूस पर आय; उदाहरण के लिए, प्रोस्टेट कैंसर इमेजिंग पीईटी अनुरेखक के उत्पादन में डाइमेथिलमैमिनोथेनोल के18एफजेड फ्लोरोमेथिलेशन एक cation-exchange रेजिन कार्ट्रिज पर होता है 6. यद्यपि कारतूसों पर कई 11सी-ट्रेसरों के रेडियो लेबलिंग के लिए इसी प्रकार की प्रक्रियाओं की सूचना7,8 और रेडियो सिंथेसिस के लिए विशेष रूप से शक्तिशाली हो गई है [11सी]कोलीन9 और [11C]methionine10, इन उदाहरणों oncological पीईटी अनुरेखक जहां अग्रदूत से जुदाई अक्सर आवश्यक नहीं है तक ही सीमित रहते हैं. हमने हाल ही में [11C]CH3I11 और उसके बाद 11सी-मेथिलेशन, साथ ही ठोस चरण-समर्थित संश्लेषण12 के उत्पादन के लिए"[11C]kits" के विकास की सूचना दी है। 11सी-ट्रेसर्स के नियमित उत्पादन को सरल बनाना। यहाँ, हम ठोस चरण समर्थित रेडियोसिंथेसिस के उदाहरण का उपयोग करके अपनी प्रगति को प्रदर्शित करना चाहते हैं [11C]PiB, एजेड इमेजिंग के लिए एक रेडियोट्रैकर जो अल्जाइमर रोग (एडी) इमेजिंग के क्षेत्र में क्रांति ला दी जब यह पहली बार 2003 में विकसित किया गया था ( चित्र 1) 13,14. इस विधि में, अस्थिर [11C]CH3OTf (बीपी 100 डिग्री सेल्सियस) एक डिस्पोजेबल कारतूस के राल पर जमा 6-OH-BTA-0 अग्रदूत पर पारित कर दिया है। पीईटी अनुरेखक [11सी]PiB तो bioसंगत जलीय इथेनॉल के साथ कारतूस से elution द्वारा अग्रदूत और रेडियोधर्मी अशुद्धियों से अलग है. इसके अलावा, हम एक दूर से संचालित रेडियोकेमिस्ट्री संश्लेषण मॉड्यूल और डिस्पोजेबल कैसेट किट का उपयोग कर के इस विधि स्वचालित [11सी]PiB रेडियोसिंथेसिस. विशेष रूप से, हम एक 20 वाल्व रेडियोकेमिस्ट्री मॉड्यूल पर इस रेडियोसिंथेसिस लागू, सिरिंज ड्राइव (डिस्पेंसर) जो मानक 20 एमएल डिस्पोजेबल प्लास्टिक सिरिंज, गैस प्रवाह नियंत्रक, वैक्यूम पंप और गेज फिट बैठता है के साथ सुसज्जित. इस विधि की सादगी के कारण, हमें विश्वास है कि यह सबसे व्यावसायिक रूप से उपलब्ध स्वचालित सिंथेसाइज़र के लिए संशोधित किया जा सकता है, या तो कैसेट आधारित या स्थिर वाल्व के साथ सुसज्जित उन. इस ठोस चरण समर्थित तकनीक की सुविधा [11सी]PiB उत्पादन अच्छा विनिर्माण अभ्यास (जीएमपी) नियमों के साथ अनुरूप है और संश्लेषण विश्वसनीयता में सुधार. यहाँ वर्णित तकनीक भी रेडियोसिंथेसिस के लिए आवश्यक अग्रदूत की मात्रा कम कर देता है, केवल का उपयोग करता है "हरी" bioसंगत सॉल्वैंट्स और लगातार उत्पादन बैचों के बीच समय कम हो जाती है.

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Protocol

1. बफ़र्स और eluents की तैयारी

  1. 0ण्2 एम सोडियम ऐसीटेट विलयन (समाधान ए) तैयार करने के लिए 2ण्72 ह सोडियम ऐसीटेट ट्राइहाइड्रेट को 100 एमएल जल में घोल दें।
  2. 0ण्2 एम एसिटिक अम्ल विलयन (विलयन ठ) तैयार करने के लिए 1ल जल में 11ण्4 एमएल हिमनदीय ऐसीटिक अम्ल को भंग करें।
  3. 50 एमएल विलयन क को 450 एमएल विलयन ठ के साथ मिलाकर, बफर संदर्भ केंद्र15के अनुसार पीएच 3.7 (बफर 1) पर एसीटेट बफर तैयार किया जा सकता है। पीएच स्ट्रिप्स या एक पीएच मीटर के साथ बफर के पीएच सत्यापित करें।
  4. बफर 1 के 87.5 एमएल के साथ निरपेक्ष इथेनॉल के 12.5 एमएल का मिश्रण 1 12.5% जलीय EtOH समाधान बनाने के लिए (धो 1) एक 100 एमएल बोतल में.
  5. 100 एमएल बोतल में 15% जलीय EtOH समाधान (धोने 2) बनाने के लिए बफर 1 के 85 एमएल के साथ निरपेक्ष इथेनॉल के 15 एमएल का मिश्रण।
  6. 50% जलीय EtOH समाधान (अंतिम eluent) बनाने के लिए बफर 1 के 5 एमएल के साथ निरपेक्ष इथेनॉल के 5 एमएल का मिश्रण है और एक 10 एमएल सिरिंज में इस समाधान के 2.5 एमएल आकर्षित।

2. कारतूस के अग्रदूत के आवेदन

  1. 10 एमएल पानी पास करें और इसके बाद टीसी 18 कारतूस के माध्यम से एसीटोन के 5 एमएल के बाद इसे पूर्व शर्त के लिए।
  2. 1 मिनट के लिए 50 एमएल/मिनट पर नाइट्रोजन की एक धारा के साथ कारतूस सूखी।
  3. एनहाइड्रोस एसीटोन के 1 एमएल में 6-OH-BTA-0 के अग्रदूत की 2 मिलीग्राम भंग करें।
  4. एक Luer-टिप 250 डिग्री एल परिशुद्धता ग्लास सिरिंज नीचे की ओर पकड़े, अग्रदूत समाधान के 100 $L और तरल के शीर्ष पर हवा कुशन के 50 डिग्री एल वापस ले लो। सुई निकालें और धीरे धीरे नीचे सभी तरह से प्लंजर धक्का द्वारा महिला अंत से tC18 कारतूस पर अग्रदूत समाधान लागू होते हैं. समाधान किसी भी आगे धक्का मत करो!

3. स्वचालित संश्लेषण के लिए कई गुना की स्थापना

  1. संश्लेषण मॉड्यूल पर मानक 5-पोर्ट डिस्पोजेबल कई गुना सुरक्षित करें और इसे चित्र 2 और चरण 3.2 - 3.5 नीचे के अनुसार इकट्ठा करें।
    नोट: हम एसीटोन प्रतिरोधी manifolds का उपयोग करने की सलाह देते हैं (सामग्री की तालिकादेखें).
  2. पोर्ट 1 में दो पद हैं। एक 20 एमएल सिरिंज के साथ फिट स्वचालित मशीन के लिए क्षैतिज इनलेट कनेक्ट करें। धोने 1 के साथ बोतल के लिए ऊर्ध्वाधर इनलेट कनेक्ट करें।
  3. मॉड्यूल जो उत्पादन के उत्पादन के उत्पादन से कनेक्ट करें [11C]CH3OTf पोर्ट 2 के लिए कई गुना.
  4. बंदरगाहों 3 और 4 के बीच अग्रदूत 6-OH-BTA-0 के साथ भरी हुई tC18 कारतूस स्थापित करें।
  5. पोर्ट 5 में दो पद हैं। क्षैतिज आउटलेट को अपशिष्ट बोतल से कनेक्ट करें जो कम से कम 200 एमएल रखना चाहिए। बाँझ फिल्टर के माध्यम से अनुरेखक संग्रह के लिए बाँझ शीशी के लिए ऊर्ध्वाधर आउटलेट कनेक्ट करें।

4. रेडियोसिंथेसिस की [11C]PiB

चेतावनी: रेडियोधर्मी आइसोटोप शामिल सभी जोड़तोड़ रेडियोधर्मी सामग्री के साथ काम करने के लिए पर्याप्त प्रशिक्षण के साथ कर्मियों द्वारा एक नेतृत्व परिरक्षित गर्म सेल में किया जाना चाहिए।
नोट: इस प्रोटोकॉल के उत्पादन के विवरण को कवर नहीं करता है [11C]CO2 cyclotron में और इसके रूपांतरण में [11C]CH3OTf रेडियोरसायन मॉड्यूल का उपयोग कर. इन प्रक्रियाओं रेडियोकेमिस्ट्री प्रयोगशाला के व्यक्तिगत उपकरणों पर निर्भर करेगा और इस प्रोटोकॉल के दायरे से बाहर हैं. हमारा पीईटी केंद्र एक आईबीए साइक्लोट्रॉन से सुसज्जित है, जो गैस में 14छ (च,जेड)11सी नाभिकीय अभिक्रिया केमाध्यम से कार्बन-11 का रासायनिक रूप में उत्पादन करता है। लक्ष्य, और के उत्पादन के लिए एक व्यावसायिक रूप से उपलब्ध मॉड्यूल [11C$CH3मैं के माध्यम से "सूखी विधि" (उत्प्रेरक में कमी करने के लिए [11C]CH4 कट्टरपंथी iodination के बाद). [11सी] ब्3OTf को पासकर द्वारा उत्पादित किया जाता है [11C]CH3I एक चांदी triflate कॉलम पर 20 एमएल/मिनट पर 175 डिग्री सेल्सियस के लिए गरम किया गया।

  1. पोर्ट 2 के माध्यम से कई गुना में [11C]CH3OTf उद्धार और 20 mL/min उत्पादन प्रवाह पर भरी हुई tC18 कारतूस के माध्यम से पारित द्वारा विनियमित [11C]CH3OTf मॉड्यूल, बंदरगाहों के माध्यम से 3 और 4 और कचरे की बोतल में के रूप में पर दिखाया गया चित्र 2A|
  2. एक बार सभी रेडियोधर्मिता स्थानांतरित कर दिया गया है और कारतूस धारक के पीछे रेडियोधर्मिता डिटेक्टर द्वारा नजर रखी के रूप में tC18 कारतूस पर फंस, बंदरगाह 2 बंद करके गैस के प्रवाह को रोकने के. प्रतिक्रिया को पूरा करने के लिए 2 मिनट के लिए कारतूस बैठते हैं।
  3. 19 एमएल धोने का समाधान वापस लें (चित्र 2 Bपर दर्शाए अनुसार 100 एमएल/
  4. डिस्पेंसरी से पोर्ट 3 और 4 के माध्यम से 18.5 एमएल वॉश 1 घोल का वितरण करें और अपशिष्ट बोतल में 50 एमएल/मिनट पर घोल दें जैसा कि चित्र 2गपर दिखाया गया है। कई गुना में हवा के बुलबुले के अभाव के रूप में वे जुदाई दक्षता कम हो सकता है सुनिश्चित करें।
  5. चरण 4.3 और 4.4 चार बार दोहराएँ, वापस लेने और धोने के 18.5 एमएल का वितरण 1 समाधान हर बार. tC18 के माध्यम से पारित धोने 1 समाधान की कुल मात्रा 92.5 एमएल है; हालांकि, यह 90 के भीतर भिन्न हो सकते हैं - 100 एमएल रेंज विशेष संश्लेषण मॉड्यूल के आधार पर इस्तेमाल किया.
  6. 2 समाधान धोने के लिए 1 से पोर्ट 1 पर इनपुट लाइन स्विच करें (चरण 1.5 देखें)।
  7. चरण 4.3 और 4.4 तीन बार दोहराएँ, वापस लेने और धोने 2 समाधान के 18.5 एमएल हर बार वितरण. धोने की कुल मात्रा 2 समाधान tC18 के माध्यम से पारित 55.5 एमएल है. हालांकि, यह 50 के भीतर भिन्न हो सकते हैं - 60 एमएल रेंज विशेष संश्लेषण मॉड्यूल के आधार पर इस्तेमाल किया.
  8. टॉगलवाल्व 5 अंतिम शीशी की ओर के रूप में चित्र 2डीपर दिखाया गया है. मशीन से लाइन डिस्कनेक्ट करें और इसे 10 एमएल सिरिंज से कनेक्ट करें जिसमें अंतिम एलुएंट समाधान (50% जलीय EtOH, चरण 1.6) और 7.5 एमएल हवा का 2.5 एमएल होता है।
  9. सिरिंज नीचे की ओर पकड़े, मैन्युअल रूप से अंतिम eluent समाधान धक्का (2.5 एमएल) हवा के द्वारा पीछा किया (7.5 एमएल) बंदरगाहों के माध्यम से tC18 कारतूस के माध्यम से 3 और 4 और बाँझ शीशी में अनुरेखक संग्रह के लिए बाँझ फिल्टर के माध्यम से के रूप में चित्रा पर दिखाया गया है 2डी.
  10. खाली सिरिंज डिस्कनेक्ट करें, बाँझ फॉस्फेट बफर के 10 एमएल युक्त 10 एमएल से कनेक्ट करें (इसे अलग-अलग रूप में शामिल नहीं किया गया है) और ऊपर वर्णित के रूप में बाँझ शीशी में tC18 कारतूस के माध्यम से पूरे मात्रा धक्का (चित्र 2डी ). सिरिंज डिस्कनेक्ट करें और एक ही सिरिंज का उपयोग करके 10 एमएल हवा के साथ लाइन को फ्लश करें।
  11. अंतिम अनुरेखक तैयार करने के 0.7 एमएल वापस लेने और गुणवत्ता नियंत्रण प्रक्रियाओं (0.1 एमएल), बैक्टीरियल एंडोटॉक्सिन परीक्षण (0.1 एमएल) और बाँझपन (0.5 एमएल) के लिए नमूने एकत्र।

5. गुणवत्ता नियंत्रण प्रक्रियाओं

चेतावनी: radiotracer के प्रत्येक बैच उचित गुणवत्ता नियंत्रण प्रक्रियाओं (QC) मानव या पशु विषयों में प्रशासन के लिए पीईटी इमेजिंग साइट के लिए जारी करने से पहले के अधीन किया जाना चाहिए. इस पांडुलिपि के लेखक स्थानीय स्वास्थ्य प्राधिकरण के नियमों के साथ अन्य केन्द्रों में उत्पादित रेडियोट्रैकर के अनुपालन के लिए जिम्मेदार नहीं हैं।

  1. रिलीज से पहले QC प्रक्रियाओं, जो रेडियोकेमिकल पहचान (आरसीआई), रेडियोकेमिकल शुद्धता (आरसीपी), रासायनिक शुद्धता और अनुरेखक के मोलर गतिविधि के साथ ही अवशिष्ट विलायक सामग्री और निर्माण के पीएच के लिए परीक्षण शामिल होना चाहिए प्रदर्शन।
  2. यूवी (350 एनएम पर निगरानी) और रेडियोधर्मिता डिटेक्टरों, और एक उलट चरण स्तंभ के साथ सुसज्जित विश्लेषणात्मक HPLC प्रणाली के माध्यम से आरसीआई, आरसीपी, रासायनिक शुद्धता और मोलर गतिविधि निर्धारित करते हैं। 6-OH-BTA-0 और 6-OH-BTA-1 के प्रतिधारण समय का निर्धारण और प्रत्येक यौगिक की सामग्री मात्रा निर्धारित करने के लिए साधन जांचना.
  3. एक केशिका स्तंभ से सुसज्जित विश्लेषणात्मक गैस क्रोमैटोग्राफी प्रणाली के माध्यम से अवशिष्ट विलायक सामग्री का निर्धारण। एसीटोन और इथेनॉल के प्रतिधारण समय का निर्धारण और प्रत्येक विलायक की सामग्री मात्रा निर्धारित करने के लिए साधन जांचना।
  4. उपयुक्त कारतूस के साथ सुसज्जित एक कारतूस पाठक का उपयोग कर जीवाणु endotoxins परीक्षण प्रदर्शन करते हैं.
  5. जीवाणु विकास की अनुपस्थिति सुनिश्चित करने या स्थानीय स्वास्थ्य प्राधिकरण द्वारा मान्यता प्राप्त प्रयोगशाला में बाँझपन के नमूने को भेजने के लिए संश्लेषण के कम से कम 14 दिन बाद नमूना की बाँझपन विश्लेषण करें।

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Representative Results

की एक विशिष्ट विकिरण संश्लेषण को संक्षेप में प्रस्तुत करने के लिए [11C]PiB, गैसीय [11C]CH3OTf पहले एक tC18 कारतूस के माध्यम से पारित किया जाता है अग्रदूत के एक समाधान के साथ पहले से लोड (चित्र 1). प्रतिक्रिया मिश्रण का पृथक्करण तो इस प्रकार के रूप में जलीय इथेनॉल समाधान के साथ क्रमिक elution द्वारा प्राप्त की है। सबसे पहले, 12.5% EtOH unreacted के बहुमत elutes [11C]CH3OTf और 6-OH-BTA-0, तो 15% EtOH अवशिष्ट अशुद्धियों बाहर washes, और अंत में एक 50% इथेनॉल समाधान एक बाँझ में वांछित [11C]PiB elutes. ट्रेसर तो बाँझ फॉस्फेट बफर के साथ पतला है और पीईटी इमेजिंग साइट के लिए जारी करने से पहले सख्त QC प्रक्रियाओं से होकर गुजरती है. प्रशासन के लिए उपयुक्त11सीजेडपीआईबी बैच के विशिष्ट विश्लेषणात्मक एचपीएलसी यूवी और रेडियोधर्मिता क्रोमैटोग्राम को चित्र 3में प्रस्तुत किया गया है।

कुल रेडियो संश्लेषण समय है 10 मिनट की डिलीवरी से शुरू [11C]CH3OTf, के RCY [11C]PiB का उपयोग कर 0.2 पूर्ववर्ती की मिलीग्राम है 22% (से शुरू [11C]CH3OTf, क्षय के लिए सही नहीं) और मोलर गतिविधि है 190 जीबीक्यू/ ट्रेसर नैदानिक परीक्षणों के लिए multicenter dominantly विरासत अल्जाइमर नेटवर्क परीक्षण इकाई (DIAN-TU) के सभी QC विनिर्देशों के साथ पालन करना चाहिए: रेडियोकेमिकल शुद्धता 95% से ऊपर होना चाहिए; गैर-रेडियोसक्रिय अशुद्धियों की मात्रा प्रति 10 एमएल खुराक 1.3 ग्राम से नीचे होनी चाहिए; पीएच 4 - 8 रेंज के भीतर होना चाहिए; और इथेनॉल और एसीटोन सामग्री क्रमशः 10% और 3000 पीपीएम से नीचे होनी चाहिए। नमूने भी बाँझ और endotoxin मुक्त होना चाहिए. चार विशिष्ट विकिरण संश्लेषण रनों के परिणाम ों को सारणी 1में संक्षेप में प्रस्तुत किया गया है।

रिपोर्ट की गई तकनीक के लिए ठीक से काम करने के लिए, ऊपर वर्णित कई महत्वपूर्ण कदमों के दौरान देखभाल की जानी चाहिए। TC18 कारतूस पर अग्रदूत लागू करने के लिए (चरण 2.4) समाधान उत्पादन की ओर धक्का नहीं दिया जाना चाहिए, ताकि के विभाजन के लिए प्रभावी पथ को छोटा नहीं करने के लिए [11C]PiB unreacted प्रारंभिक सामग्री और संभव पक्ष उत्पादों से. स्थानांतरण के दौरान एक कारतूस के माध्यम से [11C]CH3OTf का प्रवाह 20 एमएल/मिनट (चरण 4.1) से अधिक नहीं होना चाहिए। एक बार elution शुरू होता है (चरण 4.4), यह बहुत महत्वपूर्ण है कारतूस गीला रखने के लिए और हवा के माध्यम से नहीं जाने के लिए channeling प्रभाव है जो अनुरेखक की कम शुद्धता में परिणाम हो सकता है या कम RCY के नुकसान के कारण से बचने के लिए [11C]PiB कचरे में. यदि रेडियोसिंथेसिस (चरण 3.1) में उपयोग किया गया 5-पोर्ट मैनिफोल्ड एसीटोन के प्रति प्रतिरोधी नहीं है, जैसे एसीसी-101 जैसे मानक पॉलीकार्बोनेट कई गुना, एसीटोन की मात्रा 100 डिग्री सेल्सियस से अधिक नहीं होनी चाहिए क्योंकि बड़ी मात्रा में गतिविधि स्थानांतरण के दौरान कई गुना नुकसान हो सकता है और असफल संश्लेषण में परिणाम. मामले में पीएच विनिर्देशों को पूरा नहीं करता है, tC18 कारतूस वैकल्पिक रूप से अपशिष्ट बोतल में कदम 4.7 और 4.8 के बीच बाँझ पानी के 10 एमएल के साथ कुल्ला किया जा सकता है.

Figure 1
चित्र 1:6-OH-BTA-0 के 11C-मेथिलेशन द्वारा रेडियोसिंथेसिस [11C]CH3OTf. ]11C]PiB संबद्ध एमिलॉयड प्लेक की इमेजिंग के लिए सबसे व्यापक रूप से उपयोग किए जाने वाले रेडियोट्रेसमें से एक है। पीईटी द्वारा ई. और अन्य neurodegenerative शर्तों के साथ. इस अनुरेखक आमतौर पर aniline अग्रदूत के 11सी-मेथिलेशन के माध्यम से संश्लेषित है 6-OH-BTA-0 का उपयोग कर [11C]मिथाइल triflate ([11C]CH3OTf) या तो समाधान में या सूखी HPLC इंजेक्शन पाश में (समाधानी कैप्टिव तकनीक)। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 2
चित्रा 2: कदम दर कदम संश्लेषण और एक tC18 कारतूस पर $11सी $PiB की शुद्धि। (ए) गैसीय [11C]CH3OTf 6-OH-BTA-0 के साथ भरी हुई कारतूस के माध्यम से पारित कर दिया है. के रूप में चरण 4.1 और 4.2 में वर्णित है, [11C]CH3OTf अग्रदूत युक्त कारतूस पर फंस गया है और 2 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर अग्रदूत के साथ प्रतिक्रिया करता है. (बी) धो 1 या धोने 2 समाधान मशीन सिरिंज में वापस ले लिया है. चरण 4.3 में वर्णित के रूप में, मॉड्यूल के सिरिंज पंप ऊपर की ओर काटा सिरिंज के प्लंजर खींचती है, कई गुना के बंदरगाह 1 से जुड़े एक लाइन के माध्यम से या तो eluent का एक समाधान वापस लेने. (ग) अशुद्धियों को अपशिष्ट की बोतल में बहा दिया जाता है। के रूप में कदम 4.4 में वर्णित है, मॉड्यूल के सिरिंज पंप काटा सिरिंज नीचे की ओर के प्लंजर ले जाता है, बंदरगाहों के माध्यम से tC18 कारतूस के माध्यम से वापस ले लिया धोने समाधान धक्का 1, 3 और एक बेकार की बोतल में कई गुना के 4. चित्र बी और सी पर प्रतिनिधित्व कदम एक चक्र में कई बार दोहराया जाता है कारतूस से सभी unreacted सामग्री बाहर धोने के लिए, के रूप में कदम 4.5 - 4.7 में वर्णित है. (डी) [11C]PiB एक बाँझ फिल्टर के माध्यम से एक बाँझ शीशी में अंतिम eluent के साथ eluted है. के रूप में कदम 4.8 और 4.9 में वर्णित है, सिरिंज एक सिरिंज पंप में काटा लाइन से काट दिया और एक 10 एमएल सिरिंज 50% जलीय इथेनॉल के 2.5 एमएल युक्त के साथ पहले बदल दिया है. कई गुना के पोर्ट 5 तो बाँझ शीशी की ओर टॉगल है और [11C]PiB tC18 से मैन्युअल रूप से eluted है. खाली सिरिंज तो बाँझ फॉस्फेट बफर के 10 एमएल युक्त एक और सिरिंज के साथ बदल दिया है और पूरी सामग्री tC18 के माध्यम से धक्का दिया जाता है के रूप में कदम 4.10 में वर्णित लाइनों कुल्ला. बाँझ शीशी अब एक 12.5 एमएल 10% बफर जलीय इथेनॉल समाधान में11सी $PiB शामिल हैं। यह आंकड़ा बोडजेमेलीन एट अल12से संशोधित किया गया है। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 3
चित्रा 3: गुणवत्ता नियंत्रण विश्लेषणात्मक HPLC के [11C]PiB. (अ)11ब्$च3OH का धारण समय(11C$CH3OTf से), अनप्रतिक्रियादार [11C]CH3OTf, और अनुरेखक [11C]PiB रेडियोएक्टिवा ग्राम पर 2.1, 4.0 और 6.6 मिनट, क्रमशः. रेडियोधर्मिता का पता लगाने के विश्लेषण से पता चलता है कि के RCP [11C]PiB 98.0% है. (ख) यूवी क्रोमैटोग्राम पर 6-OH-BTA-0 (पूर्वाधिकारी) और 6-OH-BTA-1 (ट्रेसर शिखर) का प्रतिधारण समय क्रमशः 3.6 और 5.9 न्यूनतम है। यूवी ट्रेस का विश्लेषण स्वीकार्य सीमा (1.3 डिग्री) और अन्य गैर-रेडियोसक्रिय अशुद्धियों की अनुपस्थिति से नीचे अवशिष्ट अग्रदूत एकाग्रता को दर्शाता है। इस प्रकार, ट्रेसर के रेडियोकेमिकल और रासायनिक शुद्धता नैदानिक पीईटी अध्ययन के लिए स्वीकार्य है। HPLC शर्तों - स्तंभ (सामग्री की तालिका):5 डिग्री, 100 x 4.0 मिमी; मोबाइल चरण: 40:60 acetonitrile/पानी के प्रवाह की दर: 0.7 mL/min. कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 4
चित्र 4: 6-OH-BTA-0 अग्रदूत राशि का अनुकूलन। सबसे कम राशि (0.1 मिलीग्राम) प्रदान करता है [11C]PiB एक मध्यम रेडियोकेमिकल उपज में (RCY) के 18.1 ]3.8%. रेडियोसिंथेसिस 0.2 मिलीग्राम से शुरू प्रदान करता है [11C]PiB एक RCY के 22.0$3.1%, जबकि राशि में वृद्धि 0.3 मिलीग्राम आगे RCY करने के लिए सुधार 32.1 $3.7%, अंतिम उत्पाद में अग्रदूत की एक थोड़ा अधिक राशि की कीमत पर. सभी RCY क्षय के लिए सही नहीं कर रहे हैं (रेडियो सिंथेसिस समय के 10 मिनट) की रेडियोधर्मिता से शुरू [11C]CH3OTf tC18 कारतूस पर फंस. कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 5
चित्र 5: गुणवत्ता नियंत्रण विश्लेषणात्मक HPLC के $11C$ABP688. (ए ) रेडियोएक्टिविटी क्रोमैटोग्राम संयुक्त (ई) और( )के आरसीपी को दर्शाता है-11सीजेडएबीपी688 98.1% का। (बी) यूवी क्रोमैटोग्राम 10 ग्राम से ऊपर अवशिष्ट अग्रदूत सांद्रता को दर्शाता है। जबकि रासायनिक शुद्धता नैदानिक पीईटी अध्ययन के लिए स्वीकार्य हो सकता है, अपेक्षाकृत कम प्रभावी मोलर गतिविधि (एकमीटर और lt; 37 जीबीक्यू/ कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

बैच 1 चलाएँ 2 रन 3 चलाएँ रन 4
[11सी] सीएच3OTf, जीबीक्यू 9.21 11.25 7.84 6.44
[11सी] पीआईबी, जीबीक्यू 2.26 2.37 2.11 1.41
RCY, %* 24.5 21.1 26.9 21.8
आरसीपी, % 98 97.2 97.8 99.2
मोलर गतिविधि, जीबीक्यू/ 154.6 322.6 121.1 162.1
अवशिष्ट अग्रदूत, $g 0.32 0.55 0.58 0.87
पीएच 5 5 5 5
EtOH सामग्री, % 9.4 8.8 7.7 8.1
एसीटोन सामग्री, पीपीएम 33 38 46 33
शर्त परीक्षण एन/ए (lt;10 EU/mL (lt;10 EU/mL (lt;10 EU/mL
बंध्याकरण परीक्षण एन/ए कोई विकास नहीं कोई विकास नहीं कोई विकास नहीं
* फुटनोट: से [11C]CH3OTf, क्षय के लिए सही नहीं

तालिका 1. के प्रतिनिधि परिणाम [11C]PiB उत्पादन अनुकूलित शर्तों के तहत चलाता है. सभी बैचों नैदानिक पीईटी अध्ययन के लिए इरादा अनुरेखकों के लिए आवश्यकताओं के अनुरूप हैं।

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Discussion

हाल ही में उभरने और एफडीए के कई अनुमोदन के बावजूद 18एफ लेबल पीईटी अनुरेखक, जैसे florbetapir, florbetaben और flutemetamol, [11सी]PiB तेजी से मस्तिष्क तेज और कम गैर विशिष्ट के कारण amyloid इमेजिंग के लिए एक सोने के मानक अनुरेखक बनी हुई है बाइंडिंग. वर्तमान में इस अनुरेखक या तो गीला रसायन विज्ञान16 या एक "सूखी पाश" दृष्टिकोण का उपयोग कर के माध्यम से संश्लेषित है4,17. दोनों तरीकों के लिए HPLC शुद्धि की आवश्यकता होती है जिसके बाद जलीय इथेनॉल में सुधार होता है, जो लगभग 20 - 30 मिनट लेता है जो $11C$CH3OTf से शुरू होता है। ठोस चरण पर पिछले रिपोर्टों में से कुछ से प्रेरित होकर 11सी-मेथिलेशन तकनीकों और के नैदानिक महत्व का समर्थन किया [11सी]PiB, हम सस्ती डिस्पोजेबल ठोस चरण निष्कर्षण का उपयोग कर इस अनुरेखक के एक रेडियो संश्लेषण विकसित करने के उद्देश्य से ( SPE) प्रतिक्रिया, शुद्धि और निर्माण के लिए एक "3-in-1" इकाई के रूप में कारतूस.

मानव विषयों में विवो इमेजिंग में के लिए पीईटी अनुरेखक के सफल उत्पादन के लिए सबसे महत्वपूर्ण कदम हैं: 1) एक अनुरेखक अणु में रेडियोधर्मी आइसोटोप का समावेश; 2) unreacted रेडियोधर्मी और गैर रेडियोसक्रिय प्रजातियों से अनुरेखक के जुदाई; 3) एक जैविक रूप से संगत विलायक में अनुरेखक के सुधार; 4) गुणवत्ता नियंत्रण प्रक्रियाओं के साथ अनुपालन। पहले सूचित विलायक कैप्टिव विधि के आधार पर, हम उम्मीद करते थे कि SPE-समर्थित तकनीक के समाधान में 11सी-मेथिलेशन की तुलना में अग्रदूत की कम मात्रा की आवश्यकता होगी। विशेष रूप से, पहले सूचित विलायक कैप्टिव प्रक्रियाओं के रेडियो संश्लेषण के लिए[11C]PiB की आवश्यकता है 0.5 - 1.0 पूर्वाधारके 1.0मिलीग्राम4 ,17. इस प्रकार, हमने 6-OH-BTA-0: 0.1, 0.2, और 0.3 मिलीग्राम की तीन अलग-अलग मात्रा में $11C$C]PiB से प्रारंभ होने वाले क्षय रेडियोकेमिकल पैदावार के लिए सही नहीं जांच की। यहां तक कि सबसे कम राशि (0.1 मिलीग्राम) की एक मध्यम राशि प्रदान करता है [11C]PiB, हालांकि अपेक्षाकृत कम और कम विश्वसनीय RCY पर (18.1 $3.8%). रेडियोसिंथेसिस 0.2 मिलीग्राम से शुरू करने के एक RCY प्रदान करता है [11C]PiB (22.0 ]3.1%), जबकि राशि में वृद्धि 0.3 मिलीग्राम आगे RCY में सुधार (32.1 $3.7%), अंतिम उत्पाद में अग्रदूत की एक थोड़ा अधिक राशि की कीमत पर. सभी मामलों में, रेडियोसिंथेसिस 10 मिनट में पूरा किया गया था। इस प्रकार, इष्टतम अग्रदूत राशि वांछित RCY और विशेष पीईटी केन्द्रों पर $11C$PiB की शुद्धता पर निर्भर करता है. पूर्ववर्ती राशि पर आधारित रेडियोकेमिकल उपज अनुकूलन प्रयोगों के परिणामोंको चित्र 4 में संक्षेप ित किया गया है। विशेष रूप से, रेडियोसिंथेसिस का उपयोग करने का प्रयास [11C]CH3I एक मिथाइलिंग एजेंट या इथेनॉल के रूप में एक प्रतिक्रिया विलायक के रूप में वांछित उपज नहीं था [11C]PiB (डेटा नहीं दिखाया).

एक छोटी SPE कारतूस पर रेडियो संश्लेषण प्रतिक्रिया मिश्रण की मात्रात्मक जुदाई वर्णित तकनीक का सबसे चुनौतीपूर्ण हिस्सा था. हम hypothesized कि खुशबूदार amines 6-OH-BTA-0 और 6-OH-BTA-1 मुख्य रूप से अम्लीय मीडिया में उनके protonated रूपों में मौजूद हैं और इसलिए उलट चरण ठोस चरण से तेज elution प्रोफाइल होगा. अतः सभी जलीय इथेनॉल समाधान पीएच 3-7 पर 0.2 एम ऐसीटेट बफर का उपयोग करके तैयार किए गए थे। इसके बाद, हमने निर्धारित किया कि EtOH एकाग्रता के साथ जलीय इथेनॉल समाधान 15% तक धीरे-धीरे elute unreacted अग्रदूत 6-OH-BTA-0 और [11C]CH3OTf, जबकि radiolabeled [11C]PiB tC18 कारतूस पर फंस रहता है. एक अंतिम अनुरेखक तैयार करने में उन अशुद्धियों की पूंछ को रोकने के लिए इथेनॉल एकाग्रता एक ढाल elution में 12.5% से 15% तक बढ़ गया था. सभी अशुद्धियों के बाद कारतूस से बाहर धोया गया था, अनुरेखक elution केंद्रित इथेनॉल समाधान (50%) की एक न्यूनतम राशि (2.5 एमएल) का उपयोग कर हासिल किया गया था. 10% सीमा के तहत इथेनॉल सामग्री रखने के लिए और मानव इंजेक्शन (4 - 8) के लिए स्वीकार्य सीमा के भीतर तैयार अनुरेखक के पीएच लाने के लिए, ट्रेसर बाँझ फॉस्फेट बफर के साथ पतला था।

शर्तों अनुकूलन के बाद, के रेडियो संश्लेषण $11सी $PiB एक व्यावसायिक रूप से उपलब्ध स्वचालित संश्लेषण इकाई (ASU), मशीन सिरिंज और डिस्पोजेबल कई गुना से सुसज्जित का उपयोग कर स्वचालित किया गया था. इस विशेष ASU के लिए कई गुना सेटअप चरण 3.1 - 3.5 में वर्णित के रूप में सरल है. विशेष रूप से, इस पद्धति को आसानी से अन्य उपलब्ध ASU के ऊपर वर्णित व्यंजनों के बाद के अधिकांश पर लागू किया जा सकता है. अनुकूलित शर्तों के तहत, नैदानिक आवेदन के लिए उपयुक्त [11सी]पीआईबी के बैचों को 1.4 से 2.4 जीबीक्यू (38 - 61 mCi) तक अंतिम गतिविधियों के साथ संश्लेषित किया जाता है।

हाल ही में, हमने रेडियोलेबलिंग के लिए "3-इन-1" तकनीक लागू की , जो कि11C$ABP688, मेटाबोट्रोपिक ग्लूटामेट रिसेप्टर्स प्रकार की इमेजिंग के लिए पीईटी ट्रेसर 5 (mGlu5)18,19. इस अनुरेखक का विकिरण संश्लेषण ऑक्सीम में -OH समूह के 11सी-मेथिलेशन पर निर्भर करता है; इसलिए, बेस के अलावा desmethyl अग्रदूत deprotonate करने के लिए आवश्यक है. Tetrabutylammonium हाइड्रॉक्साइड (MeOH में एक 1 एम समाधान के रूप में) एक आधार के रूप में चुना गया था क्योंकि यह सबसे ध्रुवीय कार्बनिक सॉल्वैंट्स में घुलनशील है. एक प्रारंभिक radiolabeling प्रयोग में, DMSO में अग्रदूत (0.5 मिलीग्राम) का एक समाधान (100 $L) MeOH में 1 M TBAOH के साथ मिलाया गया था (20 $L) और मिश्रण ध्यान से ऊपर वर्णित के रूप में tC18 कारतूस पर लागू किया गया था (चरण 2.4 देखें). गैसीय [11C]CH3मैं के रूप में कदम 4.1 - 4.2 में वर्णित कारतूस के माध्यम से पारित किया गया था और प्रतिक्रिया के लिए कमरे के तापमान पर आगे बढ़ने की अनुमति दी गई थी 5 मिनट. अनुक्रमिक elution में तनु इथेनॉल समाधान के साथ 0.2 एम सोडियम बाइकार्बोनेट बफरेट (पीएच 8.5 - 9.0) - 15% EtOH के 92 एमएल के बाद 92 एमएल के बाद 20% EtOH - बाहर unreacted [11C]CH3मैं और अवशिष्ट अग्रदूत धोया. रेडियोरासायनिक रूप से शुद्ध [11C]ABP688 (RCY ] 18.2%, आरसीपी और 98.0%) तब चरण 4.9 - 4.11 में वर्णित के रूप में एक बाँझ फिल्टर के माध्यम से एक ही बफर में 50% EtOH समाधान के साथ eluted किया गया था. इस तथ्य के बावजूद कि 98% से अधिक पूर्ववर्ती को पतला इथेनॉल washes के साथ हटा दिया जाता है, अंतिम अनुरेखक में कुछ unreacted अग्रदूत की उपस्थिति (अप करने के लिए 20 डिग्री) विकिरण संश्लेषण प्रक्रिया के आगे अनुकूलन की आवश्यकता है. इस अनुकूलन चल रहा है, और इस परियोजना के परिणाम उचित समय में प्रकाशित किया जाएगा. प्रतिनिधि विश्लेषणात्मक HPLC यूवी और रेडियोधर्मिता क्रोमैटोग्राम के [11C]ABP688 बैच चित्र 5पर दिखाया गया है.

अंत में, हम एक कुशल ठोस चरण समर्थित कार्बन-11 radiolabeling प्रक्रिया के रूप में आसानी से उपलब्ध सस्ती एसपीई कारतूस का उपयोग विकसित किया है "3-in-1" रेडियोसंश्लेषण के लिए संस्थाओं, शुद्धि, और पीईटी अनुरेखक ों के निर्माण नैदानिक के लिए इस्तेमाल किया इमेजिंग. मानव इंजेक्शन के लिए उपयुक्त ट्रेसर उच्च आरसीवाई और मोलर गतिविधि में 11 सी-मेथिलेटिंग एजेंट ([11सीजेडएच3ओटीएफ या ]11सीजेडएच3I) के अलावा से शुरू होने वाले 10मिनट के भीतर उत्पादित किए जाते हैं। हम पूरी तरह से यह अच्छा विनिर्माण अभ्यास (जीएमपी) स्वास्थ्य और विकिरण सुरक्षा अधिकारियों द्वारा लगाए गए नियमों के अनुरूप बनाने के लिए इस तकनीक स्वचालित. ठोस चरण समर्थित रेडियो संश्लेषण अग्रदूत की एक कम राशि की आवश्यकता है, विषाक्त सॉल्वैंट्स के उपयोग से बचा जाता है, संश्लेषण समय और विकिरण खुराक कर्मियों द्वारा निरंतर कम हो जाती है. इसके अलावा, HPLC से संबंधित विफलताओं से बचने रेडियोसिंथेसिस विश्वसनीयता में सुधार और नियमित अनुरेखक उत्पादन के लिए डिस्पोजेबल किट के विकास के लिए अनुमति देता है.

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Disclosures

लेखक घोषणा करते हैं कि उनका कोई प्रतिस्पर्धी वित्तीय हित नहीं है।

Acknowledgments

इस अध्ययन आंशिक रूप से एक अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था 18-05 कनाडा के अल्जाइमर सोसायटी से (ए के लिए) और स्वास्थ्य कनाडा से समर्थन के साथ मस्तिष्क कनाडा फाउंडेशन. लेखक इस काम के समर्थन के लिए मैकगिल विश्वविद्यालय के चिकित्सा संकाय, मॉन्ट्रियल न्यूरोलॉजिकल संस्थान और मैककोनेल ब्रेन इमेजिंग सेंटर को स्वीकार करना चाहते हैं। हम भी गुणवत्ता नियंत्रण प्रक्रियाओं और Drs जीन पॉल Soucy और Gasan Massarweh रेडियोआइसोटोप और रेडियोकेमिस्ट्री सुविधा के लिए उपयोग के लिए मदद के लिए श्रीमती मोनिका Lacatus-Samoila धन्यवाद.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
6-OH-BTA-0 ABX advanced biochemical compounds 5101 Non-radioactive precursor of [11C]PiB
6-OH-BTA-1 ABX advanced biochemical compounds 5140 Non-radioactive standard of [11C]PiB
Agilent 1200 HPLC system Agilent Agilent 1200 Analytical HPLC system
Ethanol absolute Commercial alcohols 432526
Hamilton syringe (luer-tip, 250 µL) Hamilton HAM80701
MZ Analytical PerfectSil 120 MZ-Analysentechik GmbH MZ1440-100040 Analytical HPLC column
Perkin Elmer Clarus 480 GC system Perkin Elmer Clarus 480 Gas chromotograph
polycarbonate manifold Scintomics ACC-101 Synthesis manifold
Restek MTX-Wax column (30 m, 0.53 mm) Restek 70625-273 Analytical GC column
Scintomics GRP module Scintomics Scintomics GRP Automated synthesis unit
Sep-Pak tC18 Plus Waters WAT020515 Solid phase extraction cartridge
solvent-resistant manifold Scintomics ACC-201 Synthesis manifold
Spinal needle BD 405181
Sterile extension line B. Braun 8255059
Sterile filter Millipore SLLG013SL
Sterile vial (20mL) Huayi SVV-20A
Sterile water Baxter JF7623
Synthra MeIplus Research Synthra MeIplus Research [11C]CH3I/[11C]CH3OTf module
Syringe (10 mL) BD 309604
Syringe (1mL) BD 309659
Syringe (20 mL) B. Braun 4617207V Dispenser syringe
Vent filter Millipore TEFG02525

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References

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रसायन विज्ञान अंक 152 कार्बन-11 रेडियोलेबलिंग पॉजिट्रॉन उत्सर्जन टोमोग्राफी इमेजिंग [11सी]पीआईबी ]11सी जेड एबीपी688 11सी-मेथिलेशन ठोस चरण समर्थित संश्लेषण ठोस चरण निष्कर्षण स्वचालन
ठोस चरण <sup>11</sup>सी-मेथिलेशन, शुद्धि और पीईटी ट्रेसर्स के उत्पादन के लिए निर्माण
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Singleton, T. A., Boudjemeline, M.,… More

Singleton, T. A., Boudjemeline, M., Hopewell, R., Jolly, D., Bdair, H., Kostikov, A. Solid Phase 11C-Methylation, Purification and Formulation for the Production of PET Tracers. J. Vis. Exp. (152), e60237, doi:10.3791/60237 (2019).

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