Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Neuroscience

En revideret kirurgisk tilgang til at fremkalde endolymphatic hydrops i MarsVin

Published: June 4, 2020 doi: 10.3791/60597

Summary

Denne artikel viser en ekstradural tilgang til at udslette marsvin endolymphatic sac og skade endolymphatic kanalen med en fin pick for at fremkalde eksperimentelle endolymphatic hydrops.

Abstract

Endolymphatic hydrops er en udvidelse af scala medier, der oftest er forbundet med Meniries sygdom, selv om patofysilogiske mekanisme (r) forbliver uklar. For i tilstrækkelig grad at undersøge egenskaberne ved endolymphatic hydrops, såsom oprindelsen af lavfrekvente høretab, en pålidelig model er nødvendig. Marsvinet er en god model, fordi det hører i de lavfrekvente regioner, der er angiveligt påvirket af endolymphatic hydrops. Tidligere forskning har vist, at endolymphatic hydrops kan induceres kirurgisk via intradural eller ekstradural tilgange, der involverer boring på endolymphatic kanalen og sac. Men om det var muligt at skabe en endolymphatic hydrops model ved hjælp af en ekstradural tilgang, der undgik farlige boring på endolymphatic kanalen og sac var ukendt. Formålet med denne undersøgelse var at demonstrere en revideret ekstradural tilgang til at fremkalde eksperimentelle endolymphatic hydrops på 30 dage postoperativt ved at udslette endolymphatic sac og skade endolymphatic kanalen med en fin pick. Prøvestørrelsen bestod af syv marsvin. Der blev foretaget funktionelle målinger af hørelsen, og der blev efterfølgende høstet tidsmæssige knogler til histologisk analyse. Tilgangen havde en succesrate på 86% i at opnå endolymphatic hydrops. Risikoen for cerebrospinalvæskelækage var minimal. Der forekom ingen perioperative dødsfald eller skader på den bageste halvcirkelformede kanal i prøven. Den præsenterede metode viser en sikker og pålidelig måde at fremkalde endolymphatic hydrops på et relativt hurtigt tidspunkt på 30 dage. De kliniske implikationer er, at den præsenterede metode giver en pålidelig model til yderligere at udforske oprindelsen af lavfrekvente høretab, der kan være forbundet endolymphatic hydrops.

Introduction

Endolymphatic hydrops er en udvidelse af scala medier. Tilstedeværelsen af endolymphatic hydrops kan måles ved hjælp af tværsnittet område af scala medier. Det menes, at kliniske endolymphatic hydrops kan være forbundet med lavfrekvente sensorineuralt høretab, som det ses i Menirekes sygdom. Men oprindelsen (e) af høretabet er fortsat uklar. For at kunne undersøge oprindelsen af lavfrekvent høretab i forbindelse med endolymphatic hydrops er der behov for en pålidelig model.

I 1965 beskrev Kimura og Schuknecht, hvordan man kan fremkalde endolymphatic hydrops i marsvin ved hjælp af en intradural tilgang1. Deres teknik involveret ved hjælp af en posterior kraniel fossa tilgang til at få adgang til operculum og subarcuate fossa. Trinene involverede incising dura, tilbagetrækning af lillehjernen med en Ringer løsning gennemblødt vatrondel, og boring på tværs af endolymphatic kanalen og den mellemliggende del af endolymphatic sac. Bone voks blev derefter placeret i operculum at adskille endolymphatic kanalen fra distale endolymphatic sac. Kraniotomi defekten blev lukket ved at placere absorberbart gelatine pulver (f.eks Gelfoam) og reapproximating de overlydende muskler. Histologisk evidens for endolymphatic hydrops blev konsekvent fundet på postoperative dage 1, 3, 7, 14, 21 og 30, viser, at den intradurale tilgang var en pålidelig metode til at fremkalde histologisk bekræftet endolymphatic hydrops. Ved hjælp af samme intradural tilgang som Kimura og Schuknecht, men med forskellige tidspunkter, Bekræftede Salt og DeMott, at scala medier i anden omgang af cochlea blev væsentligt udvidet på dag 4 og udover 2. Mens den faktiske sygelighed at fremkalde en cerebrospinalvæske (CSF) lækage ved hjælp af Kimura og Schuknecht's intradural tilgang ikke blev rapporteret i den oprindelige undersøgelse, tilstedeværelsen af en CSF lækage kunne øge risikoen for meningitis. Det er blevet foreslået, at tab af CSF kan føre til en udstrømning af perilymph, hvilket resulterer i en samtidig midlertidig udvidelse af endolymphatic volumen i marsvin3. En ekstradural tilgang til inducerende endolymphatic hydrops ville være en sikrere løsning.

I 1989, Andrews og Bohmer beskrevet to ekstradural kirurgiske tilgange til at nå endolymphatic sac og kanal, via enten en midt kraniel fossa tilgang eller posterior kraniel fossa tilgang, at udslette endolymphatic sac4. De beskrev fjernelse af operculum med en diamant boremaskine, og derefter enten bore ud den mellemliggende del af endolymphatic sac eller ved hjælp af en fin pick at forstyrre endolymphatic sac og kanal. I 1993 beskrev Lee, Wright og Meyerhoff en lignende tilgang, som omfattede boring gennem endolymphatic sac og kanal, men afveg i, at de også samtidig blokeret cochlear akvædukten5. De viste tilstedeværelsen af endolymphatic hydrops, som vurderes via histologi, på fire uger efter udslettelse af endolymphatic sac og obstruktion af cochlear akvædukt. Megerian et al. var den første til at offentliggøre en video artikel, der viser en ekstradural udslettelse af endolymphatic sac og kanal, der involverede boring direkte på den mediale del af operculum at indgå i endolymphatic sac og kanal6. De viste histologiske beviser for endolymphatic hydrops i et marsvin ofret på 28 uger efter operationen, samt høretab i 16 kHz regionen6. Hvorvidt det var muligt at fremkalde histologisk bekræftet endolymphatic hydrops og lavfrekvente høretab på et tidligt tidspunkt ved hjælp af ekstradurale tilgange var ukendt.

Det overordnede mål med denne rapport er at demonstrere en ekstradural tilgang til at fremkalde eksperimentelle endolymphatic hydrops på 30 dage postoperativt ved at udslette endolymphatic sac og skade endolymphatic kanalen med en fin pick. Begrundelsen for brugen af denne teknik er fordelen ved at undgå behovet for at bore på den petrous tidsmæssige knogle, hvorved risikoen for utilsigtet at skade dura og forårsage en CSF lækage, afbøde muligheden for at skade den bageste halvcirkelformede kanalen, og reducere risikoen for skade på sigmoid sinus.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Alle procedurer, der er anført umiddelbart nedenfor i protokollen afsnit blev gennemført som beskrevet i protokoller godkendt af Washington University i St. Louis Institutional Animal Care and Use Committee.

1. Anæstesiinduktion og overvågning af vitale tegn

BEMÆRK: Denne undersøgelse anvendes pigmenteret NIH-stamme marsvin fremstillet af en in-house avl koloni.

  1. Brug marsvin af begge køn, der vejer mindst 350 g.
  2. Marsvinet anbringes i en neonatal opvarmningsisolet og give en ketamin/xylazinblanding intraperitonealt (50 mg/kg ketamin og 10 mg/kg xylazin) til induktionsbedøvelse. Overhold marsvinet, indtil det mister tå-knivspids refleks.
  3. Når tab af tå-knivspids reflekser opstår, barbere den bageste hals og hovedet af marsvin med en hårtrimmer typisk annonceret til human brug.
  4. Indsprøjt en subkutan bolus på 12 ml lakteret Ringers opløsning i dyrets bagende.
  5. Placer marsvin liggende på en opvarmning pad med benene hævet og sted 27,5 G sommerfugl nål intraperitoneally. Kontroller, at sommerfuglenålen er i den korrekte position i det intraperitoneale rum ved at sikre, at kun luft indsugning. Hvis blod eller væske er indsugning, der er bekymring for levering i vaskulære eller tarmsystem. Sommerfuglenålen bruges til gentagen administration af anæstesi.
  6. Vend marsvinet over til den udsatte position, og fastgør hovedet til en stereotaktisk holder.
  7. Fastgør et pulsoximeter til foden. Hvis du bruger pigmenterede marsvin, pigmenterede poter kan forhindre læsning iltmætning. Anbring derfor pulsoximeteret på enhver pote, der ikke er pigmenteret.
  8. Indsæt en rektal temperatursonde for at overvåge kropstemperaturen. Rektalsonden er en del af et opvarmningstæppesystem, der opretholder kropstemperaturen ved 38 °C. Tænd ikke for opvarmningstæppet, før rektalsonden er på plads for at undgå overophedning af opvarmningstæppet. Hvis der har svært ved at placere rektal sonden, kan det lægges ved siden af marsvin krop.
  9. Påfør smøremiddel på begge øjne på marsvinet for at forhindre hornhindeafskrabninger.
  10. Administrere supplerende ilt efter behov via en gummislange placeret nær næsen for at opretholde iltmætning niveauer over 90%.
  11. Giv enrofloxacin 0,5 mg/kg subkutanely som et antibiotisk profylakse.
  12. Giv 0,25 mg/kg bupivacaine med 1:100.000 adrenalin subkutophøst på det forventede snit sted for lokalbedøvelse og vasokonstrictive effekter.
  13. Giv vedligeholdelse anæstesi hver 20 min i 4 cyklusser og derefter kun efter behov baseret på vitale tegn. Rutinemæssigt overvåge dybden af anæstesi ved kropstemperatur, respiration sats, iltmætning, og puls.
  14. Overvåg vitale tegn hvert 15.

2. Kirurgisk forberedelse

  1. Når marsvinets hoved er placeret sikkert i en stereotaktisk holder, skal du placere et stykke afdækningstape over ryggen for at give tilstrækkelig spænding langs huden, der overlyser occiput. Fastgør enderne af båndet til den stereotaktiske holder.
  2. Liberalt prep huden overlying occiput og posterior hals med jod opløsning og 70% ethanol i en steril måde tre gange.
  3. På dette tidspunkt skal du bruge sterile forholdsregler og autoklaklede instrumenter. Placer sterile gardiner over marsvinet.

3. Kirurgisk procedure

  1. Ved hjælp af en 15 klinge, lave en lille, midline snit langs den bageste occiput strækker sig ned i den bageste hals. Når under huden, bruge iris saks til at frigøre den rigtige bageste cervikale muskler fra occipital knoglen. Hvis nogen blødning opstår, mens skære musklerne, kontrol ved at anvende pres med en steril vatkugle.
  2. Ved hjælp af en kombination af en #3 mm, #2 mm, og #1 mm diamant burr med en 5-0 suge og steril kunstvanding, udføre en kraniotomi, der er afgrænset af den eksterne occipital crest, lamboidal højderyg, occipitomastoid sutur linje, og dorsale margin af foramen magnum.
    1. Forsigtigt placere et lille stykke saltvand-fugtet vat under knoglen, mens adskille occipital knoglen fra dura.
  3. Skeletonize den sigmoid sinus med en #0,5 mm diamant burr og forsigtigt fjerne knoglen overlydende det.
  4. Når sigmoid sinus er udsat, forsigtigt trække sigmoid sinus medialt ved hjælp af en vat og skifte til at bruge en 3-0 suge.
  5. Identificer operculum som en slids lignende struktur, der er placeret i petrous tidsmæssige knogle. Den subarcuate fossa vil blive placeret overlegent og sigmoid sinus vil være mediale til det. Den ekstra ossøse del af endolymphatic sac visualiseres derefter som en klar sæk ind i operculum og knyttet til duraoversende sig sigmoid sinus. Operculum er ovalt, ca. 3 til 4 mm med 1,5 til 2 mm. Men set fra den kirurgiske opfattelse, operculum vises som en omtrentlig 1 mm slids. Den synlige del af sæk fra den kirurgiske visning er omtrent samme størrelse som den synlige del af operculum, hvis ikke mindre.
  6. Påfør blid tilbagetrækning til sigmoid sinus medialt for klart at visualisere den ekstra-osseous del af endolymphatic sac og øge spændingen mellem de ekstraosseous og intraosseous dele af endolymphatic sac.
    1. Brug en fin vinklet pick til forsigtigt expunge den mellemliggende del af endolymphatic sac. Det er afgørende, at expungement processen ikke efterlader nogen synlig forbindelse mellem dura og operculum; derefter placere en fin pick inde i operculum at stort set skrabe langs indersiden af knoglen til at skade det.
    2. Drej den fine pick i retning af endolymphatic kanalen og blindt forstyrre foring. På dette tidspunkt kan der forekomme blødninger fra et fartøj i operculum. Det kan styres med et lille stykke bomuld.
  7. Tør det tomme operculum med et lille stykke bomuld. Brug 3-0 suge efter behov for at holde bomulden tør.
  8. Få knoglestøv ved hjælp af en lille curette til at skrabe langs den kvadratiske del af den tidsmæssige knogle. Pak operculumen generøst med knoglestøv. Brug en vatkugle og sugning til at holde området tørt, mens du pakker det med knoglestøv.
  9. Påfør knoglevoks på operculum at forsegle det. Sørg for, at der ikke er overskydende knoglevoks løsnet ind i kraniet.
  10. Brug knoglevoks til at dække kraniet defekt.
  11. Omtrent den bageste cervikale muskler med 4-0 flettet, absorberbar sutur i en afbrudt måde.
  12. Udfør en subcutikulær lukning ved hjælp af en 4-0 flettet, absorberbar sutur.

4. Pleje efter proceduren

  1. Fjern marsvinet fra den brugerdefinerede stereotaktiske holder og overfør til en opvarmning isolette.
  2. Giv 2 mg/kg Atipamezole og 24 ml lakteret Ringers opløsning (subkutanely væk fra snittet). Giv lakteret Ringers opløsning på grund af xylazinens vanddrivende virkninger. 0,2 mg/kg meloxicam subkutanely for postoperativ analgetisk dækning.
  3. Få vitale tegn hvert 15.
  4. Giv en yderligere 12 ml væskebolus af lakteret Ringers opløsning ca. 2 timer fra operationens afslutning i restitutionsperioden.
  5. Når marsvinet er opmærksomt, ambuler, tømning, og har afføring, returnere marsvin til dyret facilitet. Der er brug for ca. 2 til 4 timer, for at marsvinet kan komme helt ud af anæstesi.
  6. Monitor marsvin to gange dagligt i de første tre postoperative dage. Hvis der observeres tegn på ubehag, administreres 0,2 mg/kg meloxicam subkutanet hver 24. Alternativt kan buprenorphin (0,05 mg/kg) administreres subkutanet, hvis symptomerne ikke håndteres tilstrækkeligt af meloxicam.
  7. Giv en 12 ml væskebolus af lakteret Ringers opløsning subkutanet to gange dagligt i op til tre dage, indtil marsvinet når den præoperative vægt. Hvis marsvinet når sin præoperative vægt før den tredje postoperative dag, skal væskeboluses stoppes. Hvis marsvin fortsætter med at tabe sig efter de første tre dage, bruge et supplement ernæring ryste typisk annonceres til konsum blandet med knuste marsvin fødevarer pellets.
  8. Overvåge marsvin ugentligt indtil deres slutpunkt.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Den præsenterede metode anvendes en ekstradural tilgang til at udslette endolymphatic sac og skade endolymphatic kanalen med en fin pick i syv marsvin bestående af to hanner og fem hunner. Den gennemsnitlige varighed af kirurgi var 2 timer fra snit til lukning. Den samlede boretid varierede fra 5-10 minutter. Op til 4 timer var nødvendig for marsvin til fuldt ud at komme ud af anæstesi. Der var ingen intraoperative eller postoperative dødsfald i stikprøven. Der var ingen skader på den bageste halvcirkelformede kanal eller dura i nogen af marsvin. Der skete skade på sigmoid sinus hos det ene marsvin (udelukket fra dataanalysen).

Marsvinene gennemgik en anden procedure på offerdagen (postoperativ dag 30) for at foretage auditive funktionsmålinger, der omfattede Auditive Nerve Overlapped Waveform (ANOW) og cochlear compound action potentialer (CAPs). Der blev foretaget ANOW- og CAP-målinger , og der blev udført analyser ved hjælp af metoder , der er beskrevet tidligere7,8,9. Den ANOW er en rent neurale måling, der stammer fra neurale excitation i den apikale cochlear halv7,8,9. Efter de auditive funktionstest blev ørerne straks høstet og forberedt til histologisk analyse ved hjælp af metoder, der tidligere var beskrevet10. Vellykket histologisk forberedelse blev afsluttet i seks ører, men det ene øre viste tårer i Reisners membran. Øret med tårer blev elimineret fra histologisk analyse, men holdt i fysiologisk analyse. Det tværsnitsareal af scalamedier blev målt ved hjælp af ImageJ11. Histologisk analyse af de tidsmæssige knogler afslørede endolymphatic hydrops i seks ud af de syv marsvin i hele højre cochlea sammenlignet med venstre cochlea (Figur 1). I figur 1forstørres skalaterne tværsnitsnit på det opererede højre øre (rødt) i forhold til det kontralaterale venstre øre (blå), hvilket demonstrerer endolymphatic hydrops i højre øre. Det tværsnitsareal af scalamedier på hver tur blev også kvantificeret og sammenlignet med kontrol marsvin (Figur 2). Foranstaltninger fra det ene øre blev ikke medtaget i figur 2 på grund af et histologisk præparat problem, der fik Reisners membran til at rive. Kontrol marsvin havde enten gennemgået fingeret kirurgi (hvor endolymphatic sække blev identificeret, men ikke forstyrret) eller ikke havde gennemgået nogen operation andet end det, der er nødvendige for at gøre auditive funktion foranstaltninger. Sammenlignet med styringen var tværsnitsområdet generelt større i ører, der overlevede 30 dage efter udslettelse af endolymphatic sac (Figur 2). ANOW-tærskler (≤1 kHz) blev forhøjet hos seks ud af syv marsvin, der påviste endolymphatic hydrops sammenlignet med kontrolmarskansiner, hvilket viser tilstedeværelsen af lavfrekvent høretab (figur 3). Bølge 1 af den auditive hjernestammerespons eller cochlear-sammensatte virkningspotentiale (CAP), tærskler var inden for normalområdet ved frekvenser over 8 kHz i seks ud af de syv marsvin (Figur 3).

Figure 1
Figur 1: Histologiske billeder af et mid-modiolar snit af marsvin cochlea. Dette marsvin overlevede 30 dage efter udslettelse af endolymphatic sac ved hjælp af en ekstradural tilgang. Klik her for at se en større version af dette tal.

Figure 2
Figur 2: Tværsnitsareal af skalamedier som funktion af cochlear-længde. Foranstaltninger fra seks af syv individuelle ører er i rødt. Grå stiplede linjer repræsenterer ±1 standardafvigelse af målinger fra kontrolørerne. Klik her for at se en større version af dette tal.

Figure 3
Figur 3: Auditive funktionsmålinger (ANOW og CAPs) målt på postoperativ dag 30. ANOW-foranstaltninger er ≤1 kHz, og der blev truffet foranstaltninger til fælles landbrugspolitik >1 kHz. Foranstaltninger fra individuelle ører er i rødt. Grå stiplede linjer repræsenterer ±1 standardafvigelse for tærskler for kontrolmarskaniner. Klik her for at se en større version af dette tal.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Den præsenterede ekstradurale metode havde en succesrate på 86% i at opnå histologisk bekræftet endolymphatic hydrops og lavfrekvente høretab. Metoden opnåede pålideligt histologiske beviser for endolymphatic hydrops efter postoperativ dag 30, i overensstemmelse med tidligere undersøgelser, der anvendte en intradural tilgang2. Metodens betydning med hensyn til eksisterende metoder er, at der ikke er behov for en csf-lækage, hvorved en potentiel konfunderende variabel, der er blevet foreslået at resultere i en kompenserende, midlertidig udvidelse af endolymphatic volumen3. Samlet set viser metoden en hurtig, sikker og pålidelig måde at fremkalde eksperimentelle endolymphatic hydrops.

Den præsenterede metode har flere styrker sammenlignet med tidligere undersøgelser. For det første var tilgangen ekstradural, minimere de potentielle sygelighed og forstyrrende virkninger af en CSF lækage. For det andet, ved hjælp af en fin pick i stedet for en boremaskine til at expunge endolymphatic sac og skade endolymphatic kanalen, metoden undgår enhver potentiel skade på den bageste halvcirkelformede kanalen. Et kritisk skridt er at sikre ingen synlig forbindelse mellem dura og operculum. For det tredje, ved hjælp af en fin pick i den tidsmæssige knogle i stedet for en boremaskine, metoden minimeret risikoen for akustisktraume forårsaget af boring på petrous tidsmæssige knogle. Endelig giver metoden en optimeret perioperativ dyreprotokol for at sikre en hurtig genopretning og et vellykket postoperativt forløb af marsvinene. En begrænsning af metoden er brugen af ketamin/xylazin, som kan overvindes ved hjælp af en stereotaxic enhed, der tillader isofluran levering.

De videnskabelige konsekvenser af resultaterne er udviklingen af en sikker og pålidelig måde at fremkalde endolymphatic hydrops på et relativt hurtigt tidspunkt på 30 dage. De kliniske implikationer er, at metoden giver en pålidelig model af endolymphatic hydrops for yderligere at udforske oprindelsen af den tilhørende lavfrekvente høretab. Fremtidige anvendelser af metoden vil blive anvendt til yderligere undersøgelse af oprindelsen (r) af lavfrekvente høretab forbundet med endolymphatic hydrops. Afslutningsvis, den præsenterede metode er en modificeret occipital, extradural tilgang, der indebærer udslettelse af endolymphatic sac og skade endolymphatic kanalen med en fin pick at fremkalde eksperimentelle endolymphatic hydrops på 30 dage postoperativt i marsvin.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Forfatterne har intet at afsløre.

Acknowledgments

Vi takker Shannon M. Lefler for hjælp med tal og materialetabellen. Forskning rapporteret i denne publikation blev støttet af National Institute of Døvhed og andre kommunikationsforstyrrelser inden for National Institutes of Health, gennem "Udvikling af kliniker / forskere i akademisk ENT" uddannelse tilskud, tildeling nummer T32DC000022 (C.V.V.) og ved R01 DC014997 (J.T.L). Indholdet er alene forfatternes ansvar og repræsenterer ikke nødvendigvis de nationale sundhedsinstitutters officielle synspunkter.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
12 mL syringe Henke-Sass Wolf 5100-X00V0
1 mL and 3 mL syringe BD Precision(Ordered from Fischer Sci) 14-826-87 15859152
27.5 butterfly gauge needle Terumo Surflo Winged Infusion Set, Terumo Corporation, Japan) (Ordered from McKesson) 448407
4-0 suture McKesson 1034507
4 x 4 gauze sponges Dukal (Ordered form McKesson) 374454
60 mL syringe Fisher Sci 22-031-375
Anspach otologic drill Anspach SC2100
atipamezole Zoetis 107204-6
autoclave Fisher sci 15-103-0508
autoclave bags McKesson 524881
bayonet separator Olympus AL 130564
bupivicaine auro Medics Pharma 555150-169-10
clear sterile drape 3M 1020
cotton balls Fisherbrand (ordered from Fisher Sci) 22-456-885
cotton swabs McKesson 508716
diamond burrs #3, #2, #1, and #0.5 mm Anspach QD8-3SD; QD8-2SD; QD8-1SD; QD8-05SD
diaper pad McKesson 945330
disposable 15 blade Swann-Morton 0305
enrofloxacin Hospira 0409-4888-01
epinephrine McKesson 63739-0456
eye ointment Dechra Vet Products 17033-211-38
Freer elevator Grace Medical 215100FX
gelfoam Pfizer (Ordered from McKesson) 82830
hair trimmers Oster Power Pro Cordless (ordered from Amazon) 078400-020-000
iodine scrub Purdue Pharma (ordered from mcKesson) 521243
iris scissors Olympus CL-542114
ketamine Henry Schein Animal Health 55853
lactated ringers B. Braun Medical (ordered from McKesson) 186662
lancet knife by Rosen Grace Medical 151100FX referred to as curette in the text
lubricant Milex (ordered from Cooper Surgical) MX5030
masking tape 3M (ordered from fisher sci 19047259
metal rectangle basin Amazon B07NQDBC6T
needle holder Olympus CR 213015-ENT
needles: 27 gage, 18 gauge BD Precision(Ordered from Fischer Sci) 14-826-48 14-826-5D
neonatal warming isollete Air Borne Life Support Systems 731-1800
operating microscope Carl Zeiss OPMI pico
oxygen tank AirGas OX USP200
pulse ox CapnoTrue (Ordered from Medacx) M-3090112001
rectal probe with heating blanket Harvard Apparatus probe: PY2 50-7217 Heating Blanket: PY2 50-7214
red body holder Lichtenhan Lab N/A In-house product
right angle Olympus BV-230337
rosen needle Olympus AM-130566 customized, it is the instrument I use to tear the sac
rubber tubing for O2 administration Fisher Sci 14-171-104
saran wrap Fisher Sci NC9617977
stereotactic head holder WUSTL Instrument Machine Shop N/A In-house product
sterile drapes Cardinal Health 7553
suction tube by Baron Grace Medical 034903FX 034905FX #3 and #5 Suction
tissue forceps adson brown Grace Medical 325112FX
Weitlander retractor Olympus Grace Medical BL200011 100313FX
xylazine Akorn 59399-110-20

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Kimura, R. S., Schuknecht, H. F. Membranous Hydrops in the Inner Ear of the Guinea Pig after Obliteration of the Endolymphatic Sac. Pract oto-rhino-laryng. 27, 343-354 (1965).
  2. Salt, A. N., DeMott, J. Time course of endolymph volume increase in experimental hydrops measured in vivo with an ionic volume marker. Hearing Research. 74 (1-2), 165-172 (1994).
  3. Walsted, A., Garbarsch, C., Michaels, L. Effect of craniotomy and cerebrospinal fluid loss on the inner ear. An experimental study. Acta Oto-Laryngologica. 114 (6), 626-631 (1994).
  4. Andrews, J. C., Bohmer, A. The surgical approach to the endolymphatic sac and the cochlear aqueduct in the guinea pig. American Journal of Otolaryngology. 10 (1), 61-66 (1989).
  5. Lee, J. R., Wright, C. G., Meyerhoff, W. L. Modified occipital approach to the endolymphatic sac and cochlear aqueduct of the guinea pig. American Journal of Otolaryngology. 14 (2), 165-169 (1993).
  6. Megerian, C. A., et al. Surgical induction of endolymphatic hydrops by obliteration of the endolymphatic duct. Journal of Visualized Experiments. (35), (2010).
  7. Lichtenhan, J. T., Cooper, N. P., Guinan, J. J. Jr A new auditory threshold estimation technique for low frequencies: proof of concept. Ear and Hearing. 34 (1), 42-51 (2013).
  8. Lichtenhan, J. T., Hartsock, J., Dornhoffer, J. R., Donovan, K. M., Salt, A. N. Drug delivery into the cochlear apex: Improved control to sequentially affect finely spaced regions along the entire length of the cochlear spiral. Journal of Neuroscience Methods. 273, 201-209 (2016).
  9. Lichtenhan, J. T., Hartsock, J. J., Gill, R. M., Guinan, J. J. Jr, Salt, A. N. The auditory nerve overlapped waveform (ANOW) originates in the cochlear apex. Journal of the Association for Research in Otolaryngology. 15 (3), 395-411 (2014).
  10. Lichtenhan, J. T., Hirose, K., Buchman, C. A., Duncan, R. K., Salt, A. N. Direct administration of 2-Hydroxypropyl-Beta-Cyclodextrin into guinea pig cochleae: Effects on physiological and histological measurements. PloS One. 12 (4), e0175236 (2017).
  11. Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis. Nature Methods. 9 (7), 671-675 (2012).

Tags

Neurovidenskab Endolymphatic hydrops endolymphatic sac obliteration endolymphatic sac ablation Audity Nerve Overlapped Waveform dyremodel af Meniers sygdom ekstradural tilgang
En revideret kirurgisk tilgang til at fremkalde endolymphatic hydrops i MarsVin
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Valenzuela, C. V., Lee, C., Buchman, More

Valenzuela, C. V., Lee, C., Buchman, C. A., Lichtenhan, J. T. A Revised Surgical Approach to Induce Endolymphatic Hydrops in the Guinea Pig. J. Vis. Exp. (160), e60597, doi:10.3791/60597 (2020).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter