Summary
כתב יד זה מתאר שיטה להקלטות EEG וידאו מתמשכות באמצעות אלקטרודות עומק מרובות בעכברים יילודים העוברים היפוקסיה-איסכמיה.
Abstract
היפוקסיה איסכמיה היא הגורם הנפוץ ביותר להתקפי יילודים. מודלים של בעלי חיים חיוניים להבנת המנגנונים והפיזיולוגיה שבבית התקפי יילודים ואיסכמיה היפוקסיה. כתב יד זה מתאר שיטה לניטור אלקטרואנצפלוגרמה וידאו רציף (EEG) בעכברים יילודים כדי לזהות התקפים ולנתח רקע EEG במהלך איסכמיה היפוקסיה. השימוש בווידאו ו- EEG בשילוב מאפשר תיאור של סמיולוגיה של התקפים ואישור התקפים. שיטה זו מאפשרת גם ניתוח של ספקטרוגרמות כוח ומגמות דפוסי רקע EEG לאורך תקופת הניסוי. במודל היפוקסיה איסכמיה זה, השיטה מאפשרת הקלטת EEG לפני הפציעה כדי לקבל בסיס נורמטיבי במהלך פציעה והתאוששות. זמן הניטור הכולל מוגבל על ידי חוסר היכולת להפריד גורים מהאם במשך יותר מארבע שעות. אמנם, השתמשנו במודל של התקפים היפוקסיים-איסכמיים בכתב יד זה, שיטה זו לניטור EEG וידאו יילודים יכול להיות מיושם מודלים שונים של מחלות ותפיסות מכרסמים.
Introduction
אנצפלופתיה איסכמית היפוקסית (HIE) היא מצב המשפיע על 1.5 ב-1,000 תינוקות בשנה והוא הגורם השכיח ביותר להתקפי יילודים1,2. תינוקות ששרדו נמצאים בסיכון למוגבלויות נוירולוגיות שונות כגון שיתוק מוחין, נכות שכלית ואפילפסיה3,4,5.
מודלים של בעלי חיים ממלאים תפקיד קריטי בהבנת וחקירת הפתופיזיולוגיה של איסכמיה היפוקסיה והתקפי יילודים6,7. מודל Vannucci שונה משמש כדי לגרום היפוקסיה איסכמיה (HI) ביום שלאחר הנתיחת 10 (p10)7,8. גורי עכברים בגיל זה מתרגמים בערך נוירולוגית למונח הניאונט האנושי המלא9.
ניטור אלקטרואנצפלוגרפיה רציף של וידאו (EEG) המשמש בשילוב עם מודל פגיעה זה מאפשר הבנה ואפיון נוספים של התקפים איסכמיים היפוקסיים יילודים. מחקרים קודמים השתמשו בשיטות שונות לניתוח התקפי יילודים במכרסמים, כולל הקלטות וידאו, הקלטות EEG מוגבלות והקלטות EEG טלמטריה10,11,12,13,14,15,16. בכתב היד הבא, אנו דנים לעומק בתהליך הקלטת EEG וידאו רציף בגורי עכבר במהלך היפוקסיה-איסכמיה. טכניקה זו לניטור EEG וידאו רציף בגורי עכבר יילודים יכולה להיות מיושמת על מגוון מודלים של מחלות ותקפים.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
כל המחקרים בבעלי חיים אושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול בבעלי חיים ושימוש (IACUC) של אוניברסיטת וירג'יניה.
1. בניין אלקטרודה / בניין כבלים
- השתמש בחוט נירוסטה מבודד חד קוטבי (קוטר חשוף בגודל 0.005 אינץ', מצופה "0.008) כדי ליצור אלקטרודה המחוברת למחבר שקע נקבה (מחבר כלי קיבול נשי 0.079).
- השתמש בכבל מיוחד בהתאמה אישית כדי לחבר בעלי חיים למגבר.
- חבר מחבר זכר בעל 4 פינים (מחבר זכר 0.079) לאחדות של 4 ערוצים, השג עכום התואם למגבר תפעולי (op-amp). חבר נגד 10K לחוטים המתחברים לסוללת ה-9 V. חוט קרקע שאינו מחובר למגבר הפעולה פועל כנקודת האמצע של הסוללה.
- חבר קצה אחד של הכבל (AWG, 0.012" OD) למגבר החיבור וחבר את הקצה השני של הכבל למגבר.
2. ניתוח השתלת אלקטרודה
- הרדמה הגור (לאחר ההונאה 9) עם 4-5% איזופלוראן במכסה המנוע זרימה כלפי מטה. לפני תחילת ההליך, להזריק את הגורים עם bupivacaine (0.02-0.05 מ"ל, 0.25% חדירה מקומית תת עורית).
- ברגע שהחיה חסרת תנועה, העבר לשלב סטריאוטקטי עם חרוט באף. השתמש בצד ההפוך של מוט האוזן כפי שהוא רך להחזיק את הראש יציב. בגיל זה, גורים אין אוזן מפותחת לחלוטין להשתמש בקצה מחודד של חטיף האוזן.
- להנמיך את זרימת האיזופלוריין ולשמור אותו ב 2.5-3%. לפקוח עין על נשימה קבועה של הגור לאורך כל הניתוח. צבוט את הזנב כדי לבדוק את תגובת הכאב ולאחר מכן להמשיך לתחכים.
- לחטא את אזור ההשתכה על הגולגולת עם betadine ואלכוהול (3 מחזורים של יוד לסירוגין ו 70% אתנול). עוטפים את חלק הגוף שמסביב כך שאזור ההסתה נראה לעין.
- פתחו את הקרקפת הקדמית-אחורית מעט מעל העיניים וחזרו בהן כ-0.5 ס"מ מהעור. מקם מחדש את ראש העכבר על הבמה הסטריאוטקסית כך שהעור מושך החוצה וחושף את הגולגולת.
- החל מי חמצן על הגולגולת באמצעות צמר גפן ולגרד את הגולגולת נקי באמצעות להב אזמל. הגולגולת רכה מאוד; לנקוט זהירות בעת גירוד.
- החל טיפה אחת (כ 50 μL) של דבק ולהפיץ אותו סביב אזור הגולגולת החשוף באמצעות אפליקטור שלה. לחשוף לאור UV במשך 40 s כדי להגדיר את הדבק.
- מדוד את הקואורדינטות באמצעות ברגמה החשופה כהפניה. שתל אלקטרודות דו-צדדיות באזור CA1 של ההיפוקמפוס [-3.5 מ"מ דורסל-גחון (DV), ±2 מ"מ מנדל-לרוחב (ML), -1.75 מ"מ עמוק (D)] ובדו-צדדי בקליפת המוח הקודקודית [-1.22 מ"מ DV, ±0.5 מ"מ ML, -1 מ"מ D] ואלקטרודה ייחוס במוח הקטן17. השתמש במחט 32 G כדי ליצור חור באזור המסומן.
- נקה את הדם מפני השטח של הגולגולת. אלקטרודות נמוכות המחוברות למחבר השקע הנשי למוח בעזרת הזרוע הסטריאוטקסית ולתקן במקום עם אקריליק שיניים. להשתיל את האלקטרודה במוח. אוזניות מחבר השקע יושבות על גבי הגולגולת מודבקות יחד על ידי אקריליק דנטלי.
- הזריקו קטופרפן (5 מ"ג/ק"ג) באופן תת עורי באזור הבין-כוכבי לאחר שהחשמל תוקן. מחזירים את הגורים לאם.
הערה: הצג חצי מהפסולת עם האוזניות בבת אחת לאם במקום להציג אותן אחת בכל פעם. זה ימנע מאמא לפגוע באוזניות של הגור.
3. הגדרה והקלטה של EEG (בסיסי/טרום פגיעה)
- לאחר 24 שעות של התאוששות לאחר השתלת אלקטרודה, מניחים כל חיה בתא פרספקס מחומם (37 °C) בהתאמה אישית להקלטת EEG. חדר זה ישמש גם כתא היפוקסיה.
- חברו גורים בתא למערכת ניטור וידאו-EEG באמצעות כבל גמיש (כבל op-amp בהתאמה אישית).
הערה: עם האוזניות במקום, העכברים ניידים באופן חופשי ואינם מפגינים הבדלים בהתנהגות. לאחר חיבור חוטי האלקטרודה, החוטים חייבים להיות מותאמים בתוך כבל התא על מנת לספק את הכמות הנכונה של מרווח, כך הגור יכול לנוע בחופשיות ברחבי התא. - דיגיטציה של נתוני ה- EEG ב- 1000 הרץ עם רווח 1K באמצעות מגבר דשא. סקור את אות ה- EEG (מסנן מעבר רצועה בין 3-70 הרץ) מאוחר יותר באמצעות תוכנה (למשל, LabChart Pro).
- הקלט EEG בסיסי לפני פציעה במשך 30 דקות לפני ניתוק בעלי חיים עבור הליך קשירת עורק עורקים.
4. קשירת עורק עורקים שמאלית
- הרדמה הגור (לאחר היילוד 10) עם 4-5% איזופלוראן במכסה זרימה כלפי מטה ומניחים אותם על התקנה מסודרת במיוחד על כרית מרחץ מים. מקם את עלון החיה ואבטח את החלק המנומר עם סרט נייר.
- תנמיך את זרימת האיזופלוריין ל-2-3%. צבוט את הזנב לתגובה לכאב ולנטר את הנשימה לאורך כל ההליך.
- לחטא את אזור הסינג '(בין הלסת הלסת לבריח) בצד שמאל של הצוואר עם בטדין ואלכוהול (3 מחזורים של יוד לסירוגין ו -70% אתנול).
- בצע תרסיס באורך של כ-1 ס"מ בצד שמאל של הצוואר באמצעות מיקרו-רסיסים. באמצעות מיקרוסקופ מנתח, בזהירות לסגת הרקמה התת עורית ואת העור כדי לחשוף את העורק הראשי. יש להקפיד לזהות את עצב הוואגוס (ריצה רוחבית לעורק) ולהפריד בעדינות ולהסיר אותו מהעורק.
- השחיל תיל משי סטרילי באורך 5 ס"מ מתחת לעורק באמצעות מיקרו-כוחספס. לקשור תיל כפול קשור סביב העורק כדי לחנוק את זרימת.
- חותכים את התפר העודף וסוגרו את העורק החשוף על ידי משיכת הרקמה והעור התת עורי. השתמש בקשר וטרינר כדי לאטום את החתירה.
- מניחים את החיה בחזרה על ניטור EEG רציף בתא בטמפרטורת החדר, אשר ממוקם על מזרן חימום. יש ליטול בדיקת טמפרטורת אינפרא אדום נקודתית של טמפרטורת הליבה של הגור כדי להימנע מפתיחת התא. אפשר לחיה להתאושש במשך שעה אחת לפני היפוקסיה.
5. EEG והיפוקסיה
- צג באופן רציף FiO2 (שבריר של חמצן השראה) בתוך התא באמצעות צג חמצן.
- לשטוף את התא עם 60 L / min של 100% N2 ו 0.415 L / min עבור 100% O2. ברגע רוויית החמצן בתא מגיע 12%, להקטין את זרימת N2 ל 10 L / min תוך שמירה על זרימת O2 ללא שינוי. עם התאמות קטנות, לשמור על FiO2 ב 8% במשך 45 דקות.
- לאחר 45 דקות של חשיפה היפוקסיה, להחזיר FiO2 ל 21%.
- יש גורים להתאושש בתא ולפקח על EEG עבור 2 שעות לאחר היפוקסיה.
- לאחר סיום תקופת ההקלטה, נתק עכברים מהקלטת EEG וחזר לאם.
6. ניתוח EEG
- נתח את קובץ ה- EEG באמצעות וידאו ב- LabChart Pro. יש חוקר עיוור לסמן את EEG להתקפים ודפוסי רקע17. התקפים מוגדרים כאירוע אלקטרוגרפי הנמשך יותר מ -10 שניות עם הפרשות גל חדות בקצב גבוה (≥3x בסיסי) עם אבולוציה ברורה17.
- יש סקירת חוקר עיוור שני אירועים מסומנים באקראי להסכמה.
- סקור וידאו משויך עבור כל אירוע אלקטרוגרפי מסומן ולנתח על פי ציון תפיסה התנהגותית מכרסם יילודים16. בקצרה, ציון זה נע בין 0-6 (חוסר תנועה להתנהגות טוניק-קלוני חמור). כדי לאפיין עוד יותר את סמילוגיית ההתקפים, ניתחו התנהגות לרוחב (תנועות רב-מוקדיות/דו-צדדיות לעומת מוקד/חד-צדדי לעומת מעורב).
- צור ספקטרוגרמת כוח. השתמש בהסטת פורייה מהירה עם חלון נתונים של Cosine-Bell בגודל של 1024 נקודות נתונים. צור ציר x חלק בספקטרוגרמה בעזרת חפיפת חלון של 87.5%. לבטא את הכוח כמו μV218.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
סמיולוגיה של התקפים
חשיפה להיפוקסיה-איסכמיה יילודים גורמת להתקפים כלליים ומוקדיים בעכברים (איור 1A-C). הקלטות EEG וידאו מאפשרות לממצאים אלקטרוגרפיים להיות מתואמים להתנהגות בוידאו. התנהגויות אלה קיבלו ציון באמצעות ציון תפיסה התנהגותית של מכרסם יילודים (BSS)16. בנוסף ל-BSS, סיווגנו אירועים לפי השאלה אם ההתנהגות הייתה מוקדית/חד-צדדית, דו-צדדית או מעורבת (איור 1B).
במודל זה, עכברים הציגו בדרך כלל 3 דפוסים של סמילוגיית התקפים: 1) חג חוזר על עצמו לצד הקשר עם הרחבה של גפיים מנוגדות, 2) אובדן יציבה עם כיפוף הגוף וזנב מכורבלים לצד קשירה, או 3) אובדן יציבה עם חתירה חד צדדית או דו צדדית של גפיים (חומרה ואורך משתנים). רוב האירועים שנצפו כללו התנהגויות מוקדיות/חד-צדדיות או מעורבות (איור 1B). בנוסף, בתקופה ההיפוקסית, תת-קבוצה של עכברים הציגה פעילות התקפית לא עוויתית, שבה הגור היה חסר תנועה עם פעילות התקפית מתמשכת ב-EEG (איור 1C).
הקלטות אלקטרוגרפיות
הקלטת EEG החלה 30 דקות לפני קשירת ראשנית על מנת לקבל בסיס לפני פציעה. פעילות בסיסית (איור 1A ואיור 2A) הייתה דומה לרקע שתוארה בעבר בגורי עכברים p1017. לאחר קשירה, גורים הוחזרו מיד על EEG וידאו. במהלך התקופה שבין קשירה להתחלה של היפוקסיה, תת-קבוצה של עכברים מציגה התקפים עוויתים (איור 1A-C).
בעקבות אינדוקציה היפוקסיה, משרעת הרקע על EEG מופחתת (איור 3B) והציג לסירוגין התפרצויות של הפרשות גלי ספייק, ואחריו דיכוי (איור 2A). עכברים מציגים התקפים אלקטרוגרפיים, שיוצאים מרקע מודחק כהפרשות קצביות של גלי ספייק ומתקדמים להפוך למורכבים ותכופים יותר, עם גלי פולי ספיק (איור 2B). במהלך היפוקסיה, ניתוח ספקטרוגרם הכוח היה בולט עבור אסימטריות בין חצי הכדור האיסכמי והנגדי (איור 3A,B). בחצי הכדור האיסכמי הוצג דפוס דיכוי פרץ וחצי הכדור הנגדי הציג רקע מודחק (איור 1A ואיור 3A,B). התקפים בממוצע מתחילים 5.5±8.1 דקות לאחר אינדוקציה של היפוקסיה, כאשר כל אירוע נמשך 56±57 שניות. היה שיעור תמותה של 13% במהלך היפוקסיה (n = 4/30), עם כל מקרי המוות בעקבות התקף עוויתות (BSS = 5-6).
במהלך reoxygenation והתאוששות, תת קבוצה של עכברים ממשיך להיות התקפים על שאר תקופת ההקלטה (2 h לאחר היפוקסיה). רקע ה-EEG דוכא בהשוואה לקו הבסיס בעקבות היפוקסיה (איור 1A ואיור 3), עם התאוששות הדרגתית במהלך תקופת ההקלטה שלאחר היפוקסיה. במהלך כל תקופת ההקלטה, עכברים הציגו בממוצע 9±5 אירועי תפיסה, כל אחד נמשך 54±57.7 s.
איור 1: מאפייני ההתקפים בעכברים p10 החשופים להיפקסיה-איסכמיה בילודים. (A) ספקטרוגרם כוח מייצג מאלקטרויד קליפת המוח הקודקודית האיסכמית דרך ציר הזמן הניסיוני. (סולם מפת חום צבע משרעת x10–6). החצים מציינים את הזמן שמעקבי אלקטרואנצפלוגרמה גולמיים מתחת לספקטרוגרמה מייצגים. (B) התנהגויות תפיסה לכל הניסוי, פוסט-כימיה/פרה-אפוקסיה, במהלך היפוקסיה, ופוסט-אבעבועות. (ג) ציון תפיסה התנהגותית (BSS) ותזמון עבור כל אירועי ההתקפים (n = 30 עכברים, לכל עכבר יש סמל ייחודי, כל נקודה היא אירוע תפיסה נפרד). 100% מהעכברים שנתפסו במהלך היפוקסיה (תיבה כחולה; זמן = −60 דקות הוא השלמת קשירת קרטוטיד, זמן = 0 הוא תחילת היפוקסיה). 13 אחוזים מתו במהלך היפוקסיה בעקבות התקף עוויתות (כיתה 5-6). נתון זה שונה מ-Burnsed et al13. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.
איור 2: דפוסי אלקטרואנצפלוגרפיה אופיינית (EEG) במהלך איסכמיה היפוקסיה. (A) רקע EEG משמאל לימין: קו בסיס קדם-שיפוטי, דיכוי פרץ במהלך היפוקסיה, דיכוי פוסט-איפוקסיה. הקלטה מאלקטרודה עומק קליפת המוח הקודקודית. (ב) אבולוציה של התקף במהלך היפוקסיה. הקלטה מאלקטרודה עומק היפוקמפוס איפסילטרלית. תיבות מוצללות (I-V) תואמות לקטעי EEG מורחבים מימין (B). נתון זה שונה מ-Burnsed et al13. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.
איור 3: א-סימטריה ברקע EEG בין חצי הכדורים איסכמיים ומנוטרליים. (A) ספקטרוגרמת כוח אסימטרית בעכברים HI במהלך היפוקסיה (פרק זמן של 45 דקות) בקליפת המוח האיסכמית (משמאל) ובקליפת המוח הנגדית (סולם משרעת מימין; משרעת x10–6). דפוס דיכוי פרץ והתקפים בחצי הכדור איסכמי, דיכוי בחצי הכדור של CL. (B) דיכוי רקע במהלך היפוקסיה ו reoxygenation בחצי הכדור IL ו- CL. כל המדידות של מתח ממוצע שנלקחו מקטעים אקראיים של 10 שניות של האנצפלוגרמה במהלך תקופת הזמן הניסיונית (בסיסית, 30 דקות לאחר תיוג, במהלך היפוקסיה – 15 דקות ו-30 דקות לאחר ההתחלה, לאחר ריוקסיגנציה מחדש – 15 דקות ו-60 דקות לאחר ההתחלה) הושוו לקו הבסיס. קו הבסיס של כל בעל חיים שימש כשליטה משלו, והנתונים מדווחים כאחוז מקו הבסיס (n = 5 עכברים). מדידות נלקחו מאלקטרודות קליפת המוח. נתון זה שונה מ-Burnsed et al13. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
הצגנו מודל לניטור רציף של וידאו-EEG בעכברים יילודים במהלך התקפים היפוקסיים-איסכמיים. ניתוח וידאו בשילוב עם EEG מאפשר אפיון של סמיולוגיה התקפים. ניתוח של EEG מאפשר מיצוי ספקטרוגרמות כוח וניתוח משרעת רקע.
מיקום נכון וזהיר של אלקטרודות הוא קריטי בפרוטוקול זה, כמו פגיעה במהלך מיקום אלקטרודה או מיקום לא מדויק יכול להשפיע באופן משמעותי על התוצאות. הערכה של פעילות EEG בסיסית נורמלית לפני הפציעה היא בעלת חשיבות עליונה, כמו דימום או פציעה במהלך מיקום אלקטרודה, בעוד נדיר, יכול לקרות. שנית, על מנת לאשר מיקום אלקטרודה נכון, המוח יכול להיות חתך ונבדק עבור מסלולי אלקטרודה במיקום הנכון. בנוסף, אי החזרת גורים לאם בקבוצות (בנפרד) עלולה לגרום לפגיעה באוזניות אלקטרודה או להריגת גורים או הזנחה על ידי האם.
מגבלה אחת של שיטה זו היא הגבול של לוקליזציה מרחבית של הקלטות אלקטרודות עומק במוח יילודים קטן. זה מגביל את היכולת למקם מוקדי התקפים ספציפיים בהקלטות EEG. מגבלה נוספת במודל זה של היפוקסיה איסכמיה היא השונות בנטל ההתקפים. שונות בגודל נגעים ובגירעונות התנהגותיים במודל מכרסמים זה של איסכמיה היפוקסיה תוארה היטב בעבר 7,8,19. באופן לא מפתיע, שונות זו קיימת בנטל התפיסה (הן אורך אירועי התפיסה והן מספר אירועי התפיסה). עם זאת, באופן עקבי, 100% מהגורים במודל זה מציגים התקפים במהלך היפוקסיה. לבסוף, כמות הזמן שגורים יכולים להיות בניטור EEG (הרחק מהאם) מוגבלת. לכן, איננו מסוגלים לאפיין התקפים מתמשכים עם EEG מתמשך בנקודות זמן מאוחרות יותר ביחס לפציעה.
אמנם, השתמשנו מודל התקפי היפוקסיה-איסכמיה בכתב יד זה, שיטה זו לניטור וידאו-EEG רציף בגורי עכבר יילודים יכול להיות מיושם בקלות על מודלים אחרים של מחלות / התקפים. התקפים במכרסמים יילודים קשה לזהות בהתבסס על התנהגות בלבד, מה שהופך ניטור וידאו-EEG חשוב. חקירות עתידיות יכולות להשתמש בטכניקות אלה כדי לנתח נטל התקפים וסמיולוגיה במודלים אחרים של התקפי יילודים או תגובה לטיפולים ואמצעים נוירו-הגנתיים.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
ללא.
Acknowledgments
אנו מכירים במקורות המימון הבאים: NIH NINDS – K08NS101122 (JB), R01NS040337 (JK), R01NS044370 (JK), בית הספר לרפואה של אוניברסיטת וירג'יניה (JB).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| SURGERY | |||
| Ball Point Applicator | Metrex Research | 8300-F | i-bond applicator |
| Cranioplast (Powder/Resin) | Coltene | H00383 | Perm Reline/Power |
| I-Bond | Kulzer GmbH, Germany | ||
| LOOK Silk Suture | Surgical Specialities Corporation | SP115 | LOOK SP115 Black Braided Silk Non absorbable surgical suture |
| RS-5168 Botvin Forceps | Roboz Surgical Instrument | RS5168 | Forcep for surgery/ligation |
| RS-5138 Graefe Forceps | Roboz Surgical Instrument | RS5138 | Forcep for surgery/ligation |
| UV light for I-Bond | Blast Lite By First Media | BL778 | UV ligth for I-bond |
| Vannas Microdissecting Scissor | Roboz Surgical Instrument | RS5618 | Scissor for ligation |
| Vet Bond | 3M Vetbond | 1469SB | Vet Glue |
| HYPOXIA | |||
| Hypoxidial | Starr Life Science | ||
| Oxygen sensor | Medical Products | MiniOxI- oxygen analyzer/sensor for hypoxia rig | |
| EEG RECORDING | |||
| Female receptacle connector 0.079" | Mill-Max Manufacturing Corp | 832-10-024-10-001000 | Ordered from Digikey |
| Grass Amplifier | Natus Neurology Incorporated | Grass Product | |
| LabChart Pro | ADI Instruments | Software to run the system | |
| Male Socket Connector 0.079" | Mill-Max Manufacturing Corp | 833-43-024-20-001000 | Ordered from Digikey |
| Operational Amplifier | Texas Instruments, Dallas, TX, USA | TLC2274CD | TLC2274 Quad Low-Noise Rail-to Rail Operational Amplifier |
| Operational Amplifier | Texas Instruments, Dallas, TX, USA | TLC2272ACDR | TLC2274 Quad Low-Noise Rail-to Rail Operational Amplifier |
| Stainless Steel wire | A-M Systems | 791400 | 0.005" Bare/0.008" Coated 100 ft |
| Ultra-Flexible Wire | McMaster-Carr | 9564T1 | 36 Gauze wire of various color |
References
- Vasudevan, C., Levene, M. Epidemiology and aetiology of neonatal seizures. Seminars in Fetal & Neonatal Medicine. , (2013).
- Volpe, J., et al.
- Shankaran, S., et al. Network EKSNNR. Childhood outcomes after hypothermia for neonatal encephalopathy. New England Journal of Medicine. 366 (22), 2085-2092 (2012).
- Pappas, A., et al. Cognitive outcomes after neonatal encephalopathy. Pediatrics. 135 (3), 624-634 (2015).
- van Schie, P. E., et al. Long-term motor and behavioral outcome after perinatal hypoxic-ischemic encephalopathy. European Journal of Paediatric Neurology. 19 (3), 354-359 (2015).
- Rensing, N., et al. Longitudinal analysis of developmental changes in electroencephalography patterns and sleep-wake states of the neonatal mouse. PLoS One. 13 (11), 1-17 (2018).
- Rice, J. E., Vannucci, R. C., Brierley, J. B. The influence of immaturity on hypoxic-ischemic brain damage in the rat. Annals of Neurology. 9 (2), 131-141 (1981).
- Burnsed, J. C., et al. Hypoxia-ischemia and therapeutic hypothermia in the neonatal mouse brain--a longitudinal study. PLoS One. 10 (3), 0118889 (2015).
- Semple, B. D., et al. Brain development in rodents and humans: Identifying benchmarks of maturation and vulnerability to injury across species. Progress in Neurobiology. , 1-16 (2013).
- Comi, A. M., et al. Gabapentin neuroprotection and seizure suppression in immature mouse brain ischemia. Pediatric Research. 64 (1), 81-85 (2008).
- Comi, A. M., et al. A new model of stroke and ischemic seizures in the immature mouse. Pediatric Neurology. 31 (4), 254-257 (2004).
- Kadam, S. D., White, A. M., Staley, K. J., Dudek, F. E. Continuous Electroencephalographic Monitoring with Radio-Telemetry in a Rat Model of Perinatal Hypoxia-Ischemia Reveals Progressive Post-Stroke Epilepsy. Journal of Neuroscience. 30 (1), 404-415 (2010).
- Burnsed, J., et al. Neuronal Circuit Activity during Neonatal Hypoxic - Ischemic Seizures in Mice. Annals of Neurology. 86, 927-938 (2019).
- Sampath, D., White, A. M., Raol, Y. H. Characterization of neonatal seizures in an animal model of hypoxic-ischemic encephalopathy. Epilepsia. 55 (7), 985-993 (2014).
- Sampath, D., Valdez, R., White, A. M., Raol, Y. H. Anticonvulsant effect of flupirtine in an animal model of neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy. Neuropharmacology. 123, 126-135 (2017).
- Kang, S. K., et al. and sex-dependent susceptibility to phenobarbital-resistant neonatal seizures: role of chloride co-transporters. Frontiers in Cellular Neuroscience. 9, 1-16 (2015).
- Zanelli, S., Goodkin, H. P., Kowalski, S., Kapur, J. Impact of transient acute hypoxia on the developing mouse EEG. Neurobiology of Disease. 68, 37-46 (2014).
- Lewczuk, E., et al. EEG and behavior patterns during experimental status epilepticus. Epilepsia. 59 (2), 369-380 (2017).
- Wu, D., Martin, L. J., Northington, F. J., Zhang, J. Oscillating gradient diffusion MRI reveals unique microstructural information in normal and hypoxia-ischemia injured mouse brains. Magnetic Resonance in Medicine. 72 (5), 1366-1374 (2014).
