Summary
この論文では、固定密度の捕捉ビーズの浮上高さの変化を定量化することによって、可溶性または膜結合性の抗原の存在を特異的に検出できる磁気浮上ベースの方法について述べる。
Abstract
この方法は、密度と磁気特性に基づいて細胞と粒子を分離する磁気浮上の原理に基づいて開発されました。密度は細胞型識別性であり、その代謝率、分化、および活性化状態に直接関連する。磁気浮上により、循環血液細胞を分離し、画像化、特徴付け、密度や磁気特性に基づいて貧血、鎌状赤血球病、循環腫瘍細胞を検出するワンステップアプローチが可能になります。このアプローチは、それぞれ、捕獲および検出抗体でコーティングされた低密度および高密度ビーズのセットを使用して、溶液中に存在する可溶性抗原を検出するのに適しています。抗原が溶液中に存在する場合、それはビーズの2つのセットを橋渡しし、抗体コーティングされたビーズの列の間に浮上する新しいビーズ複合体を生成します。溶液中の標的抗原の濃度の増加は、より低い濃度の抗原と比較してより多くのビーズビーズ複合体を生成し、したがって標的抗原の定量的測定を可能にする。磁気浮上は、サンプル調製時間の短縮と古典的な読み出し方法への依存性の欠如のために他の方法に有利である。生成された画像は、スマートフォンやタブレットなどの標準的な顕微鏡やモバイルデバイスを使用して簡単にキャプチャおよび解析できます。
Introduction
磁気浮上は、細胞タイプ1、2、3、タンパク質4、5、オピオイド6を分離、分析、同定するために開発された技術であり、その特異的な密度と常磁特性のみに基づいて開発された技術です。細胞密度は、その代謝率および分化状態7、8、9、10、11、12、13、14に直接関連する各細胞型の固有の固有の性質である。定常状態の間、そして様々な細胞プロセスの間に、細胞密度の微妙で一過性の変化を定量化することは、細胞生理学および病理生理学に対する比類のない洞察を与えることができる。細胞密度の変化は、細胞分化15、16、細胞周期進行9、17、18、19、アポトーシス20、21、22、23、および悪性変換24、25、26に関連付けられる.したがって、細胞密度の特定の変化の定量化は、異なるタイプの細胞間で区別するとともに、異なる活性化プロセスを経て同じタイプの細胞を区別するために使用することができる。これにより、密度の動的変化が変化した細胞代謝の指標となる特定の細胞サブ集団を標的とする実験が可能になる。変化する環境7に応じて細胞の密度を変化させる可能性が確立されたので、その密度に関連して細胞の運動を完全に理解することが不可欠であり、現在の方法では12を提供しない可能性がある。一方、磁気浮上は、細胞およびその特性28の動的評価を可能にする。
細胞は、永久的な磁気双極子モーメントを持たないという対磁性の意味です。しかし、外部磁場にさらされると、適用された磁場の反対方向に、弱い磁気双極子モーメントが細胞内に生成されます。したがって、細胞が常磁性溶液に懸濁され、強い垂直磁場にさらされると、磁源から離れて浮上し、主に個々の密度に依存する高さに停止します。不均一磁場の最小値に限定された物体の直径磁気浮上は、次の2つの基準が満たされている場合に可能です:1)粒子の磁気感受性は周囲の媒体よりも小さくなければならない、そして2)磁力は粒子の浮力のバランスを取るのに十分な強さでなければならない。両方の基準は、磁気バッファー内のRBCsを懸濁させることによって、および小さく、安価で、市販の永久磁石1を用いて強い磁場勾配を作成することによって満たすことができる。重力の方向に沿った軸上の磁気的に閉じ込められた粒子の平衡位置は、その密度(バッファの密度に対する相対)、磁気感受性(バッファの磁気感受性に対する相対)、および適用された磁場の署名によって決定されます。溶液の密度と磁気特性はシステム全体で一定なので、細胞の固有密度特性は細胞の浮上高さを決定する主要な要因となり、密度の低い細胞と比較してより密度の高い細胞が低くなります。このアプローチでは、密度測定に正確な比比分析を使用できる 2 つの密度参照ビーズ(1.05 および 1.2 g/mL)のセットを使用します。磁気溶液の濃度を変更することで、循環細胞の密度が細胞特異的であるため、細胞特異的であるため、BVCからRbcsなどの異なる細胞集団を分離することができ、分離プロトコルやその他の細胞操作の必要性が取り除かれます。
生物学研究で使用される検出方法の大半は、線形信号を定量化しやすい特定の結合事象の外挿に依存しています。これらの読み出し方法は複雑な場合が多く、特殊な機器や専門の科学担当者が関与します。細胞または細胞外小胞の形質膜上に見出される抗原の検出を目的としたアプローチ、または血漿に可溶性である、1つまたは2つの抗体被覆ビーズのいずれかを使用して、本明細書に記載される。ビーズは、互いに異なる密度で、尋問対象のビーズとは異なる密度でなければなりません。任意の特定の生体流体中の標的抗原の存在は、検出ビードに結合している抗原陽性細胞の浮上高さの特異的で測定可能な変化に翻訳される。可溶性抗原または細胞外小胞の場合、それらは捕捉および検出ビーズの両方に結合し、ビーズ細胞複合体ではなくビーズ複合体を形成する。浮上高さの変化は、ビーズ細胞またはビーズの複合体の新しい密度に依存します。生体流体中の抗原の存在を示す複合体の浮上高さの変化に加えて、複合体の数も標的の量に依存し、磁気浮上も抗原検出24のための定量的アプローチを行う。
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Protocol
この研究で使用される実験的なプロトコルは、ベス・イスラエル・ディーコネス医療センター機関審査委員会(IRB)によって承認されました。
1. 機器のセットアップ
注:細胞を浮上させるイメージングでは、Z軸上に磁化された2つの希土類ネオジム磁石を、同じ極を向けて磁場を発生させる必要があります。磁石間の距離は、磁場の強さとターゲットの密度に応じてカスタマイズすることができます。この場合、磁石は長さ50mmの1×1mmのガラス毛管管を挿入するのに十分な1mm空間で分離される。デバイスは、AutoCAD デザインを使用して 3D 印刷されました。
- 顕微鏡を横に、完全に水平に置きます。
注:標準的な直立位置に置かれた顕微鏡は、凝縮器および目的に関する磁石の位置による浮上物の撮像には直接適していません。この制限は、顕微鏡を横に置くことによってバイパスすることができ、完全に水平に凝縮器は、キャピラリーに光を集中させることができ、そして、対物レンズはケーラーの照明要件を維持しながら、磁石の間に浮上する細胞をイメージする。 - 2または3のラボジャックを使用して、ブレッドボードテーブルの上にスタンドをサポートし、レベルを付けます。
- 振動を抑えるために、ゴム製の湿らせた足でブレッドボードテーブルを支えます。
- ステージを取り外し、浮上装置(y軸)と2つの単軸の移動段階の高さを調整するためのコンパクトなラボジャックに置き換えます。焦点(z軸)を調整するための1つ、および毛細管管をスキャンするための2番目の1。
- 2つのミニシリーズ光ポストを使用して、磁気浮上装置をラボジャックに取り付けます。
2. 抗体のカーボキシミクロ粒子/ビーズへの結合(PolyAnによるプロトコルから改変)
注: Rh(+)検出には低密度ビーズ(1.05 g/mL)のみをコーティングする必要がありますが、細胞外小胞の検出のために高密度および低密度ビーズの両方をコーティングします。
- 1 mg 相当のビーズ懸濁液を取り出し、0.5 mLの活性化バッファー(50 mM MES(MW195.2、9.72 mg 1 mL))pH 5.0および0.001%ポリソルベート-20に加えます。
- 12 μLの新鮮な1.5 M EDC(MW 191.7、0.28755 g 1 mL)、0.3 Mスルフォ-NHS(MW 217.14、0.0651 g 1 mL)の12 μLを氷冷水に加えます。
- 軌道シェーカーにチューブを置き、室温で1時間激しく振ってビーズ上のカルボキシル基を活性化します。
- カップリングバッファー(10x PBS、または0.1 Mリン酸pH 7-9)を0.5 mL添加して1時間後に活性化を停止します。
- ペレットは、10分間20,000 x g で遠心分離機でビーズをペレット化するか、ビーズをペレット化できない場合は0.45 μm遠心管フィルターを使用します。上清またはフロースルーを吸引する。
- ステップ2.5の場合と同様に、10倍PBSの1mLでビーズを3回洗浄します。
- mgビーズ当たり25μgの抗体を計算し、必要な抗体と活性化ビーズを混合して、10X PBSで0.7〜1.0 mg/mLの最終抗体濃度を得ます。
- 低速でセットチューブロッカーにチューブを配置します。カップリングのために一晩室温で穏やかにチューブをロールします。
- ステップ2.5を繰り返し、10倍PBSの1mLでビーズを2回洗います。
- 緩衝液pH 8.0で0.5mLの1 Mエタノールアミン(98%ストック=16.2 M)で、穏やかに振りながら室温で1時間ポリソルベート-20で洗浄します。
- ステップ2.5を繰り返し、DPBSの1mLに1回ビーズを洗います。ビーズは必要になるまで4°Cで200 μLのDPBSに貯蔵することができます。
注: プロトコルはここで一時停止することができます。
3. Rh(+)検出のための血液の採取と準備
- ワンクリックランシングデバイスを使用して、Rh(+)ドナーの指を刺し、10 μLの血液を1mLのDPBSに集めます。
- 蛍光性形質膜染色でRh+細胞を染色する。必要に応じて、Rh+細胞の1 mL懸濁液に1μLの蛍光色素を加えます(1:1000希釈)。
- 蛍光色素を37°Cで15分間インキュベートします。
- ペレット細胞を15sで5,600xgで紡糸し、1mLのDPBSを用いて3回洗浄した。 カルシウムとマグネシウム(HBSS++)を使用してHBSSの1 mLで再中断します。
- ワンクリックランシング装置を使用して、Rh(-)ドナーの指を刺し、2μLの血液を採取します。
注:2つ以上の条件を準備する場合は、各チューブにRh(-)血液の1 μLを追加するのに十分な血液を収集します。 - 必要な実験チューブを準備する:ビーズのみ、IgGコントロール、サンプル。
- ビーズ単独:HBSS++174 μL、IgGコントロールビーズ1 μL、高密度ビーズ1 μL(1.2 g/mL)、24 μLの500 mM Gd3+(60 mM)を追加します。
- IgG制御:HBSS++172 μL、IgGコントロールビーズ1μL、高密度ビーズ1μL、Rh-血液1μL、染色Rh+血液懸濁液1μL、500 mM Gd3+の24 μLを加える。
- サンプルチューブは、HBSS++の172 μL、抗RhDコーティングビーズ1 μL、高密度ビーズ1 μL、Rh-血液1μL、染色されたRh(+)血液懸濁液の1 μL、500 mM Gd3+の24 μLを加えます。
注: 高密度ビーズは、参照用に Rh サンプルに追加されます。
4. 細胞分離デモ用PMNの分離
- 好中球の分離
- クエン酸ナトリウム/クエン酸6mL(0.15M、pH 5.5)と6%デキストラン-70の14 mLを含む60 mLシリンジに静脈血の40 mLを引き込む。
- 血液が沈み出るのを50分待ちます。
- フィコル・パケの20mLの上にバフィーコート細胞をゆっくりと重ね、血液採取チューブを通して50mLチューブに押し込み、沈積したRbCsによる汚染を避けます。元の採血管に残存するRBCによる汚染を最小限に抑えるために、新鮮な採血セットを使用することをお勧めします。
- ペレットは、3,000 x gで20分間遠心分離によってバフィーコート細胞をコーティングする。好中球および汚染されたRBCsは管の底にペレットをする。PBMCはフィコル・パクの上に白い層を形成します。
- 好中球を新しい50 mLチューブに移します。
- 20 mLの0.2%の冷たいNaCl溶液を25秒間インキュベートし、さらに20 mLの1.6%NaClを続けて、残留性RbCを溶解します。NaClの最後の協奏は0.9%(等張)でなければなりません。
- 3,000 x gで 10 分間のサスペンションを遠心分離します。
- 上清を取り除き、好中球を所望の濃度に再懸濁する。
-
リンパ球の分離
- 6ウェル培養プレートに5%の熱不活化血清を用いて、RPMIにPBMCをプレートします。
- 37°Cでプレートを1時間インキュベートします。 単球はプレートに付着し、リンパ球は自由に浮遊する。
- リンパ球を含む緩衝液を取り出し、RPMIで2回洗浄します。
- 所望の濃度でリンパ球を再中断する。
-
ラベルRBCs、PMN、リンパ球。
- 各細胞タイプに異なる蛍光色素を付けます。各色素が異なるチャネルで蛍光を発していることを確認します。選択した各色素に対して、製造元の指示に従います。
5. 補体活性化によるRBC細胞外小胞の生成
- EDTAチューブを使用して静脈穿刺を通して全血を得る。
- 白血球フィルターを通過し、次いで500 x g で3回遠心分離し、それぞれ10分間赤血球を単離する。HBSS++を洗浄バッファとして使用します。
- 1.5 mLチューブに100 μLパックされたRBCのアリコートを作り、HBSS++を追加して体積を1 mLにします。
- HBSS++で0.18 μg/mLの最終濃度にC5b,6を加え、次に渦を加えます。
- 室温で15分間ゆっくりとしたシェーカーを着ます。
- 0.2 μg/mLの最終濃度にC7タンパク質を加えます。チューブを数回やさしく反転して混ぜます。この時点から前方にボルテックスしないでください。
- チューブを、室温で5分間低速にセットしたチューブシェーカーに置きます。
- 0.2 μg/mL の最終濃度に C8 タンパク質を加え、0.45 μg/mL に C9 タンパク質を加えます。チューブを数回やさしく反転して混ぜます。
- 37°Cで30分間インキュベートします。
- チューブを10,000 x g で10分間遠心します。
- EV含有上清を新しいチューブに集めます。上清を細胞ペレットに近づけすぎないようにしてください。
6. 磁気浮上装置上の細胞の解析
- メーカーの指示に従って機器の起動を実行します。
- チューブがいっぱいになるまで、サンプル50 μLをキャピラリーチューブに積み込みます。キャピラリーチューブの端部をキャピラリーシーラントで密封し、気泡がないことを確認します。
- 上部磁石と底部磁石の間のホルダーにキャピラリーチューブを積み込みます。最適な表示のためにステージとフォーカスを調整します。
注:セル/ビーズは、密度とGd3+の濃度に基づいて磁気平衡位置に到達するために5〜20分の任意の場所を取ることができます。Gd3+の濃度が高いほど、時間が短くなります。
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Representative Results
磁気浮上は、物体の密度、磁気シグネチャ、常磁性溶液の濃度、および2つの強い希土類磁石によって生み出される磁場の強さに応じて、異なる浮上高さで異なる密度の物体に焦点を当てます。2つの磁石が互いの上に置かれると、浮上サンプルは、ケーラーの照明を維持したまま、その側面に向けられた顕微鏡を使用することによってのみ見ることができる(図1)。各細胞型が到達した最終的な浮上高さは、常磁性溶液の濃度を変えることで簡単に修正できます。図2は、ガドリニウムの種々の濃度を用いて異なる循環血液細胞の分離を示す。密度が異なる 2 つのビード タイプ(1.05 および 1.2 g/mL)は、密度浮上高さとサイズ参照を提供するために使用されました。特定の細胞型の浮上高さは、その固有の密度に依存するので、磁気浮上は、重要な操作24を伴わずに目的の細胞を単離する直接的な手段を提供する。このプロトコルの主な目的は、循環赤血球上の膜結合抗原(この場合はRh因子)の存在を検出する磁気浮上の能力を実証することであった。この実験では、低密度ビーズをIgG制御抗体または抗RhDのいずれかでコーティングした。その後、Rh(+)ドナーからの血液を1:1000の比率で血液でスパイクしてサンプルを調製した。抗RhD(+)コーティングビーズまたはコントロールIgGコーティングビーズを血液サンプルに添加し、10分間インキュベートした。図3Aは、ビーズ赤血球複合体を生成しなかったIgG対照試料を示す。次に、Rh(+)陽性ビーズによって捕捉された赤血球の同一性を、蛍光原形質膜染色でRh(+)細胞を前染色し、蛍光顕微鏡を用いて画像化した(図3B)。正の検出イベントを図3Cに示します。Rh(+) 細胞に対する抗 Rh-bead の結合は、ビーズとセルの間の密度を持つビーズ細胞複合体を作成し、従って、非結合捕捉ビードと負のRbCsの間に位置する高さで浮上する。ビーズ細胞複合体のクローズアップを蛍光灯下で画像化し、蛍光性形質膜染色で標識されたRh(+)細胞の存在を確認した。(図3D)図3Eは、細胞外小胞の存在を示すCR1およびCD47に対する抗体でコーティングされた高密度ビーズと低密度ビーズの間に形成されるビーズ複合体を示す。ビーズ細胞複合体の概略を図3Fに示す。
図 1.磁気浮上の原理: (A) 磁場の概略図(B)毛細管内で浮上する標的を横画像化できるように、その側面に先端を打った研究用のグレードの顕微鏡。(C)顕微鏡目的下の磁気浮上装置の角度図。(D)磁気浮上装置正面図。(E)2つの磁石の間に取り付けられた毛細管を備えた磁気浮上装置の模式図、正面と側面の図。 この図の大きなバージョンを表示するには、ここをクリックしてください。
図 2.細胞特異的密度均衡のデモンストレーション: (A)低密度および高密度ビーズ(1.05および1.2 g/mL)単独で60 mM Gd3+(10 倍の目的で見た)。(B) 21 mM Gd3+で赤血球の上に浮上するPMNで、焦点が合っていない血小板が循環している(10倍の目標で見た)。(C) 全血が60 mM Gd3+で浮上し、RBC(10倍の目標で見た)に焦点を当てた濃度である。(D) この図は[タソグル 、S.ら ]から変更されています。時間分解能を有する浮上画像サイトメトリー 先端材料。 27 (26), 3901-3908, doi:10.1002/adma.201405660 (2015).40 mM Gd3+で RBC(赤)、PMN(緑)、リンパ球(青)の密度分離各細胞集団は、固有の密度に基づいて高さで浮上した(10倍の目標で見た)。 この図の大きなバージョンを表示するには、ここをクリックしてください。
図 3.血液サンプル中のRh因子の検出: (A)Rh(-) 血液がRh(+)血液とIgGコントロールビーズでスパイクした。ビーズ細胞複合体は形成されていない(10倍の目的で見る)。(B) 蛍光灯下のIgG制御試料は、Rh(+)細胞を強調する(10倍の目的で見た)。(C) Rh(-)血液をRh(+)血液と抗RhD被覆ビーズでスパイクし、ビーズ細胞複合体の形成を示す(10倍の目的で見た)。(D) 蛍光灯下のビーズ細胞複合体のクローズアップ図(10倍の目的で見た)。(E)抗CR1および抗CD47被覆ビーズ形成複合体は、RBC由来の細胞外小胞(10倍の目的で見た)の存在を示す。(F) ビーズ細胞複合体を表す図。この図の大きなバージョンを表示するには、ここをクリックしてください。
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Discussion
勾配遠心分離は、現在、そのユニークな密度に基づいて細胞下の成分を単離するための標準的な技術です。しかし、このアプローチでは、特殊な勾配媒体と遠心分離機装置を使用する必要があります。ここで提示される磁気浮上アプローチは、循環細胞の形態学的および機能的特性の詳細な調査を可能にし、細胞の操作を最小限に抑え、循環細胞への近く in vivo アクセスを提供する。
しかし、磁気浮上を使用する場合、いくつかの点は言及する価値があります。まず、イメージングに使用される顕微鏡は、セットアップに時間がかかるため、顕微鏡を部分的に分解し、磁石とキャピラリーチューブと正確に整列した光学系と完全に水平に配置する必要があります。第二に、毛細血管ガラスと焦点の動きを調整するために使用されるラボジャックと並進ステージは、3つの軸のそれぞれで正確な位置と自由な動きを必要とします。セットアップ全体の最も重要なアライメントは、トップとボトムの磁石が重力ベクトルと完全に水平になるように、移動段階で磁気浮上装置を取り付けることです。これらの要件からの逸脱は、磁力と重力の間に角度を作り出し、細胞を毛細管の両側に向かって押し上げ、浮上プロセスを混乱させ、結果を信頼できないものにします。
細胞の浮上に使用されるガドリニウム溶液の最適濃度は、細胞の種類と実験の目的のために調整する必要があります。ガドリニウム溶液の濃度の変化は、分析される細胞の浮上高さを有意に変化させるので、ある実験から別の実験のセットに一定に保つ必要があります。濃度が低すぎると、標的細胞の密度によっては全く浮上しない場合があり、高すぎると正確に定量できる検出可能な変化の範囲が制限されます。
浮上構造は、それらに作用する唯一の力が重力と磁気反発である場合、安定したバンドを作成します。毛細管にミリメートルサイズの気泡が存在すると、空気と液体の界面に小さな円形電流が発生し、浮上細胞が乱れ、分析が事実上不可能になります。毛細管にサンプルを積み込み、そして密封した後、体型顕微鏡または低電力(4x)目的で毛細血管を調べることによって、空気が存在することを確認しなければならない。
設定された高さでの細胞の浮上は、時間の経過とともに同じままの磁気署名に依存する。浮上媒体からの常磁性ガドリニウムイオンが細胞に入ると、アポトーシス時など、ピノサイトーシスまたは膜透過性の上昇により、密度参照ビーズに基づいて測定された細胞密度の増加が誤りとなる。幸いなことに、循環細胞の大部分はピノサイティック能力が低い26を有し、長期間にわたって細胞を研究するための適切なアプローチである。
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Disclosures
著者らは開示する矛盾はない。
Acknowledgments
著者らは、細胞外小胞の仕事に協力してくれたゲトゥリオ・ペレイラ博士に感謝したいと考えています。
この研究は、ICGに対する国立衛生研究所の助成金によって支援されました: RO1CA218500, UG3HL147353, およびUG3TR002881.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 2-(N-Morpholino)ethanesulfonic acid hydrate | Sigma Aldrich | M-2933 | (MES); component of activation buffer |
| 50x2.5x1 mm magnets, Nickel (Ni-Cu-Ni) plated, grade N52, magnetized through 5mm (0.197") thickness | K&J Magnetics | Custom | Magnets used for the magnetic levitation device |
| Capillary Tube Sealant (Critoseal) | Leica Microsystems | 267620 | Used to cap the ends of the capillary tubes |
| Centrifuge tube filters (Corning Costar Spin-X) | Sigma Aldrich | CLS8163 | Used to wash beads |
| Compact Lab Jack | Thorlabs | LJ750 | Used for adjusting the magnetic levitation device |
| DPBS, no calcium, no magnesium | Gibco | 14190-144 | Solution for bead suspensions |
| Ethanolamine | Sigma Aldrich | E9508-100ML | Used during a wash step for beads |
| Fluorescent Plasma Membrane Stain (CellMask Green) | Invitrogen | C37608 | Used to stain Rh+ cells |
| Gadoteridol Injection | ProHance | NDC 0270-1111-03 | Gadolinium (Gd3+); magnetic solution used to suspend cells |
| HBSS++ | Gibco | 14025-092 | Solution for sample preparation |
| Human C5b,6 complex | Complement Technology, Inc | A122 | Used to generate RBC Evs |
| Human C7 protein | Complement Technology, Inc | A124 | Used to generate RBC Evs |
| Human C8 protein | Complement Technology, Inc | A125 | Used to generate RBC Evs |
| Human C9 protein | Complement Technology, Inc | A126 | Used to generate RBC Evs |
| Mini Series Post Collar | Thorlabs | MSR2 | Used to secure magnetic levitation device to lab jacks |
| N-(3-Dimethylaminopropyl)-N′-ethylcarbodiimide hydrochloride | Sigma Aldrich | E1769-10G | (EDC); used in antibody coupling reaction |
| Normal Rabbit IgG Control | R&D Systems | AB-105-C | Used to coat beads as a control condition |
| Phosphate Buffered Saline (10X Solution, pH 7.4) | Boston Bioproducts | BM-220 | Component of coupling buffer, used for washing steps |
| Polysorbate 20 (Tween 20) | Sigma Aldrich | P7949-500ML | Component of activation buffer |
| Polystyrene Carboxyl Polymer | Bangs Laboratories | PC06004 | Top density beads (1.05 g/mL), used for antibody coupling |
| Rabbit RhD Polyclonal Antibody | Invitrogen | PA5-112694 | Used to coat beads for the dectection of Rh factor in red blood cells |
| Research Grade Microscope | Olympus | Provis AX-70 | Microscoped used to mount magnetic levitation device and view levitating cells |
| Rubber Dampening Feet | Thorlabs | RDF1 | Used to support the breadboard table |
| Square Boro Tubing | VitroTubes | 8100-050 | Capillary tube used for loading sample into Maglev |
| Sulfo-NHS | Thermoscientific | 24510 | Used in antibody coupling reaction |
| Translational Stage | Thorlabs | PT1 | Used for focusing and for scanning capillary tube |
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