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Neuroscience

एकतरफा Sciatic तंत्रिका क्रश चोट के बाद चूहों में मोटर व्यवहार का बहुकार्यात्मक आकलन

Published: July 31, 2021 doi: 10.3791/62606
Automatic Translation
1, 1, 1, 1, 1
1Department of Neurology, University Hospital of Würzburg

Summary

हम सियाटिक तंत्रिका क्रश चोट के बाद चूहों में एक व्यवहार परीक्षण बैटरी के माध्यम से मोटर व्यवहार के आकलन के लिए एक प्रोटोकॉल प्रदान करते हैं।

Abstract

परिधीय तंत्रिका चोट का प्रेरण अन्य लोगों के बीच मरम्मत और दर्द तंत्र के आकलन के लिए तंत्रिका विज्ञान में व्यापक रूप से उपयोग की जाने वाली विधि है। इसके अलावा, आंदोलन विकारों के अनुसंधान क्षेत्र में, डिस्टिक क्रश चोट को डिस्टोनिया के आनुवंशिक रूप से संवेदनशील DYT-TOR1A कृंतक मॉडल में एक डिस्टोनिया जैसे फेनोटाइप को ट्रिगर करने के लिए नियोजित किया गया है। एक सियाटिक तंत्रिका क्रश चोट के बाद सुसंगत, प्रजनन योग्य और तुलनीय परिणाम प्राप्त करने के लिए, एक मानकीकृत फेनोटाइपिकल लक्षण वर्णन के अलावा तंत्रिका क्रश को प्रेरित करने के लिए एक मानकीकृत विधि आवश्यक है। ध्यान न केवल व्यवहार परीक्षणों के विशिष्ट वर्गीकरण के लिए भुगतान किया जाना चाहिए, लेकिन यह भी तकनीकी आवश्यकताओं, सही निष्पादन और लगातार डेटा विश्लेषण के लिए । इस प्रोटोकॉल में विस्तार से वर्णन करता है कि कैसे एक sciatic तंत्रिका क्रश चोट प्रदर्शन करने के लिए और चूहों में मोटर घाटे के आकलन के लिए एक व्यवहार परीक्षण बैटरी प्रदान करता है जिसमें ओपन फील्ड टेस्ट, कैटवॉक एक्सटी चाल विश्लेषण, बीम वॉकिंग टास्क और सीढ़ी चलने का कार्य शामिल है।

Introduction

कृंतक कई जैविक स्तरों पर परिकल्पनाओं का परीक्षण करके मानव रोगों की समझ को गहरा करने के लिए उत्कृष्ट मॉडल जीव हैं1,2। कृंतक मॉडल के लक्षण वर्णन के लिए एक मौलिक जैविक स्तर फेनोटाइप स्तर है, जिसे व्यवहार आकलन द्वारा मापा जाता है। पशु मॉडल और वैज्ञानिक अनुसंधान प्रश्न के आधार पर, पार्किंसंस रोग के पशु मॉडल और डिस्टोनिया3,4,5,6जैसे व्यवहार पहलुओं की एक विस्तृत श्रृंखला को कवर करने के लिए एक शक्तिशाली और विश्वसनीय व्यवहार परीक्षण बैटरी का चयन आवश्यक है।

सियाटिक तंत्रिका मोटर के साथ-साथ संवेदी फाइबर के साथ मानव शरीर में सबसे बड़ी तंत्रिका है। सियाटिक तंत्रिका की चोटों के परिणामस्वरूप यातायात दुर्घटनाओं और सर्जरी जैसी कई घटनाओं से आसानी से परिणाम मिल सकता है7,8. इसलिए, सियाटिक तंत्रिका चोटों के साथ कृंतक मॉडल का उपयोग करके अनुसंधान गतिविधियां, अनुवादात्मक रूप से प्रासंगिक मूल्य की हैं। यद्यपि चूहे से मानव तक तंत्रिका उत्थान के अनुवादीय पहलू को गंभीर रूप से9माना जाना चाहिए, लेकिन कृंतक मॉडलों में सियाटिक तंत्रिका क्रश इंजरी (एक्सोनोटेमेसिस) आमतौर पर उपयोग की जाने वाली विधि है जो परिधीय नसों की पतन और पुनर्जनन प्रक्रियाओं का विश्लेषण करने के लिए10,11है। क्रश इंजरी के मामले में तंत्रिका पूरी तरह से ट्रांसेक्टेड नहीं होती है। यह अक्षतंपन को नुकसान पहुंचाता है, जिसके परिणामस्वरूप क्रश इंजरी के बाद सीधे चालन ब्लॉक हो जाता है जिसके बाद पुनर्योजी प्रक्रियाएं 4,12,13होती हैं ।

इसके अलावा, डिस्टोनिया अनुसंधान में, एकतरफा सियाटिक तंत्रिका क्रश चोट आनुवंशिक रूप से संवेदनशील डिस्टोनिया कृंतक मॉडल में डिस्टोनिया जैसे आंदोलनों (डीएलएम) को ट्रिगर करने के लिए एक स्थापित विधि है, जो डीएलएम प्रति एसई4, 14नहीं दिखाती है। यह माना जाता है कि परिधीय तंत्रिका आघात15मोटर और संवेदी कार्यों के लिए जिम्मेदार हैं, जो सियाटिक तंत्रिका फाइबर को प्रभावित करके संवेदी तंत्रिका एकीकरण को परेशान करता है।

हम यहां सियाटिक तंत्रिका की एक मानकीकृत क्रश चोट और मोटर व्यवहार आकलन की एक बैटरी के लिए एक विस्तृत विवरण प्रदान करते हैं जो ओपन फील्ड टेस्ट (ओएफटी), कैटवॉक एक्सटी चाल विश्लेषण, बीम वॉकिंग टास्क और सीढ़ी सीढ़ी चलने का काम भोले जंगली प्रकार (डब्ल्यूटी) चूहों (एन = 8-9) और डब्ल्यूटी चूहों के पांच सप्ताह बाद एकतरफा सियाटिक तंत्रिका क्रश चोट (एन = 10) से बना है। ओएफटी सामान्य लोकोमोटर गतिविधि के बारे में जानकारी प्रदान करता है, जबकि स्वचालित चाल विश्लेषण प्रणाली कैटवॉक एक्सटी द्वारा एक विस्तृत चाल विश्लेषण प्राप्त किया जाता है। बीम वॉकिंग टास्क का उपयोग बीम को पार करने के लिए समय और पैर प्लेसमेंट त्रुटियों की संख्या का मूल्यांकन करके मोटर समन्वय का आकलन करने के लिए किया जाता है। चाल प्रदर्शन विश्लेषण के लिए सीढ़ी सीढ़ी चलने का कार्य एक निरंतर लेकिन अनियमित सीढ़ी पैटर्न के साथ एक क्षैतिज सीढ़ी सीढ़ी उपकरण पर पैर या पंजा प्लेसमेंट और त्रुटियों के बारे में जानकारी देता है।

Protocol

सभी पशु प्रयोगों को स्थानीय अधिकारियों द्वारा रेजियरुंग वॉन अनटरफ्रैंकेन (वुर्ज़बर्ग, जर्मनी) में अनुमोदित किया गया था और जानवरों की देखभाल और उपयोग के लिए लागू अंतरराष्ट्रीय, राष्ट्रीय और/या संस्थागत दिशा-निर्देशों के अनुसार प्रदर्शन किया गया था ।

1. सियाटिक तंत्रिका क्रश चोट

नोट: पूरी शल्य प्रक्रिया के दौरान एक बाँझ वातावरण बनाए रखें। आवश्यक उपकरणों के साथ सर्जरी टेबल सेट करें।

  1. ओ2 (2 एल/मिन) में आइसोफलून 3.0% के साथ एक बंद कैबिनेट में चूहे को गहराई से एनेस्थेटाइज करें। चूहे को कैबिनेट से हटा दें। सही हिंडलिब का एक व्यापक क्षेत्र दाढ़ी।
  2. चूहे को संज्ञाहरण मुखौटे में रखें और ओ2 (2 एल/मिन) में आइसोफ्लाणे 2.0% के साथ गहरे संज्ञाहरण जारी रखें। पिछले पैरों के इंटरडिजिटल वेबिंग को पिंच करके संज्ञाहरण की गहराई को नियंत्रित करें। निकासी सजगता की अनुपस्थिति पर्याप्त संज्ञाहरण को इंगित करती है।
  3. टेप के साथ चूहे के धड़ और दोनों हिंडलिंबों को ठीक करें। दोनों हिंडलिम्ब्स को सर्जरी टेबल पर पंजा फ्लैट को बदलकर सममित और फैलाया हुआ स्थिति में रखें।
  4. सूखी आंखों को रोकने के लिए आंखों पर नेत्र मरहम लगाएं। एंटीसेप्टिक के साथ मुंडा क्षेत्र की त्वचा को कीटाणुरहित करें।
  5. इलियम के सियाटिक पायदान की खोज करें।
  6. स्केलपेल के साथ पंजा की दिशा में सियाटिक पायदान से त्वचा का चीरा लगाएं। त्वचा का चीरा जितना संभव हो उतना छोटा होना चाहिए (लगभग 1 से 2 सेमी)।
  7. यदि हिंडम्ब्स तय किए जाते हैं और त्वचा का चीरा सही ढंग से किया जाता है, तो ग्लूटस मैक्सिमस मांसपेशी और बाइसेप्स फेमोरिस मांसपेशी के बीच फेसियल विमान में एक गुहा देखा जा सकता है जो "सफेद रेखा" जैसा दिखता है। गुहा में बंद सुपर-फाइन हेम्मोस्टेटिक फोर्स्प (नंबर 5) डालें और संदंश फैलाएं। फेसियल प्लेन को किसी भी मांसपेशी ऊतक को घायल किए बिना खोलना चाहिए।
  8. त्वचा चीरा खुला रखने के लिए, मांसपेशियों के नीचे रबर बैंड रिट्रैक्टर्स रखें।
  9. धीरे-धीरे किसी भी आसपास के ऊतकों और रक्त वाहिकाओं को सियाटिक तंत्रिका से हटा दें जब तक कि तंत्रिका पूरी तरह से उजागर न हो जाए। पूरी प्रक्रिया के दौरान तंत्रिका को फैलाना या खींचना महत्वपूर्ण है।
  10. लगातार और प्रजनन दबाव के साथ एक गैर-दांतेदार क्लैंप (अल्ट्रा-फाइन हेमोस्टेट) के साथ सियाटिक तंत्रिका को क्रश करें। इसके लिए क्लैंप खोलें, नर्व को क्लैंप के निचले जबड़े पर रखें और क्लैंप को तीन बार दस सेकंड के लिए पहली स्थिति में लॉक करके बंद कर दें। सियाटिक तंत्रिका क्रश की स्थिति मुख्य सियाटिक तंत्रिका बंडल के डिवीजन साइट के समीपस्थ, सियाटिक पायदान के करीब स्थित है। क्रश इंजरी के बाद क्लैंप को सावधानी से फिर से खोलें। सियाटिक तंत्रिका का क्रश साइट पारदर्शी दिखाई देता है।
  11. रबर बैंड रिट्रैक्टर्स को हटा दें।
  12. 4-0 सीवन के साथ फेसियल प्लेन चीरा बंद करें। शरीर की त्वचा स्टेपल के साथ त्वचा चीरा बंद करें।
  13. दो दिन तक सर्जरी के बाद हर 24 घंटे में पश्चात दर्द से राहत के लिए जीवी-सोलास गाइडलाइंस (5 मिलीग्राम/किलो शरीर का वजन, चमड़े के नीचे इंजेक्शन) के अनुसार रिमाडिल लगाएं।
  14. सर्जरी सेटअप से चूहे को हटा दें। चूहे को जागने तक हीटिंग प्लेट (37 डिग्री सेल्सियस) पर बिस्तर के बिना एक साफ पिंजरे में रखें। चूहे को उनके साफ घर के पिंजरे में वापस ले जाएं।
  15. सर्जरी के चार से छह दिन बाद शरीर की त्वचा स्टेपल निकालें।

2. ओपन फील्ड टेस्ट (ओएफटी)

नोट: लोकोमोटर गतिविधि के साथ-साथ व्यवहार गतिविधि का विश्लेषण ओएफटी द्वारा किया जा सकता है।

  1. सेटअप
    1. एक अंधेरे और शांत वातावरण में OFT(चित्रा 1A)की स्थापना करें। इसमें स्वचालित वीडियो ट्रैकिंग सिस्टम एथोविजन एक्सटी (कंप्यूटर, लाइसेंस के साथ सॉफ्टवेयर) और एक खरोंच प्रतिरोधी, साफ काले सतह के साथ 58.5 सेमी (लंबाई) x 58.5 सेमी (चौड़ाई) x 45 सेमी (ऊंचाई) को मापने वाला क्षेत्र होता है। सफेद जानवरों पर नज़र रखते समय इसके विपरीत बढ़ाने के लिए काली सतह महत्वपूर्ण है।
  2. मूल्यांकन
    1. अखाड़ा और कैमरे को सही स्थिति में रखें। कैमरे को समायोजित करें कि सबसे अच्छा रिज़ॉल्यूशन के साथ पूरा ओपन फील्ड बॉक्स रिकॉर्ड किया गया है। एक अंधेरे वातावरण में प्रयोग करते हैं। यदि सेटअप के लिए प्रकाश की आवश्यकता है, तो अखाड़े में हल्के धब्बे, प्रतिबिंब और रंगों से बचने के लिए एक छोटे और फैलाने वाले प्रकाश का उपयोग करें। अखाड़े के विभिन्न क्षेत्रों में लक्स मीटर के साथ illuminance मापने के द्वारा समान प्रकाश की स्थिति सुनिश्चित करें।
    2. एथोविजन एक्सटी सॉफ्टवेयर स्थापित करें। सबसे महत्वपूर्ण सेटिंग्स निम्नलिखित में सूचीबद्ध हैं। प्रयोग सेटिंग्स में वीडियो स्रोत के लिए लाइव ट्रैकिंग और ट्रैक किए गए सुविधाओं के लिए सेंटर पॉइंट डिटेक्शन का चयन करें। अखाड़ा सेटिंग्समें अखाड़े के आकार को मान्य करें । चूहे को अखाड़े के बीच में रखने के बाद डेटा अधिग्रहण के लिए शुरुआत की स्थिति तीन सेकंड और परीक्षण नियंत्रण सेटिंग्समें कुल रन समय पांच मिनट तक निर्धारित करें । डिटेक्शन सेटिंग्समें विधि के लिए स्थिर घटाव चुनें । अधिग्रहण सेटिंग्समें विधि के लिए चेकमार्क सेव वीडियो ।
    3. परीक्षण क्षेत्र(चित्रा 1B)के बीच में चूहे को धीरे से रखें।
    4. रिकॉर्डिंग शुरू करने के लिए अधिग्रहण नियंत्रण में स्टार्ट ट्रायल बटन दबाएं।
    5. रिकॉर्डिंग के दौरान, चूहे को विचलित करने से बचने के लिए ओएफटी सेटअप से दूर रहें।
    6. प्रत्येक परीक्षण के बाद, परीक्षण के मैदान से चूहे को धीरे से हटा दें और पहले दर्ज चूहे की गंध से व्याकुलता से बचने के लिए 0.1% एसिटिक एसिड के साथ सेटअप को साफ करें।
  3. डेटा विश्लेषण
    1. एथोविजन एक्सटी सॉफ्टवेयर के साथ ओएफटी के डेटा विश्लेषण के लिए, लेफ्ट साइड बार में एनालिसिस सेक्शन पर जाएं और रिजल्ट्स टैब(चित्रा 1C)के तहत ट्रैक विजुअलाइजेशन चुनें । इसके बाद, एक्सेल को आवश्यक मापदंडों का निर्यात करें। सॉफ्टवेयर के भीतर, डेटा विश्लेषण के लिए विभिन्न श्रेणियों से कई चर चुनें। इस विशिष्ट वैज्ञानिक उद्देश्य के लिए महत्वपूर्ण चर "दूरी और समय" श्रेणी के तहत "दूरी ले जाया" और "वेग" हैं। चयनित मापदंडों(चित्रा 1D)का सांख्यिकीय विश्लेषण करें।

3. कैटवॉक एक्सटी चाल विश्लेषण

नोट: कैटवॉक एक्सटी सिस्टम के माध्यम से एक चाल विश्लेषण पशु मॉडल के पैरों के निशान, रुख और चाल से संबंधित कई अलग-अलग मापदंडों का आकलन करने में मदद कर सकता है। एक ग्लास वॉकवे हरी रोशनी से जगमगाता है और जानवरों के पैरों के निशान से बिखरे हुए प्रकाश को एक हाई-स्पीड वीडियो कैमरा के साथ कैप्चर किया जाता है, जो वॉकवे के नीचे स्थित है । सिग्नलों का कैटवॉक एक्सटी सॉफ्टवेयर के साथ विश्लेषण किया जा सकता है।

  1. सेटअप
    1. कैटवॉक एक्सटी के साथ चाल विश्लेषण के लिए, कैटवॉक सिस्टम और संबंधित सॉफ्टवेयर (कंप्यूटर, लाइसेंस के साथ सॉफ्टवेयर)(चित्रा 2 ए)का उपयोग करें।
    2. अंधेरे परिस्थितियों में प्रयोग करें, क्योंकि डेटा अधिग्रहण हरे एलईडी प्रकाश के साथ कैटवॉक सिस्टम के रास्ते की रोशनी पर निर्भर करता है। अंधेरे परिस्थितियों में प्रायोगिक प्रक्रिया को सुविधाजनक बनाने के लिए, प्रयोगात्मक कमरे को लाल बत्ती से रोशन करें।
    3. एक परिभाषित मार्ग का उपयोग करें जो लंबाई में 65 सेमी और चौड़ाई में 7 सेमी का उपाय करता है; हालांकि, वॉकवे का आकार चूहों के आकार पर निर्भर करता है। प्रत्येक पंजा के लिए संभव के रूप में कई पैरों के निशान रिकॉर्ड करने के लिए संभव के रूप में बड़े रूप में रास्ता स्थापित करें।
    4. प्रत्येक रन के लिए प्रति पंजा तीन पैरों के निशान की एक न्यूनतम संख्या पर कब्जा । रास्ता की लंबाई को परिभाषित करते समय, चूहे के शरीर और पूंछ पर विचार करें, क्योंकि शुरुआत या स्टॉप सिग्नल का सही पता नहीं लगाया जा सकता है और रन को अनुपालन के रूप में वर्गीकृत नहीं किया जा सकता है, यदि शरीर/पूंछ में प्रवेश करता है या रन के पूरा होने से पहले या बाद में परिभाषित रास्ते पर रहता है ।
  2. प्रशिक्षण
    नोट: कैटवॉक सिस्टम के लिए चूहों को प्रशिक्षित करना जानवरों को सेटअप में आदत देने और उन्हें बिना किसी रुकावट के रास्ता पार करने के लिए सीखने की अनुमति देना आवश्यक है। उचित प्रशिक्षण प्रायोगिक मूल्यांकन के दौरान समय की बचत और बेहतर परिणाम प्राप्त करने के फायदे प्रदान करता है। प्रशिक्षण सत्रों के दौरान CatWalk प्रणाली के डेटा अधिग्रहण शुरू करने से चूहों को मूल्यांकन शर्तों (शोर/प्रकाश) की आदत हो जाती है ।
    1. कैटवॉक सिस्टम स्थापित करना शुरू करें।
      1. आसुत पानी और एक लिंट मुक्त नरम कपड़े के साथ ग्लास वॉकवे को साफ करें। शुरुआत में और प्रयोग के अंत में, या बीच में अगर ग्लास रास्ता गंदा है, तो ग्लास-क्लीनिंग तरल पदार्थ और लिंट-फ्री सॉफ्ट कपड़े का उपयोग ग्लास वॉकवे को साफ करने के लिए करें। कांच की सफाई तरल पदार्थ के उपयोग के बाद, तरल पदार्थ के किसी भी अवशेषों से रास्ता साफ करने से बचने के लिए यह जानवर ध्यान भंग ।
      2. प्रायोगिक सेटिंग्स चुनें। एक महत्वपूर्ण पैरामीटर रन मापदंड है। न्यूनतम रन अवधि, अधिकतम रन अवधिऔर अधिग्रहण के लिए अनुपालन रन की न्यूनतम संख्या केलिए उचित मूल्य निर्धारित करें, जो प्रत्येक शोध परियोजना के लिए विशिष्ट हैं। उपयोग अधिकतम अनुमति दी गति भिन्नता के बॉक्स को चेकमार्क करें और मूल्य निर्धारित करें। पहले चार से पांच दिन की ट्रेनिंग के लिए रन मापदंड को नजरअंदाज किया जा सकता है ।
      3. कैमरे को स्थिति में रखें और फोकस को समायोजित करें। वॉकवे की उचित लंबाई और रिकॉर्ड किए गए पंजे का सबसे अच्छा संकल्प एक साथ प्राप्त करने के लिए इष्टतम कैमरा स्थिति का पता लगाएं। रिकॉर्डिंग के बीच समान कैमरा प्लेसमेंट सुनिश्चित करने के लिए कैटवॉक सिस्टम पर कैमरा स्थिति को लेबल करें।
      4. एक नए प्रयोग के लिए ऑटो-डिटेक्शन का उपयोग करके डिटेक्शन सेटिंग्स सेट करें। सुनिश्चित करें कि सभी पैरों के निशान न्यूनतम पृष्ठभूमि शोर के साथ पता लगाया जा सकता है। यदि आवश्यक हो, तो पहचान सेटिंग्स को मैन्युअल रूप से अनुकूलित करें और ग्रीन तीव्रता सीमा को बदलें। पूरे प्रयोग के लिए एक ही डिटेक्शन सेटिंग्स का इस्तेमाल करें।
      5. कैटवॉक सिस्टम के गलियारे की दीवारों को स्थापित करें। गलियारे की दीवारें चूहे के जितना संभव हो उतना करीब होनी चाहिए। सुनिश्चित करें कि गलियारे की दीवारें रास्ते के समानांतर रहें।
      6. वॉकवे की लंबाई को परिभाषित करें: परिभाषित वॉकवे आइकन पर क्लिक करें। विशिष्ट अनुसंधान परियोजना के अनुसार, लंबाई और चौड़ाई में सफेद आयत के आकार को समायोजित करें। ठीक क्लिककरें ।
      7. वॉकवे को कैलिब्रेट करें: कैलिब्रेट वॉकवे आइकन पर क्लिक करें। एक आयताकार अंशांकन शीट की स्थिति जो वॉकवे के बीच में 20 x 10 सेमी मापती है। अंशांकन पत्रक के लिए सफेद आयत के आकार को अनुकूलित करें। ठीक क्लिककरें ।
      8. इसके बाद, एक पृष्ठभूमि छवि को स्नैप करें: पहले से जांचें कि रास्ता साफ और खाली है। बैकग्राउंड इमेज जेनरेट करने के लिए स्नैप बैकग्राउंड बटन पर क्लिक करें।
    2. वास्तविक प्रयोग शुरू करने से पहले कम से कम आठ दिनों के लिए जानवरों को प्रशिक्षित करें। लगातार दिनों में प्रशिक्षण की सिफारिश की जाती है।
      1. प्रशिक्षण का दिन 1: चूहों के लिए कैटवॉक सिस्टम की आदत हो जाती है, जानवर को स्वतंत्र रूप से वॉकवे और गोल बॉक्स का पता लगाने की अनुमति देते हैं। चूहों को रास्ता पार करने और गोल बॉक्स में प्रवेश करने दें। वॉकवे के अंत में या गोल बॉक्स में चूहे को उठाएं और चूहे को वॉकवे के शुरुआती बिंदु पर वापस लाएं। प्रायोगिक सेटिंग्स के अनुपालन की आवश्यकता के बिना प्रशिक्षण के पहले दिन के लिए पांच रन की सिफारिश की जाती है।
      2. प्रशिक्षण के दिन 2: चूहों स्वतंत्र रूप से रास्ता और लक्ष्य बॉक्स का पता लगाने कर सकते हैं। प्रायोगिक सेटिंग्स के अनुपालन के बिना पांच रन की सिफारिश की जाती है।
      3. प्रशिक्षण के तीसरे दिन: प्रायोगिक सेटिंग्स के अनुपालन के बिना आठ रन की सिफारिश की जाती है।
      4. प्रशिक्षण के दिन 4: प्रायोगिक सेटिंग्स के अनुपालन के बिना दस रन की सिफारिश की जाती है।
      5. प्रशिक्षण के 5 दिन: दस रन की सिफारिश कर रहे हैं । प्रायोगिक सेटिंग को ध्यान में रखना चाहिए। चूहों को बिना किसी रुकावट के रास्ता पार करने के लिए प्रेरित करें।
      6. प्रशिक्षण के दिन 6: दस रन की सिफारिश कर रहे हैं । प्रायोगिक सेटिंग को ध्यान में रखना चाहिए। चूहों को बिना किसी रुकावट के रास्ता पार करने के लिए प्रेरित करें।
      7. प्रशिक्षण के दिन 7: दस रन की सिफारिश कर रहे हैं । न्यूनतम तीन अनुरूप रन हासिल किए जाने चाहिए । जानवरों के लिए और अधिक रन जोड़ें, अगर वे इस लक्ष्य तक पहुंचने में असमर्थ थे ।
      8. प्रशिक्षण के दिन 8: दस रन की सिफारिश कर रहे हैं । न्यूनतम तीन अनुरूप रन हासिल किए जाने चाहिए । जानवरों के लिए और अधिक रन जोड़ें, अगर वे इस लक्ष्य तक पहुंचने में असमर्थ थे ।
  3. मूल्यांकन
    1. परिभाषित रन मानदंडों के अनुसार, डेटा विश्लेषण के लिए प्रति चूहे तीन अनुरूप रन करें। मूल्यांकन के लिए, कृपया चरण 3.2.1 का पालन करें। - 3.2.1.8. जैसा कि प्रशिक्षण अनुभाग में वर्णित है। यहां तक कि अगर चूहा पहले तीन रन के भीतर तीन आज्ञाकारी रन तक पहुंचता है, तो प्रशिक्षण प्रयोजनों के लिए प्रति सप्ताह न्यूनतम छह रन/
    2. कई समय अंक के साथ प्रयोगों के लिए एक स्थिर चाल पैटर्न के लिए प्रति सप्ताह छह रन के साथ कम से कम एक (प्रशिक्षण) सत्र प्रदर्शन करें। प्रयोगात्मक और पता लगाने सेटिंग्स पूरे प्रयोग के लिए संगत रहते हैं।
  4. डेटा विश्लेषण
    1. डेटा विश्लेषण के लिए, केवल अनुपालन रन का मूल्यांकन करें। गैर-आज्ञाकारी रन हटाएं।
    2. ग्रीन तीव्रता सीमा को सत्यापित करें और यदि आवश्यक हो तो पंजा प्रिंट के वर्गीकरण से पहले हरे रंग की तीव्रता सीमा को बढ़ाएं या कम करें। हरी तीव्रता सीमा सभी जानवरों और सभी रन के लिए सुसंगत होना चाहिए ।
    3. कैटवॉक एक्सटी सॉफ्टवेयर(चित्रा 2B)के साथ स्वचालित रूप से पंजा प्रिंट को वर्गीकृत करें।
    4. पंजा प्रिंट लेबल की मैन्युअल रूप से समीक्षा करें। गलत पंजा प्रिंट लेबल सही करें, गैर-पता लगाया पंजा प्रिंट के लेबल जोड़ें, और शोर और गलत लेबल मैन्युअल रूप से हटा दें। वीडियो को एक स्थिति में ले जाएं, जिसकी मैन्युअल रूप से समीक्षा की जानी है। गलत लेबल वाले पंजा प्रिंट के सुधार के लिए, विशिष्ट पंजा प्रिंट के आयत का चयन करें, रीसेटपर क्लिक करें, एक ही आयत को फिर से चुनें, और सूची से सही लेबल असाइन करें। गैर-पता लगाया पंजा प्रिंट लेबलिंग के लिए, गैर-पता पंजा के आसपास एक आयत आकर्षित, प्रिंट जोड़ें,नए उत्पन्न आयत का चयन करें, और सूची से सही लेबल आवंटित करें । यदि सॉफ्टवेयर ने नाक या शरीर के प्रिंट को स्वचालित रूप से लेबल किया है, तो विशिष्ट लेबल के आयत का चयन करें, और रिमूवल प्रिंटपर क्लिक करें।
    5. संख्यात्मक परिणामों की समीक्षा करें। संख्यात्मक परिणाम एक एक्सेल शीट में प्रदर्शित होते हैं, जिसमें कई बुनियादी पैरामीटर दिखाई देते हैं। अनुसंधान हित के आधार पर पूर्व-परिभाषित विशिष्ट मापदंडों का चयन करें और हमेशा की तरह सांख्यिकीय विश्लेषण करें(चित्रा 2डी)।
    6. प्रत्येक पदचिह्न के बारे में अधिक विस्तृत जानकारी के लिए, हिंद पंजे के पंजे को वर्गीकृत करें। इस विश्लेषण के लिए इंटरएक्टिव फुटप्रिंट मापन मॉड्यूल की आवश्यकता होती है।
      1. यदि आवश्यक हो तो इंटरएक्टिव पदचिह्न माप विश्लेषण के लिए हरी तीव्रता सीमा को अनुकूलित करें। हरी तीव्रता सीमा सभी जानवरों और सभी रन के लिए सुसंगत होना चाहिए ।
      2. पदचिह्न विश्लेषण के लिए मार्कर मैन्युअल रूप से सेट करें। सभी तीन आज्ञाकारी रन में हर हिंद पंजा प्रिंट का विश्लेषण करें। "पैर के फैलाव" को मापने के लिए पांचवें पैर के पैर के हिस्से के केंद्र में पहले पैर के पैर के केंद्र से एक लाइन ड्रा करें। "मध्यवर्ती पैर की अंगुली फैल" को मापने के लिए चौथे पैर के पैर के पैर के पैर के हिस्से के केंद्र से एक लाइन ड्रा। "मैनुअल प्रिंट लंबाई"(चित्रा 2C)को मापने के लिए तीसरे पैर की अंगुली के केंद्र से हिंद पंजा की एड़ी तक एक लाइन बनाएं।
      3. एक अलग शीट में प्रदर्शित "इंटरएक्टिव पदचिह्न माप" के संख्यात्मक परिणामों की समीक्षा करें। "इंटरएक्टिव पदचिह्न मापन" के विशिष्ट मापदंडों का चयन करें और हमेशा की तरह सांख्यिकीय विश्लेषण करें(चित्रा 2E)।

4. बीम घूमना कार्य

नोट: चाल घाटे बीम चलने कार्य द्वारा निर्धारित किया जा सकता है। इस विशिष्ट शोध विषय में बीम चलने के कार्य का ध्यान मोटर समन्वय का विश्लेषण होगा, जिसे शरीर के कई अंगों से मांसपेशियों की सक्रियता को समन्वित करने की क्षमता के रूप में परिभाषित किया गया है, न कि मोटर संतुलन का आकलन, शरीर के आंदोलनों के दौरान आसनीय नियंत्रण की क्षमता के रूप में परिभाषित किया गया है।

  1. सेटअप
    1. बीम वॉकिंग टास्क के लिए बीम, स्पेसर, टेबल, यूनिफॉर्म बैकग्राउंड और एक कैमकॉर्डर(चित्रा 3A) काइस्तेमाल करें ।
    2. लंबाई में 90 सेमी, चौड़ाई में 1.7 सेमी और ऊंचाई में 2 सेमी की लकड़ी की बीम का उपयोग करें। लंबाई में 20.5 सेमी, चौड़ाई में 15 सेमी और बीम के दोनों सिरों पर ऊंचाई में 2 सेमी का एक मंच की सिफारिश की जाती है। प्लेटफार्मों और बीम के लिए एक ही सामग्री का उपयोग करें, प्लेटफार्मों और बीम के बीच किसी भी बाधाओं से बचें।
    3. बीम और टेबल के बीच की दूरी कम से कम 44 सेमी हो। घर के पिंजरे जैसे परिचित वातावरण चूहों को बीम पार करने के लिए प्रेरित करते हैं, जिसे बीम प्लेटफॉर्म के अंत में रखा जा सकता है।
  2. प्रशिक्षण
    1. टेबल पर स्पेसर और होम केज के साथ बीम सेट करें।
    2. सात दिनों के लिए जानवरों को प्रशिक्षित करें। लगातार दिनों में प्रशिक्षण की सिफारिश की जाती है।
      1. प्रशिक्षण का दिन 1
        1. बीम के शुरुआती मंच पर एक घर पिंजरे से सभी चूहों रखें।
        2. चूहों को पर्यावरण (मंच/बीम) का पता लगाने दें।
        3. एक चूहे को पूंछ से ध्यान से पकड़ें और चूहे को धीरे-धीरे बीम पर धकेलकर बीम में ले जाएं।
        4. कम से कम दो रन के लिए अपनी पूंछ से चूहे को पकड़कर बीम को ट्रैवर्सिंग में चूहे की सहायता करें।
        5. चूहा सहायता के बिना तीन और रन के लिए बीम पार करते हैं । चूहे का निरीक्षण करें और यदि आवश्यक हो तो सहायता प्रदान करें। यदि चूहा बीम को पार करने में विफल रहता है, तो चोटों से बचने और बीम को पार करने के लिए डर के विकास से बचने के लिए गिरावट को रोकें।
        6. सभी चूहों के लिए इस प्रक्रिया के साथ जारी रखें।
          नोट: कभी-कभी चूहे बीम को पार करने के लिए एक दूसरे का अनुसरण करते हैं, जिस स्थिति में किसी सहायता की आवश्यकता नहीं होती है। हालांकि, चूहों का निरीक्षण करना, फॉल्स को रोकना और यदि आवश्यक हो तो सहायता प्रदान करना महत्वपूर्ण है।
      2. प्रशिक्षण के दूसरे दिन
        1. बीम के शुरुआती मंच पर एक घर पिंजरे से सभी चूहों रखें।
        2. चूहों को छह बार बीम को पार करने दें।
        3. यदि आवश्यक हो, तो सहायता प्रदान करें और अवरोधन फॉल्स प्रदान करें।
      3. प्रशिक्षण के दिन 3
        1. बीम के शुरुआती मंच पर एक चूहा रखें।
        2. चूहे को बीम को छह बार पार करने दें।
        3. यदि आवश्यक हो, तो सहायता प्रदान करें और अवरोधन फॉल्स प्रदान करें।
      4. प्रशिक्षण के दिन 4-7
        1. बीम के शुरुआती मंच पर एक चूहा रखें।
        2. चूहे को दस बार बीम को पार करने दें।
        3. यदि आवश्यक हो, तो सहायता प्रदान करें और अवरोधन फॉल्स प्रदान करें।
        4. प्रशिक्षण के अंत में, चूहे को कम से कम तीन रन के लिए बिना किसी रुकावट के बीम को पार करना चाहिए। आंदोलन की शुरुआत को ट्रिगर करने के लिए चूहे को धीरे-धीरे शुरुआत मंच पर धकेलने की अनुमति है।
  3. मूल्यांकन
    1. टेबल पर स्पेसर और होम केज के साथ बीम सेट करें।
    2. कैमकॉर्डर को स्थिति में रखें, ध्यान में जानवर के साथ बीम के समानांतर गठबंधन करें। रिकॉर्ड किए गए आंदोलनों के इष्टतम समाधान को प्राप्त करने के लिए कैमकॉर्डर की स्थिति जानवर के लिए यथासंभव करीब होनी चाहिए। बीम और दोनों प्लेटफार्मों के कुछ हिस्सों को रिकॉर्डिंग द्वारा कैप्चर किया जाना चाहिए।
    3. रिकॉर्डिंग शुरू करें और सबसे पहले सत्र और जानवर की पहचान करें।
    4. बीम के शुरुआती मंच पर चूहे को रखें।
    5. चूहे को बिना किसी रुकावट के तीन बार बीम पार करनी चाहिए। यहां तक कि अगर चूहा पहले तीन रन के भीतर तीन अनुरूप रन तक पहुंचता है, तो निरंतर कार्य प्रदर्शन के लिए न्यूनतम छह से दस रन तक ले जाएं ।
    6. हमेशा, जानवर का निरीक्षण करें और यदि आवश्यक हो तो अवरोधन गिरता है।
    7. कार्य के बाद, पहले दर्ज चूहे की गंध से व्याकुलता से बचने के लिए बीम और टेबल को 0.1% एसिटिक एसिड से साफ करें।
      नोट: तंत्रिका क्रश चोट के बाद पहले दो हफ्तों के भीतर, चूहों सहायता के बिना बीम पार करने में असमर्थ हैं । इसलिए नर्व क्रश इंजरी के बाद पहले दो हफ्तों में छह से आठ रन के लिए सहायता देनी होगी। सप्ताह तीन से सप्ताह पांच तक, पांच रन सहायता के साथ प्रदर्शन कर रहे है और दस आगे रन सहायता के बिना प्रदर्शन किया गया ।
  4. डेटा विश्लेषण
    1. डेटा विश्लेषण के लिए मुफ्त वीडियो विश्लेषण सॉफ्टवेयर किनोवेआ का उपयोग करें।
    2. रिकॉर्डिंग से तीन अनुरूप रन के वीडियो दृश्यों का चयन करें। इसके लिए, जानवर द्वारा सहायता के बिना किए गए पहले तीन अनुरूप रन चुनें। सभी चूहों के लिए आज्ञाकारी रन चयन में संगत रहें।
    3. प्रारंभ समय बिंदु और चयनित तीन अनुरूप रन(चित्रा 3डी-ई)के अंतिम समय बिंदु को परिभाषित करें। इस सेटअप में, स्टार्ट पॉइंट को बीम पर एक काली रेखा द्वारा लेबल किया गया था और ब्लैक लाइन के पीछे पहले हिंडलिम्ब के प्लेसमेंट ने रन के स्टार्ट टाइम पॉइंट को परिभाषित किया था। बीम के अंत में मंच पर पहले हिंडलिम्ब का प्लेसमेंट अंतिम समय बिंदु को परिभाषित करता है।
    4. इसके बाद, बीम को पार करने के लिए चूहे के लिए आवश्यक समय की गणना करें। सेकंड में बीम को पार करने और हमेशा की तरह सांख्यिकीय विश्लेषण करने के लिए विलंबता समय के रूप में डेटा की रिपोर्टकरें (चित्रा 3B)।
    5. सॉफ्टवेयर के ज़ूम और स्लो मोशन फ़ंक्शन का उपयोग करके दोनों हिंडलिम्ब्स के लिए तीन अनुपालन रन से चरणों और त्रुटियों की संख्या को अलग से स्कोर करें। त्रुटियों में कुल पैर फिसल जाता है और आधा फुट फिसल जाता है । एक कुल पैर पर्ची एक पैर प्लेसमेंट है कि एक गहरी बीम(चित्रा 3F)के साथ प्रभावित पंजा के संपर्क की हानि के कारण पर्ची के बाद है के रूप में परिभाषित किया गया है । एक आधी पर्ची बीम(चित्रा 3G)के साथ पूरा संपर्क खोने के बिना बीम की साइडवॉल से फिसलने पंजा के रूप में परिभाषित किया गया है ।
    6. बीम को पार करने के लिए चरणों की संख्या के संबंध में पैर स्लिप के प्रतिशत की गणना करें ((अंग एक्स 100% की पैर पर्चियों की संख्या)/ प्रतिशत पैर फिसल जाता है के रूप में वर्तमान डेटा और हमेशा की तरह सांख्यिकीय विश्लेषण प्रदर्शन(चित्रा 3C)।

5. सीढ़ी सीढ़ी चलने का काम

नोट: सीढ़ी चलने का कार्य मोटर फ़ंक्शन, फ्रंटलिम्ब्स और हिंडिंब दोनों की नियुक्ति और इंटरलिम्ब समन्वय का आकलन कर सकता है।

  1. सेटअप
    1. इस व्यवहार परीक्षण(चित्रा 4A)के लिए एक सीढ़ी सीढ़ी उपकरण, स्पेसर, टेबल, वर्दी पृष्ठभूमि और कैमकॉर्डर का उपयोग करें। क्षैतिज सीढ़ी सीढ़ी उपकरण धातु पायदान और स्पष्ट पॉलीकार्बोनेट साइडवॉल के होते हैं। उपकरण की लंबाई 119.5 सेमी है और चौड़ाई 7.4 सेमी तक समायोजित की गई है। विश्लेषण किए जाने वाले वॉकवे की लंबाई 100 सेमी है।
    2. साइडवॉल पर एक काली रेखा के साथ स्टार्ट और एंड पॉइंट को लेबल करें। 1 सेमी अंतराल पर उपकरण पर पायदान के लिए प्लेसहोल्डर रखें। छड़ों के बीच 1 और 5 सेमी के बीच की दूरी के साथ 100 सेमी पैदल मार्ग के लिए छड़ों के एक अनियमित पैटर्न की व्यवस्था करें। शुरुआत में पहला 10 सेमी और उपकरण के अंत में अंतिम 9.5 सेमी, जिसे विश्लेषण से बाहर रखा गया है, में 1 सेमी की दूरी के साथ पायदानों का एक नियमित पैटर्न होता है।
    3. वॉकवे और लगभग 30 सेमी(चित्रा 4A-B)की तालिका के बीच की दूरी का उपयोग करें। एक गोल बॉक्स या उपकरण के अंत में एक परिचित वातावरण, एक घर पिंजरे की तरह, चूहों को सीढ़ी सीढ़ी तंत्र को पार करने के लिए प्रेरित करता है।
  2. प्रशिक्षण
    1. मेज पर स्पेसर और गोल बॉक्स के साथ सीढ़ी सीढ़ी उपकरण स्थापित करें।
    2. आठ दिनों के लिए जानवरों को प्रशिक्षित करें। लगातार दिनों में प्रशिक्षण की सिफारिश की जाती है।
      1. प्रशिक्षण का दिन 1
        1. सीढ़ी सीढ़ी तंत्र पर एक घर पिंजरे से सभी चूहों रखें।
        2. चूहों को पर्यावरण (सीढ़ी सीढ़ी उपकरण/गोल बॉक्स) का पता लगाने दें।
        3. धीरे-धीरे चूहों को गोल बॉक्स की दिशा में धकेल दें। गोल बॉक्स में प्रवेश करने में चूहों की सहायता करें। चूहों को कुछ देर के लिए गोल बॉक्स का पता लगाने दें।
        4. आखिरकार चूहे गोल बॉक्स में घुस गए। गोल बॉक्स से पहला चूहा लें और चूहे को उपकरण के शुरुआती क्षेत्र पर फिर से रखें। एक घर पिंजरे के सभी चूहों के लिए एक ही प्रक्रिया के साथ जारी रखें। धीरे-धीरे चूहों को गोल बॉक्स की दिशा में धकेलें और जरूरत पड़ने पर गोल बॉक्स में प्रवेश करने के लिए सहायता दें।
        5. चूहे को चार बार तंत्र को पार करने दें।
      2. प्रशिक्षण के दूसरे दिन
        1. प्रशिक्षण के पहले दिन के लिए सूचीबद्ध के रूप में एक ही प्रोटोकॉल प्रदर्शन करते हैं ।
        2. चूहे को छह बार उपकरण को पार करने दें।
      3. प्रशिक्षण के दिन 3
        1. प्रशिक्षण के पहले दिन के लिए सूचीबद्ध के रूप में एक ही प्रोटोकॉल प्रदर्शन करते हैं ।
        2. चूहे को आठ बार तंत्र को पार करने दें।
      4. प्रशिक्षण के दिन 4
        1. सीढ़ी सीढ़ी तंत्र की शुरुआत पर एक चूहा रखें।
        2. यदि चूहा उपकरण को पार नहीं करता है और स्वेच्छा से गोल बॉक्स में प्रवेश करता है, तो चूहे को पीछे से धीरे-धीरे धक्का देकर सहायता दें।
        3. चूहे को आठ बार तंत्र को पार करने दें।
      5. प्रशिक्षण के दिन 5-8
        1. सीढ़ी सीढ़ी तंत्र की शुरुआत पर एक चूहा रखें।
        2. यदि चूहा उपकरण को पार नहीं करता है और स्वेच्छा से गोल बॉक्स में प्रवेश करता है, तो चूहे को पीछे से धीरे-धीरे धक्का देकर सहायता दें।
        3. चूहे को दस बार तंत्र को पार करने दें।
        4. प्रशिक्षण के अंत में, चूहे को न्यूनतम तीन रन के लिए बिना किसी रुकावट और सहायता के रास्ता पार करने में सक्षम होना चाहिए। आंदोलन की शुरुआत को ट्रिगर करने के लिए चूहे को स्टार्ट जोन में एक सौम्य धक्का देने की अनुमति है।
  3. मूल्यांकन
    1. मेज पर स्पेसर और गोल बॉक्स के साथ सीढ़ी सीढ़ी उपकरण स्थापित करें।
    2. कैमकॉर्डर को ध्यान में रखने वाले जानवर के साथ उपकरण के समानांतर गठबंधन की स्थिति में रखें। रिकॉर्ड किए गए आंदोलनों के इष्टतम समाधान को प्राप्त करने के लिए जानवर के जितना संभव हो सके कैमकॉर्डर की स्थिति करें और यह सुनिश्चित करें कि रिकॉर्डिंग में पूरे सीढ़ी सीढ़ी तंत्र को कैप्चर किया जाए।
    3. रिकॉर्डिंग शुरू करें और सबसे पहले सत्र और जानवर की पहचान करें।
    4. सीढ़ी सीढ़ी तंत्र के स्टार्ट जोन पर चूहे रखें।
    5. चूहे को सीढ़ी सीढ़ी तंत्र के 100 सेमी मार्ग को बिना किसी रुकावट के तीन बार पार करना पड़ता है ताकि यह एक आज्ञाकारी रन के रूप में अर्हता प्राप्त कर सके। यहां तक कि अगर चूहा पहले तीन रन के भीतर तीन अनुरूप रन तक पहुंचता है, तो निरंतर कार्य प्रदर्शन के लिए न्यूनतम दस रन बनाए जाने चाहिए ।
    6. कार्य के बाद, पहले दर्ज चूहे की गंध से व्याकुलता से बचने के लिए उपकरण और टेबल को 0.1% एसिटिक एसिड से साफ करें।
  4. डेटा विश्लेषण
    1. डेटा विश्लेषण के लिए मुफ्त वीडियो विश्लेषण सॉफ्टवेयर किनोवेआ का उपयोग करें।
    2. रिकॉर्डिंग से तीन अनुरूप रन के वीडियो दृश्यों का चयन करें। डेटा विश्लेषण के लिए पहले तीन अनुरूप रन चुनें।
    3. प्रारंभ समय बिंदु और चयनित तीन अनुरूप रन के अंतिम समय बिंदु को परिभाषित करें। उपकरण की साइडवॉल पर पहली काली रेखा के पीछे पहली हिंडलिब का प्लेसमेंट, जो 100 सेमी वॉकवे के शुरुआती समय बिंदु को लेबल करता है, रन के स्टार्ट टाइम पॉइंट को परिभाषित करता है। उपकरण की साइडवॉल पर दूसरी काली रेखा के पीछे पहली फ्रंटलिम्ब का प्लेसमेंट, जो 100 सेमी वॉकवे के अंतिम बिंदु को लेबल करता है, रन के अंतिम समय बिंदु को परिभाषित करता है।
    4. स्टार्ट और एंड टाइम पॉइंट की पहचान करें। इसके बाद, वॉकवे के पार रन की अवधि की गणना करें। सेकंड में रास्ता पार करने और हमेशा की तरह सांख्यिकीय विश्लेषण करने के लिए विलंबता समय के रूप में डेटा की रिपोर्ट करें(चित्रा 4C)।
    5. तीन अनुरूप स्कोर मेट्ज़ एट अल से 7 श्रेणी के पैमाने के साथ चलाता है । धीमी गति या सॉफ्टवेयर के फ्रेम-बाय-फ्रेम फ़ंक्शन(चित्रा 5)16, 17का उपयोग करके । प्रत्येक अंग के लिए पैमाने की श्रेणियों के अनुसार चरणों की संख्या और त्रुटियों की संख्या अलग से निर्धारित करें। पैमाने पर निम्नलिखित श्रेणियों के बीच अलग: (0) कुल याद आती है (1) गहरी पर्ची (2) मामूली पर्ची (3) प्रतिस्थापन (4) सुधार (5) आंशिक प्लेसमेंट, और (6) सही प्लेसमेंट । केवल शुरू करने वाले अंग की त्रुटि को रेट किया गया था। प्रारंभिक त्रुटि से ट्रिगर की गई और त्रुटियों को रेट नहीं किया जाना चाहिए।
    6. निम्नलिखित आवश्यकताओं पर विचार करके त्रुटियों/चरण की गणना करें। श्रेणियां (0) कुल मिस (1) गहरी पर्ची (2) मामूली पर्ची एक त्रुटि के रूप में गिनती । प्रत्येक हिंडलम्ब के लिए चरणों की संख्या और प्रत्येक रन के द्वारा त्रुटियों की संख्या को अलग-अलग विभाजित करें। प्रत्येक पशु और प्रत्येक हिंडलिब के लिए सभी तीन अनुरूप रन का औसत मूल्य अलग से निर्धारित करें और हमेशा की तरह सांख्यिकीय विश्लेषण करें(चित्रा 4D)।

Representative Results

पांच मिनट के प्रतिनिधि परिणाम बताते हैं कि तंत्रिका क्रश चोट पांच सप्ताह के बाद सर्जरी लोकोमोटर गतिविधि(चित्रा 1)पर कोई प्रभाव नहीं पड़ता है ।

कैटवॉक एक्सटी सिस्टम(चित्रा 2)के साथ चाल विश्लेषण कई अलग-अलग पैरामीटर उत्पन्न करता है। तंत्रिका क्रश(चित्रा 2डी)के पांच सप्ताह बाद तंत्रिका-घायल डब्ल्यूटी चूहों के साथ डब्ल्यूटी भोले चूहों की तुलना करके चयनात्मक मापदंडों का सांख्यिकीय विश्लेषण किया गया। महत्वपूर्ण परिवर्तन रन औसत गति, प्रगति की लंबाई और तंत्रिका घायल (दाएं) हिंद पंजा के प्रिंट क्षेत्र के लिए पता लगाया जा सकता है । तंत्रिका-घायल हिंद पंजा का एक अधिक विस्तृत विश्लेषण "इंटरएक्टिव पदचिह्न माप" मॉड्यूल के साथ किया गया था। मापदंडों पैर की अंगुली फैल, मध्यवर्ती पैर की अंगुली फैल और प्रिंट लंबाई की एक महत्वपूर्ण कमी wt भोले चूहों की तुलना में तंत्रिका घायल wt चूहों में मनाया गया । इसके अलावा, पंजा कोण शरीर धुरी और पंजा कोण आंदोलन वेक्टर काफी अलग है जब तंत्रिका घायल wt चूहों की तुलना wt भोले चूहों(चित्रा 2E)के साथ ।

चित्रा 3 बीम वॉकिंग टास्क असेसमेंट के माध्यम से प्राप्त मोटर समन्वय के आंकड़े प्रस्तुत करता है। तंत्रिका घायल wt चूहों एक काफी वृद्धि हुई विलंबता समय wt भोले चूहों पांच सप्ताह के बाद चोट(चित्रा 3B)की तुलना में बीम पार दिखाया । बीम वॉकिंग टास्क से बाहर एक अतिरिक्त पढ़ने के रूप में, पूर्ण पर्चियों और तंत्रिका घायल हिंडलिब की आधी पर्चियों को सांख्यिकीय विश्लेषण के लिए एक त्रुटि के रूप में गिना जाता था और माना जाता था । तंत्रिका-घायल (दाएं) हिंडलिम्ब के प्रति कदम त्रुटियों का प्रतिशत wt भोले चूहों की तुलना में तंत्रिका-घायल डब्ल्यूटी चूहों में काफी बढ़ गया था।

सीढ़ी सीढ़ी चलने कार्य के प्रतिनिधि डेटा(चित्रा 4)विलंबता समय में महत्वपूर्ण परिवर्तन नहीं दिखा सीढ़ी सीढ़ी उपकरण(चित्रा 4C)के रास्ते को पार करने के लिए या तंत्रिका घायल (दाएं) हिंडलिब(चित्रा 4D)के प्रति कदम त्रुटियों के प्रतिशत में । तंत्रिका-घायल हिंडलिम्ब के प्रति चरण त्रुटि प्रतिशत के विश्लेषण ने मेट्ज़ एट अलसे 7 श्रेणी के पैमाने के 0 से 2 तक के स्कोर पर विचार किया। तंत्रिका-घायल हिंडलिम्ब और गैर-तंत्रिका-घायल (बाएं) हिंडलिम्ब के 7 श्रेणी के पैमाने से प्रति चरण सभी स्कोर श्रेणियों का वितरण चित्र 4Eमें सचित्र है।

Figure 1
चित्रा 1-ओपन फील्ड टेस्ट के दौरान लोकोमोटर गतिविधि का आकलन। (क) ओपन फील्ड टेस्ट सेटअप की तस्वीर । चयनित चित्र खुले क्षेत्र परीक्षण के दौरान एक रिकॉर्ड वीडियो से घटाया (बी) और (सी) ट्रैकिंग के बिना खुले क्षेत्र के क्षेत्र में एक चूहा दिखा । (घ) पांच मिनट के ओपन फील्ड टेस्ट रिकॉर्डिंग के दौरान वेग की जांच wt भोले चूहों और डब्ल्यूटी चूहों में तंत्रिका क्रश चोट के पांच सप्ताह बाद की गई । डेटा को मतलब ± एसईएम के रूप में दिखाया गया है । सामान्य रूप से वितरित डेटा के अकर्पित टी परीक्षण का उपयोग करके सांख्यिकीय विश्लेषण किया गया था। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 2
चित्रा 2:कैटवॉक एक्सटी सिस्टम के साथ चाल विश्लेषण। (ए) कैटवॉक एक्सटी उपकरण की तस्वीर। (ख) प्रिंट दृश्य के उदाहरण झूठे रंग मोड में लेबल पंजा प्रिंट दिखा और समय दृश्य के उदाहरण wt भोले चूहों और wt चूहों के समय आधारित चाल आरेख दिखा तंत्रिका क्रश चोट के पांच सप्ताह बाद । (ग) पैर के अंगूठे के वर्गीकरण के उदाहरण पैर के अंगूठे का प्रसार (टीएस), मध्यवर्ती पैर की अंगुली फैल (आईटीएस) और प्रिंट लंबाई (पीएल) के साथ-साथ शरीर की धुरी दृश्य के उदाहरण शरीर की धुरी (सफेद रेखा) और डब्ल्यूटी भोले चूहों के मूवमेंट वेक्टर (लाल रेखा) और तंत्रिका क्रश चोट के पांच सप्ताह बाद चूहों को wt दिखाते हैं । (घ) तंत्रिका क्रश चोट के पांच सप्ताह बाद डब्ल्यूटी भोले चूहों और डब्ल्यूटी चूहों की तुलना करते हुए "मानक" वर्गीकरण से चयनित मापदंडों के आंकड़े । (ङ) तंत्रिका क्रश चोट के पांच सप्ताह बाद wt भोले चूहों और डब्ल्यूटी चूहों की तुलना "इंटरएक्टिव फुटप्रिंट मापन मॉड्यूल" से चयनित मापदंडों का डेटा । डेटा को मतलब ± एसईएम के रूप में दिखाया गया है। सांख्यिकीय विश्लेषण सामान्य रूप से वितरित डेटा के अकर्चितित टी परीक्षण का उपयोग करके किया गया था, जो असमान विचरण के साथ सामान्य रूप से वितरित डेटा के वेल्च के सुधार के साथ अकरुष्ट टी परीक्षण और गैर-सामान्य वितरित डेटा के मान-व्हिटनी यू परीक्षण के साथ किया गया था। पी-वैल्यू < 0.05 को सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण लेबल के रूप में परिभाषित किया गया था * पी < 0.05, * * पी < 0.01, ****p < 0.001, *****p < 0.0001। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 3
चित्रा 3:बीम चलने के कार्य के साथ चाल विश्लेषण। (क) बीम वॉकिंग टास्क सेटअप की तस्वीर और योजनाबद्ध चित्र । बीम चलने कार्य (सी) के दौरान तंत्रिका-घायल हिंडलिम्ब के प्रति कदम प्रतिशत पैर पर्ची त्रुटियों को पार करने के लिए विलंबता समय का विश्लेषण wt भोले चूहों और डब्ल्यूटी चूहों में तंत्रिका क्रश चोट के पांच सप्ताह बाद किया गया था। प्रारंभ समय स्थिति (डी) और बीम चलने वाले कार्य की अंतिम समय स्थिति (ई) के लिए प्रतिनिधि चित्र। बीम चलने वाले कार्य की पूर्ण पर्ची त्रुटि (एफ) और एक आधा पर्ची त्रुटि (जी) का प्रतिनिधि छवि अनुक्रम। डेटा को मतलब ± एसईएम के रूप में दिखाया गया है । सांख्यिकीय विश्लेषण गैर-सामान्य वितरित डेटा के मान-व्हिटनी यू परीक्षण का उपयोग करके किया गया था । पी-वैल्यू < 0.05 को सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण लेबल के रूप में परिभाषित किया गया था, जो * पी < 0.05, * * पी < 0.01 के रूप में लेबल किया गया था। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 4
चित्रा 4:सीढ़ी चलने कार्य का उपयोग कर चाल विश्लेषण। सीढ़ी सीढ़ी चलने कार्य सेटअप के चित्र (ए) और योजनाबद्ध चित्र (बी) । सीढ़ी सीढ़ी उपकरण (सी) और सीढ़ी सीढ़ी चलने कार्य (डी) के दौरान तंत्रिका घायल हिंडलिब के प्रति कदम प्रतिशत पैर पर्ची त्रुटियों traversing के विलंबता समय wt भोले चूहों और wt चूहों में पांच सप्ताह तंत्रिका क्रश चोट के बाद मूल्यांकन किया गया था । (ङ) मेट्ज़ एट अलसे 7 श्रेणी के पैमाने के अनुसार प्रति कदम स्कोर श्रेणी का प्रतिशत वितरण । तंत्रिका क्रश चोट के पांच सप्ताह बाद डब्ल्यूटी भोले चूहों और डब्ल्यूटी चूहों के बाएं और दाएं हिंडलिम्ब के लिए। डेटा को मतलब ± एसईएम के रूप में दिखाया गया है । सांख्यिकीय विश्लेषण सामान्य रूप से वितरित डेटा और गैर-सामान्य वितरित डेटा के मान-व्हिटनी यू परीक्षण के अकर्पित टी परीक्षण का उपयोग करके किया गया था। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 5
चित्रा 5:मेट्ज़ एट अल से 7 श्रेणी के पैमाने के अनुसार प्रत्येक श्रेणी का अनुकरणीय प्रतिनिधित्व। सीढ़ी सीढ़ी वॉकिंग टास्क के दौरान. श्रेणी 0 के दाहिने हिंडलिम्ब से प्रतिनिधि छवि अनुक्रम - कुल मिस, श्रेणी 1 - गहरी पर्ची, श्रेणी 2 - मामूली पर्ची, श्रेणी 3 - प्रतिस्थापन, श्रेणी 4 - सुधार, सीढ़ी चलने कार्य के दौरान। श्रेणी 5 के लिए प्रतिनिधि चित्र - आंशिक प्लेसमेंट और श्रेणी 6 - सही प्लेसमेंट। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Discussion

यह व्यवहार मूल्यांकन प्रोटोकॉल सिस्टिक तंत्रिका क्रश चोट के बाद एक कृंतक मॉडल में चयनित व्यवहार परीक्षण बैटरी के फायदे और नुकसान के साथ-साथ संभावित रीडआउट का अवलोकन प्रदान करता है।

सियाटिक तंत्रिका क्रश चोट का तुलनात्मक परिणाम प्राप्त करने के लिए, एक सुसंगत क्रश तकनीक अनिवार्य है। संदंश के बजाय एक गैर-दांतेदार क्लैंप (अल्ट्रा फाइन हेमोस्टेट) का उपयोग क्रश की स्थिरता में सुधार कर सकता है। समान तंत्रिका संपीड़न की गारंटी देने के लिए एक ही क्लैंप के साथ-साथ समान क्रश स्थिति का उपयोग करें। क्रश चोट और देखभाल के साथ क्लैंप की हैंडलिंग के लिए क्लैंप का विशेष उपयोग स्थिरता में सुधार करता है। इसके अलावा, देखभाल के साथ क्रश चोट की प्रक्रिया करें। सर्जरी के दौरान तंत्रिका को अतिरिक्त क्षति जैसे तंत्रिका के अवांछित कर्षण से ऑटोम्यूटिलेशन जैसे अवांछित दुष्प्रभाव हो सकते हैं। इसलिए, एक सावधान तंत्रिका तैयारी के साथ-साथ कम से कम दो दिनों के लिए दर्द रिलीवर के प्रशासन की सिफारिश की जाती है।

मोटर व्यवहार का बहुकार्यात्मक मूल्यांकन विभिन्न स्तरों पर चूहों में तंत्रिका क्रश चोट के बाद फेनोटाइप की विशेषता हो सकती है। हमने ओएफटी, कैटवॉक एक्सटी चाल विश्लेषण, बीम वॉकिंग टास्क और सीढ़ी चलने का काम किया। इन प्रयोगों के लिए प्रयोगात्मक समूहों के लिए एक अंधा प्रयोगात्मक प्रक्रिया और डेटा विश्लेषण आवश्यक है । व्यवहार मूल्यांकन से पहले, जानवरों को परीक्षण कक्ष में कम से 30 मिनट के लिए परीक्षण की स्थिति के तहत आदत थी । यहां लागू सभी व्यवहार परीक्षणों से यह लाभ होता है कि भोजन या पानी के अभाव की आवश्यकता नहीं है। जानवरों के एक ही समूह सेट सभी वर्णित व्यवहार परीक्षणों में इस्तेमाल किया गया । प्रत्येक जानवर के लिए प्रति दिन अधिकतम दो अलग-अलग व्यवहार परीक्षण किए गए। यदि नियमित अंतराल में व्यवहार परीक्षण किए जाते हैं, तो एक तुलनीय प्रक्रिया पर ध्यान दें, जैसे कि एक ही पशु क्रम में परीक्षण करना और दिन के एक ही समय में। व्यवहार विश्लेषण के लिए एक और महत्वपूर्ण पहलू चूहों का दिन-रात चक्र है। दिन चक्र (अंधेरे चक्र) पर गतिविधि के अधिक प्राकृतिक और उच्च स्तर प्राप्त करने के लिए एक उलट दिन-रात चक्र पर विचार करें। यह विशेष रूप से सहज व्यवहार के माप के लिए विचार किया जाना चाहिए, OFT की तरह । इस प्रयोग में, एक उलट दिन-रात चक्र लागू नहीं किया जा सका, लेकिन परीक्षण शर्तों के लिए एक पर्याप्त अनुकूलन सुनिश्चित किया गया था । बीम चलने के कार्य और सीढ़ी चलने के कार्य के लिए उच्च-रिज़ॉल्यूशन वीडियो के लिए एक आदर्श रोशनी आवश्यक है। अंधेरे में प्रयोग करते समय इस उच्च वीडियो गुणवत्ता तक नहीं पहुंचा जा सकता है।

चाल के आकलन के लिए निरंतर कार्य निष्पादन की आवश्यकता होती है। एक सतत कार्य प्रदर्शन का पहला महत्वपूर्ण पहलू जानवरों को सेटअप पार करने के लिए मनाना है। प्रेरणा बढ़ाने के लिए, सेटअप के अंत में छोटे खाद्य छर्रों (45 मिलीग्राम) रखें। जानवरों को भोजन छर्रों से परिचित होने के लिए, परीक्षण से पहले छर्रों को उन्हें खिलाया जाना चाहिए। इसके अलावा, सेटअप के अंत में एक गोल बॉक्स मददगार हो सकता है। कैटवॉक के सेटअप में पहले से ही गोल बॉक्स शामिल है, लेकिन चूहे कभी-कभी गोल बॉक्स में प्रवेश करने में संकोच करते हैं। वैकल्पिक रूप से, आप गोल बॉक्स में एक छोटा पिंजरा जोड़ सकते हैं, लेकिन चूहों से घर पिंजरे गोल बॉक्स में फिट नहीं होता है। अधिग्रहण से पहले कुछ मिनट के लिए चूहे को पिंजरे में आदत दें। इसके अतिरिक्त, एक ही घर पिंजरे से एक और चूहा गोल बॉक्स में या लक्ष्य बॉक्स के अंदर पिंजरे में रखा जा सकता है । सुनिश्चित करें कि दूसरा चूहा बॉक्स में रहता है और गोल बॉक्स के प्रवेश द्वार को अवरुद्ध नहीं करता है। इसके अलावा, कैटवॉक सिस्टम से गोल बॉक्स को हटाना और वॉकवे के अंत में चूहे के घर पिंजरे को रखना भी संभव है, जो चूहे को प्रत्येक रन के बाद अपने "गृह क्षेत्र" में प्रवेश करने की अनुमति देता है। बीम वॉकिंग टास्क और सीढ़ी चलने के कार्य के सेटअप के लिए, हम सेटअप के अंत में एक गोल बॉक्स या घर पिंजरे को जोड़ने की सलाह देते हैं। निरंतरता सुनिश्चित करने के लिए, कैटवॉक, बीम वॉकिंग टास्क, और सीढ़ी चलने का कार्य सप्ताह में कम से कम एक बार छह से दस रन के साथ किया जाना चाहिए।

हालांकि हर विश्लेषण इस अध्ययन में महत्वपूर्ण अंतर मिले, विचार है कि आनुवंशिक रूप से संशोधित जानवरों या उपचार समूहों के एक शामिल किए जाने मूल्यवान डेटा है कि एक ही व्यवहार परीक्षणों से समूहों के बीच अंतर कर सकते है उत्पादन कर सकता है ।

नर्व क्रश इंजरी का चूहे की लोकोमोटर एक्टिविटी पर कोई असर नहीं पड़ा, जिसे पांच मिनट में मापा गया। कैटवॉक एक्सटी चाल विश्लेषण चाल, पंजा और पंजा प्लेसमेंट का विश्लेषण करने के लिए एक अधिक उद्देश्य और संवेदनशील उपकरण है। एक गहन प्रशिक्षण के बाद, चूहे कैटवॉक एक्सटी उपकरण के डिफ़ॉल्ट सेटिंग्स के लिए वॉकवे पार करना सीखते हैं। तंत्रिका चोट चूहों की रास्ता पार करने की क्षमता को कम नहीं करती है। विभिन्न मापदंडों की स्वचालित गणना डेटा को निष्पक्ष रूप से प्रस्तुत करती है। अतिरिक्त जानकारी "इंटरएक्टिव पदचिह्न माप" मॉड्यूल का उपयोग करके प्राप्त किया जा सकता है और वास्तव में, इन विश्लेषणों से पैर के अंगूठे के प्रसार, प्रिंट लंबाई और पंजा कोण के विभिन्न मापदंडों में महत्वपूर्ण अंतर मिले हैं, जो तंत्रिका चोट के साथ और बिना चूहों की तुलना करते हैं।

बीम वॉकिंग टास्क के लिए चूहों को आसानी से प्रशिक्षित किया जा सकता है। बीम को पार करने के लिए विलंबता समय में अंतर और तंत्रिका-घायल हिंडलिम्ब के प्रति कदम पैर स्लिप की संख्या में क्रश-घायल चूहों के साथ भोली की तुलना करके पता लगाया गया था। बीम चलने के कार्य के साथ तंत्रिका-घायल चूहों का विश्लेषण करने का नुकसान बीम का आकार है। सियाटिक तंत्रिका क्रश चोट के बाद पहले दो हफ्तों के भीतर, चूहों को बीम को पार करने के लिए सहायता की आवश्यकता होती है क्योंकि उनका संतुलन बिगड़ा हुआ है। हालांकि कुछ चूहे बीम को पार करने में सक्षम हो सकते हैं, लेकिन गिरावट के कारण चोटों का खतरा अधिक होता है। इसलिए तंत्रिका-कुचल जानवरों को यदि आवश्यक हो तो सियाटिक तंत्रिका क्रश चोट या उससे अधिक समय के बाद पहले दो हफ्तों के लिए बीम को पार करने में सहायता की जानी चाहिए। हालांकि, सहायता के साथ और बिना रन की तुलना करना मुश्किल है । इसके अलावा, मोटर बैलेंस बीम वॉकिंग टास्क द्वारा मूल्यांकन किया गया एक महत्वपूर्ण पैरामीटर है। हमने इस पैरामीटर को हमारे तंत्रिका क्रश चूहा मॉडल के लिए प्रासंगिक नहीं माना। इसलिए, ओहवाताशी एट अल और जोहानसन और ओएचएलएसन द्वारा वर्णित स्कोर का उपयोग नहीं किया जा सका और डेटा विश्लेषण18,19के लिए एक अधूरी बीम ट्रैवर्स के साथ रन को बाहर रखा गया ।

मेट्ज़ एट अल से 7 श्रेणी का पैमाना सामने और हिंडलिंब दोनों का विश्लेषण कर सकता है और सीढ़ी चलने वाले कार्य16,17के दौरान सभी अंगों की त्रुटियों के विभिन्न गंभीरता स्तरों के बीच अंतर कर सकता है। सबसे प्रमुख त्रुटियों का विश्लेषण करके, जिसमें 0 से 2 श्रेणियां शामिल हैं, भोली wt चूहों के साथ तंत्रिका-घायल डब्ल्यूटी चूहों की तुलना करते समय हिंडलिब में प्रति चरण त्रुटियों का कोई अंतर नहीं पाया जा सकता है। इसके अलावा, सीढ़ी सीढ़ी तंत्र को पार करने का विलंबता समय तंत्रिका-घायल डब्ल्यूटी चूहों और wt भोले चूहों के बीच अलग नहीं था। डीप लर्निंग मॉडल एक स्वचालित दृष्टिकोण के माध्यम से सीढ़ी चलने के कार्य के डेटा विश्लेषण में सुधार और गति कर सकते हैं।

यह उल्लेख करना महत्वपूर्ण है कि तंत्रिका क्रश चोट के साथ-साथ सभी वर्णित व्यवहार परीक्षण आसानी से चूहों में अनुवाद कर सकते हैं, सेटिंग्स और सेटअप के आकार को अनुकूलित करके। एक मॉडल जीव के रूप में चूहों के उपयोग से लाभकारी प्रभाव पड़ता है कि कई मानव रोगों के लिए ट्रांसजेनिक मॉडल मौजूद हैं।

Disclosures

लेखकों के पास खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।

Acknowledgments

इस काम को जर्मन संघीय शिक्षा और अनुसंधान मंत्रालय (बीएमबीएफ डिस्ट्रेक्ट से सीडब्ल्यूआई) और इंटरडिसिप्लिनरी सेंटर फॉर क्लीनिकल रिसर्च (IZKF) द्वारा Würzburg विश्वविद्यालय (एन-362 से C.W.I.; Z2-CSP3 से एलआर) । इसके अलावा, इस परियोजना को ईजेपी आरडी कोफंड-ईजेपी एन ° 825575 (यूआरडीस्कवर से जेवी) के तहत यूरोपीय संघ के क्षितिज 2020 अनुसंधान और नवाचार कार्यक्रम से और वीआरयूएम फाउंडेशन से धन प्राप्त हुआ है। इसके अलावा C.W.I. ड्यूश Forschungsgemeinschaft (DFG, जर्मन Reseach फाउंडेशन) परियोजना आईडी ४२४७७८३८१-TRR २९५, ड्यूश Stiftung न्यूरोलॉजी और पार्किंसंसFonds द्वारा वित्त पोषित है । एलआर अतिरिक्त रूप से डिस्टोनिया मेडिकल रेसेच फाउंडेशन द्वारा समर्थित है।

लेखक अपनी तकनीकी सहायता के साथ-साथ पशु देखभाल के लिए हेल्गा ब्रूनर के लिए केली रोह्म, वेरोनिका सेंगर, हेके मेंज़ेल और लुइसा फ्रीस का धन्यवाद करते हैं।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Acetic acid, ≥99.8% Sigma-Aldrich 33209-1L
Appose ULC skin stapler 35W Covidien 8886803712
Beam self made
Bepanthen eye cream Bayer Vital GmbH 81552983
Box for OFT self made
Camcorder GC-PX100 JVC
Catwalk XT Noldus  setup and software
Chamber for isofluran GT-Labortechnik custom made
Disposable scalpel No. 11 Feather 20.001.30.011
Dräger Vapor 19.3 isoflurane system Dr. Wilfried Müller GmbH
Dumont #2 - laminectomy forceps Fine Science Tools 11223-20
Dumont #5 forceps Fine Science Tools 11251-30 super-fine
Dustless precision pellets 45 mg Bio-Serv F0021
EthoVision XT Noldus  setup and software
Forceps 160 mm Hartenstein PZ09
Gas anesthesia mask, rat Dr. Wilfried Müller GmbH
Goal box for ladder rung walking task apparatus self made
Hair clipper Magnum 5000 Wahl GmbH
Hardened fine scissors Fine Science Tools 14090-11
Heating table MEDAX 13801
Isofluran CP 1ml/ml, 250 ml cp-pharma 1214 prescription needed
Kinovea www.kinovea.org
Ladder rung walking task apparatus self made
Needleholder KLS Martin 20-526-14-07
Octeniderm Schülke 118211
Rimadyl 50 mg/ml, injectable Zoetis Carprofen, prescription needed
Rubber band retractors self made
Spacer for beam self made
Spacer for ladder rung walking task apparatus self made
Suture Silkam 4/0 DS 19 B. Braun C0762202
Ultra fine hemostats (non-serrated clamp) Fine Science Tools 13020-12

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References

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Knorr, S., Rauschenberger, L., Lang, T., Volkmann, J., Ip, C. W. Multifactorial Assessment of Motor Behavior in Rats after Unilateral Sciatic Nerve Crush Injury. J. Vis. Exp. (173), e62606, doi:10.3791/62606 (2021).

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