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Neuroscience

使用细胞示踪剂注射研究大鼠囊侧壁模型中新内膜形成细胞的起源

Published: March 16, 2022 doi: 10.3791/63580
* These authors contributed equally

Summary

我们进行了一点亲脂性细胞示踪剂注射以追踪内皮细胞,然后进行动脉切开术和缝合腹大鼠主动脉上的侧壁动脉瘤。在去细胞化动脉瘤中,新intima的形成似乎依赖于母动脉,并且通过从富含细胞的重要壁的动脉瘤壁细胞中募集来促进。

Abstract

显微外科夹闭术形成随后的血流屏障进入颅内动脉瘤,而血管内治疗则依赖于新脑和血栓形成。覆盖新内腔层的内皮细胞的来源尚不清楚。因此,本研究的目的是在已经完善的赫尔辛基大鼠显微外科侧壁动脉瘤模型中研究细胞示踪剂注射后新intima形成细胞的起源。

侧壁动脉瘤是通过在雄性Lewis大鼠中将脱细胞化或重要动脉袋首尾并侧缝合到主动脉而形成的。在用动脉瘤缝合线进行动脉切开术之前,在夹紧的主动脉中进行含有CM-Dil染料的细胞示踪剂注射,以标记相邻血管中的内皮细胞并在随访期间跟踪其增殖(FU)。治疗后进行盘绕(n = 16)或支架置入术(n = 15)。在FU(7天或21天)时,所有大鼠都接受荧光血管造影,然后进行动脉瘤收获以及具有特定感兴趣区域的免疫组学细胞计数的宏观和组织学评估。

31例动脉瘤均未在随访时破裂。四只动物过早死亡。在75.0%盘绕大鼠和7.0%支架大鼠中观察到宏观残余灌注。与盘绕动脉瘤相比,第7天(p = 0.01)和第21天新intima(p = 0.04)的盘绕动脉瘤相比,去细胞化支架的细胞示踪阳性细胞数量显着升高。在血栓或新生血管中未发现显著差异。

这些发现证实,与支架置入式动脉瘤相比,盘绕动脉瘤的愈合模式更差。在去细胞化动脉瘤中,新内膜的形成似乎特别依赖于母动脉,而它是由重要细胞丰富的壁中的动脉瘤壁细胞募集支持的。在转化方面,支架治疗可能更适合于高度退化的动脉瘤,而对于血管壁大多健康的动脉瘤,仅进行盘绕可能就足够了。

Introduction

由颅内动脉瘤 (IA) 破裂引起的蛛网膜下腔出血是一种破坏性的神经外科疾病,与高发病率和死亡率相关1234。除了提供内皮与内皮直接接触的显微外科夹闭外,血管内装置在过去几十年中在治疗破裂和偶然发现的IA方面变得越来越重要。血管内治疗的IA的愈合反应主要取决于新脑形成和血栓组织。两者都是协同过程,取决于细胞从相邻血管和动脉瘤壁的迁移。5 迄今为止,血管内处理动脉瘤新脑形成中内皮细胞的起源尚不清楚。文献中关于新intima形成细胞被招募的来源一直存在争议。

通过在大鼠腹主动脉中使用CM-Dil染料的细胞示踪剂注射(见 材料表),我们旨在分析起源于母动脉的内皮细胞在两个不同的FU时间点(第7天和第21天)的新intima形成中的作用(图1)。该模型的一个优点是在动脉瘤缝合之前在亲体动脉 直接在体内孵育局部细胞示踪剂,从而在以后的时间点允许FU。 体内 注射技术,如细胞示踪剂孵育,尚未在文献中描述。该技术的一个优点是直接,单点,术 中,体内 注射,这使得模型坚固耐用且可重复。

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Protocol

兽医支持是根据机构指南进行的。实验由瑞士地方伦理委员会批准(BE 60/19)。67严格遵守了ARRIAGE指南和3R原则。包括31只雄性刘易斯大鼠,12周大,体重492±8克。将所有大鼠在23°C的室温和12小时的光/暗循环下。提供免费水和颗粒。统计分析是使用非参数Wilcoxon-Mann-Whitney U 检验进行的。≤0.05和/或≤0.01的概率值(p)被认为是显著的。

1. 术前阶段-一般准备和麻醉方面

  1. 通过基于网络的随机化系统将大鼠随机化到线圈或支架治疗组中(图2)。现在,在一个安静的无菌手术室旁边对所有计划进行手术的动物进行术前临床检查,保持室温为23±3°C。 分析动物的行为并检查粘膜和弹性,作为术前临床检查的一部分。
  2. 记录每只动物的体重。
  3. 手术前,将供体大鼠的动脉袋在37°C下在0.1%十二烷基硫酸钠中孵育10小时,以获得脱细胞化动脉瘤8。在手术前几天从捐赠动物那里收集这些袋子。
    1. 用显微剪刀和镊子准备腹主动脉的整个长度,并以3-4mm的间隔应用6-0个不可吸收的结扎。
    2. 术中通过先前结扎的动脉血管袋从供体动物的胸部部分直接产生生命动脉瘤9。在指定的FU时间点用剪刀和手术钳进行开胸术,并以所需的长度连接血管袋。
  4. 直接将袋子植入受体并从供体动物处收获动脉瘤,以进行进一步的宏观分析和组织学处理。
  5. 对于麻醉诱导,将所有大鼠置于提供氧气(O2)的干净盒子中,直到5-10分钟后失去意识。用皮下注射(SC)芬太尼0.005mg / kg,美托咪定0.15mg / kg和咪达唑仑2mg / kg的混合物麻醉大鼠。
    注意:这确保了手术平面至少45分钟。
  6. 通过没有踏板退出反射来检查麻醉深度。
  7. 将大鼠置于仰卧位,并用电动剃须刀剃除胸腹部。
  8. 用胶带将大鼠的4只爪子固定在板上,由连接到自动调节直肠探针的加热垫覆盖。将直肠探针插入大鼠的肛门,在加热垫的帮助下保持37°C的所需温度。
  9. 现在,在连接到计算机系统的右后腿上安装一个传感器,用于检查术中的生命体征。
  10. 用口罩遮住老鼠的鼻子和嘴巴。如果需要长时间麻醉,开始异氟醚(1.0-2.0%滴定,在100%O2中起作用)。
  11. 用聚维酮 - 碘或交替消毒剂对手术区域进行消毒,并以无菌方式覆盖手术区域。
  12. 对于肛周护理,将无菌眼科润滑剂涂抹在眼睛上,并用不透明的铝箔面罩覆盖它们,以防止手术灯干燥和损坏。
  13. 在整个手术过程中,通过面罩连续供氧,监测体温,并使用加热垫提供热量,以保持正常体温。
  14. 持续监测其他生命体征(脉搏和呼吸膨胀、心脏和呼吸频率以及血氧饱和度)。

2. 手术阶段 - 细胞示踪剂注射

注:赫尔辛基大鼠显微外科侧壁动脉瘤模型9 中的详细手术方法以及线圈和支架植入技术在别处进行了描述81011

  1. 将荧光亲脂性细胞示踪剂始终储存在≤-20°C,避光。
  2. 通过准备大鼠主动脉和腔静脉进行手术,然后分离两者,以及主动脉的近端和远端临时钳夹。
    注意:此技术在前面已在9 中进行了描述。
    1. 用两个临时的泰坦夹钳夹住主动脉的近端和远端部分。
  3. 在主动脉的近端和远端部分下放置一个带有紫色衬垫的微拭子,以便更好地可视化动脉。
  4. 现在,用湿纱布保护腹部。
  5. 在手术当天,通过移液于1mL磷酸盐缓冲盐水(PBS)来溶解2μL细胞示踪剂。
  6. 将混合物转移到装有27-1 / 2 G(0.4 x 13 mm)无菌套管的1mL注射器中。
    注:在执行步骤 2.5 和 2.6 时,请注意避免光线照射。
  7. 关闭手术室的灯。在显微镜下观察时,使用微镊子在主动脉的中腹侧部分进行单点注射,并小心地注射1mL肝素化的0.9%盐水溶液。
  8. 小心地注射细胞示踪剂 (视频1 ),并立即关闭手术显微镜。再次,用湿纱布保护腹部。
  9. 让染料孵育至少15分钟。潜伏期过后,打开显微镜和手术室的灯。
  10. 进行动脉瘤的纵向动脉切开术和缝合,如别处11所述。
    1. 使用微镊子和微剪刀进行动脉切开术,使其长度平均采集的动脉瘤的直径(步骤1.3)。为确保长度正确,在进行动脉切开术之前,将动脉瘤放在主动脉旁边。使用不可吸收的10-0缝线用8-10针单缝缝合动脉瘤,并小心地取下临时钳子 - 从远端开始 - 用肝素盐水连续冲洗。以分层方式闭合伤口。请注意,使用1厘米的线圈包装密度。
      注:线圈或支架植入技术已在别处进行了描述810.

3. 术后阶段监测和镇痛护理

  1. 在手术结束时,用丁丙诺啡0.05mg / kg,阿替哌唑0.75mg / kg和氟马西尼0.2mg / kg的SC注射混合物逆转麻醉。让每只操作的动物在干净的笼子里恢复,直到完全清醒,并根据需要用加热灯加热。
  2. 3天,给予1mg / kg美洛昔康(每天一次注射或口服)和丁丙诺啡(0.05mg / kg,每天四次)SC.过夜,在饮用水中连续提供丁丙诺啡,剂量相同:6mL丁丙诺啡0.3mg / mL,360mL饮用水,10mL 5%葡萄糖。
  3. 在术后立即阶段,将每只动物安置在一个笼子里进行保护。24小时后重新组合动物。
  4. 如果任何大鼠在SC注射后表现出痛苦或攻击性行为,请在白天在饮用水中施用丁丙诺啡。
  5. 在笼子地板上提供软饲料,以支持术后喂养和恢复。
  6. 根据健康和疼痛评分表观察并照顾所有动物。
  7. 需要时给予急救镇痛SC(美洛昔康1mg / kg和0.05mg / kg丁丙诺啡)。

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Representative Results

实验室环境共纳入31只动物:最终统计分析中包括27只大鼠;4只大鼠过早死亡(死亡率为12.9%)。术中,与线圈处理(13.5μm±0.6)大鼠相比,支架(12.9μm±0.7)的呼吸膨胀显着减少(p = 0.03)。在最后的FU结束时对每只大鼠进行荧光血管造影。在所有6种线圈处理的动物中均有再灌注,而在8种支架处理的动物中仅观察到12.5%的再灌注。

盘管或支架治疗组之间第7天和第21天的合并基线动脉瘤体积没有显着差异(无论是去细胞化(p = 0.9)也不是重要的动脉瘤(p = 0.1)动脉瘤)(图3)。与支架置入式动脉瘤相比,去细胞化动脉瘤的合并FU体积显示盘绕的动脉瘤生长不显着(p = 0.28),在重要的盘绕组中显着大于支架组(60.1 mm3±31.1 mm3 vs. 20.5 mm3 ±20.6 mm3; p = 0.002)。

在第7天FU(p = 0.8)时,去细胞化动脉瘤新中新中细胞示踪剂阳性细胞的数量在支架或线圈处理组之间没有显着差异(p = 0.8),但在第21天FU时,支架大鼠的细胞示踪阳性细胞数量显着更高(图4; p = 0.04)。在重要的动脉瘤缝合大鼠中,在7天(p = 1.0)或21天(图5)FU(p = 0.66)时未观察到显着差异。在7天FU的去细胞化动脉瘤中,与线圈处理的组相比,支架处理的血栓中残留的细胞示踪阳性细胞明显更多(p = 0.01)。在 FU 7 天时,在生命动脉瘤中未观察到这种差异。参见 表1 ,了解去细胞化细胞的细胞示踪阳性细胞的比例,以及第7天和第21天FU的重要盘绕和支架置入动脉瘤的比例。在每只大鼠新内膜的内皮细胞中进行血管性血友病因子(F8)的复染(图6)。

卷取组的平均手术持续时间为119.1±21.3分钟,支架组为154.1±30.2分钟(p = 0.001)。线圈(15.6±2.9针)和支架组(11.3±1.1)的动脉瘤缝合线的缝合次数也显着不同(p = 0.000002)。

Figure 1
图1:实验设置的流程图。 共对35只动物进行手术,并随机分配到盘绕组或支架置入组。支架组的两只动物在术后立即死亡。 请点击此处查看此图的大图。

Figure 2
图2:线圈和支架栓塞期间动脉瘤的术中照片(A)描绘了缝合在腹部大鼠主动脉上的侧壁动脉瘤(#)。在进行最后一次单针以完成动脉瘤缝合之前,请注意动脉瘤中引入的线圈装置。注意动脉切开术左侧的粉红色染色(箭头),表明细胞示踪剂的正确分布。(B)设置与A中相同,显示支架装置已就位请点击此处查看此图的大图。

Figure 3
图3:31只动物的宏观尸检测量。 在植入前和随访时记录动脉瘤体积(mm 3),沿y轴表示。(A) 基线(去细胞化),(B) 随访(去细胞化),(C) 基线(重要),(D) 随访(重要)。第 7 天和第 21 天的数据已合并。** <页 0.01。值表示为具有四分位间距的中位数。 请点击此处查看此图的大图。

Figure 4
图 4:支架治疗的脱细胞化动脉瘤在第 21 天的示例性图像。 右图显示了单克隆抗α-SMA,细胞耗竭动脉瘤(2倍放大)的图像概述;比例尺 = 150 μm。左,用DAPI复染;红细胞是动脉瘤壁中的细胞示踪阳性(A),(B)在血栓中,(C)新中残留染色但褪色的细胞示踪剂阳性细胞,以及(D)在相邻血管复合物中。比例尺 = 100 μm (A-D)。单箭头标记动脉瘤壁,双箭头标记母动脉。缩写:DAPI = 4',6-二脒基-2-苯基吲哚;α-SMA = α平滑肌肌动蛋白。请点击此处查看此图的大图。

Figure 5
图 5:线圈处理的重要动脉瘤在第 21 天的示例性图像。右侧,显示单克隆抗α-SMA,富含细胞的动脉瘤(2倍放大)的图像概述;比例尺 = 150 μm。左侧,用DAPI重新染色;红细胞在动脉瘤壁中为细胞示踪阳性(A),(B)在血栓中,(C)在新内膜中为多个阳性细胞,(D)在相邻血管复合物中。比例尺 = 100 μm (A-D)。单箭头标记动脉瘤壁,双箭头标记母动脉。缩写:DAPI = 4',6-二脒基-2-苯基吲哚;α-SMA = α平滑肌肌动蛋白。请点击此处查看此图的大图。

Figure 6
图 6:F8 染色的 40 倍放大倍率。 # 描绘了血栓形成、* 新内膜和 § 动脉瘤孔下方的腔内侧。注意新内膜腔内层中显示为紫色染色的内皮分层。比例尺 = 175 μm。 请点击此处查看此图的大图。

DAPI/CM-Dil 染料 (%) 线圈 支架
第 7 天 第21天 第 7 天 第21天
去细胞化袋 新因蒂玛 68.00% 7.70% 72.20% 34.30%
父母动脉 75.50% 10.50% 76.50% 35.60%
血栓 7.50% 5.50% 25.20% 8.30%
动脉瘤壁 12.20% 8.50% 11.70% 9%
重要袋 新因蒂玛 56.70% 11.50% 58.20% 15.00%
父母动脉 60.00% 24.20% 81.50% 26.00%
血栓 62.00% 26.20% 71.20% 23.70%
动脉瘤壁 13.20% 10.20% 13.50% 11.60%

表1:新肠、母动脉、血栓和动脉瘤壁中细胞示踪阳性细胞的比例。 值表示为第7天和第21天用于线圈和支架治疗的去细胞化和重要袋的百分比。简称:DAPI = 4',6-二脒基-2-苯基吲哚。

视频1:在大鼠主动脉腹部注射细胞示踪剂。 该技术是使用一点注射到钳夹的大鼠主动脉中进行的。 请点击此处下载此视频。

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Discussion

这项研究表明,新血管的形成是通过起源于动脉瘤复合体母动脉的内皮细胞介导的,但由重要动脉瘤中来自动脉瘤壁的细胞的募集来支持。然而,循环祖细胞在动脉瘤愈合中的作用仍然存在争议1213。总体而言,31只雄性刘易斯大鼠被纳入这项调查;只有4人过早死亡(死亡率为12.9%)。

与促进随后内皮至内皮接触的手术夹闭相比,血管内治疗的成功依赖于延迟的生物反应。新开发的技术,例如流量转移,生物活性血管内装置或基于腔内细胞的疗法,相对于血管内治疗装置1415是值得注意的。在这种情况下,有证据表明,成功根除动脉瘤的治疗成功与动脉瘤壁本身的生物反应相加相关51617

最近的研究表明,血栓组织和新脑形成是血管内治疗后动脉瘤愈合的并发过程。参与动脉瘤愈合的两个过程都依赖于从动脉瘤复合体的相邻血管和动脉瘤壁本身移动细胞。此外,这两个过程都通过存在血管内装置(例如线圈或支架)来促进。正如Grüter等人所证明的,5 血栓组织细胞主要来自相邻血管,用于两种类型的血管内治疗方法。在这里,线圈处理的动脉瘤中的新intima形成主要依赖于细胞从血管壁的迁移,而相邻的血管是支架处理的动脉瘤的主要供体。

多年来,使用赫尔辛基大鼠显微外科侧壁动脉瘤模型建立和扩展研究问题的共同线索可以观察到。首先,去细胞化和因此退化的动脉瘤比富含细胞的重要动脉瘤更容易生长和破裂9。此外,线圈治疗在使用生命囊的动脉瘤治疗中比高度退化的动脉瘤治疗更成功8。此外,细胞移植甚至在高度退化的动脉瘤14中也提供了足够的动脉瘤愈合。比较该动脉瘤模型中不同的血管内装置,支架治疗明显优于单独使用线圈治疗11。因此,了解来自母体动脉和动脉瘤壁5的盘绕和支架动脉瘤的不同细胞募集模式,仍然存在主要问题,新血管的形成是否主要由来自母动脉的内皮细胞,来自动脉瘤壁的细胞,甚至循环祖细胞触发。最近关于引发新脑形成的循环祖细胞的发现是有争议的12131518

本系列仅包括雄性大鼠,以避免雌激素对动脉瘤生长,血栓形成和壁部炎症的混杂作用,如前所述19。除了使用荧光血管造影20 和生命体征监测的复杂多模态监测外,我们还使用特定的细胞示踪剂来标记母动脉,以区分来自血液中循环细胞的细胞和来自邻近细胞真正迁移的细胞。然而,我们不能排除内皮细胞的信号强度随着时间和细胞分裂而轻微下降,尽管研究表明肌原纤维细胞在这些时间点(第7天和第21天)具有很强的信号强度14。最后,该动脉瘤模型使用血液动力学和随后的生物过程,例如自发性血栓形成或动脉瘤愈合的速率,这些都受到动脉瘤21侧壁星座的高度影响。

正如这些发现所证明的那样,很明显,动脉瘤复合物的相邻血管是形成新内膜的重要细胞来源。这些发现与Kallmes等人最近发表的结果非常一致,表明支柱厚度也是分流器中壁置的决定因素,这是有效内皮化的重要驱动因素。在这里,增加支柱厚度降低了错位的可能性,改善了与母体动脉壁的接触,因此,通过支柱22优化了细胞重建。在具有去细胞化动脉瘤的大鼠中,在第21天在支架组中观察到的细胞示踪剂阳性内皮细胞量显着高于在同一时间点的盘绕组(表1)。

这一发现可归因于这样一个事实,即支架应用于母动脉的细胞丰富的区域,即使是高度退化的动脉瘤,也可以作为细胞运动的指导结构,允许新肠腔内层的连续内皮衬里并提供进行性动脉瘤愈合。另外,比较第7天FU的支架置入和卷取,在支架动物的血栓中观察到的细胞示踪剂阳性细胞的数量明显高于盘绕动物。因此,一个合理的解释是支架支柱很容易促进细胞从血栓中的相邻血管迁移。在比较卷取与支架置入术的重要动脉瘤中,无论是21天后的新intima,还是第7天的血栓形成,均观察到细胞示踪阳性细胞的显着差异。与之前的发现5一致,这可以归因于通过健康血管壁中的细胞募集来支持新中脑形成。

在去细胞化或重要的盘绕和支架动脉瘤中,21天后血栓中细胞示踪剂阳性细胞的数量没有任何显着差异,这是因为新内膜几乎完全密封23。因此,即使通过支架,细胞也不再可能迁移到血栓中。进行支架植入时需要考虑的关键点包括支架应用期间可能的医源性血管破裂或动脉切开术区域的严重狭窄形成,以及下肢潜在的缺血发展。为预防缺血,选择血管分叉旁边的动脉切开部位,以插入足够小的支架,以避免支架植入和缝合动脉切开术后的医源性狭窄。此外,在闭合之前,用肝素化盐水冲洗该区域,以尽量减少由于存在任何致栓成分而导致的任何潜在栓子的远端转运。

这些手术所需的材料通常成本极高且很少见,其可用性对于神经外科的年轻居民至关重要2425。然而,除了从这个模型获得的大量信息外,练习这个手术将有助于提高手术技能。

总而言之,赫尔辛基大鼠显微外科侧壁动脉瘤模型中血管内治疗动脉瘤的生物愈合反应取决于细胞从相邻血管复合物的迁移。此外,它还通过从重要,健康的动脉瘤壁中招募细胞来支持。然而,在脱细胞化且因此高度退化的动脉瘤中,富含母细胞的动脉是新血管形成的最重要细胞来源,这可以通过血管内装置(例如支架)促进,将相邻的细胞丰富的组织连接到动脉瘤孔。为了帮助将这一发现转化为临床环境,高度退化的动脉瘤可以通过放置在细胞丰富的健康血管区域的支架进行治疗。对于血管壁大多健康的动脉瘤,仅进行线圈栓塞可能就足够了。

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Disclosures

作者对所提交研究的设计和进行负全部责任,并声明没有竞争利益。

Acknowledgments

作者感谢Alessandra Bergadano,DVM,PhD,对长期动物健康的专门监督。这项工作得到了研究委员会,瑞士阿劳Kantonsspital Aarau和瑞士国家科学基金会SNF(310030_182450)的研究基金的支持。

Materials

Name Company Catalog Number Comments
3-0 resorbable suture Ethicon Inc., USA VCP428G
4-0 non-absorbable suture B. Braun, Germany G0762563
6-0 non-absorbable suture B. Braun, Germany C0766070
9-0 non-absorbable suture B. Braun, Germany G1111140
Atipamezol Arovet AG, Switzerland
Bandpass filter blue Thorlabs FD1B any other
Bandpass filter green Thorlabs FGV9 any other
Bipolar forceps any other
Bicycle spotlight any other
Board (20 x 10 cm) any other
Buprenorphine Indivior, Switzerland 1014197
Camera Sony NEX-5R, Sony, Tokyo, Japan
Cannula (27-1/2 G) any other
Cell count software Image-J version 1.52n, U.S. National Institutes of Health, Bethesda, Maryland, USA, https://imagej.nih.gov/ij/
CellTracker CM-Dil dye ThermoFisher SCIENTIFIC, USA C7000
Coil-Device Styker, Kalamazoo, MI, USA 2 cm of Target 360 TM Ultra, 2-mm diameter
Desinfection any other
Eye-lubricant any other
Fentanyl Sintetica, S.A., Switzerland 98683 any generic
Flumazenil Labatec-Pharma, Switerzland
Fluoresceine Curatis AG 5030376 any generic
Fluorescence microscope Olympus BX51, Hamburg, Germany; Cell Sens Dimension Imaging software v1.8
Foil mask any other
Glucose (5%) any other
Heating pad Homeothermic Control Unit, Harvard, Edenbridge, England any other
Isotonic sodium chloride solution (0.9%) Fresenius KABI 336769 any generic
Isoflurane any generic
Longuettes any other
Meloxicam Boehringer Ingelheim P7626406 any generic
Medetomidine Virbac, Switzerland QN05CM91
Micro needle holder any other
Midazolam Roche, Switzerland
Monitoring-system Starr Life Sciences Corp., 333 Allegheny Ave, Oakmont, PA 15139, United States
Needle holder any other
O2-Face mask any other
Operation microscope OPMI, Carl Zeiss AG, Oberkochen, Germany any other
Oxygen any other
Rectal temperature probe any other
Scalpell Swann-Morton 210 any other
Small animal shaver any other
Smartphone any other
Sodium dodecyl sulfate (0.1%) Sigma-Aldrich 11667289001
Soft feed Emeraid Omnivore any generic
Soft tissue forceps any other
Soft tissue spreader any other
Stainless steel sponge bowls any other
Stent-Device Biotroni, Bülach, Switzerland modified magmaris device, AMS with polymer coating, 6-mm length, 2-mm diameter
Sterile micro swabs any other
Straight and curved microforceps any other
Straight and curved microscissors any other
Straight and curved forceps any other
Surgery drape any other
Surgical scissors any other
Syringes 1 mL, 2 mL, and 5 mL any other
Tape any other
Vascular clip applicator B. Braun, Germany FT495T
Yasargil titan standard clip (2x) B. Braun Medical AG, Aesculap, Switzerland FT242T temporary

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

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神经科学,第181期,赫尔辛基大鼠显微外科侧壁动脉瘤模型,血管内治疗,细胞示踪剂注射,母体动脉,新内膜,内皮,神经生物学
使用细胞示踪剂注射研究大鼠囊侧壁模型中新内膜形成细胞的起源
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Wanderer, S., Grüter, B. E.,More

Wanderer, S., Grüter, B. E., Kümin, J., Boillat, G., Sivanrupan, S., Catalano, K., von Gunten, M., Widmer, H. R., Marbacher, S., Andereggen, L. Using a Cell-Tracer Injection to Investigate the Origin of Neointima-Forming Cells in a Rat Saccular Side Wall Model. J. Vis. Exp. (181), e63580, doi:10.3791/63580 (2022).

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