Summary
我々は、内皮細胞を追跡するために一点親油性細胞トレーサー注射を行い、続いて動脈切除術および腹部ラット大動脈瘤の側壁動脈瘤の縫合を行った。新内膜形成は、脱細胞化動脈瘤における親動脈に依存しているように見え、重要な細胞が豊富な壁における動脈瘤壁細胞からの動員によって促進された。
Abstract
顕微外科的クリッピングは、頭蓋内動脈瘤への血流のその後の障壁を作り出すが、血管内治療は新内膜および血栓形成に依存する。新内膜の内腔内層を覆う内皮細胞の供給源は不明のままである。したがって、本研究の目的は、既に十分に確立されたヘルシンキラット顕微手術側壁動脈瘤モデルにおける細胞トレーサー注射後の新前頭腫形成細胞の起源を調査することであった。
側壁動脈瘤は、雄ルイスラットにおいて大動脈に脱細胞化または重要な動脈パウチをエンドツーサイドに縫合することによって作成された。動脈瘤縫合糸による動脈切除の前に、CM-Dil色素を含む細胞トレーサー注射をクランプされた大動脈に行い、隣接する血管内の内皮細胞を標識し、フォローアップ(FU)中のそれらの増殖を追跡した。処理に続いてコイリング(n=16)またはステント留置(n=15)を行う。FU(7日間または21日間)で、すべてのラットを蛍光血管造影を受け、続いて動脈瘤採取および特定の関心領域の免疫組織学的細胞数による巨視的および組織学的評価を行った。
31の動脈瘤のいずれも、追跡調査で破裂していなかった。4匹の動物が早死にしました。巨視的に残留した灌流は、75.0%コイル状および7.0%のステント留置ラットにおいて観察された。細胞トレーサー陽性細胞の量は、7日目の血栓(p = 0.01)および21日目の新内膜(p = 0.04)に関して、コイル状動脈瘤と比較して脱細胞化ステントで有意に上昇した。重要な動脈瘤における血栓または新内膜に有意差は認められなかった。
これらの知見は、ステント留置動脈瘤と比較してコイル状の治癒パターンが悪化していることを確認している。新内膜形成は、脱細胞化動脈瘤における親動脈に特に依存するようであるが、重要な細胞が豊富な壁における動脈瘤壁細胞からの動員によって支持される。翻訳の面では、ステント治療は高度に変性した動脈瘤にはより適切かもしれないが、コイリングのみでは、ほとんどが健康な血管壁を有する動脈瘤に適切であるかもしれない。
Introduction
頭蓋内動脈瘤(IA)の破裂によって引き起こされるくも膜下出血は、高い罹患率および死亡率に関連する壊滅的な神経外科的状態である1、2、3、4。内皮と内皮の直接接触を提供する顕微手術クリッピングに加えて、血管内デバイスは、破裂したIAおよび偶発的に発見されたIAを治療するために、過去数十年にわたって重要性を増しています。血管内治療されたIAにおける治癒応答は、主に新内膜形成および血栓組織に依存する。どちらも相乗的なプロセスであり、隣接する血管および動脈瘤壁からの細胞遊走に依存する。5今日まで、血管内処置動脈瘤の新内膜形成における内皮細胞の起源は不明のままである。新内膜形成細胞がリクルートされる源について、文献で進行中の議論がある。
ラットの腹部大動脈にCM-Dir色素を細胞トレーサー注射( 材料表参照)することにより、2つの異なるFU時点(7日目と21日目)での新内膜形成における親動脈を起源とする内皮細胞の役割を解析することを目指しました(図1)。このモデルの利点は、動脈瘤縫合前の親動脈 におけるインビボでの 直接局所細胞トレーサーインキュベーションであり、後の時点でのFUを可能にする。細胞トレーサーインキュベーションなどの インビボ 注射技術は、文献には記載されていない。この技術の利点は、直接、一点、術中、 インビボ 注射であり、モデルを堅牢で再現性のあるものにする。
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Protocol
獣医支援は、機関のガイドラインに従って実施された。実験はスイスの地方倫理委員会(BE 60/19)によって承認された。ARRIVEガイドラインと3Rの原則は厳密に守られています6,7。生後12週、体重492±8gの31匹の雄ルイスラットが含まれていた。すべてのラットを23°Cの室温で12時間の明暗サイクルで飼育する。水とペレットへの無料アクセスを提供します。統計解析は、ノンパラメトリックなウィルコクソン-マン-ホイットニーU検定を用いて行われている。≤0.05および/または≤0.01の確率値(p)は有意であると考えられた。
1.術前期 - 一般的な準備と麻酔学的側面
- ラットをコイルまたはステント治療群のいずれかにランダム化(図2)し、ウェブベースのランダム化システムを使用します。次に、23±3°Cの室温を維持する静かで無菌の手術室の隣に手術を計画しているすべての動物の術前臨床検査を行う。 動物の行動を分析し、術前臨床検査の一環として粘膜とターガーを検査します。
- 各動物の体重を記録します。
- 手術前に、ドナーラット由来の動脈嚢を0.1%ドデシル硫酸ナトリウム中で37°Cで10時間インキュベートし、脱細胞化動脈瘤8を得た。手術の数日前にドナー動物からこれらの袋を収集します。
- 腹部大動脈の全長をマイクロハサミおよび鉗子で準備し、3〜4mmの間隔で6〜0個の非吸収性合字を適用する。
- ドナー動物の胸部から予め結紮した動脈血管パウチにより術中に重要な動脈瘤を直接生成する9。示されたFU時点ではさみおよび外科用鉗子で開胸術を行い、所望の長さで血管パウチを結紮する。
- パウチをレシピエントに直接移植し、ドナー動物から動脈瘤を採取して、さらなる巨視的分析および組織学的処理を行う。
- 麻酔誘導のために、5〜10分後に意識を失うまで、酸素(O2)を備えたクリーンボックスにすべてのラットを置く。フェンタニル0.005mg / kg、メデトミジン0.15mg / kg、およびミダゾラム2mg / kgの混合物の皮下(SC)注射でラットを麻酔する。
注:これにより、少なくとも45分の手術面が保証されます。 - ペダル離脱反射の不在により麻酔の深さを確認する。
- ラットを仰臥位に置き、胸腹部を電気シェーバーで剃る。
- ラットの4本の足をボード上のテープで固定し、自動調節直腸プローブに接続された加熱パッドで覆われた。ラットの肛門に直腸プローブを挿入し、加熱パッドの助けを借りて37°Cの所望の温度を維持する。
- 次に、コンピュータ化されたシステムに接続された右後肢にセンサーを設置し、バイタルサインを術中にチェックします。
- ラットの鼻と口をフェイスマスクで覆います。長期間の麻酔が必要な場合は、イソフルラン(1.0〜2.0%滴定して100%O2で効果を発揮する)を開始します。
- ポビドンヨードまたは交互の消毒剤で手術野を消毒し、手術野を滅菌方法でドレープする。
- 麻酔周囲ケアのために、滅菌眼科用潤滑剤を眼に塗布し、不透明なホイルマスクでそれらを覆い、外科用ランプからの乾燥および損傷を防止する。
- 手術中は、フェイスマスクを介して継続的に酸素を供給し、体温を監視し、加熱パッドを使用して熱を供給し、正常熱を維持します。
- 他のバイタルサイン(脈拍と呼吸の膨満、心臓と呼吸数、酸素飽和度)を継続的に監視します。
2.手術期 - 細胞 - トレーサー注入
注:ヘルシンキラット顕微手術側壁動脈瘤モデル9 における詳細な外科的アプローチおよびコイルおよびステント移植のための技術は、他の場所8、10、11に記載されている。
- 蛍光親油性細胞トレーサーを≤-20°Cで常時保管し、光から保護する。
- ラット大動脈および騎手静脈を準備し、続いて両方の分離、ならびに大動脈の近位および遠位一時クランプを調製することによって手術を行う。
注: この手法については、以前にも説明しました9.- 大動脈の近位部と遠位部を2つの一時的なタイタンクリップでクランプします。
- 動脈のよりよい視覚化のために大動脈の近位および遠位部分の下にそれぞれ紫色のパディングが付いている1つのマイクロスワブを置く。
- 今、濡れたガーゼで腹部を保護します。
- 手術当日、2 μLの細胞トレーサーを1 mLのリン酸緩衝生理食塩水(PBS)にピペッティングして溶解する。
- 混合物を、27-1/2 G(0.4 x 13 mm)の滅菌カニューレを取り付けた1mLシリンジに移す。
メモ: 手順 2.5 および 2.6 の実行中は、光が当たらないように注意してください。 - 手術室の照明を消します。顕微鏡下を見ながら、マイクロ鉗子を用いて大動脈の中央腹部に一点注射を行い、ヘパリン処理した0.9%生理食塩水1mLを注意深く注入する。
- 細胞トレーサーを慎重に注入し (ビデオ1)、 すぐに手術用顕微鏡の電源も切ってください。再び、濡れたガーゼで腹部を保護します。
- 染料を少なくとも15分間インキュベートさせます。潜伏期間の後、顕微鏡と手術室の照明をオンにします。
- 動脈瘤の縦動脈切除術および縫合を、他の箇所11に記載されているように行う。
- 微小鉗子とマイクロハサミを使用して動脈切除術を行い、その長さが収穫された動脈瘤の直径の平均になるようにします(ステップ1.3)。正しい長さを確保するために、動脈瘤を大動脈の横に置いてから関節切除術を行います。非吸収性の10-0縫合糸を用いて8〜10本のシングルステッチで動脈瘤を縫合し、ヘパリン化生理食塩水で遠位的に開始する一時的なクランプを慎重に除去する。傷口を層状に閉じます。注目すべきは、1cmのコイルパッキング密度を使用してください。
注:コイルまたはステント注入の技術は、他の場所8,10で説明されています。
- 微小鉗子とマイクロハサミを使用して動脈切除術を行い、その長さが収穫された動脈瘤の直径の平均になるようにします(ステップ1.3)。正しい長さを確保するために、動脈瘤を大動脈の横に置いてから関節切除術を行います。非吸収性の10-0縫合糸を用いて8〜10本のシングルステッチで動脈瘤を縫合し、ヘパリン化生理食塩水で遠位的に開始する一時的なクランプを慎重に除去する。傷口を層状に閉じます。注目すべきは、1cmのコイルパッキング密度を使用してください。
3.術後フェーズモニタリングと鎮痛ケア
- 手術の終わりに、ブプレノルフィン0.05mg / kg、アチパメゾール0.75mg / kg、およびフルマゼニル0.2mg / kgのSC注射混合物で麻酔を逆転させる。手術を受けた各動物を清潔なケージに入れ、完全に目を覚まし、必要に応じて加熱ランプで暖めるまで回復させます。
- 3日間、1mg / kgメロキシカム(1日1回の注射または経口適用)およびブプレノルフィン(0.05mg / kgを1日4回)SCを投与し、一晩、同じ用量で飲料水中にブプレノルフィンを連続的に提供する:6mLブプレノルフィン0.3mg / mL、360mL飲料水、10mLの5%グルコース。
- 術直後の段階では、保護のために各動物を1つのケージに入れてください。24時間後に動物を再編成する。
- ラットがSC注射後に苦痛または攻撃的な行動を示す場合は、日中飲料水中にブプレノルフィンを投与する。
- ケージの床に柔らかい飼料を提供し、術後の摂食と回復をサポートします。
- 健康状態と痛みのスコアシートに従ってすべての動物を観察し、世話をしてください。
- 必要に応じて、レスキュー鎮痛SC(メロキシカム1mg / kgおよび0.05mg / kgブプレノルフィン)を投与する。
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Representative Results
合計31匹の動物が実験室の設定に含まれた:27匹のラットが最終的な統計分析に含まれた。4匹のラットが早死にした(死亡率12.9%)。術中、呼気膨満は、コイル処理(13.5μm±0.6)ラットと比較して、ステント(12.9μm±0.7)において有意に減少した(p = 0.03)。蛍光血管造影は、最終FUの終了時にラットごとに実施した。再灌流は6匹のコイル処理動物すべてで示されたが、再灌流は8匹のステント処理動物のうちわずか12.5%で観察された。
7日目と21日目のプールされたベースライン動脈瘤体積は、コイルまたはステント治療群間で有意に異ならなかった(脱細胞化(p = 0.9)動脈瘤でも生命性(p = 0.1)動脈瘤でも)。脱細胞化動脈瘤のプールされたFU容積は、ステント留置動脈瘤(p = 0.28)と比較してコイル状動脈瘤において有意でない動脈瘤成長を示し、ステント留置群よりも有意に大きい(60.1mm3±31.1mm3対20.5mm3±20.6mm3;p = 0.002)。
脱細胞化動脈瘤の新内膜における細胞トレーサー陽性細胞の量は、7日目のFUでステントまたはコイル処理群間で有意に異ならなかったが(p = 0.8)、21日目のFUのステントラットでは有意に高かった(図4;p = 0.04)。重要な動脈瘤縫合ラットでは、7日目(p=1.0)または21日目(図5)のいずれにおいても有意差は認められなかったFU(p=0.66)。7日目のFUでの脱細胞化動脈瘤では、コイル処理群と比較して有意に多くの細胞トレーサー陽性細胞がステント処理の血栓に残った(p=0.01)。この差は、7日目のFUで重要な動脈瘤では観察されなかった。脱細胞化のための細胞トレーサー陽性細胞の割合、ならびに7日目および21日目のFUのバイタルコイル状およびステント状動脈瘤については、表1を参照されたい。フォンビルブラント因子(F8)に対する対比染色は、各ラットの新内膜の内皮細胞において行った(図6)。
外科的処置の平均持続時間は、ステント群の154.1±30.2分(p = 0.001)と比較して、コイリング群では119.1±21.3分であった。動脈瘤縫合糸の縫合糸の数も、コイル(15.6 ± 2.9ステッチ)とステント群(11.3 ± 1.1)で有意に異なっていた(p = 0.000002)。
図1:実験設定のフローチャート。 合計35匹の動物を手術し、コイリング群またはステント留置群に無作為化した。ステント群の2匹の動物は、術直後の経過で死亡した。 この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。
図2:コイルおよびステント塞栓術中の動脈瘤の術中写真。 (A)は、腹部ラット大動脈に縫合された側壁 - 動脈瘤(#)を描いている(*)。動脈瘤縫合を完了するために最後の単一のステッチを行う前に動脈瘤に導入されたコイル装置に注意してください。関節切除術の左側にあるピンクがかった染色(矢印)に注意し、細胞トレーサーの正しい分布を示す。(B) Aと同じ設定で、既にその場 にあるステント装置を示す。 この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。
図3:31匹の動物における巨視的死後測定。 動脈瘤容積(mm3)は、移植前およびフォローアップ時に文書化され、y軸に沿って表された。(A)ベースライン(脱細胞化)、(B)フォローアップ(脱細胞化)、(C)ベースライン(バイタル)、(D)フォローアップ(バイタル)。7 日目と 21 日目のデータがプールされます。** p < 0.01.値は、四分位範囲を持つ中央値として表されます。 この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。
図4:21日目におけるステント処理された脱細胞化動脈瘤の例示的な画像。 右、モノクローナル抗α-SMA、細胞枯渇性動脈瘤(倍率2倍)の画像概要が示されている。スケールバー = 150 μm。左、DAPIで対比染色。赤血球は、(A)動脈瘤壁における細胞トレーサー陽性、(B)血栓内、(C)新内膜における残留染色されたが退色した細胞トレーサー陽性細胞、および(D)隣接する血管複合体においてである。スケールバー = 100 μm (A-D)。一本矢印は動脈瘤壁を、二重矢印は親動脈を示す。略語:DAPI=4',6-ジアミジノ-2-フェニルインドール;α-SMA = α-平滑筋アクチン。この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。
図5:21日目におけるコイル処置された重要な動脈瘤の例示的な画像。右側に、モノクローナル抗α-SMA、細胞リッチ動脈瘤(倍率2倍)の画像概要が示されている;スケールバー = 150 μm。左側は、DAPIで対比染色されています。赤血球は、動脈瘤壁における細胞トレーサー陽性(A)、(B)血栓内、(C)新内膜における複数の陽性細胞、および(D)隣接する血管複合体における細胞トレーサー陽性である。スケールバー = 100 μm (A-D)。一本矢印は動脈瘤壁を、二重矢印は親動脈を示す。略語:DAPI=4',6-ジアミジノ-2-フェニルインドール;α-SMA = α-平滑筋アクチン。この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。
図6:F8染色から40倍の倍率を示す 。 #は血栓形成を、*は新内膜を、および§は動脈瘤オリフィスの下の内腔側を描写する。なお、ネオインチマの内腔層における紫色染色として示した内皮層形成。スケールバー = 175 μm。 この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。
| ダピ/CM-ディル染料(%) | コイル | ステント | |||
| 7日目 | 21日目 | 7日目 | 21日目 | ||
| 脱細胞化パウチ | ネオインティマ | 68.00% | 7.70% | 72.20% | 34.30% |
| 親動脈 | 75.50% | 10.50% | 76.50% | 35.60% | |
| 血栓 | 7.50% | 5.50% | 25.20% | 8.30% | |
| 動脈瘤壁 | 12.20% | 8.50% | 11.70% | 9% | |
| バイタルポーチ | ネオインティマ | 56.70% | 11.50% | 58.20% | 15.00% |
| 親動脈 | 60.00% | 24.20% | 81.50% | 26.00% | |
| 血栓 | 62.00% | 26.20% | 71.20% | 23.70% | |
| 動脈瘤壁 | 13.20% | 10.20% | 13.50% | 11.60% |
表1:新内膜、親動脈、血栓、および動脈瘤壁における細胞トレーサー陽性細胞の割合。 値は、7日目および21日目のコイルおよびステント治療用の脱細胞化およびバイタルパウチのパーセンテージとして描かれる。略語:DAPI=4',6-ジアミジノ-2-フェニルインドール。
ビデオ1:ラット大動脈の腹部への細胞トレーサー注射。 この技術は、クランプされたラット大動脈への一点注射を用いて行われる。 このビデオをダウンロードするには、ここをクリックしてください。
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Discussion
この研究は、新内膜形成が動脈瘤複合体の親動脈を起源とする内皮細胞を介して媒介されるが、重要な動脈瘤における動脈瘤壁に由来する細胞の動員によって支持されることを実証する。それにもかかわらず、動脈瘤治癒における循環前駆細胞の役割は依然として議論の余地がある12,13。全体として、31匹の雄ルイスラットがこの調査に含まれていた。早死にしたのはわずか4人(死亡率12.9%)。
その後の内皮間接触を促進する外科的クリッピングとは対照的に、血管内治療の成功は遅延した生物学的応答に依存する。流れ転換、生理活性血管内デバイス、または管腔内細胞ベースの療法などの新しく開発された技術は、血管内治療デバイス14、15に関して注目に値する。この文脈において、成功した動脈瘤根絶における治療の成功は、動脈瘤壁自体からの生物学的応答と相加的に関連していることを示す証拠5、16、17。
最近の研究では、血栓組織と新内膜形成が血管内療法後の動脈瘤治癒における同時プロセスであることが示唆されている。動脈瘤治癒に関与する両方のプロセスは、動脈瘤複合体の隣接する血管および動脈瘤壁自体から細胞を移動させることに依存する。さらに、両方のプロセスは、コイルまたはステントなどの血管内デバイスの存在によって促進される。Grüterらが実証したように、5 血栓組織細胞は、両方のタイプの血管内治療アプローチにおいて、主に隣接する血管に由来する。ここで、コイル処理動脈瘤における新内膜形成は、主に血管壁からの細胞移動に依存しているが、隣接する血管は、ステント処理動脈瘤における一次ドナーとして役立った。
ヘルシンキラット顕微手術側壁動脈瘤モデルを用いた研究課題の確立と拡大における共通の糸は、長年にわたって観察することができた。第一に、脱細胞化され、したがって、変性動脈瘤は、細胞が豊富な重要な動脈瘤よりも成長および破裂を起こしやすい9。さらに、コイル治療は、高度に変性したものよりもバイタルパウチによる動脈瘤治療においてより多くの成功を示した8。また、細胞移植は、高度に変性した動脈瘤14においても十分な動脈瘤治癒をもたらした。この動脈瘤モデルにおける異なる血管内デバイスを比較すると、ステント治療はコイル治療単独よりも明らかに優れていた11。したがって、親動脈および動脈瘤壁5からのコイル状動脈瘤およびステント状動脈瘤における異なる細胞動員様式を評価すると、新内膜形成が主に親動脈からの内皮細胞、動脈瘤壁からの細胞、または循環前駆細胞によって引き起こされているかどうかという主要な疑問が残る。新内膜形成を引き起こす循環前駆細胞に関する最近の知見は、議論の余地がある12,13,15,18。
以前に報告されたように、動脈瘤の成長、血栓形成、および壁の炎症に対するエストロゲンの交絡効果を避けるために、雄ラットのみがこのシリーズに含まれた19。蛍光血管造影20 とバイタルサインモニタリングによる高度なマルチモーダルモニタリングに加えて、特定の細胞トレーサーを使用して親動脈を標識し、血流中の循環細胞に由来する細胞を、隣接する細胞の真の遊走に由来する細胞から区別した。それにもかかわらず、内皮細胞のシグナル強度が時間と細胞分裂とともにわずかに衰退することを排除することはできませんが、研究はこれらの時点(7日目および21日目)における筋線維芽細胞の強いシグナル強度を示しています14。最後に、この動脈瘤モデルは、動脈瘤21の側壁星座によって大きく影響される自発的血栓症または動脈瘤治癒の速度などの血行動態およびその後の生物学的プロセスを使用した。
これらの知見で実証されているように、動脈瘤複合体の隣接する血管が新内膜を形成する上で重要な細胞源として役立つことは明らかである。これらの知見は、Kallmesらによって最近発表された結果と強く一致しており、支柱の厚さがフローダイバータにおける壁配置の決定因子でもあり、これが効果的な内皮化の重要な推進力であることを示している。ここで、支柱の厚さを増加させることは、マラポーションの確率を減少させ、親動脈壁との接触を改善し、したがって、支柱22を介した細胞再構成を最適化する。脱細胞化動脈瘤を有するラットでは、21日目にステント留保群において、同時時点でコイル状群よりも有意に高い量の細胞トレーサー陽性内皮細胞が観察された(表1)。
この知見は、高度に変性した動脈瘤においても親動脈の細胞が豊富な領域に適用されるステントが、細胞運動の誘導構造として機能し、新内膜の内腔層の連続的な内皮内層形成を可能にし、進行性動脈瘤治癒を提供するという事実に起因する可能性がある。加えて、FUの7日目のステント留置およびコイリングを比較すると、ステントを張られた動物の血栓において、コイル状のものよりも有意に高い量の細胞トレーサー陽性細胞が観察された。したがって、合理的な説明は、ステント支柱が血栓内の隣接する血管からの細胞遊走を容易に促進することである。コイリングとステント留置を比較した生命動脈瘤では、21日後の新内膜でも7日目の血栓形成でも、細胞トレーサー陽性細胞に有意差は認められなかった。以前の知見5に沿って、これは健康な血管壁における細胞動員を介した新内膜形成の支持に起因する可能性がある。
脱細胞化またはバイタルコイル状およびステント状動脈瘤における21日後の血栓中の細胞トレーサー陽性細胞の量に有意差がないのは、新内膜がほぼ完全に密封されたためである23。したがって、ステントを介しても、血栓への細胞遊走はもはや不可能である。ステント移植を行う際に考慮されるべき臨界点は、ステント適用中の医原性血管破裂の可能性、または関節切除術の領域における臨界狭窄形成、下肢における虚血発症の可能性を含む。虚血を防ぐために、ステント移植および縫合関節切除術後の医原性狭窄を回避するのに十分な大きさのステントの挿入のために、血管分岐部の隣の動脈切除部位を選択する。さらに、閉鎖前に、この領域をヘパリン化生理食塩水で洗い流して、任意の血栓形成成分の存在による任意の潜在的な塞栓の遠位輸送を最小限に抑える。
これらの処置に必要な材料は、通常、非常に費用がかかる稀であり、その入手可能性は、脳神経外科の若い居住者にとって極めて重要である24,25。しかし、このモデルから得られた豊富な情報に加えて、この手術を実践することは手術スキルの向上に役立ちます。
結論として、ヘルシンキラット顕微手術側壁動脈瘤モデルにおける血管内処置動脈瘤の生物学的治癒応答は、隣接する血管複合体からの細胞遊走に依存する。それはさらに、重要で健康な動脈瘤壁からの細胞の動員によって支持される。しかし、脱細胞化およびしたがって高度に変性した動脈瘤では、親細胞が豊富な動脈は、隣接する細胞が豊富な組織を動脈瘤オリフィスに接続するステントなどの血管内装置によって促進される新内膜の形成のための最も重要な細胞源である。この知見を臨床現場に応用するために、高度に変性した動脈瘤を、細胞が豊富な健康な血管領域に配置された足場を介して治療することができる。コイル塞栓術だけでも、ほとんどが健康な血管壁を有する動脈瘤には十分かもしれない。
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Disclosures
著者らは、提示された研究の設計と実施について単独で責任を負い、競合する利益を宣言しません。
Acknowledgments
著者らは、長期の動物衛生の献身的な監督に対して、Alessandra Bergadano、DVM、PhDに感謝している。この研究は、研究評議会、カントンスピタル・アーラウ、アーラウ、スイス、スイス国立科学財団SNF(310030_182450)の研究資金によって支援されました。
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 3-0 resorbable suture | Ethicon Inc., USA | VCP428G | |
| 4-0 non-absorbable suture | B. Braun, Germany | G0762563 | |
| 6-0 non-absorbable suture | B. Braun, Germany | C0766070 | |
| 9-0 non-absorbable suture | B. Braun, Germany | G1111140 | |
| Atipamezol | Arovet AG, Switzerland | ||
| Bandpass filter blue | Thorlabs | FD1B | any other |
| Bandpass filter green | Thorlabs | FGV9 | any other |
| Bipolar forceps | any other | ||
| Bicycle spotlight | any other | ||
| Board (20 x 10 cm) | any other | ||
| Buprenorphine | Indivior, Switzerland | 1014197 | |
| Camera | Sony NEX-5R, Sony, Tokyo, Japan | ||
| Cannula (27-1/2 G) | any other | ||
| Cell count software | Image-J version 1.52n, U.S. National Institutes of Health, Bethesda, Maryland, USA, https://imagej.nih.gov/ij/ | ||
| CellTracker CM-Dil dye | ThermoFisher SCIENTIFIC, USA | C7000 | |
| Coil-Device | Styker, Kalamazoo, MI, USA | 2 cm of Target 360 TM Ultra, 2-mm diameter | |
| Desinfection | any other | ||
| Eye-lubricant | any other | ||
| Fentanyl | Sintetica, S.A., Switzerland | 98683 | any generic |
| Flumazenil | Labatec-Pharma, Switerzland | ||
| Fluoresceine | Curatis AG | 5030376 | any generic |
| Fluorescence microscope | Olympus BX51, Hamburg, Germany; Cell Sens Dimension Imaging software v1.8 | ||
| Foil mask | any other | ||
| Glucose (5%) | any other | ||
| Heating pad | Homeothermic Control Unit, Harvard, Edenbridge, England | any other | |
| Isotonic sodium chloride solution (0.9%) | Fresenius KABI | 336769 | any generic |
| Isoflurane | any generic | ||
| Longuettes | any other | ||
| Meloxicam | Boehringer Ingelheim | P7626406 | any generic |
| Medetomidine | Virbac, Switzerland | QN05CM91 | |
| Micro needle holder | any other | ||
| Midazolam | Roche, Switzerland | ||
| Monitoring-system | Starr Life Sciences Corp., 333 Allegheny Ave, Oakmont, PA 15139, United States | ||
| Needle holder | any other | ||
| O2-Face mask | any other | ||
| Operation microscope | OPMI, Carl Zeiss AG, Oberkochen, Germany | any other | |
| Oxygen | any other | ||
| Rectal temperature probe | any other | ||
| Scalpell | Swann-Morton | 210 | any other |
| Small animal shaver | any other | ||
| Smartphone | any other | ||
| Sodium dodecyl sulfate (0.1%) | Sigma-Aldrich | 11667289001 | |
| Soft feed | Emeraid Omnivore | any generic | |
| Soft tissue forceps | any other | ||
| Soft tissue spreader | any other | ||
| Stainless steel sponge bowls | any other | ||
| Stent-Device | Biotroni, Bülach, Switzerland | modified magmaris device, AMS with polymer coating, 6-mm length, 2-mm diameter | |
| Sterile micro swabs | any other | ||
| Straight and curved microforceps | any other | ||
| Straight and curved microscissors | any other | ||
| Straight and curved forceps | any other | ||
| Surgery drape | any other | ||
| Surgical scissors | any other | ||
| Syringes 1 mL, 2 mL, and 5 mL | any other | ||
| Tape | any other | ||
| Vascular clip applicator | B. Braun, Germany | FT495T | |
| Yasargil titan standard clip (2x) | B. Braun Medical AG, Aesculap, Switzerland | FT242T | temporary |
References
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