Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Перевязка левой коронарной артерии: хирургическая мышиная модель инфаркта миокарда

Published: August 9, 2022 doi: 10.3791/64387

Summary

Здесь представлена хирургическая процедура перманентной перевязки левой коронарной артерии у мышей. Эта модель может быть использована для исследования патофизиологии и связанной с ней воспалительной реакции после инфаркта миокарда.

Abstract

Ишемическая болезнь сердца и последующий инфаркт миокарда (ИМ) является одной из ведущих причин смертности в Соединенных Штатах и во всем мире. Для изучения патофизиологических изменений после инфаркта миокарда и разработки будущих методов лечения необходимы исследовательские модели ИМ. Постоянная перевязка левой коронарной артерии (LCA) у мышей является популярной моделью для исследования сердечной функции и ремоделирования желудочков после ИМ. Здесь мы описываем менее инвазивную, надежную и воспроизводимую хирургическую модель инфаркта миокарда мыши путем постоянного перевязки LCA. Наша хирургическая модель состоит из легко обратимой общей анестезии, эндотрахеальной интубации, не требующей трахеотомии, и торакотомии. Электрокардиография и измерение тропонина должны быть выполнены для обеспечения инфаркта миокарда. Эхокардиография на 28-й день после инфаркта миокарда позволит определить функцию сердца и параметры сердечной недостаточности. Степень фиброза сердца можно оценить с помощью трихромного окрашивания Массона и МРТ сердца. Эта модель инфаркта миокарда полезна для изучения патофизиологических и иммунологических изменений после инфаркта миокарда.

Introduction

Сердечно-сосудистые заболевания являются одной из основных проблем общественного здравоохранения, которая ежегодно уносит 17,9 миллиона жизней, что составляет 31 процент глобальнойсмертности1. Наиболее распространенным типом сердечно-сосудистой аномалии является ишемическая болезнь сердца, а инфаркт миокарда (ИМ) является одним из основных проявлений ишемической болезни сердца2. ИМ обычно вызывается тромботической окклюзией коронарной артерии из-за разрыва уязвимой бляшки3. Возникающая в результате ишемия вызывает глубокие ионные и метаболические изменения в пораженном миокарде, а также быстрое снижение систолической функции. Инфаркт миокарда приводит к гибели кардиомиоцитов, что в дальнейшем может привести к дисфункции желудочков и сердечной недостаточности4.

Исследования ИМ у пациентов ограничены из-за дефицита тканей, полученных от пациентов с ИМ5. Таким образом, мышиные модели инфаркта миокарда полезны как для изучения механизмов заболевания, так и для разработки потенциальных терапевтических мишеней. Доступные в настоящее время мышиные модели инфаркта миокарда включают модели необратимой ишемии (LCA и методы абляции) и модели реперфузии (ишемия/реперфузия, I/R)6. Постоянное перевязка левой коронарной артерии (LCA) у мышей является наиболее часто используемым методом и имитирует патофизиологию и иммунологию ИМ у пациентов 7,8,9. Постоянный инфаркт миокарда также может быть вызван методами абляции, которые связаны с электрическим повреждением или криотравмой. Методы абляции способны генерировать инфаркт одинакового размера в точном месте10. С другой стороны, образование рубцов, морфология инфаркта и молекулярные сигнальные механизмы могут варьироваться в зависимости от методов абляции10,11. Метод I/R у мышей является еще одной важной моделью ИМ, поскольку он представляет собой клинический сценарий реперфузионной терапии12. Модель I/R связана с такими проблемами, как переменный размер инфаркта, трудности в различении реакций первоначальной травмы и реперфузия6.

Несмотря на широкое распространение, методы лигирования LCA связаны с низкой выживаемостью и послеоперационной болью13. Этот протокол демонстрирует мышиную хирургическую модель ИМ лигирования LCA, которая включает подготовку и интубацию мышей, лигирование LCA, послеоперационный уход и валидацию MI. Вместо использования инвазивной трахеотомии14 в этом методе используется эндотрахеальная интубация. Животное интубируют, освещая ротоглотку с помощью ларингоскопа, что делает процедуру проще, безопаснее и менее травматичной15. Мышь находится на аппарате искусственной вентиляции легких и под изофлурановой анестезией на протяжении всей процедуры. Кроме того, эхокардиография и трихромное окрашивание Массона выполняются для оценки функции сердца и фиброза сердца после ИМ соответственно. В целом, этот метод обеспечивает надежную и воспроизводимую хирургическую мышиную модель ИМ, которая может быть использована для изучения патофизиологии и воспаления после ИМ.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Настоящий протокол исследования был рассмотрен и одобрен Институциональным комитетом по уходу за животными и их использованию (IACUC) Университета Питтсбурга. Для этих экспериментов использовали восемь (фиктивные n = 4 и MI n = 4) 1-летних самок мышей C57BL/6J весом 24-30 г. Приблизительно 100% и, по крайней мере, 80% мышей выжили в первые 24 ч и 28 дней соответственно.

1. Подготовка и эндотрахеальная интубация мышей

  1. Разогрейте стерилизатор (см. Таблицу материалов) до 250 °C и поместите в него автоклавные хирургические инструменты на несколько минут.
  2. Обезболивают мышей в индукционной камере 3% изофлураном и 1 л/мин кислорода в течение 5 мин.
  3. Обеспечьте глубину анестезии в мыши, проверив реакцию на твердое защемление пальца ноги.
  4. Взвесьте мышь, чтобы оценить дозировку предоперационного обезболивающего препарата бупренорфина (0,1 мг / кг). Вводят препарат интраперитонально.
  5. Подстригите шерсть с левой стороны грудной клетки с помощью электрической бритвы.
  6. После этого трижды продезинфицируйте место операции повидон-йодом и 70% этанолом.
  7. Поместите мышь в положение лежа на спине на наклонной доске. Закрепите голову и конечности мыши с помощью резинки, прикрепленной к верхним резцам и скотча соответственно. Нанесите стерильную офтальмологическую смазку на глаза, чтобы предотвратить сухость под наркозом.
  8. Откройте челюсть и осторожно вытащите язык из ротовой полости.
  9. Определить отверстие гортани можно, осветив ротоглотку с помощью ларингоскопа (см. Таблицу материалов).
  10. Отрежьте около 0,5 см от иглы катетера 24 G и вставьте тупую иглу в пластиковый щиток. Направьте тупую иглу с пластиковым щитком в трахею. Выньте иглу, оставив пластиковый щиток в трахее.
  11. Установите аппарат ИВЛ (см. Таблицу материалов) на частоту дыхания 137 ударов в минуту (оптимизированную для мышей, используемых в этом исследовании) и дыхательный объем 0,18 куб. см. Подсоедините респираторные трубки к экрану катетера и подтвердите правильность интубации, посмотрев на синхронизированное движение грудной клетки с аппаратом искусственной вентиляции легких.
  12. Отсоедините респираторную трубку от щитка катетера и поместите животное в положение лежа на спине на предварительно нагретую хирургическую доску с регулируемой температурой. Снова подключите мышь к аппарату искусственной вентиляции легких.

2. Постоянная перевязка левой коронарной артерии

  1. Продезинфицируйте место операции повидон-йодом и 70% спиртом. Наложите стерильную простыню с отверстием размером с четверть в центре, чтобы закрепить место операции. Аккуратно поднимите кожу с помощью щипцов и сделайте небольшой (1,5-2 см) поперечный разрез кожи вдоль линии между большой и малой мышцами левой грудной мышцы с помощью хирургических ножниц.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Для разреза использовались ножницы, поскольку они обеспечивают необходимый контроль над глубиной и направлением разреза.
  2. Отделите нижележащие грудные мышцы щипцами и рассекающими ножницами. Мышцы были разделены с помощью ретракторов, прикрепленных к эластичным лентам.
  3. Сделайте разрез в третьем межреберье микроножницами, следуя естественному углу грудной клетки. На этом этапе необходимо проявлять крайнюю осторожность, чтобы предотвратить повреждение сердца и легких.
  4. Осторожно растяните ребра с помощью ретракторов, чтобы обнажить левый желудочек. Отодвиньте перикардиальный жир в сторону и найдите LCA, который проходит от края левого предсердия к вершине сердца.
  5. Пас 8-0 нейлоновый шов под LCA с помощью иглодержателя. Перевязывайте LCA двойным узлом, за которым следует второй узел (модифицированный узел хирурга).
    ПРИМЕЧАНИЕ: Побледнение нижнего левого желудочка подтверждает успешную перевязку LCA. В дополнение к этому, измерение тропонина, мониторинг ЭКГ (подъем сегмента ST), эхо / in vivo кардиоуправляемая МРТ или микро-КТ также рекомендуются для подтверждения сопоставимых поражений ИМ.
  6. Извлеките ретракторы и вставьте иглу катетера 22 G в грудную полость. Извлеките иглу, оставив кончик пластикового щитка в грудной полости. Закройте грудную клетку нейлоновым швом 4-0.
  7. Подсоедините шприц к пластиковому экрану 22 G и медленно удалите лишний воздух, попавший в грудную полость, осторожно нажимая на грудную клетку, чтобы установить отрицательное давление воздуха. Снимите пластиковый щиток.
  8. Закройте кожу нейлоновым швом 4-0.
  9. Отключите подачу изофлурана. На этом этапе мышь находится на аппарате искусственной вентиляции легких, подающем кислород.

3. Послеоперационный уход

  1. Выключите аппарат искусственной вентиляции легких, как только начнется спонтанное дыхание.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Процедура занимает около 30-35 минут на животное с момента подготовки мышей до этого этапа.
  2. Держите мышь под нагревательной лампой и следите за ней, пока она не проснется. Животное не следует оставлять без присмотра до тех пор, пока оно не придет в сознание, достаточное для поддержания лежачего положения на грудине.
  3. После операции поместите животное в отдельную клетку и верните его в исходную клетку с другими животными только после того, как оно полностью выздоровеет.
  4. Ежедневно следите за мышью на наличие любых признаков боли или дискомфорта.
  5. Продолжайте внутрибрюшинную инъекцию бупренорфина (0,1 мг / кг) каждые 6-8 часов в течение дополнительных 2 дней после операции.

4. Эхокардиографическая оценка

ПРИМЕЧАНИЕ: Эхокардиография была выполнена для оценки параметров сердечной недостаточности на 28-й день после ИМ.

  1. Через 28 дней после операции обезболите мышей 3% изофлураном и 1 л / мин кислорода, нанесите стерильную офтальмологическую смазку на глаза и удалите волосы на груди с помощью крема для удаления волос. Трижды продезинфицируйте область грудной клетки повидон-йодом и 70% этанолом.
  2. Закрепите анестезированных мышей на платформе визуализации (см. Таблицу материалов) в положении лежа на спине и поддерживайте постоянный уровень анестезии на протяжении всей процедуры, используя носовой конус, подключенный к анестезиологической системе (1% -2% изофлурана и 1 л / мин кислорода).
  3. Прикрепите четыре лапы к электродам ЭКГ электродным гелем (см. Таблицу материалов). Следите за температурой животного, вставляя ректальный зонд (см. Таблицу материалов).
  4. Нанесите сканирующий гель (см. Таблицу материалов) на грудную клетку, поместите датчик вертикально, опустите его на парастернальную линию (параллельно грудной клетке) и поверните на 35° против часовой стрелки, чтобы получить вид левого желудочка по длинной оси парастерна.
  5. Нажмите кнопку визуализации в B-режиме на программном обеспечении для визуализации (см. Таблицу материалов), чтобы получить полный вид сердца по длинной оси. Отрегулируйте размер и яркость затвора и сохраните изображения с помощью «Сохранить клип » или « Сохранить кадр» для последующих измерений16.
  6. Переключитесь в М-режим (motion-mode) и расположите ось М-режима на уровне сосочковой мышцы. Отрегулируйте размер ворот и нажмите кнопку «Пуск» в режиме M. Сохраните изображения с помощью Save Clip или Save Frame16,17.
  7. Поскольку процесс получения изображений в режиме 4D автоматизирован, перед получением данных убедитесь, что сигналы ЭКГ и дыхания активны (рис. 1).
  8. Начните получать данные в B-режиме. Откройте панель 4D-сканирования и запустите 3D-двигатель. Установите параметры изображения на панели 4D-сканирования и нажмите кнопку «Сканировать », чтобы начать сканирование. После просмотра изображений в 2D-представлении загрузите изображения в режим 4D с помощью кнопки «Загрузить в 4D ».

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

На рисунке 1 показаны репрезентативные активные сигналы ЭКГ и дыхания во время эхокардиографической оценки фиктивных (рис. 1А) и инфаркта миокарда (рис. 1Б). Проверка активных сигналов ЭКГ и дыхания важна перед получением эхокардиографических данных. На рисунке 2 показано эхокардиографическое измерение функциональных параметров сердца через 28 дней после лигирования LCA. На рисунке 2 показаны изображения в М-режиме вида парастернальной короткой оси фиктивных (рис. 2A) и MI (рис. 2B) сердец. На рисунке 2B показано дефектное движение стенки сердца после перевязки LCA. Показатели сердечной недостаточности, такие как увеличение массы ЛЖ (рис. ), снижение фракции выброса (рис. 2D) и снижение сердечного выброса (рис. 2Е), наблюдались в группе ИМ по сравнению с фиктивной группой.

Все животные были усыплены в соответствии со стандартными протоколами с использованием чрезмерной дозы газа CO2 . Сердца фиксировали и замораживали в смеси с оптимальной температурой резки (OCT). Трихромное окрашиваниеМассона 18 было выполнено для трех различных участков желудочков (нижнего, среднего и верхнего), а изображения были сделаны с использованием исследовательского слайд-сканера под 10-кратным увеличением для изучения степени сердечного фиброза. На рисунке 3 показано повышенное окрашивание коллагена (синий) в инфарктном сердце, что указывает на усиленный фиброз.

Figure 1
Рисунок 1: Активные сигналы ЭКГ и дыхания во время эхокардиографической оценки. Репрезентативные активные сигналы ЭКГ и дыхания во время эхокардиографической оценки мышей (А) фиктивного и (В) ИМ. Зеленый = сигналы ЭКГ, желтый = сигналы дыхания. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

Figure 2
Рисунок 2: Эхокардиографическая оценка функциональных параметров сердца после перевязки LCA на 28-й день после операции. Репрезентативные эхокардиографические изображения М-режима с парастернальной короткой осью (PSAX) мышей (A) и (B) MI. Оценка (C) массы левого желудочка (мг), (D) фракции выброса (%) и (E) сердечного выброса (мл/мин) фиктивных мышей и мышей с инфарктом миокарда. LVAW;d = толщина передней стенки левого желудочка в диастоле; LVAW;s = толщина передней стенки левого желудочка в систоле; LVPW;d = толщина задней стенки левого желудочка в диастоле; LVPW;s = толщина задней стенки левого желудочка при систоле; LVID;d = внутренний диаметр левого желудочка в диастоле; LVID;s = внутренний диаметр левого желудочка в систоле. Данные отображаются как среднее ± SD. * P < 0,05, ** P < 0,01, **** P < 0,0001. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

Figure 3
Рисунок 3: Оценка фиброза после перевязки LCA на 28-й день после операции. Репрезентативные изображения, показывающие трихромное окрашивание Массоном (А) фиктивного и (В) ИМ сердца через 28 дней после операции. Фиброзные области в инфарктном сердце характеризуются отложением коллагена и окрашиваются в синий цвет после трихромного окрашивания Массона. Масштабная линейка = 500 мкм. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Мышиная модель инфаркта миокарда набирает популярность в сердечно-сосудистых исследовательских лабораториях, и в этом исследовании описывается воспроизводимая и клинически значимая модель инфаркта миокарда. Этот протокол улучшает процесс лигирования LCA несколькими способами. Начнем с того, что следует избегать использования инъекционных предоперационных анестетиков, таких как ксилазин/кетамин или пентобарбиталнатрия 14,15. Использовалась только изофлурановая анестезия, которая помогает повысить выживаемость животных (>80% выживаемости через 28 дней после операции), свести к минимуму лекарственные осложнения и оказывает минимальное воздействие на сердце по сравнению с другими препаратами19. Однако изофлуран также замедляет работу сердца, хотя и в меньшей степени по сравнению с другими анестетиками20. Этот протокол включает менее инвазивную эндотрахеальную интубацию без трахеостомии21, что уменьшает послеоперационную боль и дискомфорт. Предыдущие исследования лигирования LCA у мышей рекомендовали сделать разрез в середине шеи, чтобы улучшить визуализацию эндотрахеальной интубации; Тем не менее, текущий протокол использует ларингоскоп вместо этого для освещения ротоглотки15. Lugrin et al. недавно продемонстрировали мышиную модель LCA MI без торакоцентеза14; Тем не менее, текущий протокол включает эффективный торакоцентез, который поможет удалить лишнюю кровь и воздух из грудной полости, предотвращая пневмоторакс19. Кроме того, в этом методе используется стерильная марля для остановки кровотечения вместо прижигателя, так как использование прижигателя для уменьшения кровотечения может привести к ятрогенным ожогам и может изменить показания воспаления21.

Одним из важнейших шагов в этой хирургической модели является идентификация и перевязка LCA. Расположение коронарной артерии может варьироваться в зависимости от штаммов мышей и генотипов9. В большинстве случаев артерия не видна под микроскопом. Опыт показывает, что перевязка ткани миокарда на 2-4 мм ниже края левого предсердия приводит к эффективному побледнению стенки левого желудочка. Кроме того, процедура может быть просто модифицирована, чтобы вызвать временную ишемию миокарда с последующей реперфузией (I/R) путем удаления лигирования22. Эта животная модель имитирует восстановление коронарного кровотока у пациентов с инфарктом миокарда после чрескожного коронарного вмешательства23,24. Поскольку модель постоянной окклюзии LCA отличается от модели I/R в нескольких аспектах, таких как размер инфарктной области, расположение инфаркта и инфильтрация воспалительных клеток, исследователи должны быть осторожны при выборе соответствующей модели в зависимости от исследования 7,14,25.

Существует несколько подходов для обеспечения успешного лигирования LCA и последующего развития ИМ. Наблюдение немедленного побледнения нижнего левого желудочка является самым ранним подтверждением успешного лигирования LCA. Кроме того, степень и локализацию инфаркта миокарда можно визуализировать, окрашивая все сердце синим цветом Эвана или 2,3,5-трифенилтетразолия хлоридом (TTC)26. Измерение циркулирующего сердечного тропонина может дополнительно подтвердить повреждение ткани миокарда21. Электрокардиография может быть использована в качестве неинвазивного метода подтверждения подъема сегмента ST после ИМ17. Степень фиброза сердца, связанного с инфарктом миокарда, можно оценить с помощью трихромного окрашивания Массона и МРТ сердца27,28,29. Эхокардиография может быть использована для оценки параметров сердечной недостаточности на 1-й и 28-й день после ИМ. Для изучения ремоделирования сердца после инфаркта миокарда можно использовать окрашивание трихомы Массона и эхокардиографию17. Также возможно использование кПЦР и иммуноблоттинга для дальнейшего исследования и подтверждения экспрессии генов и белков, участвующих в фиброзе, воспалении и сердечной недостаточности после ИМ14.

Основным ограничением лигирования LCA является высокая частота смертности, которая может быть вызвана послеоперационными нарушениями сердечного ритма, разрывом желудочков, кровоизлиянием, пневмотораксом и послеоперационным дискомфортом19,30. Тем не менее, успешный торакоцентез, сводящий к минимуму нецелевое повреждение тканей, а также надлежащий послеоперационный контроль боли и температуры могут помочь уменьшить смерть животного. Как и в случае с любой другой хирургической моделью, точная воспроизводимость является еще одним ограничением этой хирургической модели. Однако исследователи могут воспроизвести инфаркт миокарда, контролировать размер инфаркта и улучшить послеоперационную выживаемость с помощью строгой практики и опыта.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

У авторов нет конфликтов интересов, которые необходимо раскрывать.

Acknowledgments

Эта работа была поддержана грантами Национального института здравоохранения (R01HL143967, R01HL142629, R01AG069399 и R01DK129339), премией AHA за трансформационный проект (19TPA34910142), премией за инновационный проект AHA (19IPLOI34760566) и премией за инновационный проект ALA (IA-629694) (в PD).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
22 G catheter needle Exel INT 26741 Thoracentesis
24 G catheter needle Exel INT 26746 Endotracheal intubation
4-0 nylon suture Covetrus 29263 Suturing of muscles and skin
8-0 nylon suture S&T 3192 Ligation of LAD
Anesthetic Vaporizers Vet equip VE-6047 Anesthetic support
Animal physiology monitor Fujifilm VEVO 3100 Monitor heart rate,respiration rate and body temperature
Betadine solution PBS animal health 11205 Antispetic
Buprenorphine Covetrus 55175 Analgesic
Disecting microscope OMANO OM2300S-V7 Binocular
Electric razor Wahl 79300-1001M Shaving
Electrode gel Parker Laboratories W60698L Electrically conductive gel
Ethanol Decon Laboratories 22-032-601 Disinfectant
Forceps FST 11065-07 Stainless Steel
Gauze Curity CAR-6339-PK Sterile
Heat lamp Satco S4998 Post surgery care
Heating pad Kent scientific Surgi-M Temperature control
Hot Bead sterilizer Germinator 500 11503 Sterilization of surgical instrument
Isoflurane Covetrus 29405 Anesthesia
Masson’s trichrome staining kit Thermoscientific 87019 Measurement of cardiac Fibrosis
Micro Needle Holder FST 12500-12 Stainless Steel
Micro scissors FST 15000-02 Stainless Steel
Ophthalmic ointment Dechra Puralube Vet Sterile occular lubricant
Scanning Gel Parker Laboratories Aquasonic 100 Aqueous ultrasound transmission gel
Scissors FST 14060-11 Stainless Steel
Small Animal Laryngoscope Penn-Century Model LS-2-M Illuminating the oropharynx
Small animal ventilator Harvard apparatus 557058 Ventilator support
Surgical light Cole parmer 41723 Illuminator Width (in): 7
Vevo 3100 preclinical imaging platform Fujifilm VEVO 3100 Echocardiography
VevoLAB software Fujifilm VevoLAB 3.2.6 Echocardiography data analysis

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Virani, S. S., et al. Heart disease and stroke statistics-2021 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 143 (8), 254 (2021).
  2. Mendis, S., et al. World Health Organization definition of myocardial infarction: 2008-09 revision. International Journal of Epidemiology. 40 (1), 139-146 (2011).
  3. Frangogiannis, N. G. Pathophysiology of myocardial infarction. Comprehensive Physiology. 5 (4), 1841-1875 (2011).
  4. Smit, M., Coetzee, A., Lochner, A. The pathophysiology of myocardial ischemia and perioperative myocardial infarction. Journal of Cardiothoracic and Vascular Anesthesia. 34 (9), 2501-2512 (2020).
  5. Johny, E., et al. Platelet mediated inflammation in coronary artery disease with Type 2 Diabetes patients. Journal of Inflammation Research. 14, 5131 (2021).
  6. Martin, T. P., et al. Preclinical models of myocardial infarction: from mechanism to translation. British Journal of Pharmacology. 179 (5), 770-791 (2022).
  7. De Villiers, C., Riley, P. R. Mouse models of myocardial infarction: comparing permanent ligation and ischaemia-reperfusion. Disease Models & Mechanisms. 13 (11), (2020).
  8. Vasamsetti, S. B., et al. Apoptosis of hematopoietic progenitor-derived adipose tissue-resident macrophages contributes to insulin resistance after myocardial infarction. Science Translational Medicine. 12 (553), (2020).
  9. Fernandez, B., et al. The coronary arteries of the C57BL/6 mouse strains: implications for comparison with mutant models. Journal of Anatomy. 212 (1), 12-18 (2008).
  10. van Amerongen, M. J., Harmsen, M. C., Petersen, A. H., Popa, E. R., van Luyn, M. J. Cryoinjury: a model of myocardial regeneration. Cardiovascular Pathology. 17 (1), 23-31 (2008).
  11. Lam, N. T., Sadek, H. A. Neonatal heart regeneration: comprehensive literature review. Circulation. 138 (4), 412-423 (2018).
  12. Heusch, G., Gersh, B. J. The pathophysiology of acute myocardial infarction and strategies of protection beyond reperfusion: a continual challenge. European Heart Journal. 38 (11), 774-784 (2017).
  13. Srikanth, G., Prakash, P., Tripathy, N., Dikshit, M., Nityanand, S. Establishment of a rat model of myocardial infarction with a high survival rate: A suitable model for evaluation of efficacy of stem cell therapy. Journal of Stem Cells & Regenerative Medicine. 5 (1), 30-36 (2009).
  14. Lugrin, J., Parapanov, R., Krueger, T., Liaudet, L. Murine myocardial infarction model using permanent ligation of left anterior descending coronary artery. Journal of Visualized Experiments. (150), e59591 (2019).
  15. Muthuramu, I., Lox, M., Jacobs, F., De Geest, B. Permanent ligation of the left anterior descending coronary artery in mice: a model of post-myocardial infarction remodelling and heart failure. Journal of Visualized Experiments. (94), e52206 (2014).
  16. Pistner, A., Belmonte, S., Coulthard, T., Blaxall, B. C. Murine echocardiography and ultrasound imaging. Journal of Visualized Experiments. (42), e2100 (2010).
  17. Li, L., et al. Assessment of cardiac morphological and functional changes in mouse model of transverse aortic constriction by echocardiographic imaging. Journal of Visualized Experiments. (112), e54101 (2016).
  18. Vasamsetti, S. B., et al. Sympathetic neuronal activation triggers myeloid progenitor proliferation and differentiation. Immunity. 49 (1), 93-106 (2018).
  19. Reichert, K., et al. Murine left anterior descending (LAD) coronary artery ligation: an improved and simplified model for myocardial infarction. Journal of Visualized Experiments. (122), e55353 (2017).
  20. Alwardt, C. M., Redford, D., Larson, D. F. General anesthesia in cardiac surgery: a review of drugs and practices. The Journal of Extra-Corporeal Technology. 37 (2), 227-235 (2005).
  21. Kolk, M. V., et al. LAD-ligation: a murine model of myocardial infarction. Journal of Visualized Experiments. (32), e1438 (2009).
  22. Wu, Y., Yin, X., Wijaya, C., Huang, M. -H., McConnell, B. K. Acute myocardial infarction in rats. Journal of Visualized Experiments. (48), e2464 (2011).
  23. Kalogeris, T., Baines, C., Krenz, M., Korthuis, R. Chapter six-cell biology of ischemia/reperfusion injury. International Review of Cell and Molecular Biology. , Academic Press. 229-317 (2012).
  24. Scofield, S. L., Singh, K. Confirmation of myocardial ischemia and reperfusion injury in mice using surface pad electrocardiography. Journal of Visualized Experiments. (117), e54814 (2016).
  25. Yan, X., et al. Temporal dynamics of cardiac immune cell accumulation following acute myocardial infarction. Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 62, 24-35 (2013).
  26. Xu, Q., et al. Protective effects of fentanyl preconditioning on cardiomyocyte apoptosis induced by ischemia-reperfusion in rats. Brazilian Journal of Medical and Biological Research. 50 (2), 5286 (2017).
  27. Leuschner, F., et al. Rapid monocyte kinetics in acute myocardial infarction are sustained by extramedullary monocytopoiesis. Journal of Experimental Medicine. 209 (1), 123-137 (2012).
  28. Leuschner, F., et al. Silencing of CCR2 in myocarditis. European Heart Journal. 36 (23), 1478-1488 (2015).
  29. Dutta, P., et al. E-selectin inhibition mitigates splenic HSC activation and myelopoiesis in hypercholesterolemic mice with myocardial infarction. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 36 (9), 1802-1808 (2016).
  30. Jiang, C., et al. A modified simple method for induction of myocardial infarction in mice. Journal of Visualized Experiments. (178), e63042 (2021).

Tags

Медицина выпуск 186 инфаркт миокарда ишемия левая коронарная артерия эндотрахеальная интубация лигирование LCA
Перевязка левой коронарной артерии: хирургическая мышиная модель инфаркта миокарда
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Johny, E., Dutta, P. Left CoronaryMore

Johny, E., Dutta, P. Left Coronary Artery Ligation: A Surgical Murine Model of Myocardial Infarction. J. Vis. Exp. (186), e64387, doi:10.3791/64387 (2022).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter