Summary
Her præsenterer vi en protokol, der tilbyder hurtige, nemme og pålidelige blodindsamlingsalternativer til rottemodellen. Vi beskriver tre forskellige blodprøvetagningsmetoder i henhold til konteksten: halevenepunktur under anæstesi eller på et bevidst dyr og dorsal penisvenepunktur under anæstesi.
Abstract
Blodprøver er nødvendige i de fleste eksperimentelle dyredesign for at vurdere forskellige hæmatologiske parametre. Dette papir præsenterer to procedurer for blodindsamling hos rotter: lateral halevenepunktur og dorsal penisvenepunktur, som giver betydelige fordele i forhold til andre tidligere beskrevne teknikker. Denne undersøgelse viser, at disse to procedurer muliggør hurtig prøveudtagning (under 10 min) og giver tilstrækkelige blodvolumener til de fleste analyser (202 μL ± 67,7 μL). Den dorsale penis vene punktering skal udføres under anæstesi, mens lateral hale vene punktering kan udføres på et bevidst, fastholdt dyr.
At skifte disse to teknikker muliggør derfor blodtrækning i enhver situation. Selv om det altid anbefales, at en operatør bistås under en procedure for at sikre dyrevelfærd, kræver disse teknikker kun en enkelt operatør, i modsætning til de fleste blodprøvetagningsmetoder, der kræver to. Mens disse tidligere beskrevne metoder (f.eks. halspind, subklavisk veneblodtrækning) kræver omfattende forudgående træning for at undgå skade på eller død af dyret, er halevene og dorsal penisvenepunktur sjældent dødelig. Af alle disse grunde og afhængigt af sammenhængen (f.eks. for undersøgelser, der omfatter hanrotter i den perioperative eller umiddelbare postoperative periode for dyr med tynde haleårer), kan begge teknikker anvendes skiftevis for at muliggøre gentagne blodudtrækninger.
Introduction
Blodprøvetagning er nødvendig for de fleste dyreforsøg, både in vivo og in vitro. Hos rotter, da hyppigheden og mængden af blodprøvetagning kan være betydelig, er det nyttigt at have forskellige alternativer til indsamling. Forskellige metoder er blevet beskrevet i tidligere undersøgelser.
De mest almindeligt anvendte teknikker er halevenepunktur og saphenøs veneblodtrækning. Haleveneprøveudtagning er velegnet til alle rottestammer. Med korrekt træning er proceduren enkel at udføre og forårsager minimal nød for dyret1. På samme måde er saphenøs veneblodtrækning, forudsat at det gøres korrekt, også en hurtig og enkel indsamlingsmetode. Ingen af metoderne kræver anæstesi, og begge giver mulighed for gentagne trækninger af små mængder blod. Imidlertid giver saphenøs venepunktur normalt et lavere blodvolumen1 og kræver tilstedeværelse af to personer for at efterlade et bagben udsat for punktering2.
Hvis der skal indsamles store mængder blod fra et enkelt dyr, kan hjertepunktur eller punktering af vena cava anvendes (op til 10 ml blod kan trækkes fra en 150 g rotte med hjertepunktur2). Disse teknikker kræver anæstesi og er terminale procedurer. Dyret skal aflives efter en af disse to teknikker2. Halspinden er et alternativ, der kan bruges, hvis der skal indsamles store mængder blod i en undersøgelse, der endnu ikke har nået sit endepunkt. Denne teknik kræver imidlertid også betydelige tekniske færdigheder for at undgå skade på dyret; Derfor bør dets anvendelse begrænses3.
Andre teknikker, såsom den subklaviske veneblodtrækning, behøver ikke brug af anæstetika før blodindsamling og tillader gentagen prøveudtagning af små mængder blod. Imidlertid kræves behersket håndtering og passende nålesnit til denne teknik. En forkert operation kan resultere i dyresmerter eller endda dødelighed, og træningen til denne metode kan være kræsen4.
Andre anekdotiske procedurer omfatter orbital punktering og sublingual venepunktur, som begge kræver bedøvelse, og hverken anbefales eller anvendes i vid udstrækning. Selvom tidligere undersøgelser har vist hurtigere blodindsamling ved orbital punktering end ved halevenepunktur, blev det konstateret, at orbital punktering under diethyletherbedøvelse var mindre veltolereret end sidstnævnte metode (baseret på dyrenes excitationsscore og urinproduktion)5. Desuden er denne metode stærkt påvirket af dygtigheden hos den person, der udfører proceduren, og udføres hovedsageligt af erfarne dyrlæger. Til sammenligning er den sublinguale venepunktur mindre foruroligende og anbefales til gentagen blodprøvetagning6. Denne teknik giver imidlertid alvorlige bivirkninger såsom reduceret føde- og vandindtag, hvilket kan føre til dyrets død7.
Denne undersøgelse beskriver to metoder, der anvendes i vores laboratorium til gentagen blodprøvetagning. Halevenepunktur kan udføres på et bevidst dyr, og vævsskader og bivirkninger er minimale. Modifikationen af denne teknik i denne undersøgelse omfatter stabilisering af halen med pegefingeren og langfingeren, hvilket gør det muligt for en enkelt operatør at udføre blodindsamlingen. Den dorsale penis venepunktur er allerede blevet beskrevet for enkle intravenøse injektioner. Denne teknik udføres under anæstesi og giver mulighed for en pålidelig blodkilde i tilfælde af vanskeligheder med andre metoder (fx i den umiddelbare postoperative periode med et lille dyr, når der udføres perioperativ blodtrækning under anæstesi). I lighed med haleveneprøvetagning vil skaden på punkteringsstedet have en mindre samlet effekt på dyret sammenlignet med de ovennævnte teknikker8. Formålet med dette metodepapir er at tilbyde uerfarne forskere enkle og pålidelige blodprøvetagningsalternativer i henhold til konteksten (f.eks. til procedurer udført under anæstesi, til undersøgelser, der inkluderer hanrotter, til dyr med tynde haleårer).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Procedurerne blev udført på 3 måneder gamle Lewis-hanrotter, der hver vejede 300-400 g. I alt 24 dyr blev inkluderet med tre punkteringsbetingelser: 12 rotter gennemgik halevenepunktur uden bedøvelse (gruppe-tv uden bedøvelse), og yderligere 12 rotter blev bedøvet til at gennemgå både halevenepunktur (gruppe-tv med anæstesi) og penisvenepunktur (gruppe PV med anæstesi). Alle procedurer blev godkendt og overholdt retningslinjerne fra Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC). Alle dyrene blev aflivet ved afslutningen af undersøgelsen (efter en 1 måneds opfølgning) ved kuldioxid overdosis. Se materialefortegnelsen for detaljer vedrørende alle de materialer og instrumenter, der anvendes i denne protokol.
1. Generelle retningslinjer
- I overensstemmelse med IACUC-retningslinjerne skal du sikre, at det maksimale blodvolumen, der trækkes, ikke er mere end 10% af det samlede blodvolumen hver 2. uge9. For eksempel bør en rotte på 300 g have et totalt blodvolumen på ca. 19,2 ml. I tilfælde af en protokol, der kræver fire blodprøver alene i den første uge (dag 0, dag 1, dag 3, dag 7), skal tapningen begrænses til højst 250 μL blod pr. prøve.
- For procedurer udført under anæstesi, administreres isofluran via en præcisionsfordamper for at bedøve dyret. Inducer anæstesi i et kammer med en dosis på 3% -5% isofluran i 5 minutter, og vedligehold ved hjælp af en dosis på 1% -3% isofluran gennem en næsekegle under proceduren. Isofluranniveauet justeres baseret på kontinuerlig monitorering af respirationsfrekvensen. Kontroller, om sedation er tilstrækkelig ved at klemme, inden proceduren påbegyndes.
- Efterlad ikke dyret uden opsyn under forsøget, eller før det har genvundet tilstrækkelig bevidsthed til at opretholde brystliggende.
- Efter blodindsamlingen skal du overvåge dyret indtil fuld genopretning, før du returnerer det til buret, og introducer det ikke til andre dyrs selskab, før det er fuldt genoprettet.
BEMÆRK: Efter aftale med veterinærtjenesterne var der ikke behov for smertestillende medicin efter proceduren efter halevene eller penisvenepunktur.
2. Blod trækker fra penisvenen
- Præparation
- Forbered følgende udstyr: sterilt gasbind, handsker, alkoholservietter, et mikrokapillært blodopsamlings-EDTA-rør (lilla hætte) og en 30 G insulinsprøjte (30 U eller 50 U).
- Tag rotten ud af buret, og sæt den i et kammer til induktion med isofluran via en præcisionsfordamper (dosis: 3% -5%). Når dyret er bedøvet, skal du overføre det til procedurebordet og lægge dyret på ryggen med næsen placeret i næsekeglen for at opretholde bedøvelsen. Overvåg respirationsfrekvensen, og juster isofluranniveauet i overensstemmelse hermed (vedligeholdelsesdosis: 1%-3%). Inden forsøget påbegyndes, kontrolleres det, at dyret er tilstrækkeligt bedøvet.
- Blodprøvetagning
- Flyt stemplet frem og tilbage i sprøjten flere gange for at udjævne udtrækningen. Opret undertryk i sprøjten ved at trække i stemplet for at fjerne et par mikroliter.
- Ved hjælp af den ikke-dominerende hånd skal du trække forhuden tilbage fra enden af penis og holde glans mellem indekset og tommelfingeren og trække forsigtigt. Den dorsale penis vene vises som en overfladisk blå ledning. Se figur 1 og figur 2.
- Med nåleøjet pegende opad indsættes insulinsprøjten i venen i en vinkel på 35°. Når nålen er kommet ind i venen, vil blodet strømme ind i sprøjten.
- Træk langsomt sprøjtens stempel langsomt og stabilt ud for at opsamle det ønskede volumen.
BEMÆRK: Træk ikke stemplet for hurtigt ud, da dette vil få venen til at falde sammen og stoppe blodgennemstrømningen. - Hvis blodgennemstrømningen falder, skal nålen drejes lidt med uret eller mod uret.
- Fjern sprøjten. Der dannes en bloddråbe på punkteringsstedet, hvis aspiration tillader indsamling af nogle få mikroliter blod i tilfælde af en ikke-steril procedure.
- Hvis den første punktering mislykkes, skal du genindsætte nålen mere proximalt på venen.
BEMÆRK: I modsætning til prøveudtagning af halevene er den iterative punktering af den dorsale penisvene normalt mislykket. - Påfør let tryk på punkteringsstedet for at stoppe blødningen, og tør området af med en ny alkoholserviet.
- Placer penis tilbage i sin neutrale position.
- Sluk for isofluranen, og overvåg rotten, indtil den er fuldstændig rask. Sæt rotten tilbage i buret.
3. Tail vene punktering
- Præparation
- Forbered følgende udstyr: en plastikholder, sterilt gasbind, handsker, alkoholservietter, et EDTA-rør til mikrokapillær blodopsamling (lilla hætte) og en 28 G 1/2 insulinsprøjte (30 U eller 50 U).
- Tag rotten ud af buret, og fastgør den hurtigt i en plastikkegle. Luk den store ende af keglen omkring bunden af halen. Sørg for, at dyret har det godt, og at vejrtrækningen er ubegrænset under hele proceduren.
- Dyp halen i varmt vand (37 °C) i ca. 1 minut for at udvide venen. Tør halen med et papirhåndklæde. Placer dyret (i sin fastholdelse) med forsiden nedad, med halen liggende på en varmepude.
- Vælg højre eller venstre halevene (blå linje) til prøveudtagning ved at dreje hele dyret til hver side (dette undgår vridning af halen). Brug den sidste tredjedel af halen til punktering af blodkar, da karrene bliver mere overfladiske i denne zone. Arterien er ventral, og de to vener er laterale10.
- Tør halen af med 70% ethanolservietter på punkteringsstedet.
- Placer halen på kanten af varmepuden for at skabe en vinkel i den terminale tredjedel af halen. Dette bringer venen til overfladen og skaber mere plads til at tage prøven.
- Blodprøvetagning
- Flyt stemplet frem og tilbage i sprøjten flere gange for at udjævne udtrækningen. Opret undertryk i sprøjten ved at trække i stemplet for at fjerne et par mikroliter.
- Ved hjælp af den ikke-dominerende pegefinger og langfinger skal du fastgøre halen fladt på varmepuden. Placer langfingeren proximalt og pegefingeren distalt med punkteringsstedet mellem disse to fingre. Påfør mere tryk på langfingeren end på indekset for at sikre halen, kun lukke karret proximalt og lade blodet samle sig. Se figur 1 og figur 3.
- Med nåleøjet pegende opad skubbes insulinsprøjten mod pegefingeren, indtil den indsættes i venen (dette skaber en vinkel på 35° mellem nålen og halen). Når nålen er kommet ind i venen, vil blodet strømme ind i sprøjten. På dette tidspunkt skal du slippe trykket på pegefingeren og langfingeren for at sikre, at blodgennemstrømningen ikke er okkluderet.
- Træk langsomt sprøjtens stempel op med en jævn hastighed for at opsamle det ønskede volumen.
BEMÆRK: Træk ikke stemplet for hurtigt ud; Dette vil få venen til at kollapse og stoppe blodgennemstrømningen. - Hvis blodgennemstrømningen falder, drejes nålen lidt i begge retninger.
- Fjern sprøjten fra halen. En bloddråbe dannes på halens punkteringssted. Aspirationen af dette blod giver mulighed for indsamling af nogle få mikroliter blod i tilfælde af en ikke-steril procedure.
- Hvis den første punktering mislykkes, skal du genindsætte nålen mere proximalt på venen.
BEMÆRK: Venen bliver gradvist mere dybtgående, når den nærmer sig halebasen. Hvis der ikke er blodgennemstrømning i sprøjten, skal du øge vinklen mellem sprøjten og halen eller dreje nålen. - Tryk på punkteringsstedet for at stoppe blødningen, og tør området af med en ny alkoholserviet. Fjern rotten fra plastkeglen, og returner den til buret.
- Halevenepunktur under anæstesi
- Udfør trin 2.1.1 og trin 2.1.2 for at inducere og vedligeholde anæstesi.
- Udfør trin 3.1.3-3.2.7 for blodindsamling; se figur 1.
- Udfør trin 2.2.10 for dyregenopretning.
Figur 1: Skemaer over de forskellige punkteringsmetoder i denne protokol. A) Modificeret halevenepunktering på et bevidst, fastholdt dyr (B) modificeret halevenepunktur og penisvenepunktur under anæstesi. Klik her for at se en større version af denne figur.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Succes blev defineret som en blodprøve, der gav mindst 100 μL blod på under 10 minutter (fra punkteringstiden til afslutningen af blodindsamlingen), og svigt blev defineret som en blodtrækning, der gav mindre end 100 μL blod eller tog mere end 10 minutter at hente det krævede blodvolumen. Maksimalt 250 μL blod pr. prøve var tilladt. De statistiske analyser blev udført ved hjælp af en envejs ANOVA test til flere sammenligninger og chi-kvadreret test. Dataene blev præsenteret som middelværdi ± standardafvigelse, og p < 0,05 blev anvendt som cut-off til bestemmelse af statistisk signifikans.
Sammenligningen af succesraterne viste lignende resultater for halevenepunktur hos bevidste rotter (92%) og penisvenepunktur under anæstesi (83%)(p = 0,0543), som vist i figur 4. Interessant nok blev halevenen under anæstesi meget upålidelig, og halevenepunktur under anæstesi havde kun en succesrate på 25% i denne undersøgelse, sandsynligvis på grund af udtynding af venen. I tilfælde af anæstesi var penisvenepunktur mere vellykket end halevenepunktur til prøveudtagning (p < 0,0001).
Vi sammenlignede de indsamlede blodmængder og procedurens varighed blandt halevene og dorsal penisvenepunktur udført på rotter under anæstesi og halevenepunktur udført på bevidste rotter. Figur 5 viser, at halevenepunktur uden bedøvelse (217,5 μL ± 69,04 μL) og penisvene under anæstesi (185,8 μL ± 66,4 μL) gav sammenlignelige mængder blod (p = 0,4966), og disse blodvolumener var signifikant højere end det volumen, der blev indsamlet med halevenepunktur under anæstesi (54,4 μL ± 68,8 μL) (p < 0,0001).
Procedurens varighed var ens i penisvenepunktur under anæstesigruppe (315,2 s ± 160 s) og halevenepunktur uden anæstesigruppe (262,5 s ± 171 s) (p = 0,6632). Figur 6 viser, at prøveudtagningen blev udført på mindre end 6 minutter i begge grupper, mens halevenepunktur under anæstesi tog mere end 8 minutter (500,8 s ± 196 s) på grund af flere fejl (p < 0,0382).
Figur 2: Dorsal penis vene punktur metode. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 3: Modificeret halevenepunkturmetode. Bemærk, at halen holdes nede, og punkteringsstedet er placeret mellem pege- og langfingrene. Sprøjten skal hvile og glide mod pegefingeren for at opretholde en stabil punkteringsvinkel. Brugen af den ikke-dominerende hånd muliggør stabilisering af halen på et bevidst dyr. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 4: Succesrater med halevenepunktur under anæstesi, penisvenepunktur under anæstesi og halevenepunktur uden bedøvelse. **** p < 0,0001 med chi-kvadreret test. Forkortelser: TV = halevene; PV = penis vene. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 5: Sammenligning af blodvolumenerne (i μL) opnået i de tre grupper. ***p < 0,001; p < 0,0001 med ANOVA analyse til flere sammenligninger. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 6: Sammenligning af prøvetagningens varighed (i sekunder), defineret som tiden fra punkteringsøjeblikket til slutningen af blodudtagningen, i de tre grupper. Svigt blev defineret som en blodtrækningsvarighed, der varede længere end 600 s (10 min). *p < 0,05; **p < 0,01 med ANOVA analyse til flere sammenligninger. Klik her for at se en større version af denne figur.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Halevenepunktur er en effektiv metode til at få blod fra en bevidst rotte. Men når et dyr er under bedøvelse, kan virkningen af isofluran føre til karspasmer og gøre halevenepunktur uegnet11. Som vist i denne undersøgelse er et alternativ i denne situation at indsamle blod fra penisvenen, hvilket er mere vellykket og giver et signifikant større volumen blod på kortere tid. Det er vigtigt at huske, at i tilfælde af fejl med denne metode ved første forsøg kan efterfølgende forsøg mislykkes. I modsætning hertil giver halevenepunktur mulighed for flere efterfølgende punkteringer i tilfælde af vanskeligheder i første forsøg (der er to vener, og punktering højere oppe på halen kan forsøges)1. Imidlertid kan iterative punkteringer forårsage hæmolyse i prøven, hvilket forvrænger resultaterne på grund af frigivelsen af hæmoglobin og de indre komponenter i erythrocytmembraner. Dette gælder især, hvis plasmaet analyseres12. Undgå flere punkteringer og få prøven i en enkelt blodtrækning er at foretrække.
I dette arbejde oversteg blodprøvetagningen ikke 250 μL pr. prøve i overensstemmelse med denne protokol og IACUC-retningslinjerne for respekt for dyrevelfærd i tilfælde af gentagen prøveudtagning. Fremskridt inden for bioanalytiske teknikker har gjort det muligt at anvende mikroprøver på under 50 μL til vurdering af blodbiokemi og metaboliske parametre 13. Derfor er 250 μL tilstrækkeligt til at konkludere, at begge metoder er effektive til fremtidige undersøgelser. Imidlertid er både halevenen og penisvenen små kar og tillader ikke indsamling af store mængder blod. Disse beskrevne metoder egner sig til gentagen prøveudtagning og overvågning af levende dyr. Hvis store mængder blod er nødvendige (for eksempel til afslutning af undersøgelsen), bør andre metoder, der giver mere blod - såsom hjertepunktur - overvejes.
Disse beskrevne procedurer er to blandt mange; Vores valg af procedure var motiveret af nogle få fordele. Begge disse teknikker kan udføres af en enkelt operatør. Brug af pegefingeren og langfingeren til at stabilisere halevenen i den modificerede haleveneteknik gør komplementær menneskelig fastholdelse unødvendig. Det er dog nødvendigt at vurdere dyrets velfærd, og bistand fra en professionel (f.eks. en dyrlæge eller veterinærtekniker) anbefales altid for at undgå at udsætte dyret for unødig smerte eller angst2.
Desuden kræver tidligere beskrevne metoder (f.eks. Jugular stick, subclavian vene blodtrækning) omfattende forudgående træning for at undgå skade på eller død af dyret. I modsætning hertil er halevene eller dorsal penis venepunktur sjældent dødelig for rotten, selvom den ikke er godt udført. Denne undersøgelse havde nogle fejl med begge metoder, men ingen andre bivirkninger eller dødsfald blev observeret. Nogle tilfælde af urinretention efter dorsale penis injektioner er blevet rapporteret, men det er uklart, om injektionen selv eller det injicerede middel er ansvarlig for dette resultat. Hverken denne negative virkning eller unormal heling eller infektion på punkteringsstedet blev noteret i undersøgelsesperioden. Desuden afslørede de daglige vurderinger af dyrenes tilstand ikke smerte eller nød i nogen grupper (ingen porfyrinfarvning, intet vægttab, dyr, der blev vurderet til at være komfortable af forskerholdet og veterinærpersonale). Imidlertid kan langvarig fastholdelse og flere punkteringer forårsage dyrenød. For at undgå dette skal nålen drejes, når blodgennemstrømningen sænkes i stedet for at gentage punkteringen. Korrekt opvarmning af halen med varmt vand og en varmepude til vasodilere halevenen samt praktisering af disse metoder anbefales at reducere fastholdelsestiden.
Halevenepunktur og dorsal penis venepunkturmetoder giver mulighed for hurtig prøveudtagning (under 6 min) og giver tilstrækkelige blodvolumener til de fleste analyser. Når det gøres på et bevidst dyr, er halevenepunktur en effektiv og pålidelig metode til at opnå blod. På et bedøvet dyr har anæstetiske midler imidlertid tendens til at forårsage karspasmer, og halevenen er udsat for vigtig udtynding11. I dette scenarie giver penis dorsal venepunktur en bedre succesrate end halevenepunktur, som har tendens til at være upålidelig til blodindsamling. En begrænsning af blodudtrækningen i penisvenen er imidlertid, at den kun kan udføres på hanrotter og derfor er uegnet til hunrotter. Derfor kan både penisvenepunktur og halevenepunktur i henhold til konteksten (dvs. dyrets køn, perioperativ eller postoperativ blodtrækning, dyr med tynde haleårer) alternativt bruges til gentagne blodtrækninger, selv af forskere med ringe eller ingen erfaring med dyreforsøg.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Ingen af forfatterne har nogen interessekonflikter at erklære.
Acknowledgments
Dette arbejde blev finansieret af Shriners Children's Boston (B. E. U., K.U., C.L.C.). L.C. er finansieret af "La Bourse des Gueules Cassées", "La Bourse Année Recherche" og "La Bourse de l'Amicale des Anciens Internes des Hôpitaux de Paris". Y.B. er finansieret af "La Bourse des Gueules Cassées". Y.B. og I.F.v.R. finansieres af Shriners Hospitals for Children (Fellowships ID er henholdsvis #84308-BOS-22 #84302-BOS-21). Dette materiale er delvist baseret på arbejde støttet af National Science Foundation under bevilling nr. EØF 1941543. Delvis støtte fra US National Institutes of Health (R01EB028782, R56AI171958 og R01DK114506) anerkendes taknemmeligt. Figur 1 blev oprettet med BioRender.com.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 0.5 mL | 28 G ½ Insulin Syringes | BD | 329424 | for tail vein puncture |
| 0.5 mL | 30 G x 5/16 Insulin Syringes | BD | 320468 | for penile vein puncture |
| 250 L Microtainer blood collection tubes with K2EDTA | BD | 365974 | |
| Gauze Sponges | Curity | 6939 | |
| Isoflurane Auto-Flow Anesthesia Machine | E-Z Systems | EZ-190F | for penile vein puncture |
| Isoflurane, USP | Patterson Veterinary | 1403-704-06 | for penile vein puncture |
| Nosecone for Anesthesia | World Precision Instruments | EZ-112 | for penile vein puncture |
| Rodent Restraint Cone | Harvard Apparatus | ST2 52-95-86 | for tail vein puncture |
| Small Animal Heated Operating Table (Adjustable) | Peco Services Ltd | 69023 | |
| Webcol Alcohol prep pads | Simply Medical | 5110 |
References
- Lee, G., Goosens, K. A. Sampling blood from the lateral tail vein of the rat. Journal of Visualized Experiments. (99), e52766 (2015).
- Beeton, C., Garcia, A., Chandy, K. G. Drawing blood from rats through the saphenous vein and by cardiac puncture. Journal of Visualized Experiments. (7), 266 (2007).
- Luzzi, M., et al. Collecting blood from rodents: A discussion by the Laboratory Animal Refinement and Enrichment Forum. Animal Technology and Welfare. 4 (2), 99-102 (2005).
- Wang, L., et al. Repetitive blood sampling from the subclavian vein of conscious rat. Journal of Visualized Experiments. (180), e63439 (2022).
- Van Herck, H., et al. Blood sampling from the retro-orbital plexus, the saphenous vein and the tail vein in rats: Comparative effects on selected behavioural and blood variables. Laboratory Animals. 35 (2), 131-139 (2001).
- Harikrishnan, V. S., Hansen, A. K., Abelson, K. S., Sørensen, D. B. A comparison of various methods of blood sampling in mice and rats: Effects on animal welfare. Laboratory Animals. 52 (3), 253-264 (2018).
- Zeller, W., Weber, H., Panoussis, B., Bürge, T., Bergmann, R. Refinement of blood sampling from the sublingual vein of rats. Laboratory Animals. 32 (4), 369-376 (1998).
- Nightingale, C. H., Mouravieff, M. Reliable and simple method of intravenous injection into the laboratory rat. Journal of Pharmaceutical Sciences. 62 (5), 860-861 (1973).
- Blood collection: The rat. IACUC Guideline. UCSF Office of Research Institutional Animal Care and Use Program. , Available from: https://iacuc.ucsf.edu/sites/g/files/tkssra751/f/wysiwyg/guidelines%20-%20Blood%20Collection%20-%20Rat.pdf (2022).
- Staszyk, C., Bohnet, W., Gasse, H., Hackbarth, H. Blood vessels of the rat tail: A histological re-examination with respect to blood vessel puncture methods. Laboratory Animals. 37 (2), 121-125 (2003).
- Constantinides, C., Mean, R., Janssen, B. J. Effects of isoflurane anesthesia on the cardiovascular function of the C57BL/6 mouse. ILAR Journal. 52 (3), e21-e31 (2011).
- Hernaningsih, Y., Akualing, J. S. The effects of hemolysis on plasma prothrombin time and activated partial thromboplastin time tests using photo-optical method. Medicine. 96 (38), 7976 (2017).
- Powles-Glover, N., Kirk, S., Jardine, L., Clubb, S., Stewart, J. Assessment of haematological and clinical pathology effects of blood microsampling in suckling and weaned juvenile rats. Regulatory Toxicology and Pharmacology. 69 (3), 425-433 (2014).
