Summary
Sosyal tehdit-güvenlik testi, her ikisi de kronik olarak sosyal olarak mağlup olmuş erkek farelerden oluşan tek bir gruptaki strese duyarlı ve strese dayanıklı bireyleri tanımlamak için kullanılan, caydırıcı koşullu öğrenme ve sosyal tehdit-güvenlik ayırt etme yeteneğinin bir ölçümü olarak sosyal kaçınma gelişiminin eşzamanlı olarak değerlendirilmesine izin verir.
Abstract
Sosyal stres, ruhsal bozuklukların gelişiminin önemli bir nedenidir. Klinik öncesi çalışmaların translasyonel değerini arttırmak için, sosyal stres deneyimi ve fareler üzerindeki davranışsal etkisi insanlarla karşılaştırılabilir olmalıdır. Kronik sosyal yenilgi (CSD), insan duygusal bozukluklarına benzeyen zihinsel işlev bozukluklarını indüklemek için fiziksel saldırılar ve duyusal tehditler içeren bir tür sosyal stres kullanır. CSD'nin psikososyal bileşenini güçlendirmek için, günlük fiziksel atakların üç 10 s epizodu ve ardından 24 saatlik bir duyusal faz olarak standardize edildiği 10 günlük bir CSD protokolü uygulandı. 10. duyusal aşamadan sonra, CSD protokolünü sosyal tehdit-güvenlik testi (STST) adı verilen rafine bir davranış testi takip eder. Stres sonrası davranışsal tahlillerin, sosyal stres etkeninin davranışı nasıl ve ne ölçüde etkilediğini belirlemesi gerekir. STST, kronik olarak sosyal olarak mağlup olmuş erkek farelerin 2 yeni erkek bireyle (sosyal hedefler) etkileşime girmesine izin verir: biri CSD günlerinde karşılaşılan saldırgan suştan, diğeri ise yeni bir suştan sosyal hedef. Her ikisi de üç odacıklı bir test arenasının farklı bölmelerinde aynı anda sunulur. Test, başarılı caydırıcı koşullu öğrenme ve sosyal tehdit-güvenlik ayırt etme yeteneğini ölçmek için sosyal kaçınma gelişiminin eşzamanlı olarak değerlendirilmesini sağlar. Her iki suşa karşı sosyal kaçınmanın gelişimi, genelleştirilmiş bir caydırıcı tepkiyi ve dolayısıyla strese yatkınlığın bir ölçümünü yansıtır. Bu arada, yalnızca saldıran türe yönelik sosyal kaçınmanın gelişimi, tehdit-güvenlik ayrımcılığını ve dolayısıyla stres direncinin bir ölçümünü yansıtır. Son olarak, saldıran suşa karşı sosyal kaçınmanın olmaması, bozulmuş caydırıcı koşullu öğrenmeyi yansıtır. Protokol, şu anda kullanılan fare modellerini, translasyonel kriterleri, özellikle tehdit-güvenlik ayrımcılığı ve caydırıcı tepki genellemesini dahil ederek, kronik olarak sosyal olarak mağlup olmuş tek bir hayvan grubunu dirençli ve duyarlı alt gruplara kategorize ederek iyileştirmeyi amaçlamaktadır.
Introduction
Stres, fiziksel veya psikolojik uyaranların neden olduğu homeostazın bozulması olarak tanımlanır1. Stres, travma sonrası stres bozukluğu, depresyon ve anksiyete gibi ruhsal bozuklukların gelişimi için iyi bilinen önemli bir risk faktörüdür 2,3. Özellikle, sosyal stres, strese bağlı ruhsal bozuklukların gelişimi için önemli bir risk faktörü olarak kabul edilmektedir4. Araştırmada özel önem kazanan bir sosyal stres türü, sosyal bağlılık stresidir5. Fareler, insanlar gibi, zengin bir sosyal davranış kümesine6 sahiptir, bu da onları sosyal stresi içeren araştırmalar için uygun hale getirir. Laboratuvar ortamında, yetişkin fareler grup halinde barındırıldığında,7. sıraların oluşumunu içeren bir sosyal yapı oluştururlar. Buna göre, koloni modeli, farelerin karışık cinsiyetli gruplarında doğal olarak kurulmuş sosyal hiyerarşilerin etkilerini incelemek için tasarlanmıştır8. Yıllar geçtikçe, aynı cinsiyetten grup modelleri, sosyal istikrarsızlık modeli ve davetsiz misafir koloni modeli dahil olmak üzere sosyal boyun eğme stresini kullanmak için koloni modelinin varyasyonları geliştirilmiştir. Bununla birlikte, son yıllarda, erkek sakin-davetsiz misafir modeli olarak bilinen belirli bir varyant literatürde popüler hale geldi ve sosyal karmaşıklığı iki fareye indirgedi: bir asistan ve bir davetsiz misafir. Davetsiz misafir olarak bilinen ilgilenilen hayvan, yerleşik veya saldırgan olarak bilinen daha büyük, daha yaşlı ve emekli bir yetiştiricinin kafesine yerleştirilir. Yerleşik daha sonra davetsiz misafire bir yüzleşme yöntemi olarak fiziksel olarak saldırır ve sakinin baskın olduğu ve davetsiz misafirin ikincil olduğu bir sosyal hiyerarşi kurar. Çatışmalar tek seferlik olaylar olduğunda, "akut" ("akut sosyal yenilgi modeli") olarak sınıflandırılırken, birkaç gün (genellikle 10) süren tekrarlanan çatışmalar "kronik" ("kronik sosyal yenilgi modeli") olarak bilinir. Kronik sosyal yenilgi (CSD) modelinde, ataklar aralıklıdır ve tipik olarak fiziksel faz olarak adlandırılan 5-10 dakikalıkbir süre ile sınırlıdır. Fiziksel aşamayı takiben, davetsiz misafir ve ikamet eden gece boyunca aynı kafeste tutulur, bir ağ duvarla ikiye ayrılır ve fiziksel temas dışında her türlü etkileşime izin verilir. Duyusal faz olarak bilinen bu konfigürasyon, doğrudan fiziksel çatışma yerine sürekli tehdit görünümü yoluyla strese neden olur. 2018'de van der Kooji ve meslektaşları, fiziksel faz10'u standartlaştırarak ve katı bir şekilde sınırlayarak modelin psikososyal bileşenine odaklanmak için değiştirilmiş bir kronik sosyal yenilgi tedavisi başlattılar. Değiştirilmiş model, fiziksel saldırıları, duyusal fazın 15 dakikalık bölümler arası aralıklarında meydana gelen, farklı sakinlerle üç adet 10 saniyelik bölümle sınırlar. Üçüncü fiziksel bölümü takiben, duyusal faz gece boyunca sürer. Bu döngü, bölüm başına yeni sakinlerle art arda 10 gün boyunca tekrarlanır. Modifiye tedavi, davetsiz misafirin fiziksel zararı en aza indirildiği ve fiziksel saldırıların farklı sürelerinden kaynaklanan sonuç değişkenliği azaldığı için kronik sosyal yenilgi modelinin translasyonel geçerliliğini artırır.
CSD modeli stresle ilişkili hastalıkları (örneğin, depresyon, anksiyete, travma sonrası stres bozukluğu) incelemek için kullanıldığından, saldırganlık, hafıza ve anhedoninin davranışsal tahlilleri dahil ancak bunlarla sınırlı olmamak üzere davranışsal tahliller seçilir. Son yıllarda, farelerde CSD sonrası davranışsal analizler genellikle sosyalliğin nasıl ve ne ölçüde etkilendiğini değerlendirmektedir9. Sosyallik, farelerin sosyal olarak bir türdeşlikten kaçınmak yerine sosyal olarak etkileşime girme konusundaki doğuştan gelen tercihi olarak tanımlanır. Sosyallik stres etkilerine maruz kaldığından, yalnızca sosyal kaçınma gelişimini değerlendiren tahliller oluşturulmuştur. Strese bağlı sosyal kaçınma, insanlarda sosyal anksiyete ve depresyonun temel davranışsal semptomlarından birini temsil ettiği için translasyonel bir alaka düzeyine sahiptir11. İnsanlara benzer şekilde, tüm fareler CSD tedavisini takiben sosyal kaçınma geliştirmez, bu da strese duyarlılıkta bireyselliğin varlığını düşündürür. Cohen ve meslektaşları, bireyselliğin nörobiyolojisini incelemek için umut verici bir yaklaşım olarak davranışsal kriterlerin belirlenmesini önermişlerdir12. Hayvanların davranışa dayalı olarak seçilmesi, gen-çevre çalışmalarının temelini çizen grup bölünmesiyle sonuçlanır. Daha sonra, farklı alt gruplar genellikle farklı çevresel koşullar altında araştırılabilen spesifik genetik varyantların/modifikasyonların belirgin bir şekilde zenginleşmesini gösterir13. Buna göre, sosyal kaçınmanın gelişiminde bireysellik, kronik olarak sosyal olarak mağlup olmuş erkek farelerden oluşan tek grubu iki alt gruba ayırmak için kullanıldı: strese duyarlı (sosyal olarak kaçınan) ve strese dayanıklı (sosyal olarak kaçınan 9,14). Bununla birlikte, farelerde sosyal kaçınma fenotipinin uyumsuz veya uyarlanabilir bir davranış olarak yorumlanması, hem tedavinin (burada CSD) hem de tedavi sonrası davranışsal tahlilin genel bağlamında düşünülmelidir. Ek olarak, tedavi sonrası davranışsal seçim tahlili, yalnızca sosyal kaçınma gelişimini değil, sosyalleşmenin diğer yönlerini de ideal olarak değerlendirecektir. Son çalışmamız, CSD'nin neden olduğu sosyal kaçınmada koşullu öğrenmenin katılımını ortaya koymuştur15. Spesifik olarak, CSD'nin neden olduğu sosyal kaçınma, koşulsuz uyarana, yani sakinlerin saldırılarına koşullu uyaran olarak hizmet eden sakinlerin suşunun karakterize edici özelliklerine karşı caydırıcı bir koşullu tepkidir. Ayrıca, sosyal olarak kaçınan alt grup içinde, bazı bireyler, caydırıcı sakinlerin suşunun özellikleri ile diğer güvenli yeni suşların özellikleri arasında ayrım yapabilirken, diğer bireyler her iki suşa da genelleştirilmiş sosyal kaçınma gösterir. Burada rafine bir davranışsal CSD sonrası tahlil öneriyoruz: Sosyal Tehdit-Güvenlik Testi (STST)15. Diğer sosyal etkileşim testlerinden9 farklı olarak, STST, her ikisi de kronik olarak sosyal olarak mağlup olmuş erkek farelerden oluşan tek bir grup içinde strese duyarlı ve strese dayanıklı bireyleri tanımlamak için kullanılan doğru caydırıcı koşullu tepkinin (yani, başarılı koşullu öğrenme) ve sosyal tehdit-güvenlik ayırt etme yeteneğinin bir ölçümü olarak sosyal kaçınma gelişiminin eşzamanlı bir değerlendirmesini sağlar. Caydırıcı tepki genellemesine karşı sosyal tehdit-güvenlik ayrımcılığının değerlendirilmesi, kronik olarak sosyal olarak mağlup edilmiş hayvanlardan oluşan tek bir grubu esnek ve duyarlı alt gruplara sınıflandırmak için kullanılan çeviri kriterlerini genişletir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Tüm prosedürler, deneysel prosedürler için hayvanların bakımı ve kullanımına ilişkin Avrupa Toplulukları Konseyi Direktifine uygun olarak gerçekleştirilmiş ve yerel makamlar (Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz) tarafından onaylanmıştır. Şekil 1 şematik bir zaman çizelgesini temsil eder.
1. Tedavi
- İlgilenilen hayvanlar: C57BL6/J erkek fareleri 7 haftalıkken ve varışta, sıcaklık ve nem kontrollü bir tesiste 12 saatlik bir aydınlık-karanlık döngüsünde (ışıklar açık: 8:00; ışıklar kapalı: 20:00; 23 °C; %38 nem) yiyecek ve su ad libitum ile tek ev edinin.
- Kronik sosyal yenilgi (CSD)
- Tedavi grubu
- 1 haftalık alışkanlığın ardından, CD-1 suşunu asistanın suşu olarak kullanarak art arda 10 gün boyunca CSD tedavisi uygulayın (ayrıntılı bir protokol için, kronik sosyal yenilgi9 ve değiştirilmiş kronik sosyal yenilgi tedavisi10'a bakın).
- C57BL6/J fareyi CD-1 farenin kafesine sokun ve 10 sn fiziksel saldırıyı sayın. Bu bölümü, her biri farklı bir CD-1 fareyle ve bölümler arası 15 dakikalık aralıklarla olmak üzere üç kez tekrarlayın.
- Bu aralıklarda C57BL6/J fare ile CD-1 fare arasına yalnızca duyusal temasa izin verecek şekilde bir ağ duvarı yerleştirin. Üçüncü bölümün ardından, C57BL6/J farelerini gece boyunca CD-1 farelerinin kafeslerine yerleştirin ve her ikisini de bir ağ duvarla ayırın. 10 gün boyunca tekrarlayın.
NOT: CD-1 fare sayısı = C57BL6/J fare sayısı + 1. C57BL6 / J ile tedavi edilen farelerin sayısı 10'un altındaysa, her gün son duyusal fazın (gece boyunca süren) 10 günlük tedavi boyunca yeni bir CD-1 fare ile olmasını sağlamak için en az 10 CD-1 fareye ihtiyaç vardır. - 10 gün boyunca hayvanların fiziksel refahını dikkatlice değerlendirin. Bir hayvan ciddi şekilde yaralanmışsa, etik ve bilimsel (tedavi sonrası test sırasında hareketlilik/aktivite) nedenlerle deneyden hariç tutun. Tablo 1 bir refah kontrol listesi sunmaktadır.
- Kontrol grubu
- Varışta, aynı yaştaki fareleri tedavi grubuyla aynı koşullarda tutun.
- 1 haftalık alışkanlığın ardından, kontrol hayvanlarını 90 saniye boyunca boş bir kafese koyun ve daha sonra onları tedavi grubu için kullanılanlarla aynı ağ duvarlarla ikiye ayrılmış ayrı kafeslere (tek evli) geri koyun. Bunu 10 tedavi gününe paralel olarak günlük olarak yapın.
NOT: Kontrol grubunun ve tedavi grubunun farklı odalarda tutulması tavsiye edilir.
- Tedavi grubu
- Son (10.) duyusal aşamadan sonra, tüm fareleri varışta tarif edilenlere benzer koşullarda yeni kafeslerde tek başına barındırın ve gece boyunca dinlenmeye bırakın.
NOT: Son duyusal faz 24 saat sürmelidir, daha sonra hayvanlar tek evlidir.
2. Tedavi sonrası test: Sosyal tehdit-güvenlik testi (Şekil 2)
- CSD tedavisini takiben, tüm fareleri (tedavi edilen ve kontrol grupları) varışta tarif edilenlere benzer koşullarda yeni kafeslerde tek başına barındırın ve gece boyunca dinlenmeye bırakın.
- Sabah saatlerinde (8:00-13:30), üç odacıklı arenayı (toplam 60 cm x 40 cm boyutlarında, şeffaf akrilik duvarlardan ve düz zeminlerden yapılmış dikdörtgen) %5 etanol ile temizleyin ve 37 lux ışık koşullarında kameranın altına yerleştirin. Tüm arenanın görünür olduğundan emin olun.
- Ağ muhafazalarını (metal veya akrilikten yapılmış kafes benzeri) %5 etanol ile temizleyin ve Şekil 1A'daki köşelerde gösterildiği gibi konumlandırın.
- Alışma aşaması: İlgilendiğiniz hayvanı arenanın ortasına getirin, 6 dakika boyunca keşfe izin verin ve ardından onları ev kafeslerine geri koyun.
- Yeni (bilinmeyen) CD-1 sosyal hedefini (türdeşik) bir kafes muhafazasının altına ve yeni 129/Sv sosyal hedefini diğer kafes muhafazasının altına yerleştirin.
NOT: Aşinalık yanlılığından kaçınmak için bilinmeyen bir 129/Sv türdeşliği kullanmak önemlidir. Tercihen arena başına 4 gözenekli muhafazaya sahip olun: 2'si alışma aşamasına ve 2'si test aşamasına atfedilir. - Test aşaması: İlgilendiğiniz hayvanı hemen arenanın ortasına yeniden yerleştirin ve 6 dakika boyunca keşfe izin verin.
- Tüm hayvanları evlerine iade edin. Arena ve ağ muhafazalarını farklı hayvanların testleri arasında %5 etanol ile temizleyin, ancak asla aynı hayvanın gözlemlenmesi sırasında, yani asla alışma ve test aşamaları arasında temizlemeyin.
- Olası konum tercihli önyargısını kontrol etmek için ağ muhafazalarının konumunu hayvanlar arasında (ve asla aynı hayvan içindeki iki faz arasında değil) değiştirin.
3. Puanlama ve analiz
NOT: Yalnızca stres sonrası tedavi testi, yani STST puanlanır ve analiz edilir (CSD stres tedavisi değil).
- Etkileşim bölgesini, kafes muhafazalarının sınırlarının çevresinde 2 cm olarak tanımlayın.
- Hayvanın burnu etkileşim bölgesi içindeyken alışma aşamasında ağ muhafazalarını keşfetmek için harcanan süreyi puanlayın.
- Hayvanın burnu etkileşim bölgesi içindeyken test aşamasında sosyal hedeflerle etkileşimde bulunmak için harcanan süreyi puanlayın.
NOT: Algılama, manuel olarak (manuel puanlama için bir zamanlayıcı veya yazılım kullanılarak) veya otomatik olarak gerçekleştirilebilir. Tespit yönteminden bağımsız olarak, keşif ve sosyal etkileşim ölçümleri için burun noktasını ve aktiviteyle ilgili ölçümler için vücudun merkez noktasını (örneğin, hareket edilen mesafe) alın. - Sosyal etkileşim indeksini şu şekilde hesaplayın: test aşamasında her bir sosyal hedefi keşfetmek için harcanan süre / alışkanlık aşamasında iki boş ağ muhafazasını keşfetmek için harcanan ortalama süre (Şekil 2B).
- Tedavi grubunu aşağıdaki gibi 3 alt gruba ayırın: CD-1 sosyal hedefi ile sosyal etkileşim indeksi ≥1 olan hayvanlar kaçınmayanlardır, her iki sosyal hedefi olan sosyal etkileşim indeksi <1 olan hayvanlar ayrım gözetmeyenlerdir, sosyal etkileşim indeksi ≥1 olan hayvanlar sadece 129/Sv sosyal hedefi olan hayvanlar ayrımcılıktan kaçınırlar (Şekil 2C-D).
NOT: Üç alt grubun her birindeki hayvan sayısı, farklı hayvan grupları arasında farklılık gösterebilir (CSD tedavisine tabi tutulan tüm hayvanların yaklaşık 1/3'ü, üç alt gruptan birinin fenotipik özelliklerini gösterecektir). - Tedavi ve kontrol grupları arasındaki CD-1 sosyal hedefi ile sosyal etkileşim indeksini istatistiksel olarak analiz ederek stres etkisini değerlendirin (parametrik iki örneklem t-testi veya parametrik olmayan Mann-Whitney testi).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Caydırıcı koşullu tepkinin bir ölçümü olarak sosyal etkileşim indeksi
Bir sosyal etkileşim indeksi ≥1, boş ağ muhafazalarının keşfine kıyasla ilgili sosyal hedefle daha fazla sosyal etkileşimi yansıtır. Burada belirli bir suşun karakterize edici özellikleriyle ne iştah açıcı ne de caydırıcı deneyime sahip olarak tanımlanan temel koşullar altında (burada hem kontrol grubuna yönelik sosyal hedefler hem de tedavi grubuna yönelik 129/Sv sosyal hedef), bozulmamış sosyallik düzeyleri aynı suşla bir sosyal etkileşim indeksine ≥1) yansıtılır. Bu arada, belirli bir suşla (burada asistanın suşu, yani CD-1 suşu) sosyal olarak caydırıcı bir koşullanma deneyiminin (burada CSD tedavisi) ve dolayısıyla koşullu bir uyaran olarak hizmet eden karakterize edici özellikleriyle, doğru bir caydırıcı koşullu tepkinin bir ölçümü olarak sosyal kaçınma gelişimi, aynı suşla bir sosyal etkileşim indeksine <1 yansıtılır. CSD stres etkisi, genel tedavi grubu düzeyinde değerlendirilen ilk etkidir (protokoldeki adım 3.6'ya bakınız). Spesifik olarak, stres etkisi, CD-1 suşuna yönelik sosyal kaçınma gelişiminin bir ölçüsü olarak CD-1 sosyal hedefi ile sosyal etkileşim indeksi <1 olan tedavi grubuna yansır. Bu arada, kontrol grubunun bozulmamış temel sosyallik seviyeleri, aynı sosyal hedefe sahip bir sosyal etkileşim indeksine ≥1 sahip olarak yansıtılmaktadır. Bu, her iki grup arasında CD-1 sosyal hedefi ile sosyal etkileşim indeksinde anlamlı bir fark (p < 0.05) ile sonuçlanır (Şekil 2C).
Sosyal tehdit-güvenlik testi ile kronik olarak sosyal olarak mağlup edilmiş tek bir grup içinde üç farklı fenotipik alt grubun tanımlanması
Protokoldeki 3.4 ve 3.5 adımlarında açıklandığı gibi, hayvanları sosyal etkileşim indekslerine göre ayırdıktan sonra, her iki sosyal hedef arasında tek bir alt grup içindeki indekste anlamlı bir fark (p < 0.05), yalnızca ayrımcılıktan kaçınanlar alt grubunda bulunacaktır (Şekil 2D,E). Ayrımcılıktan kaçınanlar alt grubu ve ayrım gözetmeyen kaçınanlar alt grubu, koşullu uyarana (CD-1 suşu) yönelik sosyal kaçınma gelişiminin bir ölçümü olan CD-1 sosyal hedefi ile bir sosyal etkileşim indeksine <1 sahiptir, böylece doğru bir caydırıcı koşullu tepkinin ve başarılı caydırıcı koşullu öğrenmenin gelişimini yansıtır. Buna karşılık, kaçınmayan alt grubun sosyal etkileşim indeksi (≥1), aynı sosyal hedefle (CD-1 suşu) bozulmuş caydırıcı koşullu öğrenmeyi yansıtır. Bu arada, tehdit-güvenlik ayırt etme yeteneği, güvenli/nötr bir uyarana (129/Sv suşu) yönelik bozulmamış sosyallik düzeylerinin bir ölçümü olarak 129/Sv sosyal hedefi ile sosyal etkileşim indeksine ≥1) sahip ayrımcılıktan kaçınanlar alt grubuna yansımaktadır. Buna karşılık, ayrım gözetmeyen-kaçınanlar alt grubunun caydırıcı tepki genellemesi, sosyal kaçınmanın bir ölçümü olarak aynı sosyal hedefe sahip bir sosyal etkileşim indeksine <1 sahip olması ve dolayısıyla güvenli/nötr bir uyarana karşı caydırıcı koşullu bir tepkiye sahip olması olarak yansıtılır. Her alt gruptaki farelerin yüzdesi yaklaşık% 33'tür; Bununla birlikte, bazı hayvan gruplarının her alt grupta az ya da çok olması nedeniyle bu tahmin edilemez. Son olarak, potansiyel bir kafa karıştırıcı faktör olarak sosyal tercihli önyargının yokluğu, kontrol grubundaki her iki sosyal hedefle ≥1'lik sosyal etkileşim endekslerine (yani, p>0.05) yansır.
Sosyal tehdit-güvenlik testi sonuçlarının yorumlanması
Tehditle ilişkili ipuçlarının başarılı koşullu öğrenimi ve tehdit-güvenlik ayrımcılığı da dahil olmak üzere ayrımcı-kaçınanlar alt grubunun özellikleri, strese dayanıklı bireylerin özellikleri olarak tartışılmaktadır 16,17,18,19,20,21,22. Buna karşılık, Ayrım Gözetmeyenlerden Kaçınanlar alt grubu tarafından görüldüğü gibi, travmatik olaylardan sonra genelleştirilmiş caydırıcı koşullu tepkiler, travma sonrası stres bozukluğu ve anksiyete bozuklukları gibi stresle ilişkili ruhsal bozuklukların önemli bir belirtisidir 16,17,23,24,25,26 ve bu nedenle, strese duyarlı bireylerin karakteristiğidir. Son olarak, kaçınmayanlar alt grubu, öğrenme bozukluğunun bir fenotipini temsil eder16.
Şekil 1: Şematik zaman çizelgesi. Tesise geldikten sonra, 7 gün boyunca tüm fareleri tek başına evlendirin ve ardından tedavilere göre belirlenir: CSD stresi ile tedavi edilen grup veya ele alınan kontrol ile tedavi edilen grup. Tedaviler 10 gün sürer, ardından hayvanlar 1 gün boyunca tek başına barındırılır. STST'yi gerçekleştirmek için arenaları kurun (hayvanların tek barınağından 1 gün sonra gerçekleşir). 6 dakika boyunca alışma aşaması ile başlayın. Alışma aşamasını hemen 6 dakika daha test aşamasıyla takip edin. Son olarak, hayvanları ev kafeslerine geri koyun. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 2: Sosyal tehdit-güvenlik testi. (A) Test tasarımı. Test, açıklıkları olan şeffaf duvarlarla ayrılmış üç eşit parçaya bölünmüş üç odacıklı bir arenada gerçekleştirilir ve ilgilenilen hayvanın (C57BL6/J, siyah) aralarında hareket etmesine izin verir. Çevrelerin her birine bir ağ muhafazası yerleştirilir. Bir muhafaza, CSD tedavisi sırasında daha önce karşılaşılan sakinlerin suşundan yeni bir sosyal hedef içerir (CD-1, beyaz); diğeri, yaş, boyut ve cinsiyet bakımından eşleşen yeni bir suştan, sakinlerin suşundan ancak farklı kürk rengine sahip yeni bir fareye (129/Sv, kahverengi) yeni bir sosyal hedef içerir. Her iki sosyal hedef de ilgilenilen hayvandan daha yaşlı ve daha büyüktür. İlgilenilen hayvan, arenanın ortasına sokulur ve ağ muhafazaları boşken alışma aşamasında ve yine test aşamasında, sosyal hedefler gösterildiği gibi ağ muhafazalarının içine yerleştirildiğinde 6 dakika boyunca arenayı keşfetmesine izin verilir. (B) Sosyal etkileşim endeksi. Hayvanın burnu etkileşim bölgesi içindeyken (ağ muhafazalarının sınırlarının etrafında 2 cm) alışma aşamasında ağ muhafazalarını keşfetmek için harcanan zamanı puanlayın. Daha sonra, burun etkileşim bölgesi içindeyken test aşamasında sosyal hedeflerle etkileşim kurmak için harcanan zamanı puanlayın. Sosyal etkileşim endeksini gösterildiği gibi hesaplayın. (C) Kronik sosyal yenilgi stres etkisi: Tedavi grubu, CD-1 suşuna karşı sosyal kaçınma gelişiminin bir ölçüsü olarak CD-1 sosyal hedefi ile <1 sosyal etkileşim indeksine sahiptir. Bu arada, kontrol grubunun bozulmamış temel sosyallik seviyeleri, aynı sosyal hedefe sahip bir sosyal etkileşim indeksine ≥1 sahip olarak yansıtılmaktadır. Bu, her iki grup arasında CD-1 sosyal hedefi ile sosyal etkileşim indeksinde anlamlı bir fark (p < 0.05) ile sonuçlanır. Sonuçlar, ortalamanın standart hatası (SEM) ±, grup başına n=16, Mann-Whitney testi olarak sunuldu. (D) Kronik sosyal yenilgi tedavisini takiben sosyal tehdit-güvenlik testi temsili sonuçları. Tedavi grubu, hayvanların sosyal hedeflerle sosyal etkileşim indekslerine göre üç alt gruba ayrılmıştır. CD-1 sosyal hedefli sosyal etkileşim indeksi ≥1 olan fareler kaçınmayanlar, her iki sosyal hedefi olan sosyal etkileşim indeksi <1 olan fareler ayrım gözetmeyen kaçınanlar olarak adlandırılır ve sosyal etkileşim indeksi ≥1 olan fareler sadece 129/Sv sosyal hedefi ile ayrımcılıktan kaçınanlar olarak adlandırılır. Kontrol grubu, her iki sosyal hedefle de benzer indekslere sahiptir. Sonuçlar ortalama ± SEM olarak sunuldu, alt / grup başına n = 55. (E) STST'nin test aşamasında her bir alt/grubun temsili ısı haritaları. Daha koyu renkler, bölgede daha fazla zaman geçirildiğini gösterir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Tablo 1: Kronik sosyal yenilgi prosedürü için iptal kriterleri. Tablo, her biri birkaç alt gözleme sahip toplam dört gözlem ailesi sunmaktadır27. Her gözlemin bir puanı vardır. Puanın toplamına bağlı olarak, alınacak önlemler belirtilir. Bu Tabloyu indirmek için lütfen buraya tıklayın.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Buradaki davranışsal protokol, CSD tedavisi sonrası tek bir grubu üç farklı alt gruba ayırmak için kullanılan, strese yatkınlık ve dayanıklılığın altında yatan biyolojiyi araştırmak ve potansiyel tedavileri test etmek için bir yöntem olarak hizmet eden Sosyal Tehdit-Güvenlik Testini açıklamaktadır. Kapsamlı bir deneysel tasarıma rehberlik etmek için biyolojik bağlam ve teknik ayrıntıların dikkatlice düşünülmesi gerekir.
Farklı barınma koşulları, saldırganlık sosyallik düzeylerini değiştirebilir ve potansiyel olarak tedavi sonrası testten elde edilen sonuçları etkileyebilir28,29,30. Bu koşullar, varışta ve tedavi sonrası testten 24 saat önce tüm hayvanların tek barınak ve 10 günlük tedavi sırasında kontrol grubunun tek barınak olmasını içerir. Ayrıca, kontrol grubu kazara strese girerse, CSD stres etkisi tehlikeye girebilir. Bu, kontrol grubunun 10 günlük tedavi boyunca tedavi grubunun stres kaynaklı kokularına ve seslendirmelerine maruz bırakılmasından ve kontrol grubunun tedaviye tanık olmasından kaynaklanabilir31. Bu nedenle, kontrol grubunun ve tedavi grubunun farklı odalarda tutulması tavsiye edilir. Ayrıca, koşullu öğrenmenin katılımı nedeniyle15, burada açıklananlara benzer tedavi sonrası test sonuçları elde etmek için belirli adımlar kritik öneme sahiptir. Bu, tedavinin genç yetişkinlerde 10 gün boyunca yapılmasını ve dinlenmeden 24 saat sonra tedavi sonrası testin yapılmasını içerir (protokoldeki adım 2.1'e bakınız). Koşullu öğrenme, daha genç (veya daha yaşlı) farelerde farklı olabilir. Benzer şekilde, tedavinin 10 günden fazla veya daha az bir süre için yapılması, sırasıyla hayvanın daha fazla veya daha az şartlandırılması anlamına gelir. Tedavi süresindeki değişiklikler farklı alt grup boyutlarına neden olabilir. Ek olarak, aynı deney içinde, ya aynı deneycinin tüm hayvanlar üzerinde tedaviyi ve tedavi sonrası testi gerçekleştirmesi ya da tedaviyi yapan deneyciler ile tedavi sonrası testi yapanlar arasında tüm hayvanlarda benzer bir ayrım olması tavsiye edilir. Bunun nedeni, deneycinin/deneycilerin hayvan için genel koşullandırma (CSD tedavisi) ve test (sosyal tehdit-güvenlik sonrası tedavi testi) bağlamının bir parçasını temsil etmesidir; Bu nedenle, aynı deneydeki tüm hayvanlar deney boyunca aynı bağlama maruz bırakılmalıdır. Ek olarak, tedavi sonrası test sırasında hayvanların davranışları koku ipuçlarıyla karıştırılabilir32. Hayvanlar arasında %5 etanol ile temizlik, koku ipuçlarını standartlaştırır. Bununla birlikte, aynı hayvan arasında tedavi sonrası testin iki aşaması (alışkanlık ve test) arasında temizlik yapmaktan kaçının. Bunun nedeni, alışma aşamasının kısmen hayvanı arenaya alıştırmayı amaçlamasıdır, böylece test aşamasında hayvanın davranışı esas olarak yeni sosyal hedeflerin yeni varlığı tarafından yönlendirilir. Bu nedenle, iki aşama arasındaki temizlik, alışma aşamasında hayvan tarafından işaretlenen koku ipuçlarını tehlikeye atabilir ve tedavi sonrası testin test aşamasında arenayı daha az tanıdık hale getirebilir33. Ayrıca, test aşamasından alışma aşamasına kadar kafes muhafazalarındaki CD-1 ve 129/Sv sosyal hedeflerinin potansiyel kalıntı kokusunu söndürmek için arena başına dört mesh muhafazaya sahip olmak tercih edilir, bunlardan ikisi alışma aşamasına (her zaman boş kullanılır) ve ikisi test aşamasına (her zaman sosyal hedeflerle birlikte kullanılır). Ağ muhafazalarında kalan kokunun ortadan kaldırılması kritiktir, çünkü alışma aşamasında hayvanın ağ muhafazalarını keşfetmesini, sosyal etkileşim indeksi sonuçlarını değiştirmesini ve böylece tedavi grubunun üç alt gruba bölünmesini etkileyebilir33. Benzer şekilde, tedavi sonrası test için belirli sosyal hedeflerin atfedilmesi ve kullanılmadığında benzer koşullarda tutulması tavsiye edilir. Bunun nedeni, bir sosyal hedefin diğer tedavilere ve testlere dahil edilmesinin, tedavi sonrası test sırasında ağ muhafazasındaki ilgili hedefin davranışını etkileyebilmesidir. Örneğin, CD-1 sosyal hedefini diğer deneylerde CSD tedavisi için asistan olarak kullanmak, tedavi sonrası sosyal tehdit-güvenlik testinde kullanıldığında saldırganlık seviyelerini 129 / Sv'ye göre değiştirebilir. Saldırganlık seviyelerindeki farklılıklar, tedavi sonrası test sırasında ilgilenilen hayvana farklı ipuçları verebilir ve bu da 10 günlük tedaviden koşullu öğrenmeye atfedilmeyen tercihli bir önyargı yaratır. Bu nedenle, her iki sosyal hedefin de tedavi sonrası testte kullanılmadan önce benzer deneyimlere sahip olması, ağ muhafazasındayken her ikisinin de davranışlarını ve ipuçlarını standartlaştırmaya yardımcı olabilir. Tercihli bir önyargının ima edilmesini önlemek için bir başka önlem, ilgilenilen hayvandan daha eski ve daha büyük sosyal hedeflerin kullanılmasını içerir15, ana ipucunu yaş veya boyut değil, suşun karakterize edici özellikleri olarak onaylar. Bu amaçla, tedavi sonrası test, CD-1 ve C57BL6/J suşlarını karşılaştırmak için 129/Sv suşunu kullanır. 129/Sv suşu, her ikisinden de farklı bir kürk rengine sahiptir. Farklı kürk renklerinin farklı suşlarını test etmek ve tedavi sonrası testteki sonuçların nasıl etkilendiğini görmek ilgi çekici olacaktır15.
Kronik Sosyal Yenilgi, travma sonrası stres bozukluğu, depresyon ve stresle ilişkili diğer hastalıklar için en sağlam modellerden biridir34. Mükemmel etiyolojik-35, prediyatif-, ayırıcı-, farmakolojik- ve yüz geçerliliğinesahiptir 8,36. Burada, van Der Kooji ve meslektaşları tarafından tanıtılan ve indüklenen stresin psikososyal bileşenini güçlendirmeyi amaçlayan erkek farelerde değiştirilmiş bir CSD protokolü açıklanmaktadır10. Sosyal kaçınma fenotipi sağlam, güvenilir ve kolayca test edilebilir ve etolojik alaka düzeyine ve güçlü yüz geçerliliğine sahiptir34. Diğer sosyal etkileşim testlerinden9 farklı olarak, STST, sosyal kaçınma gelişimi ile sosyal tehdit-güvenlik ayırt etme yeteneğinin16 eş zamanlı olarak değerlendirilmesini sağlar. STST'den elde edilen sonuçlar, kronik olarak sosyal olarak mağlup edilmiş farelerden oluşan tek bir grup içinde strese duyarlı ve strese dayanıklı alt grupları tanımlamak için kullanılır, bu da insanlarda dirençli bireyleri tehdit-güvenlik ayrımcılığı ile karakterize eden kanıtlarla uyumludur ve duyarlı bireyleri caydırıcı tepki genellemesi ile16. Bu sınıflandırmayı, genel olarak strese dayanıklılık ve duyarlılığın sinirsel temelini çözmeye yardımcı olmak için deneysel manipülasyonlar takip edebilir ve caydırıcı tepki genellemesine karşı tehdit-güvenlik ayrımcılığınaözgü 16,37. Onlarca yıllık araştırmalara ve tedavideki bazı gelişmelere rağmen, strese bağlı ruhsal bozukluklar insanlarda yaygın olmaya devam etmektedir. Bununla birlikte, aynı stres etkenine yanıt olarak farklı bireyler arasında heterojenliğe odaklanarak, tek başına hastalık odaklı araştırma yürütmekten aynı anda hastalık ve sağlık odaklı araştırma yürütmeye doğru bir paradigma kayması vardır. Bu paradigma değişimi, yeni önleme38,39 yaklaşımlarının geliştirilmesine ve iyileştirilmiş hedefe yönelik tedavi stratejilerinin belirlenmesine yardımcı olabilir.
Modelin bir sınırlaması, sadece erkeklerin araştırılmasıdır. STST, doğadakierkek farelerin davranışına dayalı olarak geliştirilen CSD modeline dayandığından, test dişi farelerle uyumluluğu açısından değerlendirilmedi. Dişi farelerle uyumlu bir test, her iki cinsiyette veya sadece dişilerde oluşturulan bir stres tedavisini takip eden bir test olacaktır. Bildirilen bu bulguları erkek farelerden dişi farelere genişletmek için daha fazla çalışmaya ihtiyaç vardır. Ayrıca, burada bildirilen beklenen sonuçlar genç yetişkin farelerden alınmıştır. Bulguların farklı yaşlar kullanılarak nasıl değiştiğini (eğer) bilmek anlayışımıza katkıda bulunacaktır. Yakın zamanda yapılan bir araştırma, CSD'yi takiben sosyal kaçınma davranışının farklı yaş gruplarındaki fareler arasında benzer olduğunu buldu41. Benzer şekilde, dikkate alınması gereken diğer değişkenler, 10 günden farklıysa tedavi süresi ve dinlenmeden sonra 24 saatten fazla yapılırsa davranışsal test süresidir. Genel olarak, model şu anda kullanılan farelerin strese duyarlılık/esneklik modellerini önemli ölçüde iyileştirir ve gelecekteki translasyonel yaklaşımların geliştirilmesine katkıda bulunur.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yok.
Acknowledgments
Bu araştırma, Alman Ulusal Araştırma Vakfı (SFB1193, Dayanıklılığın Nörobiyolojisi) ve Boehringer Ingelheim Vakfı (Leibniz Dayanıklılık Araştırmaları ve Bireysel Fenotipleme ve Yüksek Çözünürlüklü Otomatik Davranış Analizi Enstitüsü'ne hibe) tarafından finanse edilen İşbirlikçi Araştırma Merkezi 1193, Alt Proje Z02 tarafından desteklenmektedir. Teknik yardımları için Dr. Konstantin Radyushkin ve Bayan Sandra Reichel'e ve İngilizce dil desteği için Bayan Hanna Kim'e teşekkür ederiz. Finansman kaynaklarının model tasarımına hiçbir katılımı yoktu; verilerin toplanması, analizi ve yorumlanması; Protokolün yazımında; ve protokolün yayınlanmak üzere sunulması kararında.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Arenas | Noldus, Sociability cage, Wageningen, the Netherlands | https://www.noldus.com/applications/sociability-cage | Three-chambered, rectangle in shape with a total size of 60 cm x 40 cm, made of acrylic transparent walls and smooth floors |
| Camera for video recording | Basler AG, Germany An der Strusbek 60-62 22926 Ahrensburg |
ace Classic acA1300-60gc |
If using automatic detection program, make sure cameras are compatible |
| Camera objective | KOWA Kowa Optimed Deutschland GmbH Fichtenstr. 123 40233 Duesseldorf: LMVZ4411 | 1/1.8" 4.4~11mm Varifokal Objektiv |
Part-No. 10504 | |
| Detection program/Timer | Noldus, EthoVision-XT, Wageningen, the Netherlands | https://www.noldus.com/ethovision-xt | Detection can be achieved either manually (using a timer or a software for manual scoring) or automatically |
| Housing cages | ZOONLAB GmbH, Hermannstraße 6, 44579 Castrop-Rauxel |
3010010 | Type 2 cages: 265 mm x 205 mm x 140 mm (l x w x h) i.e. 360 cm² bottom area. Made of Polycarbonate (Makrolone©) and Polysulfone. Lids are made of stainless steel. European standard cages for up to 5 mice (20–25 g). Autoclavable up to 134 °C |
| Mesh enclosures | Part of the Arena Package: Noldus, Sociability cage, Wageningen, the Netherlands | https://www.noldus.com/applications/sociability-cage | Small acrylic or metal cage-like with a diameter of 100 mm and a height of 200 mm with openings of a 10 mm in size. Two mesh enclosures per arena would work but four is preferable (see point 2.5 in protocol) |
| Mesh wall | selfmade | N/A | Acrylic or metal, one for each cage. Size depends on cages used. The walls must not allow the two animals to have a physical contact |
| Social targets: Mice of the strains CD-1 and 129/Sv; retired male breeders | Mice provided by Charles River: Strain name: CD-1®IGS Mouse 129S2/SvPasCrl |
Crl:CD1(ICR); 129S2/SvPasCrl | CD-1 and 129/Sv retired male breeders, single-housed, novel (unknown) conspecifics to the animals of interest. If retired male breeders are not available then males older than 1 year from both strains would suffice |
References
- Hyman, S. E. How mice cope with stressful social situations. Cell. 131 (2), 232-234 (2007).
- Kessler, R. C. The effects of stressful life events on depression. Annual Review of Psychology. 48 (1), 191-214 (1997).
- Vos, T., et al. Global, regional, and national incidence, prevalence, and years lived with disability for 301 acute and chronic diseases and injuries in 188 countries, 1990-2013: A systematic analysis for the Global Burden of Disease Study, 2013. The Lancet. 386 (9995), 743-800 (2015).
- Björkqvist, K. Social defeat as a stressor in humans. Physiology & Behavior. 73 (3), 435-442 (2001).
- Blanchard, R. J., McKittrick, C. R., Blanchard, D. C. Animal models of social stress: effects on behavior and brain neurochemical systems. Physiology & Behavior. 73 (3), 261-271 (2001).
- Singleton, G. R., Krebs, C. J. Chapter 3- The Secret World of Wild Mice. The Mouse in Biomedical Research. American College of Laboratory Animal Medicine. The Mouse in Biomedical Research (Second Edition). 1, Academic Press. 25-51 (2007).
- Kondrakiewicz, K., Kostecki, M., Szadzińska, W., Knapska, E. Ecological validity of social interaction tests in rats and mice. Genes, Brain, and Behavior. 18 (1), e12525 (2019).
- Martinez, M., Calvo-Torrent, A., Pico-Alfonso, M. A. Social defeat and subordination as models of social stress in laboratory rodents: a review. Aggressive Behavior: Official Journal of the International Society for Research on Aggression. 24 (4), 241-256 (1998).
- Golden, S. A., Covington III, H. E., Berton, O., Russo, S. J. A standardized protocol for repeated social defeat stress in mice. Nature Protocols. 6 (8), 1183 (2011).
- van der Kooij, M. A., et al. Chronic social stress-induced hyperglycemia in mice couples individual stress susceptibility to impaired spatial memory. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 115 (43), E10187-E10196 (2018).
- Chartier, M. J., Walker, J. R., Stein, M. B.
- Cohen, H., Zohar, J., Matar, M. A., Kaplan, Z., Geva, A. B. Unsupervised fuzzy clustering analysis supports behavioral cutoff criteria in an animal model of post-traumatic stress disorder. Biological Psychiatry. 58 (8), 640-650 (2005).
- Scharf, S. H., Schmidt, M. V. Animal models of stress vulnerability and resilience in translational research. Current Psychiatry Reports. 14 (2), 159-165 (2012).
- Krishnan, V., et al. Molecular adaptations underlying susceptibility and resistance to social defeat in brain reward regions. Cell. 131 (2), 391-404 (2007).
- Ayash, S., Schmitt, U., Müller, M. B. Chronic social defeat-induced social avoidance as a proxy of stress resilience in mice involves conditioned learning. Journal of Psychiatric Research. 120, 64-71 (2020).
- Ayash, S., et al. Fear circuit-based neurobehavioural signatures mirror resilience to chronic social stress in mouse. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 120 (17), e2205576120 (2023).
- Duits, P., et al. Updated meta-analysis of classical fear conditioning in the anxiety disorders. Depression and Anxiety. 32 (4), 239-253 (2015).
- Coifman, K. G., Bonanno, G. A., Rafaeli, E. Affect dynamics, bereavement, and resilience to loss. Journal of Happiness Studies. 8 (3), 371-392 (2007).
- Waugh, C. E., Thompson, R. J., Gotlib, I. H. Flexible emotional responsiveness in trait resilience. Emotion. 11 (5), 1059 (2011).
- Bonanno, G. A. Loss, trauma, and human resilience: Have we underestimated the human capacity to thrive after extremely aversive events. American Psychologist. 59 (1), 20 (2004).
- Bonanno, G. A.
- Yehuda, R., Flory, J. D., Southwick, S., Charney, D. S. Developing an agenda for translational studies of resilience and vulnerability following trauma exposure. Annals of the New York Academy of Sciences. 1071 (1), 379-396 (2006).
- Grillon, C., Morgan III, C. A. Fear-potentiated startle conditioning to explicit and contextual cues in Gulf War veterans with post-traumatic stress disorder. Journal of Abnormal Psychology. 108 (1), 134 (1999).
- Brewin, C. R. A cognitive neuroscience account of post-traumatic stress disorder and its treatment. Behaviour Research and Therapy. 39 (4), 373-393 (2001).
- Milad, M. R., Rauch, S. L., Pitman, R. K., Quirk, G. J. Fear extinction in rats: implications for human brain imaging and anxiety disorders. Biological Psychology. 73 (1), 61-71 (2006).
- Jovanovic, T., Norrholm, S. D. Neural mechanisms of impaired fear inhibition in post-traumatic stress disorder. Frontiers in Behavioral Neuroscience. 5, 44 (2011).
- Morton, D. B., Griffiths, P. H. Guidelines on the recognition of pain, distress and discomfort in experimental animals and an hypothesis for assessment. The Veterinary Record. 116 (6), 431-436 (1985).
- Goldsmith, J. F., Brain, P. F., Benton, D. Effects of the duration of individual or group housing on behavioural and adrenocortical reactivity in male mice. Physiology & Behavior. 21 (5), 757-760 (1978).
- Cairns, R. B., Hood, K. E., Midlam, J. On fighting in mice: Is there a sensitive period for isolation effects. Animal Behaviour. 33 (1), 166-180 (1985).
- Varlinskaya, E. I., Spear, L. P., Spear, N. E. Social behavior and social motivation in adolescent rats: role of housing conditions and partner's activity. Physiology & Behavior. 67 (4), 475-482 (1999).
- Sial, O. K., Warren, B. L., Alcantara, L. F., Parise, E. M., Bolaños-Guzmán, C. A. Vicarious social defeat stress: Bridging the gap between physical and emotional stress. Journal of Neuroscience Methods. 258, 94-103 (2016).
- Brown, R. E. The rodents II. Suborder Myomorpha. [In: Social Odours in Mammals]. Brown, R. E., Macdonald, D. W. 1, Oxford University Press. Oxford. (1985).
- Haney, M., Miczek, K. A. Ultrasounds during agonistic interactions between female rats (Rattus norvegicus). Journal of Comparative Psychology. 107 (4), 373 (1993).
- Warren, B. L., et al. Neurobiological sequelae of witnessing stressful events in adult mice. Biological Psychiatry. 73 (1), 7-14 (2013).
- Malatynska, E., Knapp, R. J. Dominant-submissive behavior as models of mania and depression. Neuroscience & Biobehavioral Reviews. 29 (4-5), 715-737 (2005).
- Avgustinovich, D. F., Kovalenko, I. L., Kudryavtseva, N. N. A model of anxious depression: persistence of behavioral pathology. Neuroscience and Behavioral Physiology. 35 (9), 917-924 (2005).
- Vennin, C., et al. A resilience related glial-neurovascular network is transcriptionally activated after chronic social defeat in male mice. Cells. 11 (21), 3405 (2022).
- Ayash, S., Schmitt, U., Lyons, D. M., Müller, M. B. Stress inoculation in mice induces global resilience. Translational Psychiatry. 10 (1), 200 (2020).
- Yuan, R., et al. Long-term effects of intermittent early life stress on primate prefrontal-subcortical functional connectivity. Neuropsychopharmacology. 46 (7), 1348-1356 (2021).
- Lyons, D. M., Ayash, S., Schatzberg, A. F., Müller, M. B. Ecological validity of social defeat stressors in mouse models of vulnerability and resilience. Neuroscience & Biobehavioral Reviews. 145, 105032 (2023).
- Oizumi, H., et al. Influence of aging on the behavioral phenotypes of C57BL/6J mice after social defeat. PLoS One. 14 (9), e0222076 (2019).
