Это видео описывает метод ретроградной маркировки РГК путем применения фтор-золото (FG) на поверхности верхний бугорок (SC). Техника включает бурение черепа, аспирационных коре, и применение желатина губкой по всей поверхности спины SC.
Abstract
Ганглиозных клеток сетчатки (РГК) в расчете имеет важное значение для оценки дегенерации сетчатки особенно при глаукоме. Надежная маркировка РГК имеет основополагающее значение для оценки влияния какого-либо лечения. У крысы, около 98% РГК, как известно, проект по контралатеральной верхний бугорок (SC) (Forrester и Peters, 1967). Применение фтор-золото (FG) на поверхности SC может маркировать почти все РГК, так что мы можем сосредоточиться на этой наиболее уязвимой сетчатки нейрона при глаукоме. Ф. занимают аксонов терминалов ганглиозных клеток сетчатки и на двусторонней основе транспортируется ретроградно ее РРОС в сетчатке. Сравните с ретроградной маркировки РГК, поставив FG на культю перерезана зрительного нерва в течение 2 дней, вмешательство РГК выживания сведена к минимуму. Сравните с крезиловый окрашивания фиолетовые пятна, которые РГК, amacrine клеток и эндотелия кровеносных сосудов в сетчатке глаза слой ганглиозных клеток, эта маркировка метод является более конкретным, чтобы РГК. Это видео описывает метод ретроградной маркировки РГК, применяя FG на поверхности SC. Хирургические процедуры включают в себя бурение черепа; аспирационных коры подвергать SC и применения желатина губкой по всей спинной поверхности КА показано на рисунке. Полезные советы как избежать массивного кровотечения и внутричерепного стремление СК получили.
Protocol
Анестезировать крыс внутри-перитонеального инъекции кетамина (80mg/kg) и ксилазина (8mg/kg) (объемное соотношение 2:1). Применить стерильных мазей смазки глаз, чтобы предотвратить высыхание роговицы во время операции. Бритье головы меха (от глаза до уровня ушей) и зафиксировать голову на голову ст…
Discussion
Почему использовать это хирургический метод для сетчатки количества клеток ганглия?
У крысы около 98% от ганглиозных клеток сетчатки (РГК), как известно, проект по контралатеральной верхний бугорок (SC). Применение фтор-золота на поверхности SC может маркировать почти все РГК, так что мы мож?…
Acknowledgements
Авторы хотели бы поблагодарить за поддержку от Национального Глаукома Программа американского фонда помощник здравоохранения.
Chiu, K., Lau, W., Yeung, S., Chang, R. C., So, K. Retrograde Labeling of Retinal Ganglion Cells by Application of Fluoro-Gold on the Surface of Superior Colliculus. J. Vis. Exp. (16), e819, doi:10.3791/819 (2008).