Bu video floro-altın (FG) üstün colliculus (SC) yüzeyine uygulanarak RGC retrograd etiketleme yöntem açıklanır. Tekniği, kafatası delme, korteks aspire ve SC tüm dorsal yüzey üzerinde jelatin sünger uygulayarak içerir.
Abstract
Retina ganglion hücre (RGC) sayma özellikle glokom retina dejenerasyonu değerlendirmek için esastır. Güvenilir RGC etiketleme, herhangi bir tedavi etkilerini değerlendirmek için esastır. Sıçan, RGCs yaklaşık% 98'i kontralateral üstün colliculus (SC) (Forrester ve Peters, 1967) proje için bilinir. Glokomda bu en hassas retina nöron odaklanmak böylece SC yüzeyinde floro-altın (FG) uygulanması, hemen hemen tüm RGCs etiketleyebilirsiniz. FG retina ganglion hücrelerinin akson terminalleri tarafından alınan ve bilateral retina somas retrograd taşınır. 2 gün boyunca transeksiyon optik sinir güdük FG koyarak RGC retrograd etiketleme ile karşılaştırın, RGC hayatta kalma müdahalenin en aza indirilmiştir. Lekeleri RGCs, amacrine retina ganglion hücre tabakasının kan damarı hücreleri ve endotel, bu etiketleme yöntemi RGC daha özel olduğunu cresyl violet boyama ile karşılaştırın. Bu video FG SC yüzeyine uygulanarak RGC retrograd etiketleme yöntemi açıklanmıştır. SC maruz korteks aspire ve SC tüm dorsal yüzey üzerinde jelatin sünger uygulayarak gösterilir; cerrahi işlemler kafatası delme. SC büyük intrakranial kanama ve aspirasyon önlemek için yararlı ipuçları verilmiştir.
Protocol
Ketamin (80mg/kg) ve xylazine (8mg/kg) (2:1 hacim oranı)-periton içi enjeksiyon yoluyla sıçan uyuşturan. Ameliyat sırasında korneanın kurumasını önlemek için steril göz kayganlaştırıcı merhem uygulayın. Tıraş baş kürk (göz kulak seviyesi) ve kesici bar kesiciler kelepçe ve set bir kafa kafa sahnede baş düzeltmek. % 70 alkol% 10 povidon iyot çözeltisi ile dezenfekte operasyon alanı. Kafatası ve dikişler (sagital, koronal ve transvers sütür) (Şekil 1) maruz cilt ve kasların…
Discussion
Neden retina ganglion hücre sayımı için bu cerrahi yöntem kullanılır?
Sıçan retina ganglion hücrelerinin yaklaşık% 98 (RGC) kontralateral üstün colliculus (SC) proje olduğu bilinmektedir. Glokomda bu en hassas retina nöron odaklanmak böylece floro-altın SC yüzey üzerine uygulanması, RGCs hemen hemen tüm etiketleyebilirsiniz. 2 gün boyunca transeksiyon optik sinir güdük FG koyarak RGC retrograd etiketleme ile karşılaştırın, RGC hayatta kalma müdahalenin en aza indirilmiştir. Kan damarlarını…
Acknowledgements
Yazarlar, Amerikan Sağlık Yardımcısı Vakfı Ulusal Glokom Programı desteği için teşekkür etmek istiyorum.
Chiu, K., Lau, W., Yeung, S., Chang, R. C., So, K. Retrograde Labeling of Retinal Ganglion Cells by Application of Fluoro-Gold on the Surface of Superior Colliculus. J. Vis. Exp. (16), e819, doi:10.3791/819 (2008).