Summary

上丘表面上应用氟金逆行标记视网膜神经节细胞

Published: June 17, 2008
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Summary

该视频描述了应用表面上丘(SC)的氟金(FG)逆行标记研资局的方法。技术涉及的颅骨钻,吸皮层,整个SC背水面和应用明胶海绵。

Abstract

视网膜神经节细胞计数(研资局)是必不可少的评估,尤其是在青光眼视网膜变性。可靠的研资局的标签,是为任何治疗效果评估的基本。在大鼠的视网膜神经节细胞中,约98%是已知的项目对侧上丘(SC)(Forrester和彼得斯,1967年)。 SC的表面上应用氟金(FG)的标签,几乎所有的视网膜神经节细胞,使我们能够在这个最脆弱的视网膜神经集中在青光眼。 FG是采取了由视网膜神经节细胞的轴突终端和双边运输逆行其胞体在视网膜上。切断视神经断端2天FG逆行标记与研资局的比较,研资局生存的干扰降至最低。甲酚紫染色比较污渍的视网膜神经节细胞,无长突细胞在视网膜神经节细胞层血管的内皮细胞,这种标记方法是更具体的研资局。本视频介绍了SC的表面FG申请研资局逆行标记的方法。手术过程包括钻颅骨;吸皮质揭露SC和应用在整个SC的背水面明胶海绵显示。已获得有用的技巧,避免大量的颅​​内出血和SC的愿望。

Protocol

麻醉大鼠腹腔注射氯胺酮(80mg/kg)和甲苯噻嗪(8mg/kg)(体积比为2:1)。应用无菌眼润滑剂油膏,以防止在手术过程中角膜干燥。 剃的头皮毛(从眼睛到耳朵齐平)和固定头头部头部舞台上钳,并设置其门牙,门齿栏。 消毒其次70%的酒精与10%的碘伏解决方案的操作面积。 切开皮肤和肌肉,暴露颅骨和缝合线(矢状面,冠状和横向缝线)(图1)。作为一个切口面积飞溅(不超过2毫克/…

Discussion

  1. 为什么要使用这种手术方法对视网膜神经节细胞计数?

    在大鼠视网膜神经节细胞中,约98%(研资局)是众所周知的对侧上丘(SC)的项目。 SC的表面上应用氟金标签几乎所有的视网膜神经节细胞,使我们能够在这个最脆弱的视网膜神经集中在青光眼。切断视神经断端2天FG逆行标记与研资局的比较,研资局生存的干扰降至最低。比较甲酚紫染色法的无长​​突细胞的污渍,研资局与血管内皮细胞在视…

Acknowledgements

作者想感谢美国卫生署助理基金会从全国青光眼计划的支持。

References

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Cite This Article
Chiu, K., Lau, W., Yeung, S., Chang, R. C., So, K. Retrograde Labeling of Retinal Ganglion Cells by Application of Fluoro-Gold on the Surface of Superior Colliculus. J. Vis. Exp. (16), e819, doi:10.3791/819 (2008).

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