Survivable Chirurgia Stereotassica in roditori
Summary
Il monitoraggio dei livelli del neurotrasmettitore extracellulare nelle regioni cerebrali distinte di muoversi liberamente animali offre approfondimenti sul legame tra il rilascio dei neurotrasmettitori e comportamento. In microdialisi in vivo accoppiato con rilevazione elettrochimica fornisce anatomica eccellente e la risoluzione chimici e informazioni su come neurotrasmissione basale è alterato da manipolazioni farmacologiche o fisiologiche.
Abstract
La capacità di misurare i livelli basali extracellulari di neurotrasmettitori nel cervello di animali svegli permette per la determinazione degli effetti di diverse sfide sistemiche (farmacologici o fisiologico) al sistema nervoso centrale. Per esempio, si può misurare direttamente come proiezioni dopamina dell'animale mesencefalo rispondere a rilascio di dopamina farmaci come gli stimoli d-anfetamina o naturale come il cibo. In questo video vi mostriamo come impianto cannule guida targeting siti specifici nel cervello del ratto, come inserire e impiantare una sonda microdialisi e come utilizzare cromatografia liquida ad alta prestazione accoppiata con rilevazione elettrochimica (HPLC-EC) per misurare i livelli extracellulari di neurotrasmettitori ossidabili e metaboliti. Locali introduzione preciso dei farmaci attraverso la sonda di microdialisi permette di raffinato lavoro sulle specificità del sito in un composto s meccanismo di azione. Questa tecnica è eccellente e la risoluzione anatomica chimiche, ma solo i tempi di risoluzione modesta come campioni microdialisi sono di norma elaborata ogni 20-30 minuti per assicurare i livelli di neurotrasmettitore rilevabili. Strumenti complementari ex vivo (cioè fetta e coltura cellulare elettrofisiologia) può aiutare con il monitoraggio in tempo reale la neurotrasmissione.
Protocol
Discussion
Microdialisi in vivo è lo strumento di scelta per la misurazione dei neurotrasmettitori multipli e metaboliti in siti diversi del cervello di un animale vivo. Tuttavia, controlla solo i livelli extracellulari di sostanze neurochimiche e non offre la risoluzione temporale di monitorare esocitosi dei neurotrasmettitori in tempo reale. Attraverso una versione della tecnica chiamata "net-flux", la concentrazione dei neurotrasmettitori effettiva in un determinato sito può essere calcolato, che a loro volta possono dare misurazioni ac…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Supportato da DK065872 (PEV), una famiglia Smith Award Foundation di eccellenza nella ricerca biomedica (PEV), F31 DA023760.
References
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