Summary

Kemirgenler içinde Kurtarılabilir Stereotaksik Cerrahi

Published: October 06, 2008
doi:

Summary

Hayvanların serbestçe hareket eden, farklı beyin bölgeleri ekstrasellüler nörotransmitter düzeylerinin izlenmesi nörotransmitter salınımı ve davranış arasındaki bağlantıyı irdeliyoruz. Ve bazal nörotransmisyon farmakolojik veya fizyolojik manipülasyonlar nasıl değiştirdiğini hakkında bilgi; in vivo mikrodiyaliz elektrokimyasal algılama ile birleştiğinde mükemmel anatomik ve kimyasal çözünürlük sağlar.

Abstract

MSS farklı sistemik sorunlar (farmakolojik veya fizyolojik) etkilerinin belirlenmesi için uyanık hayvanların beyin nörotransmitterlerin ekstrasellüler bazal düzeylerini ölçmek için yeteneği sağlar. Örneğin, bir doğrudan hayvanın orta beyin dopamin projeksiyonları d-amfetamin veya doğal yiyecek gibi uyaranlara gibi dopamin serbest ilaçlara cevap nasıl ölçebilirsiniz. Bu video mikrodiyaliz prob eklemek ve implant ve ekstrasellüler düzeylerini ölçmek için elektrokimyasal algılama (HPLC-EC) ile birleştiğinde yüksek performanslı sıvı kromatografi nasıl kullanılacağını nasıl, sıçan beyin belirli siteleri hedef kılavuz kanüller implant nasıl gösterir oksitleyici nörotransmitterlerin ve metabolitleri. Mikrodiyaliz prob aracılığıyla ilaçlar Yerel hassas giriş alana özgü rafine bir iş için bir eylem bileşik s mekanizması sağlar. Bu teknik, mükemmel anatomik ve kimyasal çözümü vardır ama sadece mikrodiyaliz örnekleri gibi mütevazı bir zaman çözünürlük genellikle saptanabilir nörotransmitter düzeylerini sağlamak için her 20-30 dakikada bir işlenir. Tamamlayıcı ex vivo araçları (yani, dilim ve hücre kültürü elektrofizyoloji), gerçek zamanlı nörotransmisyon izleme ile yardımcı olabilir.

Protocol

Özet Ve xylazine (10 mg; İki aylık ortalama yaş C57BL/6J fareler veya eşdeğer ya da üç aylık eski yaş ortalaması Sprague Dawley rat veya eşdeğeri ketamin (100 mg / kg ip fareler için sıçanlar için 60 mg / kg ip) ile anestezi / kg, türler ya da ip). Sedasyon refleks gösterdiği çekilme yumuşak bir ayak tutam kullanarak izlenir . Walantus ve ark (Jüpiter, 6, 2007) ve Szot ve ark. (Jüpiter, 9, 2007). Termoregülasyo…

Discussion

In vivo mikrodiyaliz yaşayan bir hayvanın farklı beyin sitelerinde birden fazla nörotransmitter ve metabolitleri ölçmek için tercih edilen bir araçtır. Ancak, sadece ekstraselüler nörokimyasalların seviyeleri izler ve gerçek zamanlı olarak nörotransmitter ekzositoz izlemek için zaman çözünürlüğü sunmuyor. "Net akı" olarak adlandırılan tekniği bir sürümü sayesinde, belirli bir yerinde gerçek bir nörotransmitter konsantrasyonu, plazma zarı taşıyıcıları da ile geri alım, nörotransmitter oranı …

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

DK065872 (AKP), Biyomedikal Araştırma Mükemmellik Smith Aile Vakfı Ödülü (AKP), F31 DA023760 tarafından desteklenir.

Materials

Materials are described in the protocol document

References

  1. Bungay, P. M., Newton-Vinson, P., Isele, W., Garris, P. A., Justice, J. B. Microdialysis of dopamine interpreted with quantitative model incorporating probe implantation trauma. J. Neurochem. 86, 932-946 (2003).
  2. Chen, K. C. Effects of tissue trauma on the characteristics of microdialysis zero-net-flux method sampling neurotransmitters. Journal of Theor. Biology. 238, 863-881 (2006).
  3. Geiger, B. M., Behr, G. G., Frank, L., Caldera-Siu, A. D., Beinfeld, M. C., Kokkotou, E. G., Pothos, E. N. Evidence for defective mesolimbic dopamine exocytosis in obesity-prone rats. FASEB Journal. 8, 2740-2746 (2008).
  4. Pothos, E. N., Creese, I., Hoebel, B. G. Restricted eating with weight loss selectively decreases extracellular dopamine in the nucleus accumbens and alters dopamine response to amphetamine, morphine and food intake. The Journal of Neuroscience. 15, 6640-6650 (1995).

Play Video

Cite This Article
Geiger, B. M., Frank, L. E., Caldera-Siu, A. D., Pothos, E. N. Survivable Stereotaxic Surgery in Rodents . J. Vis. Exp. (20), e880, doi:10.3791/880 (2008).

View Video