ショウジョウバエ 幼虫の円盤切除:上皮の発達を観察する方法

-解剖を始めるには、1組の鉗子を使って幼虫の体を中央につかみ、2番目のペアを使って幼虫を半分に引き裂く。次に後部側に体を保持しながら前端で口のフックをつまむ。

この準備では、唾液腺と腸を簡単に識別して取り出して脳と想像力ディスクを明らかにすることができます。触角、目、脚、翼、およびホルターレディスクが見えます。

- まず、木製のスティックまたは鈍い鉗子を使用して、3番目のインスター幼虫をPBSでペトリ皿に移します。次に、蛍光灯の下でモザイク幼虫の適切な蛍光マーカーを同定し、先に進む前に、PBSで幼虫を洗い、解剖顕微鏡で2組の鉗子を使って幼虫の中心をつまみ、体を半分に引き裂きます。 固定および抗体染色は、テキストプロトコルで詳述されている。

染色された組織の準備を2ミリリットルのプラスチックトランスファーピペットを使用して顕微鏡スライドに移し、鉗子を使用して個々の幼虫を顕微鏡スライド上の取り付け媒体の滴に移動します。

今、翼の想像力ディスクを見つける。翼の想像力ディスクは解剖された組織の側面に貼り付けられている。次に、組織を1つのフォースで固定し、翼ディスクをそっと傷つけ、翼ディスクの近くに脳を置いてカバースリップで押しつぶされないようにします。