Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Om eierstokken te isoleren van levende Drosophila-vliegen, begint u met het verplaatsen van een verdoofd vrouwtje naar een van de drie dissectieputten gevuld met voorverwarmd insectendissectiemedium. Het medium zal helpen de weefselintegriteit en levensvatbaarheid te behouden.
Onder een dissectiemicroscoop scheidt u de buik van de thorax. Verplaats vervolgens de buik in een nieuwe put. Om de eierstokken te isoleren, houdt u de buik aan het achterste uiteinde vast en schraapt u voorzichtig de voortplantingsorganen eruit. Breng ten slotte de eierstokken over in een verse put. Na deze stap kunt u de hele eierstok gebruiken of verder ontleden in de samenstellende structuren.
Elke Drosophila eierstok bestaat uit verschillende eierstokken, bestaande uit een keten van eikamers met toenemende rijpheidsniveaus. Om de eierstokken te bevrijden, speld je de eierstok vast aan het ondoorzichtige achterste uiteinde en plaag je voorzichtig de beschermende schede van rond de eierstok totdat de eierstokken goed zijn gescheiden.
In het voorbeeldprotocol laten we de dissectie van Drosophila-eierstokken zien voor hun gebruik in levende en vaste weefselmicroscopie.
- Gebruik na het sorteren van vijf verdoofde vrouwelijke vliegen volgens het tekstprotocol, onder de dissectiemicroscoop, twee paar tangen om de thorax van de buik te scheiden. Breng vervolgens voorzichtig de buik over naar de tweede put van de schaal. Gebruik een tang om de buik aan het achterste uiteinde vast te houden en gebruik het andere paar tangen om de eierstokken langzaam naar buiten te duwen.
Gebruik vervolgens de tang om een individuele eierstok aan het ondoorzichtige achterste uiteinde vast te houden en verplaats deze voorzichtig naar de derde put van de schaal om te plagen of te bevestigen. Plaag de beschermende huls voorzichtig van rond de eierstokken door een paar tangen te gebruiken om het achterste uiteinde vast te houden en lichtjes een plagende naald van de achterste naar het voorste uiteinde te vegen.
